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吡咯喹啉醌连续发酵工艺初探

食品与发酵工业 2024年第5期50卷 29-34页

作者：赵子刚金明义刘露张葵北大医药重庆大新药业股份有限公司重庆400714

吡咯喹啉醌(pyrroloquinoline quinine, PQQ)的微生物发酵生产中,常用补料分批发酵法,但是其发酵前期菌体生长较慢,发酵后期产量下降较快,整个发酵周期的生产效率较低。为了提高PQQ的发酵生产效率,初步研究了使用生丝微菌(Hyphomicrobiu... 详细信息

吡咯喹啉醌(pyrroloquinoline quinine, PQQ)的微生物发酵生产中,常用补料分批发酵法,但是其发酵前期菌体生长较慢,发酵后期产量下降较快,整个发酵周期的生产效率较低。为了提高PQQ的发酵生产效率,初步研究了使用生丝微菌(Hyphomicrobium sp.)进行单级连续发酵生产PQQ的工艺。以PQQ补料分批发酵时产率最高的时刻作为连续发酵的起点,分别进行了PQQ的恒浊法连续发酵和恒化法连续发酵的研究。实验结果表明,以0.008 7 h-1的稀释率进行PQQ恒浊法连续发酵更好,发酵液中的菌体浓度能够保持稳定且发酵产量较高。与补料分批发酵相比,恒浊法连续发酵可以提高PQQ的生产效率(80.7%),同时还提高了底物甲醇的转化率(36.5%),具有良好的工业应用前景。

关键词：吡咯喹啉醌生丝微菌连续发酵恒浊法稀释率

基于熵权-TOPSIS法评价干燥方法对陈皮浸膏粉的质量影响

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中药材 2024年第1期47卷 69-74页

作者：乔培李诒光郭灵燕孙函静邓康杨凌宇江中药业股份有限公司江西南昌330200

目的:比较分析干燥方法对陈皮浸膏粉质量的影响。方法:采用喷雾干燥、真空带式干燥、冷冻干燥制备陈皮浸膏粉,以得粉率、玻璃化转变温度、粉体物理性质及化学成分芸香柚皮苷、橙皮苷、川陈皮素、橘皮素含量等为评价指标,运用熵权-TOPSI... 详细信息

目的:比较分析干燥方法对陈皮浸膏粉质量的影响。方法:采用喷雾干燥、真空带式干燥、冷冻干燥制备陈皮浸膏粉,以得粉率、玻璃化转变温度、粉体物理性质及化学成分芸香柚皮苷、橙皮苷、川陈皮素、橘皮素含量等为评价指标,运用熵权-TOPSIS法进行综合评价。结果:辅料麦芽糊精和陈皮浸膏共混物可提高浸膏粉的玻璃化转变温度,进而提高喷雾干燥和真空带式干燥的得粉率;不同干燥方法浸膏粉的含水量、粒径、微观形貌等物理性质差异较大,化学成分含量无明显差异,色谱图相似度均大于0.980;3种干燥方法制备的陈皮浸膏粉的熵权-TOPSIS法综合评价排序为真空带式干燥>喷雾干燥>冷冻干燥。结论:经熵权-TOPSIS法综合评价,真空带式干燥的陈皮浸膏粉质量最佳,可为陈皮浸膏干燥方法的选择提供参考。

关键词：陈皮浸膏粉干燥方法物理性质化学性质综合评价

乳酸菌素对幽门螺杆菌感染性胃炎小鼠炎症和肠道菌群的影响

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食品工业科技 2024年第10期45卷 316-324页

作者：程小英詹扬周衍安张静文李颖萌刘文君江中药业股份有限公司江西南昌330103 南昌大学第一附属医院消化内科江西南昌330006

目的:探讨乳酸菌素对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,***)感染胃炎小鼠炎症和肠道菌群的影响。方法:通过口服***混悬液制备***感染小鼠模型。将***感染成功的小鼠随机分为模型组和乳酸菌素组,进行干预4周。革兰氏染色、Warthin-Starry... 详细信息

目的:探讨乳酸菌素对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,***)感染胃炎小鼠炎症和肠道菌群的影响。方法:通过口服***混悬液制备***感染小鼠模型。将***感染成功的小鼠随机分为模型组和乳酸菌素组,进行干预4周。革兰氏染色、Warthin-Starry银染色和***免疫组化染色验证小鼠胃黏膜***的定植,HE染色观察小鼠胃黏膜组织病理学改变,免疫组化法测定小鼠胃黏膜iNOS、IL-1β和3-Nitrotyrosine的表达,16S rRNA测序分析肠道菌群结构。结果:造模组小鼠***定植成功;乳酸菌素能改善***感染性胃炎小鼠胃组织病理形态;抑制胃黏膜中iNOS、IL-1β和3-Nitrotyrosine的表达。相较于***感染组,乳酸菌素组小鼠的肠道菌群组成结构具有明显差异。乳酸菌素可通过调节厚壁菌门、拟杆菌门、放线菌门和疣微菌门的组成,增加肠道菌群的多样性。在属水平上,乳酸菌素可促进g_norank_f_Muribaculaceae、阿克曼氏菌属(Akkermansia)和另枝菌属(Alistipes)等产生短链脂肪酸细菌的生长,抑制杜氏杆菌属(Dubosiella)等炎症相关细菌的增殖,改善肠道菌群组成结构。结论:乳酸菌素能够恢复由***感染破坏的肠道菌群结构,促进有益菌的增殖,降低炎症反应并缓解胃黏膜氧化损伤,对***感染性胃炎小鼠发挥保护作用。

关键词：乳酸菌素幽门螺杆菌胃炎肠道菌群

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ICP-MS法测定盐酸阿芬太尼注射液中25种元素杂质的含量

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药物分析杂志 2024年第2期44卷 280-289页

作者：高梓真李磊许如玲许向阳江苏恩华药业股份有限公司徐州221100

目的:建立电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS),测定盐酸阿芬太尼注射液中25种具有潜在风险的元素杂质的含量。方法:采用Agilent 7800 ICP-MS电感耦合等离子体质谱仪,运用常规调谐模式,射频功率1 550 W,等离子气体流量15 L·min^(-1),通过... 详细信息

目的:建立电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS),测定盐酸阿芬太尼注射液中25种具有潜在风险的元素杂质的含量。方法:采用Agilent 7800 ICP-MS电感耦合等离子体质谱仪,运用常规调谐模式,射频功率1 550 W,等离子气体流量15 L·min^(-1),通过外标方式消除基质效应,样品稀释直接进样测定。结果:该方法能同时测定25种元素杂质含量,其线性关系良好(r>0.99),重复性试验的RSD≤10%(n=6),回收率在80.0%~120.0%(n=9),均满足方法学验证的要求。结论:盐酸阿芬太尼注射液元素杂质含量均低于ICH·Q3D规定限度的30%,不会给药品带来安全性风险,本法为其他相似药品元素杂质的质量控制和风险评估提供了参考。

关键词：盐酸阿芬太尼注射液电感耦合等离子体质谱法元素杂质方法学验证含量测定杂质限度

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抗体成药性筛选流程及评价策略

生物工程学报 2024年第2期40卷 507-516页

作者：姚江宁律璎桐张迎珺张正平徐同杰正大天晴药业集团股份有限公司江苏南京211100

自1986年OKT3作为第一个治疗性单克隆抗体获批上市后,抗体技术及抗体药物迅猛发展。单克隆抗体、抗体片段、双(多)特异性抗体、融合蛋白、纳米抗体以及抗体偶联药物(antibody-drug conjugates, ADCs)等推陈出新,在肿瘤、血液、免疫、呼... 详细信息

自1986年OKT3作为第一个治疗性单克隆抗体获批上市后,抗体技术及抗体药物迅猛发展。单克隆抗体、抗体片段、双(多)特异性抗体、融合蛋白、纳米抗体以及抗体偶联药物(antibody-drug conjugates, ADCs)等推陈出新,在肿瘤、血液、免疫、呼吸和代谢等相关疾病的治疗领域发挥着举足轻重的作用。抗体药物的发现过程,是通过多轮生物学功能评估和可成药性评估,筛选出具有安全、有效、稳定和可工艺放大的最佳候选序列,从而提高药物开发和临床研究的效率及成功率。抗体药物发现阶段的“成药性筛选与评估”已日益受到关注和重视,从药物发现和设计、先导分子筛选到候选分子确认,可及时发现分子潜在的物理化学风险因素,并评估可控性,保证后续药物开发过程中的质量稳定性。本文对抗体发现阶段的成药性筛选评估流程进行了分类和定义,涉及单克隆抗体、双特异性抗体、纳米抗体和ADCs等相关技术和药物形式,同时总结了成药性筛选评估中应重点关注的质量属性和高通量检测技术;系统性地阐述成药性开发流程和策略,为不断涌现的创新型药物的成药性筛选评估提供参考,大幅提高抗体药物开发的效率和成功率。

关键词：抗体发现成药性筛选与评估高通量检测技术

基于网络药理学研究肿节风对LPS导致急性肺损伤小鼠的保护作用

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中药药理与临床 2024年

作者：马瑜刘永林詹扬李诒光罗佳欣王沁心陈杰江中药业股份有限公司江西中医药大学药学院

目的：本研究旨在通过网络药理学结合动物实验探讨肿节风提取物对急性肺损伤的保护作用机制。方法：利用网络药理学筛选肿节风治疗急性肺损伤的有效成分、核心靶点和信号通路。动物实验将72只小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、肿节... 详细信息

目的：本研究旨在通过网络药理学结合动物实验探讨肿节风提取物对急性肺损伤的保护作用机制。方法：利用网络药理学筛选肿节风治疗急性肺损伤的有效成分、核心靶点和信号通路。动物实验将72只小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、肿节风1、2、4 g/kg组及地塞米松组，采用脂多糖(LPS)诱导小鼠急性肺损伤模型，通过HE染色观察肺组织病理学变化；ELISA法检测肺组织中白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、IL-18、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量；测定小鼠肺组织中过氧化物酶(MPO)、超氧化物岐化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量和活力；免疫荧光检测肺组织中炎症小体传感器蛋白(NLRP3)、活性氧(ROS)的表达；蛋白免疫印迹(Western blot)法检测P38、p-P38、ERK、p-ERK、JNK、p-JNK、IκB、p-IκB、P65、p-P65蛋白的表达。结果：通过网络药理学分析，共筛选得到肿节风治疗急性肺损伤的靶点196个，其中核心靶点包括AKT1、GAPD、ALB和IL1β等。GO分析共获得菌状乳头形成等1 918个生物过程、核膜腔等115个细胞组成、咖啡因氧化酶活性等204个分子功能；KEGG富集分析发现MAPK、NF-κB信号通路是其中较为重要的途径。动物实验结果表明，与正常对照组相比，模型对照组小鼠肺组织水肿程度及病理损伤程度明显加重，肺组织中IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α、MPO、MDA、NLRP3、ROS水平显著升高(P<0.01)，p-P38/P38、p-ERK/ERK、p-JNK/JNK、p-IκB/ IκB、p-P65/P65的表达显著升高(P<0.01)，SOD、GSH-Px活力显著降低(P<0.01)；与模型对照组相比，肿节风1、2、4 g/kg组及地塞米松组小鼠肺组织病理损伤程度及水肿程度明显减轻，肺组织中IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α、MPO、MDA、NLRP3、ROS含量明显降低(P＜0.05或P<0.01)，p-P38/P38、p-ERK/ERK、p-JNK/JNK、p-IκB/ IκB、p-P65/P65的表达明显下调(P＜0.05或P<0.01)，SOD和GSH-Px的活力显著升高(P<0.01)。结论：肿节风可能通过调控MAPK、NF-κB信号通路，降低炎症因子水平，减轻氧化应激，对急性肺损伤起到保护作用。

关键词：肿节风急性肺损伤网络药理学炎症氧化应激

基于UPLC-QE Plus-MS/MS技术的广东紫珠化学成分分析及其神经保护活性

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天然产物研究与开发 2024年

作者：刘永林许熙汤圆曾聪胡培陈杰李诒光江西中医药大学药学院江中药业股份有限公司

分析广东紫珠（Callicarpa kwangtungensis，CK）的化学成分并探讨其对神经细胞的保护作用。本研究采用超高效液相色谱串联四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱（UPLC-QE Plus-MS/MS）对CK的化学成分进行鉴定。通过建立体外神经炎症模型，检... 详细信息

分析广东紫珠（Callicarpa kwangtungensis，CK）的化学成分并探讨其对神经细胞的保护作用。本研究采用超高效液相色谱串联四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱（UPLC-QE Plus-MS/MS）对CK的化学成分进行鉴定。通过建立体外神经炎症模型，检测一氧化氮（nitric oxide，NO）、白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）和白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）炎症因子含量，结合细胞流式术检测活性氧（reactive oxygen species，ROS）水平，并使用免疫荧光观察细胞形态变化，以评估CK的神经保护作用。在CK中共鉴定出108个化学成分，包括34个苯乙醇苷类、10个苯丙素类、25个黄酮类、23个萜类、10个有机酸类、2个有机醛类和4个其他类化合物，其中21个成分为首次鉴定。体外实验结果表明，CK能够抑制脂多糖诱导的BV2细胞NO、IL-1β、IL-6和ROS的表达水平，并能够逆转BV2细胞的活化状态。本研究通过UPLC-QE Plus-MS/MS实现对CK化学成分进行快速分析，并探讨了其神经保护活性，为后续的药效物质基础研究和新药开发提供了重要的理论依据。

关键词：广东紫珠化学成分 UHPLC-QE Plus-MS/MS 神经炎症神经保护

茶皂素及槐糖脂对紫草素脂质纳米粒子形成和稳定性的影响

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食品工业科技 2024年第3期45卷 65-74页

作者：何洁彭盛峰张军兵刘伟南昌大学食品学院江西南昌330047 江西丹霞生物科技股份有限公司江西鹰潭335000

紫草素(Shikonin)是一种具有多种生理活性的疏水性天然色素,为了提高其水溶性、稳定性和生物利用率,开发天然表面活性剂修饰的紫草素脂质纳米粒子。本课题以卵磷脂为原料,采用pH驱动法制备紫草素脂质纳米粒子,通过添加茶皂素或槐糖脂,... 详细信息

紫草素(Shikonin)是一种具有多种生理活性的疏水性天然色素,为了提高其水溶性、稳定性和生物利用率,开发天然表面活性剂修饰的紫草素脂质纳米粒子。本课题以卵磷脂为原料,采用pH驱动法制备紫草素脂质纳米粒子,通过添加茶皂素或槐糖脂,考察茶皂素或槐糖脂对紫草素脂质纳米粒子的形成以及不同环境稳定性的影响。实验结果表明,当卵磷脂与茶皂素(或槐糖脂)质量比为2:1时,茶皂素修饰的紫草素脂质纳米粒子(Saponin modified shikonin lipid nanoparticles,Sap-SLNP)的包封率达到99.01%,负载率达到5.06%,槐糖脂修饰的紫草素脂质纳米粒子(Sophorolipid modified shikonin lipid nanoparticles,Sop-SLNP)的包封率达到98.36%,负载率达到5.16%。两种天然表面活性剂修饰的紫草素脂质纳米粒子环境稳定性相近,热稳定性和光稳定性分别约是游离紫草素的2倍和1.6倍,在pH2~7以及离子浓度0~1000 mmol/L内依然保持较好的稳定性,经过反复冻融3次后粒径变化不大,包封率仍有85%左右,将近是无修饰脂质纳米粒子的2倍,并且经过4周储藏粒径基本不变,包封率仍有80%左右,约为无修饰脂质纳米粒子的1.7倍。此外紫草素的生物利用率显著提高,约是游离紫草素的3倍。

关键词：紫草素脂质纳米粒子茶皂素槐糖脂 pH驱动法稳定性

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基于代谢组学分析一种复合肽对小鼠全层皮肤缺损模型愈合的改善作用

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现代食品科技 2024年

作者：余婧婷程小英詹扬万建华李颖萌刘文君江中药业股份有限公司科研中心

研究了一种由小麦低聚肽、海洋鱼皮胶原低聚肽等组成的复合肽对小鼠全层皮肤缺损模型的愈合作用及其机制。成功构建小鼠全层皮肤缺损伤口模型后给予复合肽干预,在治疗后第4、14天,取小鼠背部皮肤分别进行HE染色观察伤口病理变化,CD34免... 详细信息

研究了一种由小麦低聚肽、海洋鱼皮胶原低聚肽等组成的复合肽对小鼠全层皮肤缺损模型的愈合作用及其机制。成功构建小鼠全层皮肤缺损伤口模型后给予复合肽干预,在治疗后第4、14天,取小鼠背部皮肤分别进行HE染色观察伤口病理变化,CD34免疫荧光观察组织的血管生成情况。利用超高效液相色谱与质谱联用进行血清代谢组学检测,进行代谢轮廓分析和OPLS-DA分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)综合分析。在造成创伤后的第4、6、8天,复合肽组的伤口愈合率分别达到了为59%±7.3%、74.1%±11.5%,80.9%±12%,明显超过模拟组;此外复合肽组的肉芽组织更加成熟,CD34阳性细胞的荧光数目也有所增长。在复合肽组中筛选出14个差异代谢物上调,20个差异代谢物下调;KEGG分析显示复合肽组在牛磺酸和次牛磺酸代谢、精氨酸和脯氨酸代谢、初级胆汁酸生物合成等6条通路中显著富集。该复合肽可以显著缩短小鼠全厚皮肤缺损伤口的修复时间,可能是通过促进毛细血管生成,促进蛋白的合成来加速伤口愈合。

关键词：复合肽伤口愈合代谢组学牛磺酸代谢