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益母草对雄性小鼠生殖细胞的遗传毒性

吉林大学学报（医学版） 2003年第5期29卷 560-562页

作者：朱玉琢庞慧民邢沈阳高久春胥耘荆吉林大学基础医学院医学遗传学教研室吉林长春130021 吉林大学护理学院生物学教研室吉林大学基础医学院细胞生物学教研室吉林省高等法院

目的 :观察中草药益母草对雄性小鼠生殖细胞的遗传毒性。方法 :采用小鼠精子畸形试验、精原细胞姐妹染色单体互换试验和小鼠精子非程序 DNA合成试验。结果 :益母草各剂量组所诱导的小鼠精子畸形频率和精原细胞姐妹染色单体互换频率与正... 详细信息

目的 :观察中草药益母草对雄性小鼠生殖细胞的遗传毒性。方法 :采用小鼠精子畸形试验、精原细胞姐妹染色单体互换试验和小鼠精子非程序 DNA合成试验。结果 :益母草各剂量组所诱导的小鼠精子畸形频率和精原细胞姐妹染色单体互换频率与正常对照组比较 ,差异无显著性( P>0 .0 5 ) ,益母草不能诱导小鼠精子非程序 DNA合成。结论 :益母草对雄性小鼠生殖细胞无遗传毒性。

关键词：益母草精子畸形姐妹染色单体互换非程序DNA合成遗传毒性雄性小鼠

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益母草对小鼠雄性生殖细胞遗传损伤的影响

吉林大学学报（医学版） 2003年第6期29卷 756-758页

目的 :观察中草药益母草对醋酸铅引起的小鼠雄性生殖细胞遗传损伤的影响。方法 :采用小鼠精原细胞姐妹染色单体交换实验。结果 :益母草本身不能诱发小鼠精原细胞姐妹染色单体交换 ,但在与醋酸铅一同给药时 ,可使醋酸铅所诱发的小鼠精原... 详细信息

目的 :观察中草药益母草对醋酸铅引起的小鼠雄性生殖细胞遗传损伤的影响。方法 :采用小鼠精原细胞姐妹染色单体交换实验。结果 :益母草本身不能诱发小鼠精原细胞姐妹染色单体交换 ,但在与醋酸铅一同给药时 ,可使醋酸铅所诱发的小鼠精原细胞姐妹染色单体交换频率明显降低。结论 :益母草对小鼠雄性生殖细胞遗传物质具有保护作用 ,即抗诱变作用。

关键词：益母草抗诱变药醋酸铅精原细胞姐妹染色单体交换诱变力试验雄性生殖细胞遗传损伤

人参二醇组皂苷增强紫杉醇对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞凋亡的研究

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中国妇幼保健 2014年第35期29卷 5899-5901页

作者：刘磊王宏英方艳秋谭岩赵雪俭吉林省人民医院医学诊治实验中心 130021 长春中医药大学基础医学院生物化学教研室吉林大学病理生理教研室

目的:探讨人参二醇组皂苷(PDS)与紫杉醇(PTX)联合应用对DUl45前列腺癌细胞增殖及凋亡的影响。方法:MTT法检测PTX单独组、PTX+地塞米松(Dex)组和PTX+PDS组SKOV3卵巢癌细胞存活的情况;流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况;免疫印迹方法检测各... 详细信息

目的:探讨人参二醇组皂苷(PDS)与紫杉醇(PTX)联合应用对DUl45前列腺癌细胞增殖及凋亡的影响。方法:MTT法检测PTX单独组、PTX+地塞米松(Dex)组和PTX+PDS组SKOV3卵巢癌细胞存活的情况;流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况;免疫印迹方法检测各组细胞活化形式caspase-3蛋白和AKT磷酸化的表达情况。结果:紫杉醇单独作用能显著的以浓度依赖性的方式降低细胞的存活,联合应用Dex后存活的SKOV3细胞数明显增加,PDS可以增加PTX对SKOV3细胞的增殖抑制作用。流式细胞仪检测细胞凋亡结果发现,PTX处理SKOV3细胞,凋亡细胞数约占总细胞数的22.38%,PTX联合Dex组其凋亡细胞数下降到总细胞数的14.52%(P<0.05),PTX联合PDS组其凋亡细胞数增加至39.54%。在SKOV3细胞中,PTX能显著诱导活化的caspase-3的表达,而Dex能够明显抑制PTX对活化的caspase-3表达的诱导作用。PDS可以促进活化的caspase-3的表达。与PTX组比较,PTX+Dex组AKT的磷酸化水平升高,而PDS可以使SKOV3细胞中的AKT的磷酸化显著降低。结论:PDS通过增强化疗药物PTX对SKOV3细胞的凋亡作用来增强对肿瘤细胞的杀伤作用。

关键词：人参二醇组皂苷紫杉醇卵巢癌细胞凋亡

持续低氧对小鼠胚胎成纤维细胞增殖及饲养层制备的影响

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中国组织工程研究 2018年第9期22卷 1450-1456页

作者：魏含清裴轶劲王丹丹蒋杨王春李洪梅广东医科大学基础医学院生理学教研室干细胞与再生医学研究所广东省东莞市523808 广东医科大学基础医学院生理科学实验室广东省东莞市523808 广东医科大学病理学系广东省东莞市523808

背景:在传统的胚胎干细胞培养体系中,饲养层细胞制备和胚胎干细胞的培养扩增大都是在常氧条件下进行的,氧培养条件的改变有可能影响饲养层细胞,从而改变胚胎干细胞的生长特性或分化能力,但尚未见到这方面的系统研究报道。目的:观察低氧... 详细信息

背景:在传统的胚胎干细胞培养体系中,饲养层细胞制备和胚胎干细胞的培养扩增大都是在常氧条件下进行的,氧培养条件的改变有可能影响饲养层细胞,从而改变胚胎干细胞的生长特性或分化能力,但尚未见到这方面的系统研究报道。目的:观察低氧培养对饲养层细胞及小鼠胚胎干细胞干性维持的影响。方法:原代小鼠胚胎成纤维细胞分为常氧组(体积分数20%O——2)和低氧组(体积分数5%O——2)持续传代培养,绘制生长曲线,检测活性氧水平和线粒体膜电位。将小鼠胚胎干细胞分为常氧组(饲养层为常氧组小鼠胚胎成纤维细胞,体积分数20%O——2条件下培养)和低氧组(饲养层为低氧组小鼠胚胎成纤维细胞,体积分数5%O——2条件下培养),观察胚胎干细胞的生长形态,检测干细胞多能性指标Oct4、Sox2以及低氧诱导因子HIF-1αmRNA表达。结果与结论:(1)与常氧组相比,低氧组小鼠胚胎成纤维细胞增殖较快,线粒体膜电位上升,产生活性氧减少(P<0.05);(2)胚胎干细胞碱性磷酸酶染色阳性,Oct4、Sox2高表达,低氧组形成的中小集落及HIF-1αmRNA表达比常氧组显著增多(P<0.05);(3)结果表明,体积分数5%O2持续低氧培养利于维持饲养层细胞(小鼠胚胎成纤维细胞)的活力和胚胎干细胞的干性维持。

关键词：胚胎干细胞成纤维细胞细胞低氧组织工程

细胞间粘附分子-1在小鼠间充质干细胞体外迁移中的作用及其机制

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中国实验血液学杂志 2014年第2期22卷 479-484页

作者：王艳国赵岳李喜梅唐博褚亚男刘元林朱恒张毅内蒙古包头医学院病理生理学教研室内蒙古包头014060 军事医学科学院基础医学研究所北京100850 内蒙古包头市九原区医院外科内蒙古包头014060 辽宁医学院沈阳军区总医院研究生培养基地辽宁沈阳110016 天津医科大学总医院儿科天津300052

本研究旨在探讨细胞间粘附分子-1(ICAM-1)在小鼠间充质干细胞(MSC)体外迁移中的作用及其相关机制。采用transwell法研究小鼠MSC(C3H10T1/2)、转染空载体的小鼠MSC(C3H10T1/2-MIGR1)和转染了ICAM-1的小鼠MSC(C2H10T1/2-ICAM-1)的体外迁移能力,即将各组MSC种植在孔径为8μm的通透膜上面,以胎牛血清作为趋化物质诱导MSC迁移。分别在迁移8 h和12 h后对膜下的MSC进行结晶紫和荧光染料DAPI染色,然后统计各组的MSC的细胞数和迁移率。为了探究调控MSC迁移的机制,丝裂原活化蛋白激酶通路的抑制剂(SB203580,PD98059和JNK inhibitor II)被添加到transwell体系中,并进一步观察MSC迁移能力的改变。结果表明:3种细胞8 h和12 h的transwell体外迁移结果显示,转染了ICAM-1的MSC组迁移的细胞数和迁移率均显著高于未转染组MSC和转染空载体组MSC(P0.05);加入JNK/SAPK通路的抑制剂JNK inhibitor II可以抑制ICAM-1对MSC的促迁移作用,无论是迁移的细胞数还是迁移率均显著降低(P<0.05)。本研究中p38/MAPK通路的抑制剂SB203580和ERK/MAPK通路的抑制剂PD98059对于ICAM-1的促MSC迁移作用无显著影响。结论:ICAM-1可增强小鼠MSC的体外迁移能力,这种促进作用部分依赖于活化JNK/SAPK通路实现。

关键词：细胞间粘附分子-1 间充质干细胞体外迁移

幽门螺杆菌感染胃癌组织MMP-2和MMP-9表达及其对胃癌侵袭转移能力的影响

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世界华人消化杂志 2007年第7期15卷 755-757页

作者：王舰李胜军赵成海罗恩杰中国医科大学口腔医学院辽宁省沈阳市110002 中国医科大学基础医学院免疫学教研室辽宁省沈阳市110001 中国医科大学基础医学院病理生理教研室辽宁省沈阳市110001 中国医科大学基础医学院病原生物学教研室辽宁省沈阳市110001

目的:分析幽门螺杆菌感染对胃癌转移侵袭能力的影响,同时对其基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达情况进行检测.方法:采用改良的Giemsa法检测幽门螺杆菌感染,免疫组化法检测42例胃癌标本MMP-9和MMP-2表达情况.采用Fishe... 详细信息

目的:分析幽门螺杆菌感染对胃癌转移侵袭能力的影响,同时对其基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达情况进行检测.方法:采用改良的Giemsa法检测幽门螺杆菌感染,免疫组化法检测42例胃癌标本MMP-9和MMP-2表达情况.采用Fisher's exact检验对幽门螺杆菌感染和胃癌患者临床病理特征的相关性进行分析.结果:胃癌组织中幽门螺杆菌感染率为61.9%(26/42).幽门螺杆菌感染与胃癌的分期和淋巴结转移状况相关,与患者性别、发病年龄、及组织类型无相关性.幽门螺杆菌感染与MMP-9和MMP-2表达均具有相关性(χ2=7.77,P<0.01;χ2=8.08,P<0.01).结论:幽门螺杆菌感染能够增加胃癌的侵袭转移能力,其机制可能与MMP-9和MMP-2表达增加有关.

关键词：幽门螺杆菌胃癌基质金属蛋白酶-9 基质金属蛋白酶-2 免疫组化

NDRG 1基因转染对HT-29人结肠癌细胞株增殖、侵袭和迁移能力的影响

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实用肿瘤杂志 2011年第2期26卷 139-143页

作者：刘瑛瑛王芳邹英鹰杨丽娟宋精玲昆明医学院病理教研室云南昆明650031 昆明医学院电镜室云南昆明650031

目的研究NDRG1基因转染对HT-29人结肠癌细胞株体外增殖、侵袭和迁移能力的影响。方法将重组真核表达质粒pEGFP-NDRG1-N3和空载体pEGFP-N3采用阳离子脂质体Lipofectamine转染HT-29人结肠癌细胞株,通过荧光倒置显微镜检测绿色荧光蛋白的... 详细信息

目的研究NDRG1基因转染对HT-29人结肠癌细胞株体外增殖、侵袭和迁移能力的影响。方法将重组真核表达质粒pEGFP-NDRG1-N3和空载体pEGFP-N3采用阳离子脂质体Lipofectamine转染HT-29人结肠癌细胞株,通过荧光倒置显微镜检测绿色荧光蛋白的表达。免疫组织化学染色检测转染前后HT-29细胞NDRG1的表达。并通过多种体外实验(流式细胞术法、24-transwell法、扫描电镜和透射电镜等)研究NDRG1对HT-29人结肠癌细胞株体外增殖、侵袭和迁移能力及表面和超微结构的影响。结果流式细胞术结果显示,与未转染组和转染pEGFP-N3空载体组比较,pEGFP-NDRG1-N3组细胞生长周期G0/G1期比例增高,S期明显减低,差异有统计学意义(P<0.05)。细胞侵袭和迁移实验的结果显示,转染pEGFP-NDRG1-N3组细胞与空载体和空白对照组比较,穿过微孔膜的细胞数均明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。扫描和透射电镜结果显示,转染pEGFP-NDRG1-N3组HT-29细胞生长增殖受抑制,细胞分化程度有增高趋势。结论 NDRG1基因可明显抑制HT-29人结肠癌细胞的体外增殖活性,降低其侵袭和迁移能力,促进其分化,提示其可作为一种候选的肿瘤转移抑制基因。

关键词：结肠肿瘤/病理学 HT29细胞细胞周期蛋白质类/遗传学细胞周期蛋白质类/生物合成基因表达肿瘤侵润肿瘤细胞,培养的

国内建立的人肿瘤细胞系的身份认证问题及对策

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解剖学报 2019年第2期50卷 201-210页

作者：卞晓翠刘玉琴杨振丽冯海凉中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理学系细胞资源中心北京100005

目的为国内建立的人肿瘤细胞系进行身份认证,确认这些细胞系使用的可靠性。方法收集、整理国内实验室建立的人肿瘤来源细胞系,提取细胞的基因组DNA,PCR扩增其中的多个短串联重复序列(STRs)位点后进行毛细管电泳,分析获得细胞的STR图谱... 详细信息

目的为国内建立的人肿瘤细胞系进行身份认证,确认这些细胞系使用的可靠性。方法收集、整理国内实验室建立的人肿瘤来源细胞系,提取细胞的基因组DNA,PCR扩增其中的多个短串联重复序列(STRs)位点后进行毛细管电泳,分析获得细胞的STR图谱作为细胞系的DNA指纹,然后与原始组织或国际数据库中已有细胞的STR谱进行比对,通过匹配度的高低判断该细胞是否被其他细胞交叉污染。对怀疑He La细胞污染的肿瘤细胞,检测其基因组中是否有人乳头瘤病毒18型(HPV-18)病毒插入片段。对怀疑T细胞白血病细胞污染的,则检测T细胞的各种特性(表面标志),根据表面标志表达情况判断是否为错误细胞。结果本研究共收集了37种国内建立的肿瘤细胞系46个样品。本中心建立的6株细胞系均STR正确。其他单位建立的细胞系中有8株系正确,有23(62. 2%)株系认定为错误细胞,人宫颈癌细胞He La是主要污染源;另外发现有些国内自建的细胞系被人结直肠癌细胞HCT-8、宫颈鳞癌细胞Si Ha、T细胞白血病细胞CCRF-CEM及大鼠细胞污染。结论国内建立的肿瘤细胞很高比例地发生了细胞间的交叉污染,科研人员在实验前一定要首先进行细胞身份认定,或者从国家实验细胞资源共享服务平台选择细胞。另外,建立细胞系时保留原始组织用于后续细胞系的身份认证。

关键词：短串联重复序列分型交叉污染特性鉴定聚合酶链反应肿瘤细胞细胞培养人

滤过膜与擦镜纸双层包埋法在细胞块制作中应用

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临床与实验病理学杂志 2017年第7期33卷 818-819页

作者：程新宇周成美赵天翔孙虓栾岚吴非王翠芳沈阳医学院附属中心医院病理科沈阳110024 锦州医科大学第三临床学院2015级临床医学17班锦州121000 沈阳医学院基础医学院2013级医学检验技术专业1班沈阳110020

随着分子生物学飞速发展，靶向治疗在肿瘤治疗中被广泛应用。传统脱落细胞学制作方法，不能满足临床需求。如何在量少的标本中尽可能大量收集细胞，减少细胞丢失在细胞块制作中显得尤为重要。本科室在实践工作中将膜式液基薄层制作过滤... 详细信息

随着分子生物学飞速发展，靶向治疗在肿瘤治疗中被广泛应用。传统脱落细胞学制作方法，不能满足临床需求。如何在量少的标本中尽可能大量收集细胞，减少细胞丢失在细胞块制作中显得尤为重要。本科室在实践工作中将膜式液基薄层制作过滤器上的滤过膜（简称滤过膜）用刀裁剪，放在包埋时裁好的擦镜纸上，对收集的细胞沉淀物进行双层包埋，形成细胞块。该方法操作简便，最大限度收集细胞，有利于恶性肿瘤类型的鉴别及靶向治疗的开展，现介绍如下。

关键词：滤过膜双层包埋细胞块