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滋阴补肾方联合糖皮质激素对系统性红斑狼疮小鼠T淋巴细胞亚群和炎症细胞因子的影响

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吉林大学学报（医学版） 2019年第2期45卷 336-341,472页

作者：王治国刘学明周云涛佟胜全李雅娟王茜陈南芳河北医科大学附属唐山工人医院风湿免疫科河北唐山063000 河北医科大学附属唐山工人医院护理教研室河北唐山063000 河北医科大学附属唐山工人医院中心实验室河北唐山063000

目的:探讨滋阴补肾方联合糖皮质激素对系统性红斑狼疮(SLE)小鼠T淋巴细胞亚群和炎症细胞因子的影响,阐明中、西药联合对SLE的作用机制。方法:将50只MRL/lpr小鼠随机分为模型组,西药组,中药组,低和高剂量联合组(n=10);另选10只C57BL/6小... 详细信息

目的:探讨滋阴补肾方联合糖皮质激素对系统性红斑狼疮(SLE)小鼠T淋巴细胞亚群和炎症细胞因子的影响,阐明中、西药联合对SLE的作用机制。方法:将50只MRL/lpr小鼠随机分为模型组,西药组,中药组,低和高剂量联合组(n=10);另选10只C57BL/6小鼠作为对照组。对照组和模型组小鼠灌胃给予0.5mL·d^(-1)生理盐水,西药组小鼠灌胃给予12.5mg·kg^(-1)醋酸泼尼松(糖皮质激素),中药组小鼠灌胃给予25.0g·kg^(-1)滋阴补肾方,低和高剂量联合组小鼠分别灌胃给予12.5和25.0g·kg^(-1)滋阴补肾方和6.25mg·kg^(-1)醋酸泼尼松。连续给药21d后,计算各组小鼠脾脏指数和胸腺指数。采用流式细胞术检测各组小鼠外周血中CD3^+、CD4^+和CD8^+T淋巴细胞亚群水平。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测小鼠血清白细胞介素4 (IL-4)、白细胞介素6 (IL-6)和γ-干扰素(IFN-γ)水平。结果:与模型组比较,西药组和低及高剂量联合组小鼠脾脏指数和胸腺指数明显降低(P0.05)。结论:滋阴补肾方联合糖皮质激素可降低SLE小鼠炎性细胞因子水平,调节T淋巴细胞亚群平衡,弥补单用糖皮质激素免疫抑制治疗后不能扶正机体内环境的不足,有效调节机体免疫平衡。

关键词：系统性红斑狼疮细胞因子 T淋巴细胞亚群滋阴补肾方糖皮质激素

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子宫内膜癌中p15及MDM2蛋白表达

中国老年学杂志 2010年第14期30卷 1936-1937页

作者：刘冬满何世东张志勇郑寰宇河北医科大学附属唐山工人医院妇产科河北唐山063000 河北医科大学附属唐山工人医院中心实验室河北唐山063000 河北医科大学附属唐山工人医院病理科河北唐山063000

目的采用流式细胞术并结合免疫组化法检测p15蛋白和MDM2蛋白在正常子宫内膜、良、恶性子宫内膜肿物组织中表达,研究其与原发性妇科恶性肿瘤的关系及三者在原发性妇科恶性肿瘤表达的相关关系。方法采用石蜡切片,提取各个实验组的单细胞悬... 详细信息

目的采用流式细胞术并结合免疫组化法检测p15蛋白和MDM2蛋白在正常子宫内膜、良、恶性子宫内膜肿物组织中表达,研究其与原发性妇科恶性肿瘤的关系及三者在原发性妇科恶性肿瘤表达的相关关系。方法采用石蜡切片,提取各个实验组的单细胞悬液,利用流式细胞术并结合免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白-过氧化酶结合法,分别检测子宫系列病变组织p15、MDM2表达情况。结果从子宫肌瘤到子宫内膜癌,p15的表达量有明显进行性增高(P1.30)5年生存率很低。两组生存率比较有显著性差异(P<0.01);MDM2的表达在子宫内膜样癌为48.28%、非子宫内膜样癌为41.5%,都明显低于功能性子宫出血诊断性刮宫标本的60.2%(P<0.01)。结论 p15、MDM2蛋白表达异常可成为子宫内膜癌危险性评估、子宫内膜癌早期诊断及预后和复发判定的新途径。

关键词：子宫内膜癌 P15 MDM2,流式细胞术免疫组化

HPV分型检测在妊娠合并宫颈上皮内瘤变患者中的应用

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中国妇幼保健 2010年第33期25卷 4842-4844页

作者：郑寰宇何世东李鸥陈文妹刘恩令廖秦平河北医科大学附属唐山工人医院妇产科河北唐山063000 河北医科大学附属唐山工人医院中心实验室北京大学第一医院妇产科

目的：了解妊娠合并宫颈上皮内瘤变（CIN）患者HPV分型种类，探讨此类患者中HPV感染情况，追踪妊娠后宫颈上皮内瘤变预后，掌握妊娠合并CIN的诊断方法和处理原则。方法：回顾性分析2004年1月1日-2008年3月31日在北京大学第一医院妇产科... 详细信息

目的：了解妊娠合并宫颈上皮内瘤变（CIN）患者HPV分型种类，探讨此类患者中HPV感染情况，追踪妊娠后宫颈上皮内瘤变预后，掌握妊娠合并CIN的诊断方法和处理原则。方法：回顾性分析2004年1月1日-2008年3月31日在北京大学第一医院妇产科分娩的妊娠合并宫颈上皮内瘤变的18例患者的临床资料。结果：妊娠合并CIN发生率为0．16％。18例患者均于早、中孕期细胞学检查异常后行阴道镜下宫颈病理活检，无1例发生大出血。18例均行保守观察处理，完成孕期3月／次的复查，结果显示无病变进展。孕期保健时病理诊断CINⅠ4例、CINⅡ4例、CINⅢ10例，18例患者中4例CINⅢ患者产后复查时仍示CINⅢ，1例产后复查为CINⅡ，此5例患者均于产后6～8周行宫颈LEEP手术，5例于产后6～11个月细胞学检查恢复正常，4例HPV检查同期转阴；其余阴道镜检查中病理活检诊断均降级或细胞学正常。18例患者中14例于产前保健时检测HPV，其中12例为阳性结果，8例为HPV16型单独或混合感染，产后复查时此14例患者中8例复查HPV，6例呈阳性结果，3例为HPV16型单独感染，且此3例产后病理复查仍为CINⅢ或Ⅱ。结论：①在妊娠期CIN患者中HPV感染率高，且HPV16型可能与CIN高等级病变关系密切。②HPV分型检测对于妊娠合并CIN是安全有效的。

关键词：宫颈上皮内瘤变人乳头瘤病毒妊娠

脑创伤程度对大鼠伤后胚胎神经干细胞移植的影响

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中华创伤杂志 2011年第12期27卷 1145-1149页

作者：洪军崔建忠黎洁刘兴宇周云涛河北医科大学附属唐山临床医学院唐山工人医院神经外科唐山063000 河北医科大学附属唐山临床医学院中心实验室唐山063000

目的探讨不同程度创伤性脑损伤（traumatic brain injury，TBI）对伤后胚胎神经干细胞（neural stem cells，NSCs）移植的影响。方法从孕12～14d胚胎大鼠海马组织中分离NSCs，采用无血清培养法，进行体外培养、扩增和鉴定。大鼠分别于... 详细信息

目的探讨不同程度创伤性脑损伤（traumatic brain injury，TBI）对伤后胚胎神经干细胞（neural stem cells，NSCs）移植的影响。方法从孕12～14d胚胎大鼠海马组织中分离NSCs，采用无血清培养法，进行体外培养、扩增和鉴定。大鼠分别于轻型、中型TBI后3d行胚胎NSCs双侧海马区移植；细胞移植14d后行组织学和TUNEL检测，并对BrdU、NSE、GFAP、GalC、NGF、BDNF蛋白行免疫组化检测。结果移植治疗后14d，轻型TBI组双侧海马区Brdu阳性细胞数明显多于中型TBI组。移植胚胎NSCs脑内分化以GFAP阳性胶质细胞为主。轻、中型TBI后NGF和BDNF蛋白阳性表达增加，其中以轻型TBI组表达最为显著。结论轻型和中型TBI对NSCs移植的影响与伤后脑组织局部微环境因素的改变密切相关。

关键词：脑损伤干细胞胚胎大鼠

沉默赖氨酸乙酰基转移酶基因对人甲状腺乳头状癌细胞增殖和凋亡的影响

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吉林大学学报（医学版） 2020年第3期46卷 543-550页

作者：杜静海陈春悠郭欣张静河北医科大学附属唐山工人医院头颈外科河北唐山063000

目的:探讨赖氨酸乙酰基转移酶(Kat5)对甲状腺乳头状癌细胞增殖和凋亡的影响及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/丝氨酸/苏氨酸激酶(AKT)信号通路的作用,阐明Kat5在甲状腺乳头状癌细胞增殖和凋亡中的可能作用机制。方法:RT-PCR和Western blotting... 详细信息

目的:探讨赖氨酸乙酰基转移酶(Kat5)对甲状腺乳头状癌细胞增殖和凋亡的影响及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/丝氨酸/苏氨酸激酶(AKT)信号通路的作用,阐明Kat5在甲状腺乳头状癌细胞增殖和凋亡中的可能作用机制。方法:RT-PCR和Western blotting法检测甲状腺乳头状癌BHP10-3、TPC-1、K1细胞和甲状腺上皮Nthy-ori3-1细胞中Kat5 mRNA和蛋白表达水平。将对数生长期甲状腺乳头状癌TPC-1细胞分为空白对照组、阴性对照组和沉默Kat5组(si-Kat5组)。空白对照组甲状腺乳头状癌TPC-1细胞不转染,阴性对照组甲状腺乳头状癌TPC-1细胞转染阴性对照siRNA,si-Kat5组甲状腺乳头状癌TPC-1细胞转染Kat5 siRNA。RT-PCR和Western blotting法检测各组甲状腺乳头状癌TPC-1细胞中Kat5 mRNA和蛋白表达水平,CCK-8法检测各组TPC-1细胞增殖活性,克隆形成实验检测各组TPC-1细胞克隆形成率,流式细胞术检测各组TPC-1细胞凋亡率,Western blotting法检测各组TPC-1细胞中周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)、P21、P53、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved caspase-3)、PI3K、磷酸化PI3K(p-PI3K)、AKT和磷酸化AKT(p-AKT)蛋白水平。结果:甲状腺乳头状癌BHP10-3、TPC-1和K1细胞中Kat5 mRNA和蛋白表达水平均高于甲状腺上皮Nthy-ori3-1细胞(P<0.05)。各组TPC-1细胞中Kat5 mRNA和蛋白水平、细胞增殖活性、细胞克隆形成率、细胞凋亡率以及细胞中CDK2、P21、P53、cleaved caspase-3、PI3K、p-PI3K、AKT及p-AKT蛋白表达水平比较差异均有统计学意义(P<0.05);与空白对照组和阴性对照组比较,si-Kat5组TPC-1细胞中Kat5 mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05),细胞增殖活性降低(P<0.05),细胞克隆形成率降低(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05),细胞中CDK2、p-PI3K和p-AKT蛋白表达水平降低(P<0.05),P21、P53和cleaved caspase-3蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论:甲状腺乳头状癌细胞中Kat5 mRNA和蛋白表达水平升高,沉默Kat5基因可抑制甲状腺乳头状癌细胞增殖并促进其凋亡,其机制可能与其抑制PI3K/AKT信号通路有关。

关键词：赖氨酸乙酰基转移酶甲状腺乳头状癌细胞增殖细胞凋亡磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸/苏氨酸激酶

siRNA靶向沉默TAK1基因对甲状腺癌细胞增殖、迁移和p38 MAPK信号通路的抑制作用

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吉林大学学报（医学版） 2021年第1期47卷 110-117页

作者：张春英阴广维尤鸣达陈红胡耀杰李岩冰陈春悠河北医科大学附属唐山工人医院头颈外科河北唐山063000

目的:探讨小干扰RNA(siRNA)靶向沉默转化生长因子β激活激酶1(TAK1)基因对甲状腺癌细胞增殖、迁移和p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的影响,阐明沉默TAK1基因对甲状腺癌的可能作用机制。方法:采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-P... 详细信息

目的:探讨小干扰RNA(siRNA)靶向沉默转化生长因子β激活激酶1(TAK1)基因对甲状腺癌细胞增殖、迁移和p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的影响,阐明沉默TAK1基因对甲状腺癌的可能作用机制。方法:采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)和Western blotting法检测甲状腺癌8505C、NPA、BCPAP和KMH-2细胞中TAK1 mRNA和蛋白表达水平。将KMH-2细胞随机分为空白对照组、阴性对照组和siRNA-TAK1组。对照组细胞不转染,阴性对照组细胞转染阴性对照siRNA,siRNA-TAK1组细胞转染TAK1 siRNA。采用qRT-PCR和Western blotting法检测各组细胞转染效率(即细胞中TAK1 mRNA和蛋白表达水平),MTT法检测细胞增殖活性,Transwell小室实验检测各组细胞侵袭和迁移能力,Western blotting法检测各组细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、p38和磷酸化p38(p-p38)蛋白表达水平。结果:与正常甲状腺上皮Nthyori3-1细胞比较,甲状腺癌8505C、NPA、BCPAP及KMH-2细胞中TAK1 mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P0.05)。结论:siRNA靶向沉默TAK1基因可通过抑制p38 MAPK信号通路的激活进而抑制甲状腺癌细胞的增殖、侵袭和迁移过程。

关键词：小干扰RNA 转化生长因子β激活激酶1 甲状腺肿瘤细胞增殖细胞迁移 p38丝裂原活化蛋白激酶

P16 P15及VEGF蛋白在原发性卵巢癌中的表达及临床意义

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中国肿瘤临床 2013年第9期40卷 521-524页

作者：郑寰宇胡月明李鸥张艳梅李洁周云涛河北医科大学附属唐山工人医院妇产科河北省唐山市063000 河北医科大学附属唐山工人医院病理科河北省唐山市063000 唐山市分子诊断与治疗重点实验室

目的:探讨P16、P15及血管内皮生长因子(VEGF)在原发性卵巢癌中表达情况及其与临床病理特征的关系。方法:采用免疫组织化学S-P法对170例原发性卵巢癌、60例交界性肿瘤及60例良性肿瘤组织进行P16、P15和VEGF蛋白检测。结果:P16在卵巢癌的... 详细信息

目的:探讨P16、P15及血管内皮生长因子(VEGF)在原发性卵巢癌中表达情况及其与临床病理特征的关系。方法:采用免疫组织化学S-P法对170例原发性卵巢癌、60例交界性肿瘤及60例良性肿瘤组织进行P16、P15和VEGF蛋白检测。结果:P16在卵巢癌的表达率为40.0%(68/170),明显低于良性肿瘤组65.0%(39/60)和交界性肿瘤组56.7%(34/60)(P<0.05);P15在卵巢癌组的阳性表达率为45.3%(77/170),显著低于良性肿瘤组68.3%、交界性肿瘤组61.7%(37/60)(P<0.05);VEGF在卵巢癌组的阳性表达率为71.2%(14/170),明显高于良性肿瘤组45.0%(27/60)和交界性肿瘤组53.3%(32/60)(P<0.05)。在卵巢癌组中,P16和P15表达呈正相关(r=0.294,P<0.01),VEGF与P16和P15的表达呈负相关(r值分别为-0.461和-0.251,P<0.01)。三者表达强度与肿瘤分化程度、临床分期、淋巴结转移有显著相关性,肿瘤分化越低、临床分期越高、淋巴结转移者P16、P15阳性表达率越低(P<0.05),VEGF阳性表达率越高(P<0.05)。P16和P15的表达与有无脉管瘤栓无关,VEGF在有脉管瘤栓组的表达高于无脉管瘤栓组。结论:P16和P15的低表达与VEGF蛋白高表达在卵巢癌的发展过程中可能起协同作用,共同促进卵巢癌的恶性发展进程。

关键词：卵巢肿瘤 P16 P15 VEGF 免疫组织化学

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脂肪间充质干细胞治疗外伤性脑损伤

中国组织工程研究 2017年第1期21卷 71-76页

作者：朱俊卿洪军崔建忠王凯杰河北医科大学附属唐山工人医院河北省唐山市063000

背景:临床与动物研究证实,间充质干细胞移植能迁移至脑损伤区域,对创伤性脑损伤有一定的治疗效果。目的:进一步验证脂肪间充质干细胞对大鼠外伤性脑损伤造成的局部损伤的治疗作用。方法:大鼠随机分为3组:实验组和对照组参照文献以脑冷... 详细信息

背景:临床与动物研究证实,间充质干细胞移植能迁移至脑损伤区域,对创伤性脑损伤有一定的治疗效果。目的:进一步验证脂肪间充质干细胞对大鼠外伤性脑损伤造成的局部损伤的治疗作用。方法:大鼠随机分为3组:实验组和对照组参照文献以脑冷冻伤法制作SD大鼠脑损伤模型,实验组造模成功2 d后进行脂肪间充质干细胞尾静脉移植;对照组只尾静脉注射等量生理盐;正常组大鼠不作任何处理。采用Morris水迷宫测试评价大鼠神经功能恢复情况;体个分离、培养脂肪间充质干细胞,在倒置显微镜下观察脂肪间充质干细胞的形态,免疫组织化学检测干细胞在大鼠损伤脑组织中的分布及脑源性神经营养因子和胶质细胞源性神经营养因子含量。结果与结论:(1)Morris水迷宫测试结果显示:与对照组比,实验组SD大鼠平均逃避潜伏期迅速下降(P实验组大鼠逃避潜伏期越来越接近于正常组大鼠;(2)免疫组织化学后倒置显微镜观察:移植的经Brdu标记的脂肪间充质干细胞大量聚集在损伤的大脑皮质,呈不均匀分布。而对照组大鼠脑组织内未见Brd U免疫荧光显色;(3)Western-blot检测结果显示:实验组经脂肪干细胞静脉移植后,SD大鼠海马区域中的脑源性神经营养因子和周围损伤皮质中的胶质细胞源性神经营养因子的含量明显高于对照组(P实验结果提示移植的脂肪间充质干细胞向大鼠脑组织的损伤部位分布,并促进了受损脑组织的胶质细胞源性神经营养因子和脑源性神经营养因子分泌,这也可能是对大鼠神经功能恢复的治疗促进作用之一。

关键词：干细胞移植脑损伤间充质干细胞干细胞移植大鼠尾静脉 Morris水迷宫间充质干细胞大鼠尾静脉 Morris水迷宫脑源性神经营养因子胶质细胞源性神经营养因子

自身免疫性肝炎患者血清抗中性粒细胞胞浆抗体的检测及其意义

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临床荟萃 2005年第4期20卷 203-204页

作者：周玉秀刘恩令河北医科大学附属唐山工人医院风湿免疫科河北唐山063000 天津医科大学中心实验室天津300052

自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis，AIH)是一种病因不明的肝脏慢性炎症性疾病，临床常以肝脏损害为主，伴有肝外自身免疫性疾病，并有多种自身抗体阳性。抗中性粒细胞胞浆抗体(anti-neutrophil cytoplasmic antibody，ANCA)被公认... 详细信息

自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis，AIH)是一种病因不明的肝脏慢性炎症性疾病，临床常以肝脏损害为主，伴有肝外自身免疫性疾病，并有多种自身抗体阳性。抗中性粒细胞胞浆抗体(anti-neutrophil cytoplasmic antibody，ANCA)被公认为原发性血管炎一种敏感的诊断指标，近年来在其他自身免疫性疾病及感染性疾病中也发现了ANCA，而在自身免疫性肝炎患者中报道较少。我们采用间接免疫荧光法对49例自身免疫性肝炎患者血清，进行了ANCA的检测，现报道如下。

关键词：肝炎,自身免疫性抗体,抗中性粒细胞胞浆间接免疫荧光测定