检索结果-南通市图书馆

DNA条形码在柞树主要鳞翅目害虫种类鉴定中的应用

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蚕业科学 2017年第5期43卷 750-756页

作者：杨瑞生陈玉波王勇姜义仁石生林王国宝秦利沈阳农业大学生物科学技术学院辽宁省昆虫资源工程技术研究中心沈阳110866

鳞翅目昆虫是柞树的重要害虫类群。为了提高柞园鳞翅目害虫早期测报效率和准确度,建立了以线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ基因(COⅠ)为标准基因的DNA条形码物种快速鉴定技术。应用该技术对从柞园采集的11种鳞翅目害虫的卵和蛹基因组DNA样... 详细信息

鳞翅目昆虫是柞树的重要害虫类群。为了提高柞园鳞翅目害虫早期测报效率和准确度,建立了以线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ基因(COⅠ)为标准基因的DNA条形码物种快速鉴定技术。应用该技术对从柞园采集的11种鳞翅目害虫的卵和蛹基因组DNA样品进行PCR及产物测序,得到了供试鳞翅目昆虫卵和蛹594~708 bp长的DNA条形码标准基因。同一种昆虫卵和蛹的DNA条形码序列存在0~2个碱基差异,序列一致度在99.7%~100%之间。供试鳞翅目昆虫DNA条形码序列碱基A、T、G和C的平均含量分别为30.7%、38.5%、14.9%和15.9%。获得的DNA条形码序列与Gen Bank数据库中同源序列相似度性最高物种的DNA条形码序列一致度在91.4%~100%之间,差异度在0~8.6%之间,其中有10种鳞翅目昆虫的卵和蛹的样品(编号1~20)与Gen Bank数据库中同源序列的一致度在99%~100%之间,差异度为0~1.0%,只有1种鳞翅目昆虫的卵和蛹样品(编号21、22)与Gen Bank数据库中同源序列的差异度较大,为8.6%。结果表明:应用建立的DNA条形码技术,可以根据天幕毛虫等鳞翅目害虫的卵和蛹基因组DNA快速、准确地对害虫进行种类鉴定。

关键词： DNA条形码柞树害虫鳞翅目昆虫分子鉴定线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ

入侵种瘤突苍耳细根解剖结构的可塑性与入侵性间的关系

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草业学报 2023年第5期32卷 118-126页

作者：陈美杉陈鲜满晓珍刘闯佟佳林曲波沈阳农业大学生物科学技术学院辽宁沈阳110866

细根是植物吸收地下水分与养分的重要器官,影响植物生长。细根可通过调整自身的形态或解剖结构支持不同环境条件下的植物生长。入侵植物多为群落内的优势种,其根系解剖结构及资源获取能力是否比本地物种的更强?本研究以外来入侵植物瘤... 详细信息

细根是植物吸收地下水分与养分的重要器官,影响植物生长。细根可通过调整自身的形态或解剖结构支持不同环境条件下的植物生长。入侵植物多为群落内的优势种,其根系解剖结构及资源获取能力是否比本地物种的更强?本研究以外来入侵植物瘤突苍耳和本地同属种苍耳为研究对象,设置4种水分-氮梯度模拟异质环境,利用石蜡切片法比较盆栽两种苍耳的细根直径、皮层厚度、中柱直径和气腔面积等的差异。结果表明:瘤突苍耳细根皮层的气腔结构比苍耳的发达。高资源下,瘤突苍耳的细根直径增长程度小于苍耳。氮含量充足时,高水中瘤突苍耳的皮层厚度、内皮层厚度和导管直径均显著小于苍耳;水分充足时,高氮中瘤突苍耳的总导管面积显著小于苍耳。相比低资源环境处理,高资源下瘤突苍耳的皮层厚度是显著升高的。上述结果表明,气腔与皮层结构的可塑性是影响瘤突苍耳细根解剖结构的驱动因子,且瘤突苍耳根部解剖结构可塑性对异质性环境的响应变化与苍耳比相对稳定。瘤突苍耳自身结构可塑性能在多种环境下获得生长优势。因此,本研究认为相比苍耳,瘤突苍耳细根具有相对进化的解剖结构及塑形变化体系,构成一种高地下资源吸收和低成本消耗的高效入侵策略。

关键词：入侵植物瘤突苍耳细根石蜡切片结构可塑性

玉米C_4光合叶不同部位解剖结构和光抑制特性的比较

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植物生理学报 2012年第6期48卷 571-576页

作者：王燕鹏崔震海朱延姝樊金娟张立军沈阳农业大学生物科学技术学院沈阳110866

以玉米第5位全展叶(C4光合叶)为材料,分别测定基部、中部和顶部的光合速率后,将叶片置于强光(2000μmol·m-2·s-1)下处理3h和暗中恢复3h,再测定这3个部位在处理期间的叶绿素荧光参数变化;然后分别从叶片的基部、中部和顶部取样观察显... 详细信息

以玉米第5位全展叶(C4光合叶)为材料,分别测定基部、中部和顶部的光合速率后,将叶片置于强光(2000μmol·m-2·s-1)下处理3h和暗中恢复3h,再测定这3个部位在处理期间的叶绿素荧光参数变化;然后分别从叶片的基部、中部和顶部取样观察显微结构和超微结构,测定叶绿素含量。结果表明,3个部位光合速率和叶绿素含量的大小依次为:中部>顶部>基部。基部的维管束鞘细胞叶绿体数量少,体积小,排列无规律,类囊体膜有部分垛叠;中部和顶部维管束鞘细胞叶绿体数量多,体积大,大部分围绕维管束呈离心排列,类囊体膜垛叠消失。在强光下,基部、中部和顶部均发生光抑制,但光抑制程度不同,根据严重度依次为:基部>顶部>中部,3个部位在暗中的光抑制恢复能力依次为:中部>顶部>基部。与叶基部相比,叶中部在强光下能维持较高的电子传递效率(φEo)和较低的热耗散比率(φDo)。这表明,C4光合循环是保持较高电子传递效率、减轻光抑制的重要因子。

关键词：玉米光抑制叶片解剖结构 C3光合循环 C4光合循环

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植物激素相关microRNA研究进展

植物生理学报 2013年第11期49卷 1121-1126页

作者：曹慧颖王可高何瑞张立军夏润玺沈阳农业大学生物科学技术学院沈阳110866

microRNA(miRNA)是22nt左右的非编码RNA,主要在转录后水平调节基因的活性。miRNA通过与靶基因的互补位点结合从而降解靶基因mRNA或抑制其翻译。近年的研究发现,miRNA在植物生长发育中发挥着重要的调控作用。目前已知一些miRNA参与植物... 详细信息

microRNA(miRNA)是22nt左右的非编码RNA,主要在转录后水平调节基因的活性。miRNA通过与靶基因的互补位点结合从而降解靶基因mRNA或抑制其翻译。近年的研究发现,miRNA在植物生长发育中发挥着重要的调控作用。目前已知一些miRNA参与植物激素信号途径的切入点,这为我们了解miRNA和植物激素在植物发育中的作用提供了新思路。本文综述了miRNA参与植物激素信号应答及生物合成的研究进展,并对一些miRNA在植物激素信号应答中可能的作用进行了讨论。

关键词： miRNA 植物激素转录后调控植物发育

玉米大斑病抗性基因Ht1定位区域内候选序列的生物信息学分析

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遗传 2009年第6期31卷 638-644页

作者：鄂洋林凤张春宇崔娜许玉凤沈阳农业大学生物科学技术学院沈阳110161

为获得玉米大斑病抗性基因Ht1候选序列,文章采用生物信息学方法对与玉米大斑病抗性基因Ht1紧密连锁的分子标记umc22和umc122定位区域内候选序列进行了分析,其中得到的63条ORF序列中有14条序列可编码蛋白质结构域。将14条核苷酸酸序列预... 详细信息

为获得玉米大斑病抗性基因Ht1候选序列,文章采用生物信息学方法对与玉米大斑病抗性基因Ht1紧密连锁的分子标记umc22和umc122定位区域内候选序列进行了分析,其中得到的63条ORF序列中有14条序列可编码蛋白质结构域。将14条核苷酸酸序列预测出的氨基酸序列与已克隆的24条抗性基因编码氨基酸序列进行Blast比对及进化树构建。结果发现,候选序列gpm565a具有植物抗性基因编码产物的高度保守结构域,而且与抗性基因Xal相似性高、亲缘关系近,推测可能与抗性基因Ht1有关。其他候选序列由于不具有植物抗性基因编码产物的高度保守结构域或者相似性低、亲缘关系远等原因,不能确定与抗性基因Ht1有关。通过对候选序列gpm565a进行二级结构及三维结构分析,发现有大量构成蛋白质特异功能结构组件的无规则卷曲存在,推测gpm565a可能是Ht1功能域的一部分。

关键词：玉米大斑病候选序列抗性基因

柞蚕微孢子虫孢壁蛋白基因NpSWP1的克隆及序列分析与原核表达

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蚕业科学 2014年第4期40卷 688-693页

作者：文竹姜义仁王斌赫孙影李喜升王勇秦利沈阳农业大学生物科学技术学院辽宁省昆虫资源工程技术研究中心沈阳110866 沈阳农业大学植物保护学院沈阳110866

微孢子虫孢壁蛋白在侵染宿主的过程中发挥着重要作用。从已构建的柞蚕微孢子虫cDNA文库中筛选出一条孢壁蛋白基因的EST序列,并结合柞蚕微孢子虫感染柞蚕中肠的转录组数据设计特异性引物进行RT-PCR和3'-RACE扩增,克隆得到了一个柞蚕微孢... 详细信息

微孢子虫孢壁蛋白在侵染宿主的过程中发挥着重要作用。从已构建的柞蚕微孢子虫cDNA文库中筛选出一条孢壁蛋白基因的EST序列,并结合柞蚕微孢子虫感染柞蚕中肠的转录组数据设计特异性引物进行RT-PCR和3'-RACE扩增,克隆得到了一个柞蚕微孢子虫孢壁蛋白基因。该基因ORF长837 bp,编码278个氨基酸,蛋白质分子质量32.02 kD,等电点(pI)7.02。通过Blast比对分析,该基因与家蚕微孢子虫孢子内壁蛋白基因NbSWP1(GenBank登录号:EOB12097.1)的序列相似度为85%,二者编码的氨基酸序列相似度达79%,将该基因命名为NpSWP1(GenBank登录号:KJ573111),初步推测NpSWP1是一种孢子内壁蛋白。将NpSWP1基因与原核表达载体pEASY-E1连接,构建原核表达重组质粒并转化Transetta(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导5 h后,SDS-PAGE和Western blot检测重组菌液能够产生与预期结果相近的大小约32 kD的目的融合蛋白。研究结果有利于进一步开展NpSWP1的细胞定位和功能研究。

关键词：柞蚕微孢子虫孢壁蛋白基因克隆原核表达免疫印迹分析

柞蚕胆绿素还原酶基因ApBVRB的克隆及表达分析

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蚕业科学 2019年第2期45卷 195-200页

作者：苗隆谢璐李群刘彦群沈阳农业大学柞蚕研究所辽宁省昆虫资源工程技术研究中心沈阳农业大学生物科学技术学院

柞蚕(Antheraea pernyi)幼虫体壁颜色表现出高度多样性。胆绿素还原酶(biliverdin reductase B,BVRB)可催化血红素降解过程中产生的胆绿素还原成胆红素,参与昆虫体色形成。为明确BVRB在柞蚕幼虫体色形成中的作用,克隆柞蚕胆绿素还原酶基... 详细信息

柞蚕(Antheraea pernyi)幼虫体壁颜色表现出高度多样性。胆绿素还原酶(biliverdin reductase B,BVRB)可催化血红素降解过程中产生的胆绿素还原成胆红素,参与昆虫体色形成。为明确BVRB在柞蚕幼虫体色形成中的作用,克隆柞蚕胆绿素还原酶基因ApBVRB,检测其mRNA表达水平,同时调查胆绿素还原酶的活性。ApBVRB编码205个氨基酸,预测蛋白质分子质量为50.67 kD,等电点为5.15。氨基酸序列比对表明,ApBVRB与家蚕的黄素还原酶(flavin reductase,FR)具有75%的序列相似度。qRT-PCR检测结果表明,ApBVRB在柞蚕幼虫的所有受试组织器官中均表达,除丝腺外,青、黄体色幼虫之间的相对表达量并没有显著差异。酶活性检测发现,胆绿素还原酶活性在青、黄蚕的血淋巴和丝腺中有极显著差异,推测可能由于血淋巴中该酶活性的差异而导致柞蚕幼虫表现为青、黄2种体色。

关键词：柞蚕胆绿素还原酶组织表达谱酶活性

qRT-PCR检测柞蚕中肠热休克蛋白基因ApHSC70对微孢子虫入侵的响应

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蚕业科学 2015年第2期41卷 300-307页

作者：王勇刘微王斌赫姜义仁孙影杨瑞生秦利沈阳农业大学生物科学技术学院辽宁省昆虫资源工程技术研究中心沈阳110866 沈阳农业大学植物保护学院沈阳110866

为证实柞蚕热休克蛋白在柞蚕防御体系中的作用,利用RT-PCR技术在柞蚕5龄幼虫中肠组织克隆了一个热休克蛋白基因Ap HSC70（Gen Bank登录号：KJ437496）,并通过实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测该基因在感染柞蚕微孢子虫的柞蚕中肠中的表... 详细信息

为证实柞蚕热休克蛋白在柞蚕防御体系中的作用,利用RT-PCR技术在柞蚕5龄幼虫中肠组织克隆了一个热休克蛋白基因Ap HSC70（Gen Bank登录号：KJ437496）,并通过实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测该基因在感染柞蚕微孢子虫的柞蚕中肠中的表达变化。该基因的开放阅读框（ORF）长1 959 bp,编码652个氨基酸,预测蛋白质分子质量为71.49 k D,等电点（p I）为5.38,具有细胞质特征基序,推测为一种组成型热休克蛋白;Ap HSC70与斜纹夜蛾、棉铃虫同源蛋白质的序列相似度最高,分别达96.94%、96.33%。感染柞蚕微孢子虫后0-9 h的柞蚕5龄幼虫中肠组织中,Ap HSC70基因转录水平变化不大,但感染后12 h该基因的转录水平开始升高,至感染后21 h达到最高值。研究结果表明,柞蚕中肠组织的Ap HSC70基因在柞蚕微孢子虫入侵时的表达变化呈现出一定的应激响应,表达量最高可上调近5倍,推测该基因可能参与了柞蚕的免疫防御过程。

关键词：柞蚕热休克蛋白70 免疫防御柞蚕微孢子虫实时荧光定量PCR

柞蚕微孢子虫全长cDNA文库的构建及EST分析

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蚕业科学 2014年第2期40卷 265-271页

作者：王勇姜义仁王晓惠钟亮黄伶秦利沈阳农业大学植物保护学院沈阳110866 辽宁省昆虫资源工程技术研究中心沈阳农业大学生物科学技术学院沈阳110866

柞蚕微粒子病的病原为柞蚕微孢子虫（Nosemapernyi）。采用SMART（switchingmechanismat5＇-endofRNAtranscript）技术构建柞蚕微孢子虫全长cDNA文库，初始文库滴度4．2×10^pfu／mL，文库容量1．0×10^7pfu，重组率为98．39％。随机挑取32个克隆，经PCR检测插入的片段长度在750—3000bp之间，平均长度〉1000bp。挑选文库中864个克隆进行表达序列标签（EST）测序，得到626条高质量的EST，拼接后得到197条单一基因（unigenes），包含64条重叠群（contigs）和133条单一EST，冗余度为68．53％。将这些Unigenes与NCBI数据库进行比对，146条Unigenes在蜜蜂微孢子虫（Nosemaceranae）、家蚕微孢子虫（Nosemabombycis）、兔脑炎微孢子虫（Encephalitozooncuniculi）等的基因组中比对到同源基因。在随机EST测序中克隆获得一个孢子形成蛋白（spomlationprotein）基因，命名为脚s尸一1。该基因ORF长度为1014bp，编码337个氨基酸，蛋白质的理论分子质量为39．2kD，等电点5．71。柞蚕微孢子虫cDNA文库的构建及EST测序的完成，为进一步发现和研究柞蚕微孢子虫的功能基因奠定了基础。

关键词：柞蚕微孢子虫 cDNA文库表达序列标签孢子形成蛋白基因