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MPTP处理的SAMP8小鼠黑质纹状体损伤中血红素加氧酶-1的表达变化

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细胞与分子免疫学杂志 2012年第11期28卷 1158-1161页

作者：刘静李欣佟旭王素洁吕宪民张越峰王彦永王铭维河北医科大学附属唐山工人医院神经内科河北唐山063000 河北医科大学第一医院河北省脑老化与认知神经科学重点实验室河北石家庄050031

目的:研究1-甲基-4-苯基-1、2、3、6-四氢吡啶(MPTP)诱导6月龄快速老化小鼠(SAMP8)黑质纹状体急性损伤,以及血红素加氧酶-1(HO-1)的表达变化,探讨其与MPTP导致的SAMP8小鼠黑质纹状体系统损害的关系。方法:给6月龄健康雄性SAMP8小鼠背部... 详细信息

目的:研究1-甲基-4-苯基-1、2、3、6-四氢吡啶(MPTP)诱导6月龄快速老化小鼠(SAMP8)黑质纹状体急性损伤,以及血红素加氧酶-1(HO-1)的表达变化,探讨其与MPTP导致的SAMP8小鼠黑质纹状体系统损害的关系。方法:给6月龄健康雄性SAMP8小鼠背部皮下注射MPTP 20mg/(kg.次),连续注射4次,每次间隔2 h;对照组注射等量生理盐水。在注射后6 h、24 h、3 d和8 d处死小鼠留取脑组织标本,用免疫组织化学技术检测小鼠黑质、纹状体的酪氨酸羟化酶(TH)和HO-1,以计数黑质多巴胺能神经元数量及其投射纤维的改变,及HO-1阳性细胞的变化;用Westernblot方法检测TH和HO-1蛋白表达的变化。结果:MPTP致6月龄SAMP8小鼠各时间点TH阳性神经元分别减少14.23%(P神经元的丢失以24 h至3 d最为显著;MPTP组随时间延长纹状体区酪氨酸羟化酶免疫反应阳性染色逐渐变浅淡,不均匀,于注射后24 h明显,第8天最为浅淡;同时TH蛋白表达具有相同变化。但仅在注射后3 d小鼠纹状体区见到大量HO-1阳性细胞,同时HO-1蛋白表达增高,具有统计学意义,其余各时间点及对照组未见HO-1阳性细胞。中脑区HO-1阳性细胞及蛋白表达在各时间点均未见显著变化。结论:MPTP导致6月龄SAMP8小鼠黑质纹状体系统急性损伤,产生多巴胺能神经元数量减少及蛋白表达降低;其黑质纹状体HO-1的高表达是一过性短暂的,它在PD中的作用是有限的。

关键词： SAMP8小鼠 MPTP 黑质纹状体血红素加氧酶-1

骨髓基质细胞条件培养液调节神经干细胞分化有效成分的蛋白质微阵列分析

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解剖学报 2008年第6期39卷 845-849页

作者：顾平马芹颖王彦永温雅王铭维崔冬生刘力耿媛河北医科大学第一医院神经内科石家庄050031 河北省脑老化与认知神经科学实验室石家庄050031

目的检测骨髓基质细胞条件培养液(N-CM)中诱导神经干细胞(NSCs)向神经元方向分化的细胞因子,探讨骨髓基质细胞(BMSCs)调节NSCs分化的机制。方法将收集到的N-CM混匀后经超滤浓缩分为大于5kD和小于5kD两部分,用这两部分培养液分别培养NSCs... 详细信息

目的检测骨髓基质细胞条件培养液(N-CM)中诱导神经干细胞(NSCs)向神经元方向分化的细胞因子,探讨骨髓基质细胞(BMSCs)调节NSCs分化的机制。方法将收集到的N-CM混匀后经超滤浓缩分为大于5kD和小于5kD两部分,用这两部分培养液分别培养NSCs,确定其中能促进NSCs分化为高比例神经元的部分并进行大鼠蛋白质微阵列检测。结果N-CM分子量大于5kD的部分可以促进NSCs分化为高比例神经元,并通过蛋白质微阵列检测,与单纯骨髓基质培养液相比,有7种细胞因子的表达量上调了1.5倍,分别是CINC-3、CNTF、IFN-γ、IL-1α、MCP-1、TIMP-1和VEGF。结论BMSCs分泌的可溶性分子对NSCs分化为神经元有促进作用,其中某些分子量大于5KD的细胞因子可能在这一调节作用中发挥效应。

关键词：神经干细胞骨髓基质细胞条件培养液蛋白质微阵列细胞因子超滤浓缩免疫组织化学

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骨髓基质细胞分泌蛋白的蛋白质质谱分析

解剖学报 2010年第1期41卷 60-64页

作者：马芹颖顾平王彦永王铭维崔冬生温雅刘力河北医科大学第一医院神经内科石家庄050031 河北省脑老化与认知神经科学实验室石家庄050031

目的通过Shotgun蛋白质组学分析,初步检测骨髓基质细胞(BMSCs)条件液中可能含有的蛋白质。方法将BMSCs条件液混匀后经超滤浓缩分为大于5kD和小于5kD两部分,并培养神经干细胞(NSCs),观察其后代中神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的比... 详细信息

目的通过Shotgun蛋白质组学分析,初步检测骨髓基质细胞(BMSCs)条件液中可能含有的蛋白质。方法将BMSCs条件液混匀后经超滤浓缩分为大于5kD和小于5kD两部分,并培养神经干细胞(NSCs),观察其后代中神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的比例,鉴定出能调节NSCs分化的部分,并进行Shotgun蛋白质组学分析。结果BMSCs条件液分子量大于5kD的部分可以调节NSCs向神经元和少突胶质细胞方向分化,这部分条件液先经过聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)发现大部分蛋白集中在14kD以上,将蛋白条带酶解以后,经Shotgun分析共鉴定到456种蛋白质,其中154个相似蛋白质,17个假想蛋白质,56个未知蛋白质,剩余的229个蛋白质中大多为细胞骨架蛋白、分泌蛋白、信号转导蛋白、酶类和转运蛋白等。结论BMSCs分泌的多种蛋白质对NSCs的分化起调节作用,明确了BMSCs条件液中可能含有的成分。

关键词：骨髓基质细胞神经干细胞 Shotgun蛋白质组学分析

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帕金森病及多系统萎缩运动皮质兴奋性的比较

中华物理医学与康复杂志 2011年第7期33卷 532-534页

作者：李艳敏郭记宏孟莉马晓伟孙海民王惠君王铭维河北医科大学第一医院神经内科河北省脑老化与认知神经科学重点实验室石家庄050031 河北医科大学第一医院神经内科

目的观察帕金森病（PD）及多系统萎缩（MSA）患者运动皮质兴奋性的差异，并探讨磁刺激双上肢运动诱发电位（MEP）能否作为鉴别二者的神经电生理指标之一。方法选取2005至2010年我院的PD患者34例作为PD组，MSA患者22例作为MSA组，年龄性... 详细信息

目的观察帕金森病（PD）及多系统萎缩（MSA）患者运动皮质兴奋性的差异，并探讨磁刺激双上肢运动诱发电位（MEP）能否作为鉴别二者的神经电生理指标之一。方法选取2005至2010年我院的PD患者34例作为PD组，MSA患者22例作为MSA组，年龄性别相匹配的正常健康者15例作为正常对照组。采用磁刺激双上肢MEP作为观察指标，比较3组静息阈值（RMT）、中枢传导时间（CMCT）、波幅（AMP）的变化及与病情严重程度的关系。结果PD组患者RMT较MSA组及正常对照组明显降低，差异具有统计学意义（P〈0．01），MSA组RMT较正常对照组降低，差异有统计学意义（P〈0．01）；3组中枢传导时间（CMCT）差异无统计学意义（P〉0．05）；PD组患者AMP明显高于MSA组和正常对照组，差异有统计学意义（P〈0．01），MSA组AMP与正常对照组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。随PD患者病情加重，皮质RMT进行性降低，CMCT进行性缩短，AMP无明显变化；而MSA患者RMT、CMCT、AMP与病情严重程度无关。结论PD与MSA患者运动皮质兴奋性存在差异，双上肢运动诱发电位RMT和CMCT在鉴别PD和MSA上有一定参考价值．波幅改变的临床意义尚待进一步研究。

关键词：帕金森病多系统萎缩运动诱发电位皮质兴奋性

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骨髓间充质干细胞分泌的蛋白及其功能

中国组织工程研究与临床康复 2009年第14期13卷 2763-2766页

作者：马晓伟马芹颖王彦永顾平王铭维河北医科大学第一医院神经内科河北省脑老化与认知神经科学重点实验室河北省石家庄市050031

骨髓间充质干细胞的主要功能是支持和营养造血细胞,其提供的微环境由其分泌的可溶性物质、细胞表面分子以及细胞外基质组成,这三者中研究较多并且更有现实意义的是骨髓间充质干细胞分泌的可溶性物质。骨髓间充质干细胞除了可以分泌一些... 详细信息

骨髓间充质干细胞的主要功能是支持和营养造血细胞,其提供的微环境由其分泌的可溶性物质、细胞表面分子以及细胞外基质组成,这三者中研究较多并且更有现实意义的是骨髓间充质干细胞分泌的可溶性物质。骨髓间充质干细胞除了可以分泌一些造血功能必须的细胞因子,如白细胞介素6、白细胞介素7、白细胞介素8、白细胞介素11、白细胞介素12、白细胞介素14、白细胞介素15、白血病抑制因子、粒细胞集落刺激因子、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子、巨噬细胞集落刺激因子和干细胞因子,长期支持造血干细胞的造血功能。还可以分泌许多神经营养因子,如脑源性神经营养因子、胶质源性神经营养因子、神经生长因子、表皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、睫状神经营养因子、肝细胞生长因子和血小板衍生的生长因子等,这些因子可以参与中枢神经系统的神经再生,促进损伤脑组织的生存与重塑。

关键词：骨髓基质细胞分泌功能

低频重复经颅磁刺激治疗帕金森叠加综合征疗效初探

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中华物理医学与康复杂志 2009年第9期31卷 614-617页

作者：王铭维顾平李艳敏马晓伟郭记宏孙海民孟莉河北医科大学第一医院神经内科石家庄050031 河北省脑老化与认知神经科学重点实验室

目的探讨低频重复经颅磁刺激（rTMS）治疗帕金森叠加综合征的疗效。方法选择2005至2008年入住我院的15例帕金森叠加综合征（PPS）患者，行低频rTMS，刺激强度为阈上30％，频率为1Hz，刺激部位为双侧的第一运动皮质手代表区，每侧50个刺... 详细信息

目的探讨低频重复经颅磁刺激（rTMS）治疗帕金森叠加综合征的疗效。方法选择2005至2008年入住我院的15例帕金森叠加综合征（PPS）患者，行低频rTMS，刺激强度为阈上30％，频率为1Hz，刺激部位为双侧的第一运动皮质手代表区，每侧50个刺激，分为5个序列，每天1次，每次5min，治疗15d；治疗前、后采用汉密尔顿抑郁量表（HAMD）、汉密尔顿焦虑量表（HAMA）、统一帕金森病评定量表（UPDRS）、日常生活活动能力量表（ADL）、简易智力量表（MMSE’）对患者进行评定，并检测患者双上肢运动诱发电位，记录静息阈值及中枢传导时间的变化。结果患者经治疗后，HAMD、HAMA、UPDRS、UPDRSⅡ、UPDRSⅢ评分明显降低，ADL评分明显增高；而UPDRSⅠ、MMSE评分无明显变化，患者的静息闽值和中枢传导时间无明显变化。结论rTMS能够改善帕金森叠加患者的临床症状，尤其是患者的抑郁及焦虑情绪、运动功能及日常生活活动能力，副作用小，其机制可能与皮质兴奋性的改变无关。rTMS是一种有潜力的治疗帕金森叠加综合征的方法。

关键词：重复经颅磁刺激帕金森叠加综合征疗效运动诱发电位

重复经颅磁刺激对帕金森模型小鼠纹状体VMAT-2和SYN表达的影响

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第三军医大学学报 2008年第4期30卷 322-325页

作者：王全懂董巧云顾平王彦永刘静王铭维河北医科大学第一医院神经内科河北省脑老化与认知神经科学重点实验室石家庄050017

目的探讨重复经颅磁刺激(repetitive transcranial magnetic,rTMS)对帕金森病(Parkinson’sdisease,PD)模型鼠纹状体多巴胺(dopamine,DA)含量及Ⅱ型单胺囊泡转运体(vesicular monoamine transporter-2,VMAT-2)和突触体素(synaptophysin,SYN)表达的影响。方法65只雄性C57BL/6J小鼠随机分为:对照组、PD模型组、假磁刺激组、rTMS-1组、rTMS-2组,每组13只。小鼠皮下注射MPTP(***-1,每小时注射1次,注射4次)复制帕金森病模型,重复经颅磁刺激干预,利用高效液相色谱-电化学(HPLC-ECD)测定纹状体DA含量;免疫组织化学染色检测VMAT-2和SYN的表达变化,并借助图像分析系统对其进行定量分析。结果rTMS-1组和rTMS-2组纹状体DA含量较对照组明显减少(P<0.01),但显著高于PD模型组和假磁刺激组(P<0.01);rTMS-1组和rTMS-2组纹状体VMAT-2和SYN表达均明显少于对照组且显著高于PD模型组和假磁刺激组,其免疫反应产物校正光密度值(COD)均显著低于对照组(P<0.05),并显著高于PD组和假磁刺激组(P<0.05),TMS-1组和rTMS-2组间无显著差异。结论rTMS可诱导PD鼠纹状体区DA释放增加,并使VMAT-2和SYN表达上调。

关键词：重复经颅磁刺激多巴胺纹状体 SYN VMAT-2

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重复经颅磁刺激治疗帕金森病的参数设计因素

中华物理医学与康复杂志 2009年第1期31卷 64-67页

作者：董巧云顾平王全懂王铭维河北省脑老化与认知神经科学重点实验室、河北医科大学第一医院神经内科石家庄050031

经颅磁刺激(transcranial magnetic stimulation,TMS)是1985年由Barker等[1]首先创立的一种非侵入性技术,通过诱导的磁场在周围介质产生空间分布的电流而兴奋神经组织,由此经颅调节神经活动[2].

关键词：重复刺激治疗帕金森病参数 magnetic stimulation 经颅磁刺激神经组织神经活动空间分布非侵入性诱导介质技术调节电流磁场

低频重复经颅磁刺激对帕金森病运动功能和情感障碍的疗效观察

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中华老年医学杂志 2009年第9期28卷 729-732页

作者：王铭维顾平马晓伟李艳敏王彦永郭记宏王惠君河北医科大学第一医院神经内科河北省脑老化与认知神经科学重点实验室石家庄050031

目的从运动功能、情感障碍方面观察低频重复经颅磁刺激（rTMS）对帕金森病（PD）患者的治疗作用。方法rTMS组用1HzrTMS技术治疗20例PD患者共15d。10例与rTMS组相匹配的PD患者接受假刺激治疗15d。rTMS、假刺激治疗前后观察统一PD评定量表... 详细信息

目的从运动功能、情感障碍方面观察低频重复经颅磁刺激（rTMS）对帕金森病（PD）患者的治疗作用。方法rTMS组用1HzrTMS技术治疗20例PD患者共15d。10例与rTMS组相匹配的PD患者接受假刺激治疗15d。rTMS、假刺激治疗前后观察统一PD评定量表（UPDRS）、汉密尔顿抑郁量表（HAMD）、汉密尔顿焦虑量表（HAMA）的变化。结果rTMS治疗后20例患者运动功能症状改善良好，UPDRS评分由治疗前的（38．45±17．33）分降至（30．95±17．00）分，降低19．51％，（t=6．780，P〈0．01），UPDRS各项评分下降；HAMD总分由治疗前的（12．15±7．62）分下降到治疗后的（8．75±7．31）分，降低27．98％，（t=5．101，P〈0．01），躯体化、睡眠障碍和阻滞的因子分低于治疗前；HAMA评分无明显改变（t=1．757，P〉0．05）。强直型患者症状改善更为明显。假刺激组治疗前后各项指标差异无统计学意义。结论1Hz rTMS可以改善运动功能和抑郁症状，对焦虑无明显作用。

关键词：帕金森病运动障碍情绪障碍经颅磁刺激