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Linc00152靶向miR-376c-3p对宫颈癌细胞活力、凋亡和放射敏感性的影响

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中国病理生理杂志 2020年第1期36卷 67-74页

作者：刘晓娟王静张娟高月月王虹河北北方学院附属第一医院妇产科

目的:探讨长链非编码RNA Linc00152对宫颈癌细胞活力、凋亡和放射敏感性的影响及作用机制。方法:RT-qPCR检测宫颈癌HeLa细胞和SiHa细胞以及正常宫颈细胞Ect1/E6E7中Linc00152与微小RNA-376c-3p(miR-376c-3p)的表达水平。建立Linc00152... 详细信息

目的:探讨长链非编码RNA Linc00152对宫颈癌细胞活力、凋亡和放射敏感性的影响及作用机制。方法:RT-qPCR检测宫颈癌HeLa细胞和SiHa细胞以及正常宫颈细胞Ect1/E6E7中Linc00152与微小RNA-376c-3p(miR-376c-3p)的表达水平。建立Linc00152低表达或miR-376c-3p过表达的宫颈癌HeLa细胞系,MTT法、流式细胞术、集落形成实验和Western blot分别检测Linc00152低表达或miR-376c-3p过表达对宫颈癌HeLa细胞的活力、凋亡、放射敏感性及相关蛋白表达的影响。双萤光素酶报告基因实验验证Linc00152与miR-376c-3p的调控关系。结果:与Ect1/E6E7细胞相比,宫颈癌HeLa细胞和SiHa细胞中的Linc00152表达上调,miR-376c-3p表达下调(P<0.05)。Linc00152低表达或miR-376c-3p过表达均可抑制HeLa细胞的活力,并诱导其凋亡,增强其放射敏感性,抑制cyclin D和Bcl-2蛋白表达,促进P21和Bax蛋白表达(P<0.05)。Linc00152在HeLa细胞中负向调控miR-376c-3p的表达,抑制miR-376c-3p表达可逆转Linc00152低表达对HeLa细胞活力、凋亡和放射敏感性的作用。结论:宫颈癌细胞中Linc00152高表达;Linc00152通过靶向调控miR-376c-3p影响HeLa细胞的生长、凋亡和放射敏感性,是宫颈癌潜在的诊治靶点。

关键词：宫颈癌 Linc00152 微小RNA-376c-3p 细胞活力细胞凋亡放射敏感性

miR-455对Omi/HtrA2介导的人涎腺腺样囊性癌细胞株线粒体凋亡的影响

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中国老年学杂志 2022年第23期42卷 5839-5844页

作者：李立恒周军张敏王芹安峰张丽娟汪佳张凡河北北方学院附属第一医院口腔科河北张家口075000 张家口市第一医院口腔科张家口学院临床学院河北北方学院附属第一医院小儿外科河北北方学院附属第一医院病理科

目的探讨过表达微小RNA-455(miR-455)对线粒体促凋亡分子丝氨酸蛋白酶(Omi/HtrA2)介导的人涎腺腺样囊性癌细胞株线粒体凋亡的影响。方法收集70例因原发病手术切除并经病理诊断为人涎腺腺样囊性癌患者的癌组织为人涎腺腺样囊性癌组,选取... 详细信息

目的探讨过表达微小RNA-455(miR-455)对线粒体促凋亡分子丝氨酸蛋白酶(Omi/HtrA2)介导的人涎腺腺样囊性癌细胞株线粒体凋亡的影响。方法收集70例因原发病手术切除并经病理诊断为人涎腺腺样囊性癌患者的癌组织为人涎腺腺样囊性癌组,选取正常涎腺组织65例为对照组,无菌操作下取得的新鲜组织放入无菌冻存管后迅速投入液氮中快速冷冻,再转至-80℃冰箱长期保存,采用qRT-PCR法检测两组组织miR-455表达情况。体外培养人涎腺腺样囊性癌患者ACC-M细胞,利用miR-455mimics转染ACC-M细胞为miR-455 mimics组,采用国际通用的与所有基因无同源性序列的miR-455-NC转染为阴性对照组,以未经处理的ACC-M细胞为空白对照组,48 h后收集各组细胞。利用qRT-PCR法检测miR-455表达情况;MTT法检测ACC-M细胞增殖能力;利用流式细胞仪检测细胞凋亡情况;免疫荧光检测细胞色素C释放情况;利用Western印迹检测免抗人增殖细胞核抗原(ki67)、Omi/HtrA2、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)3、caspase6蛋白表达情况。结果与对照组相比,人涎腺腺样囊性癌组miR-455表达显著降低(P<0.05);与空白对照组、阴性对照组比较,miR-455 mimics组ACC-M细胞中miR-455表达水平、细胞凋亡显著升高(P<0.05);miR-455 mimics组转染后48 h、72 h后OD值显著降低(P<0.05);与空白对照组、阴性对照组比较,miR-455 mimics组细胞色素C呈弥散性分布于细胞质中,围绕在细胞核周围且细胞色素C、线粒体平均光密度显著升高(P<0.05);miR-455 mimics组ACC-M细胞中ki67蛋白相对表达量显著降低(P<0.05),Omi/HtrA2、caspase3、caspase6蛋白相对表达量显著升高(P<0.05)。结论过表达miR-455可促进人涎腺腺样囊性癌ACC-M细胞凋亡,可能是通过激活Omi/HtrA2介导的线粒体凋亡途径而实现的。

关键词：微小RNA-455 线粒体促凋亡分子丝氨酸蛋白酶人涎腺腺样囊性癌细胞线粒体凋亡

肌动蛋白和神经元特异性烯醇化酶在腺样囊性癌中表达的免疫电镜研究

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中国老年学杂志 2010年第11期30卷 1529-1531页

作者：张凡常永霞刘春秀李瑞平河北北方学院附属第一医院病理科河北张家口075000 河北北方学院附属第一医院康复医学中心河北北方学院附属第一医院口腔科

目的研究肌动蛋白(MA)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)在腺样囊性癌(ACC)中的表达。方法利用免疫电镜技术从超微结构水平研究MA和NSE在14例ACC中的表达。结果 MA主要表达于腺样囊性癌的细胞质中,NSE表达于ACC的细胞质和细胞核上,MA阳性细胞... 详细信息

目的研究肌动蛋白(MA)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)在腺样囊性癌(ACC)中的表达。方法利用免疫电镜技术从超微结构水平研究MA和NSE在14例ACC中的表达。结果 MA主要表达于腺样囊性癌的细胞质中,NSE表达于ACC的细胞质和细胞核上,MA阳性细胞与NSE阳性细胞具有相似的超微结构,NSE阳性细胞的超微结构符合肌上皮细胞的超微结构特点。结论发生神经膜细胞分化的ACC细胞是其中的肌上皮成分。

关键词：腺样囊性癌神经细丝酸性蛋白肌动蛋白免疫电镜

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甘露糖凝集素与缺血性脑血管病的相关性研究

中国全科医学 2009年第12期12卷 1057-1060页

作者：胡瑾贾天军邹玉安河北北方学院附属第一医院神经内科河北北方学院检验系

目的研究缺血性脑血管病(ICVD)患者与健康对照者甘露糖凝集素(mannose-binding lectin,MBL)基因第一号外显子54位密码子(ExonI54)点突变情况,同时测定血浆MBL水平。方法选择180例ICVD患者(ICVD组)和60例健康体检者(对照组)。用聚合酶链... 详细信息

目的研究缺血性脑血管病(ICVD)患者与健康对照者甘露糖凝集素(mannose-binding lectin,MBL)基因第一号外显子54位密码子(ExonI54)点突变情况,同时测定血浆MBL水平。方法选择180例ICVD患者(ICVD组)和60例健康体检者(对照组)。用聚合酶链反应-扩增产物的限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)法测试两组MBL ExonI54点突变,用酶联免疫吸附试验(enzymelinked immune adsorptionassay,ELISA)测定MBL水平。结果(1)ICVD组和对照组血浆MBL水平分别为(3372±661)μg/L和(2065±196)μg/L,两组间差异有统计学意义(P0.05)。结论ICVD与MBL的关系在脑血管病的机制探讨及临床治疗中具有重要的意义。

关键词：甘露糖结合凝集素类脑血管障碍聚合酶链反应

干扰MACC1协同Wnt信号通路抑制剂对舌鳞癌细胞转移潜能的影响

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临床与实验病理学杂志 2019年第5期35卷 548-553页

作者：王蕊李立恒胥爱文安峰河北北方学院附属第一医院口腔科

目的探讨干扰结肠癌转移相关基因1(metastasis-associated in colon cancer 1,MACC1)协同Wnt信号通路抑制剂对舌鳞癌细胞转移潜能的影响。方法以不同浓度的Wnt信号通路抑制剂XAV939处理舌鳞癌细胞,MTT法检测细胞增殖变化。舌鳞癌细胞感... 详细信息

目的探讨干扰结肠癌转移相关基因1(metastasis-associated in colon cancer 1,MACC1)协同Wnt信号通路抑制剂对舌鳞癌细胞转移潜能的影响。方法以不同浓度的Wnt信号通路抑制剂XAV939处理舌鳞癌细胞,MTT法检测细胞增殖变化。舌鳞癌细胞感染MACC1 shRNA慢病毒,Real-time PCR和Western blot法检测干扰效果。以XAV939处理下调MACC1后的舌鳞癌细胞,MTT法测定细胞增殖变化,划痕愈合实验检测细胞运动能力,MTT法检测细胞黏附能力,Transwell小室实验检测细胞的侵袭和迁移,Western blot法检测细胞中MMP-9及E-cadherin、vimentin蛋白表达水平。结果不同浓度的Wnt信号通路抑制剂XAV939处理后的舌鳞癌细胞增殖能力降低。MACC1 shRNA慢病毒感染后的舌鳞癌细胞中MACC1表达水平降低。下调MACC1和Wnt信号通路抑制剂XAV939处理后的舌鳞癌细胞增殖[100.00% vs (79.81±6.92)%、(50.89±8.30)%]、运动[(76.25±3.47)% vs (51.63±4.20)%、(40.25±3.18)%]、黏附[100.00% vs (77.28±3.50)%、(65.17±5.26)%]、侵袭(80.20±9.33 vs 47.62±6.24、38.25±4.69)、迁移能力(95.36±4.27 vs 63.75±4.51、52.81±3.62)和MMP-9、vimentin蛋白水平均降低,E-cadherin蛋白水平升高,并且两者联合处理后对舌鳞癌细胞增殖[(79.81±6.92)%、(50.89±8.30)% vs (38.69±7.14)%]、运动[(51.63±4.20)%、(40.25±3.18)% vs (31.07±2.24)%]、黏附[(77.28±3.50)%、(65.17±5.26)% vs (52.96±3.21)%]、侵袭(25.14±2.11 vs 47.62±6.24、38.25±4.69)、迁移(35.87±2.05 vs 63.75±4.51、52.81±3.62)能力抑制作用更强。结论干扰MACC1协同Wnt信号通路抑制剂能够下调舌鳞癌细胞增殖、运动、黏附、侵袭、迁移能力。

关键词：舌肿瘤舌鳞癌黏附转移 MACC1 Wnt

敲降miR-23b通过靶向PTEN增强肺癌A549细胞的放疗敏感性

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中国肿瘤生物治疗杂志 2019年第10期26卷 1113-1119页

作者：董跃华杨燕君魏玉磊高永山姜伟华王贵刚河北北方学院附属第一医院胸心外科

目的:探讨miR-23b/PTEN分子轴对肺癌A549细胞放疗敏感性的影响及其作用机制。方法:选用人肺癌细胞系NCI-H1650、NCI-H175、Calu-1、LTEP-A-2、MSTO-211H、A549及正常肺上皮细胞株BEAS-2B,用qPCR检测肺癌细胞系中miR-23b的表达水平。用... 详细信息

目的:探讨miR-23b/PTEN分子轴对肺癌A549细胞放疗敏感性的影响及其作用机制。方法:选用人肺癌细胞系NCI-H1650、NCI-H175、Calu-1、LTEP-A-2、MSTO-211H、A549及正常肺上皮细胞株BEAS-2B,用qPCR检测肺癌细胞系中miR-23b的表达水平。用双荧光素酶报告基因检测miR-23b和PTEN的靶向关系。用脂质体转染技术将miR-23b mimics、miR-23b inhibitor、pcDNA3.1-PTEN等不同质粒转染进A549细胞,用WB检测细胞中PTEN的表达水平,用CCK-8、Transwell和Annexin VFITC/PI染色流式细胞术分别检测miR-23b/PTEN分子轴对60Coγ-射线处理的A549细胞增殖、侵袭和凋亡的影响。结果:miR-23b在肺癌细胞系中高表达(P<0.05或P<0.01),尤其在A549细胞中表达水平最高(P<0.01)。敲降miR-23b可逆转3 Gy60Coγ-射线对A549细胞增殖和侵袭的抑制作用,并诱导细胞凋亡(P<0.05或P<0.01)。双荧光素酶报告基因结果显示,miR-23b可靶向负调控PTEN(P<0.05)。敲降miR-23b能上调PTEN的表达水平,进而上调3 Gy 60Coγ-射线对A549细胞凋亡的促进作用及抑制A549细胞增殖和侵袭(P<0.05或P<0.01)。结论:敲降miR-23b可以增强肺癌A549细胞的放疗敏感性,其机制是60Coγ-射线通过下调miR-23b对PTEN表达的抑制,进而降低A549细胞增殖、侵袭能力并诱导细胞凋亡。

关键词：肺癌 miR-23b PTEN 放疗敏感性 60Coγ-射线

环状RNA hsa_circ_0085576调控微小RNA-498/B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒整合位点1轴对口腔鳞状细胞癌细胞迁移和侵袭的影响

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国际口腔医学杂志 2024年第1期51卷 60-67页

作者：李立恒王蕊王晓明张智轶张璇安峰王芹张凡河北北方学院附属第一医院口腔科张家口075000 河北北方学院附属第一医院病理科张家口075000

目的探究环状RNA hsa_circ_0085576对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞迁移和侵袭的影响及其分子机制。方法使用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白印迹法检测OSCC细胞中hsa_circ_0085576、微小RNA-498(miR-498)以及B细胞特异性莫洛尼鼠... 详细信息

目的探究环状RNA hsa_circ_0085576对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞迁移和侵袭的影响及其分子机制。方法使用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白印迹法检测OSCC细胞中hsa_circ_0085576、微小RNA-498(miR-498)以及B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒整合位点1(BMI-1)的表达水平。使用CCK-8、划痕实验、Transwell实验以及qRT-PCR、蛋白印迹法分别检测SCC-15细胞增殖活力、迁移及侵袭能力以及相关基因和蛋白的相对表达量。结果OSCC细胞中hsa_circ_0085576与BMI-1表达上调,miR-498表达下调(P<0.05)。下调hsa_circ_0085576表达或过表达miR-498后SCC-15细胞的增殖活性、划痕愈合率、侵袭细胞数目以及细胞周期蛋白D1、波形蛋白表达水平下调,miR-498和E-钙黏蛋白表达水平上调(P<0.05);抑制miR-498表达可减弱下调hsa_circ_0085576表达对OSCC细胞增殖、迁移及侵袭的抑制作用;上调BMI-1表达可减弱过表达miR-498对OSCC细胞增殖、迁移及侵袭的抑制作用。结论下调hsa_circ_0085576表达可通过激活miR-498/BMI-1轴抑制OSCC细胞增殖、迁移及侵袭。

关键词：环状RNA hsa_circ_0085576 微小RNA-498 B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒整合位点1 口腔鳞状细胞癌

肺孢子虫肺炎大鼠支气管肺泡灌洗液酶含量变化及大蒜素治疗对其影响

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2007年第4期25卷 300-303页

作者：卢致民张有成张进顺史宝林贾天军唐红炜刘金花河北北方学院寄生虫学教研室张家口075000 河北北方学院附属第一医院检验科张家口075000 河北北方学院检验系张家口075000

目的研究卡氏肺孢子虫肺炎(PCP)大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)酶含量变化以及大蒜素治疗对其影响。方法用地塞米松连续肌肉注射Wistar大鼠,诱导建立PCP大鼠模型。诱导第3、6、9周分别于后腿肌肉深部注射大蒜素治疗(10mg/kg,1次/d,连续5d)... 详细信息

目的研究卡氏肺孢子虫肺炎(PCP)大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)酶含量变化以及大蒜素治疗对其影响。方法用地塞米松连续肌肉注射Wistar大鼠,诱导建立PCP大鼠模型。诱导第3、6、9周分别于后腿肌肉深部注射大蒜素治疗(10mg/kg,1次/d,连续5d)。同时设甲氧苄氨嘧啶(TMP)-磺胺甲基异噁唑(SMZ)治疗对照组(SMZ/TMP组)、PCP模型对照组和空白对照组。于最后1次治疗3d后处死大鼠,无菌收集BALF,测定谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、胆碱脂酶(CHE)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)及其同工酶(CKMB)、a-羟丁酸脱氢酶(HBDH)、a-L-岩藻糖甘酶(AFU)、5′-核苷酸酶(5′NT)及腺苷脱氨酶(ADA)含量。结果PCP模型组ALP含量[(573.41±350.63)U/L]显著高于空白对照组[(210.56±114.41)U/L](q=4.682,P0.05)。结论PCP大鼠BALF中ALP、CK、CKMB及5′NT含量显著升高,大蒜素治疗可使ALP含量显著降低。

关键词：肺孢子虫肺炎支气管肺泡灌洗液酶大鼠

EGFR、PCNA、LN、Ⅳ型胶原在SACC中的表达及临床意义

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实用口腔医学杂志 2014年第5期30卷 667-671页

作者：杜贵霞张凡霍秀英李立恒李瑞平刘博张九鸿白睿赵秀芳河北北方学院张家口075000 河北北方学院附属第一医院病理科河北北方学院附属第一医院口腔颌面外科

目的:探讨表皮生长因子受体(EGFR)、增殖细胞核抗原(PCNA)、层黏连蛋白(LN)和Ⅳ型胶原蛋白在唾液腺腺样囊性癌(SACC)中的表达及临床意义。方法:选取临床病例资料齐全的SACC 78例,用荧光原位杂交技术检测EGFR基因表达,免疫组织化学技术检... 详细信息

目的:探讨表皮生长因子受体(EGFR)、增殖细胞核抗原(PCNA)、层黏连蛋白(LN)和Ⅳ型胶原蛋白在唾液腺腺样囊性癌(SACC)中的表达及临床意义。方法:选取临床病例资料齐全的SACC 78例,用荧光原位杂交技术检测EGFR基因表达,免疫组织化学技术检测EGFR、PCNA、LN和Ⅳ型胶原蛋白的表达,分析其与临床病理参数的相关性。结果:SACC中EGFR基因扩增率(69.2%)与蛋白的阳性表达率(71.8%)存在明显正相关(P临床病理参数密切相关。EGFR、PCNA表达水平间存在明显正相关(P<0.05);LN蛋白、Ⅳ型胶原表达水平间存在明显负相关(P<0.05)。结论:EGFR基因在SACC中明显扩增,EGFR、PCNA、LN、Ⅳ型胶原蛋白共同参与SACC发生、发展。

关键词：唾液腺腺样囊性癌表皮生长因子受体细胞增殖核抗原层黏连蛋白 IV型胶原荧光原位杂交免疫组织化学