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氧化葡萄糖酸杆菌通过降低pH值损害斑翅果蝇及益生菌

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微生物学报 2024年第3期64卷 795-808页

作者：杨维康张晟王子光何娜娜周传明周少杰刘安琪纪晓雯刘威安徽农业大学植物保护学院安徽合肥230036

【目的】分离斑翅果蝇病原性细菌并解析其致病机理,以期应用于生物防治斑翅果蝇。【方法】利用平板划线的方法,从已发生褐变的斑翅果蝇培养物中分离引起褐变的细菌,并通过16S rRNA基因序列进行鉴定;使用酸化乙醇法测定褐变物质,检测细... 详细信息

【目的】分离斑翅果蝇病原性细菌并解析其致病机理,以期应用于生物防治斑翅果蝇。【方法】利用平板划线的方法,从已发生褐变的斑翅果蝇培养物中分离引起褐变的细菌,并通过16S rRNA基因序列进行鉴定;使用酸化乙醇法测定褐变物质,检测细菌的褐变能力;在致病性检测实验中,利用菌液饲喂法检测病原菌对果蝇存活率的影响,使用二氢乙锭(dihydroethidium,DHE)染色法检测肠道活性氧(reactive oxygen species,ROS)活性,用亮蓝染色检测肠道通透性。【结果】从斑翅果蝇培养物中分离出褐变性细菌氧化葡萄糖酸杆菌(Gluconobacter oxydans)。该菌株显著地降低斑翅果蝇存活率,第8天时存活率下降到49.41%(P植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。【结论】G.oxydans通过强烈降低培养基pH而降低斑翅果蝇存活率,同时可抑制益生菌生长,表明该菌具有较好的防治斑翅果蝇等害虫的潜能。

关键词：斑翅果蝇氧化葡萄糖酸杆菌致病性生物防治 pH值

油松抗性相关激素与代谢物对油松毛虫取食与剪叶刺激的响应

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南京林业大学学报（自然科学版） 2024年第1期48卷 219-226页

作者：赵亚楠孙天骅王利峰许强刘军侠高宝嘉周国娜河北农业大学林学院河北保定071000

【目的】通过对油松毛虫(Dendrolimus tabulaeformis)取食刺激后的油松(Pinus tabuliformis)针叶进行分析,明确针叶树响应昆虫取食后树体内化合物的代谢途径变化,为油松的生长与保护提供参考。【方法】在河北省承德市平泉市黄土梁子林... 详细信息

【目的】通过对油松毛虫(Dendrolimus tabulaeformis)取食刺激后的油松(Pinus tabuliformis)针叶进行分析,明确针叶树响应昆虫取食后树体内化合物的代谢途径变化,为油松的生长与保护提供参考。【方法】在河北省承德市平泉市黄土梁子林场选取生长状况良好的油松纯林,对距地面高度一致的4个方向针叶进行10头油松毛虫取食(feeding stimulation,FS)与剪叶刺激(leaf clipping control,LCC)处理,摘取取食点或剪叶点下方3 cm的油松针叶,对照组不做任何处理(记为处理0 h,CK),取完整松针,对不同处理后0、2与8 h的松针进行代谢组分析和总类黄酮的验证,对0、0.5、1.0、1.5、2.0、4.0、6.0和8.0 h的松针进行茉莉酸(JA)、水杨酸(SA)、生长素(IAA)与脱落酸(ABA)相关植物激素含量的测定。【结果】通过代谢组学分析,FS处理后2.0 h与LCC处理后2.0 h的差异积累代谢物(different accumulated metabolites,DAMs)主要注释和富集的前3条通路为类黄酮生物合成、氨基酸合成代谢、精氨酸和脯氨酸代谢;FS处理后8.0 h与LCC处理后8.0 h的DAMs主要注释和富集的前3条通路为类黄酮生物合成、亚油酸生物合成、黄酮和黄酮醇的生物合成。因此,与LCC处理相比,FS处理可以显著诱导油松针叶取食点处类黄酮类物质的表达上调。植物激素JA、IAA表现出与代谢组中相应物质一致的表达趋势。相关性分析显示,JA与SA、JA与IAA、IAA与ABA之间呈显著正相关关系(P<0.05),SA与IAA和ABA之间呈负相关关系。【结论】类黄酮途径是参与油松抗性形成的主要代谢途径之一,单纯的机械损伤不会引起JA、IAA与ABA的显著差异,且JA、IAA、ABA参与油松抗性形成与生长发育过程。

关键词：油松油松毛虫取食刺激诱导抗性植物激素类黄酮途径代谢组学

番石榴枯萎病菌生物学特性及生防菌和防治药剂的筛选

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华南农业大学学报 2024年第3期45卷 364-370页

作者：黄荣曾敬杨雨婷习平根姜子德李敏慧华南农业大学植物保护学院广东广州510642

【目的】明确番石榴枯萎病菌的生物学特性,并进行生防菌和防治药剂筛选,为番石榴枯萎病的发生规律及高效防控提供理论依据。【方法】在不同碳源、温度、pH、NaCl浓度等培养条件下,测定番石榴枯萎病菌GS-1的生物学特性,采用平板对峙法筛... 详细信息

【目的】明确番石榴枯萎病菌的生物学特性,并进行生防菌和防治药剂筛选,为番石榴枯萎病的发生规律及高效防控提供理论依据。【方法】在不同碳源、温度、pH、NaCl浓度等培养条件下,测定番石榴枯萎病菌GS-1的生物学特性,采用平板对峙法筛选GS-1的生防菌,并利用菌丝生长速率法测定6种常用杀菌剂对病原菌的抑制效果。【结果】番石榴枯萎病菌GS-1菌丝生长的最佳碳源为果糖,产孢最佳碳源为果糖和甘露醇;菌丝最适生长温度为30℃,最适生长pH为6;温度为28~46℃时均有大量孢子萌发,52℃时孢子完全失去活性;番石榴枯萎病菌GS-1菌丝具有一定的耐盐性。生防菌解淀粉芽孢杆菌B2对病原菌GS-1生长的抑制效果最佳。番石榴枯萎病菌GS-1菌丝对咪鲜胺的敏感性最高,0.0004μg/mL咪鲜胺条件下不生长;其次为吡唑醚菌酯和甲霜灵,EC50分别为0.4912和0.8805μg/mL。【结论】番石榴枯萎病菌适生范围较广,温度较高、中性偏弱酸的环境条件利于其快速生长繁殖,咪鲜胺、吡唑醚菌酯和甲霜灵可作为防治番石榴枯萎病的药剂。

关键词：番石榴枯萎病番石榴纳氏霉生物学特性生防菌防治药剂

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枣77个品种果肉愈伤组织诱导培养研究

园艺学报 2024年第4期51卷 903-914页

作者：赵若雨郭晓雪朱文慧李瑞梅赵佳雪杜丹代丽刘志国王立新刘孟军河北农业大学园艺学院河北保定071001

果肉愈伤组织的大量培养可为悬浮细胞体系的建立、原生质体的分离与培养、遗传转化体系的建立及次生代谢产物的研究提供物质基础。以5个发育阶段的枣果肉为试材,共计77个枣品种,选用10种培养基进行枣果肉愈伤组织诱导研究。结果表明,基... 详细信息

果肉愈伤组织的大量培养可为悬浮细胞体系的建立、原生质体的分离与培养、遗传转化体系的建立及次生代谢产物的研究提供物质基础。以5个发育阶段的枣果肉为试材,共计77个枣品种,选用10种培养基进行枣果肉愈伤组织诱导研究。结果表明,基因型、果实发育阶段、培养基种类及其植物生长调节剂配比对枣果肉愈伤组织诱导效果均具有显著影响。在启动培养阶段,有42个品种分别筛选出1~6种可诱导出愈伤组织的培养基;有8种培养基可以成功诱导出愈伤组织,其中G1(4.41 g·L^(-1) MS+6 g·L^(-1)琼脂+20 g·L^(-1)蔗糖+0.5 mg·L^(-1)6-BA+2.5 mg·L^(-1)2,4-D)和G7(4.41 g·L^(-1) MS+6 g·L^(-1)琼脂+20 g·L^(-1)蔗糖+0.8 mg·L^(-1)6-BA+1.5 mg·L^(-1)2,4-D)培养基的适用性最高,达60%,其次为G5(4.41 g·L^(-1) MS+6 g·L^(-1)琼脂+20 g·L^(-1)蔗糖+1.0 mg·L^(-1)6-BA+2.0 mg·L^(-1)2,4-D),达45%;幼果最适于果肉愈伤组织培养,88%的品种可成功诱导出愈伤组织,随着果实成熟,果肉愈伤组织越不易诱导,在完全成熟的全红期只有‘圆铃小枣’成功诱导出愈伤组织。在继代培养阶段,有22个品种的愈伤组织实现了持续继代培养,适宜的培养基有G1(4.41 g·L^(-1) MS+6 g·L^(-1)琼脂+20 g·L^(-1)蔗糖+0.5 mg·L^(-1)6-BA+2.5 mg·L^(-1)2,4-D)、G3(4.41 g·L^(-1) MS+6 g·L^(-1)琼脂+20 g·L^(-1)蔗糖+1.0 mg·L^(-1)6-BA+1.0 mg·L^(-1)2,4-D)、G5(4.41 g·L^(-1) MS+6 g·L^(-1)琼脂+20 g·L^(-1)蔗糖+1.0 mg·L^(-1)6-BA+2.0 mg·L^(-1)2,4-D)、G6(4.41 g·L^(-1) MS+6 g·L^(-1)琼脂+20 g·L^(-1)蔗糖+3.0 mg·L^(-1) TDZ+0.5 mg·L^(-1) NAA)、G7(4.41 g·L^(-1) MS+6 g·L^(-1)琼脂+20 g·L^(-1)蔗糖+0.8 mg·L^(-1)6-BA+1.5 mg·L^(-1)2,4-D)、G9(4.41 g·L^(-1) MS+6 g·L^(-1)琼脂+20 g·L^(-1)蔗糖+0.5 mg·L^(-1) NAA+1.0 mg·L^(-1)6-BA)和G10(4.41 g·L^(-1) MS+6 g·L^(-1)琼脂+25 g·L^(-1)蔗糖+0.4 mg·L^(-1)6-BA+1.5 mg·L^(-1)2,4-D);改变植物生长调节剂配比可以显著提高愈伤继代效果。此外,在启动培养阶段,有极少量的品种,如‘无核72’和‘临猗梨枣’可以直接诱导出芽。

关键词：枣愈伤组织果肉培养植物生长调节剂

辣椒白绢病拮抗放线菌SD-64的鉴定及作用机制研究

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园艺学报 2024年第1期51卷 175-189页

作者：刘仕达邱泽澜李晓刚钟杰朱俊子湖南农业大学植物保护学院长沙410128

通过平板对峙培养法从辣椒根际土壤中筛选到1株对辣椒白绢病菌(Sclerotium rolfsii)具有抑制活性的放线菌株SD-64。利用形态学观察和分子生物学方法对其进行了鉴定,研究其对辣椒白绢病的防效以及对白绢病菌的作用机制,并对菌株SD-64发... 详细信息

通过平板对峙培养法从辣椒根际土壤中筛选到1株对辣椒白绢病菌(Sclerotium rolfsii)具有抑制活性的放线菌株SD-64。利用形态学观察和分子生物学方法对其进行了鉴定,研究其对辣椒白绢病的防效以及对白绢病菌的作用机制,并对菌株SD-64发酵液粗提物进行了提取。结果表明,菌株SD-64对白绢病菌的平板抑制率达到99.27%。基于形态和16SrDNA鉴定SD-64为灰橙链霉菌(Streptomyces griseoaurantiacus)。SD-64能产生黑色素和纤维素酶,其发酵产物可以影响辣椒白绢病菌菌核的产生与萌发,影响菌丝形态,破坏细胞膜的完整性,增加菌丝内活性氧的积累。辣椒离体叶片和活体盆栽防效试验显示SD-64发酵液能明显降低辣椒白绢病的发生。SD-64发酵液粗提物对辣椒白绢病菌的EC_(50)为78.281μg·mL^(-1)。综上所述,菌株SD-64对辣椒白绢病菌具有的良好防治效果,具有开发应用潜力。

关键词：辣椒白绢病生物防治放线菌 16S rDNA 作用机制

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不同温度下中国梨木虱的两性生命表

应用昆虫学报 2024年第2期 279-286页

作者：张博晨张蕊许双叶朱兴秋连少博郝赤庾琴山西农业大学植物保护学院

【目的】明确温度对中国梨木虱Psylla chinensis生长发育和繁殖的影响。【方法】室内条件下,16、20、24、28、32和36℃分别测定中国梨木虱各阶段发育历期、产卵量和存活率等，制定其年龄-龄期两性生命表，利用两性生命表计算其存活率、... 详细信息

【目的】明确温度对中国梨木虱Psylla chinensis生长发育和繁殖的影响。【方法】室内条件下,16、20、24、28、32和36℃分别测定中国梨木虱各阶段发育历期、产卵量和存活率等，制定其年龄-龄期两性生命表，利用两性生命表计算其存活率、繁殖力、寿命期望、繁殖值和种群参数。【结果】16-24℃，中国梨木虱随温度升高，其生长速度加快、发育历期缩短；24-32℃其发育历期变化不显著；36℃条件下不能完成整个生长发育。24℃时产卵量最高，为281.50粒/雌。16-24℃，中国梨木虱的年龄特征存活率、种群特定年龄净繁殖力、平均贡献度均随温度升高而增加，24-32℃，均随温度升高而下降。24℃处理的内禀增长率、周限增长率和净增值率均最高，28℃处理的平均世代周期最短。【结论】结果表明中国梨木虱生长发育和繁殖适宜温度为24-28℃。

关键词：中国梨木虱年龄-龄期两性生命表温度生长发育种群参数

苏云金芽胞杆菌Bt64紫外线照射及其对稻螟蛉的致病力

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中国生物防治学报 2024年

作者：马世炎韩宇彤刘晓丽张鑫鑫于洪春东北农业大学植物保护学院

为探索苏云金芽胞杆菌Bt64紫外线照射后菌株抗紫外线能力及对稻螟蛉幼虫的致病力变化，本研究在对苏云金芽胞杆菌菌株Bt64进行紫外线照射的基础上，揭示了不同紫外线照射处理对菌株生长发育的影响和抗紫外线能力变化，明确了紫外线处理... 详细信息

为探索苏云金芽胞杆菌Bt64紫外线照射后菌株抗紫外线能力及对稻螟蛉幼虫的致病力变化，本研究在对苏云金芽胞杆菌菌株Bt64进行紫外线照射的基础上，揭示了不同紫外线照射处理对菌株生长发育的影响和抗紫外线能力变化，明确了紫外线处理后菌株Bt64对稻螟蛉幼虫的毒力变化及室外防治效果。研究结果表明，菌株Bt64不同时长紫外线连续照射处理的菌落形成单位和芽胞产量均高于直接照射，而芽胞萌发抑制率低于直接照射，随照射时长增加差异显著。照射时长30 min和45 min条件下，菌株经连续照射后复壮和连续照射后复壮再照射对稻螟蛉幼虫的致病力和防治效果较原菌株增强，显著高于同时长的直接照射菌株致病力。紫外线连续照射后能提高菌株Bt64抗紫外线能力、杀虫活性和室外防治效果，为开发出具有杀虫活性持久和耐紫外线的Bt生物农药提供了依据。

关键词：苏云金芽胞杆菌紫外线稻螟蛉菌株生长发育致病力

草地贪夜蛾钙粘蛋白重复区片段的克隆表达及时空分析

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环境昆虫学报 2024年

作者：王靖怡李颖顾俊文张珀瑞祖尔东·加拉力丁张琪沈阳农业大学植物保护学院

为探明钙粘蛋白在草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda中不同发育阶段、不同组织中的表达水平，进一步探索草地贪夜蛾钙粘蛋白作为Cry毒蛋白受体的功能性作用，本研究克隆并原核表达了草地贪夜蛾钙粘蛋白（cadherin）SfCR10-12片段，以及Sf... 详细信息

为探明钙粘蛋白在草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda中不同发育阶段、不同组织中的表达水平，进一步探索草地贪夜蛾钙粘蛋白作为Cry毒蛋白受体的功能性作用，本研究克隆并原核表达了草地贪夜蛾钙粘蛋白（cadherin）SfCR10-12片段，以及SfCR10， SfCR11， SfCR12 3个分段重复区片段，并对其时空表达模式进行了分析。结果表明：（1）草地贪夜蛾与甜菜夜蛾Spodoptera exigua钙粘蛋白序列高度相似达80.46%。（2）获得的SfCR10-12序列（GenBank登录号：OP547784）长度为933 bp，开放阅读框810 bp，编码268个氨基酸。（3）SfCR10-12基因在不同发育阶段均有表达，在5和6龄幼虫中表达量最高，此外在草地贪夜蛾中肠部位有一定的表达，但是在头部和体壁表达量较低。（4）经原核表达和纯化后获得了分子大小约为34、9.57、14.11和11.06 kDa的SfCR10-12、SfCR10、SfCR11和SfCR12蛋白片段。本研究结果为深入研究草地贪夜蛾钙粘蛋白不同重复区介导Bt Cry毒素对草地贪夜蛾的作用机制提供了基础。

关键词：草地贪夜蛾钙粘蛋白克隆蛋白表达时空表达

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藜麦茎部响应瓜笄霉侵染的代谢组分析

微生物学通报 2024年

作者：彭玉飞王天禧杨振永田淼任璐吕红秦楠殷辉赵晓军山西农业大学植物保护学院

【背景】藜麦笄霉软腐病(quinoa Choanephora rot)的病原为瓜笄霉(Choanephora cucurbitarum)，但藜麦响应其侵染后的代谢变化尚未明确。【目的】研究瓜笄霉侵染藜麦后的代谢物变化及关键代谢途径，以利于了解该病的生理生化机制。【方... 详细信息

【背景】藜麦笄霉软腐病(quinoa Choanephora rot)的病原为瓜笄霉(Choanephora cucurbitarum)，但藜麦响应其侵染后的代谢变化尚未明确。【目的】研究瓜笄霉侵染藜麦后的代谢物变化及关键代谢途径，以利于了解该病的生理生化机制。【方法】基于非靶向代谢组学研究技术，结合多元统计分析方法，分析瓜笄霉侵染藜麦茎部代谢物差异及代谢途径变化。【结果】与对照组相比瓜笄霉侵染藜麦后，显著差异代谢物有512种(P<0.01)，其中283种为上调，229种为下调。KEGG富集分析发现藜麦茎部响应瓜笄霉侵染的主要差异代谢物共19种(P<0.05)，这些主要代谢物显著富集到花生四烯酸代谢、亚油酸代谢、α-亚麻酸代谢、黄酮和黄酮醇的生物合成共4条代谢通路。【结论】瓜笄霉侵染可导致藜麦中花生四烯酸代谢、亚油酸代谢、α-亚麻酸代谢、黄酮和黄酮醇的生物合成等代谢途径发生变化，其中α-亚麻酸代谢及其相关代谢物茉莉酸的积累、黄酮和黄酮醇的生物合成受阻，可能是藜麦响应是瓜笄霉侵染的主要方式。

关键词：藜麦笄霉软腐病瓜笄霉非靶向代谢组学代谢物