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CRMP1基因慢病毒干扰质粒构建及其对SH-SY5Y细胞NLRP3炎症小体蛋白表达的影响

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中国免疫学杂志 2025年第2期41卷 433-438页

作者：王松豪秦坤韩雨张微微徐绍业邵晓云桂林医学院人体解剖学教研室桂林541199 桂林医学院科学实验中心桂林541199

目的:构建靶向坍塌反应调节蛋白1(CRMP1)基因的慢病毒干扰质粒,建立稳定敲减CRMP1的人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)稳转细胞系,探讨其对NLRP3炎症小体蛋白表达的影响。方法:以h-CRMP1 mRNA为靶序列设计合成shRNA双链,克隆至PLKO.1载体,构... 详细信息

目的:构建靶向坍塌反应调节蛋白1(CRMP1)基因的慢病毒干扰质粒,建立稳定敲减CRMP1的人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)稳转细胞系,探讨其对NLRP3炎症小体蛋白表达的影响。方法:以h-CRMP1 mRNA为靶序列设计合成shRNA双链,克隆至PLKO.1载体,构建CRMP1重组干扰质粒。将重组正确的shCRMP1质粒转染HEK-293T细胞进行慢病毒包装,获得的慢病毒上清浓缩后感染SH-SY5Y细胞,Western blot检测SH-SY5Y细胞内CRMP1的干扰效果及其对NLRP3炎症小体各组分蛋白表达的影响。结果:DNA测序结果显示,pLKO.1-shCRMP1慢病毒干扰质粒构建成功;转染HEK-293T细胞包装慢病毒后,细胞内CRMP1蛋白表达下降;慢病毒浓缩液感染SH-SY5Y细胞经嘌呤霉素筛选,Western blot发现shCRMP1慢病毒能显著下调SH-SY5Y细胞中CRMP1蛋白表达。同时稳定敲减CRMP1的SH-SY5Y细胞系中发现,MPP^(+)诱导下,抑制CRMP1表达可有效抑制NLRP3炎症小体活化。结论:成功构建pLKO.1-shCRMP1慢病毒干扰质粒,且干扰CRMP1可抑制MPP^(+)诱导的SH-SY5Y细胞NLRP3炎症小体活化,为进一步研究CRMP1在帕金森病等神经退行性疾病中的发生机制奠定基础。

关键词：坍塌反应调节蛋白1 慢病毒干扰人神经母细胞瘤细胞 NLRP3炎症小体

椎动脉V_(3)段与第2颈神经毗邻关系的解剖学观测及其临床意义

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中国临床解剖学杂志 2025年第1期43卷 9-13页

作者：安雷雷孔祥玉刘鹏飞张宾马真杜心如新乡医学院三全学院人体解剖学教研室河南新乡453003 承德医学院人体解剖学教研室河北承德067000 首都医科大学附属北京朝阳医院北京100020

目的观察椎动脉第3段垂直段(V_(3)v)与第2颈神经(C_(2N))毗邻关系,为椎动脉型颈椎病(Cervical spondylotic arteriopathy,CSA)及枕颈痛合并眩晕的发生机制提供形态学依据。方法头颈标本33侧,解剖剥离法显露C_(2N)和V_(3)v及其相邻的结构... 详细信息

目的观察椎动脉第3段垂直段(V_(3)v)与第2颈神经(C_(2N))毗邻关系,为椎动脉型颈椎病(Cervical spondylotic arteriopathy,CSA)及枕颈痛合并眩晕的发生机制提供形态学依据。方法头颈标本33侧,解剖剥离法显露C_(2N)和V_(3)v及其相邻的结构,观测V_(3)v与C_(2N)交叉部位,范围及形态。结果所有标本中V_(3)v与C_(2N)前支均为横向交叉,跨越椎动脉后方(33/33,100%)。依据其接触程度可分为3种类型:①接触性交叉:C_(2N)的前支依其条索状原形与V_(3)v横向交叉,共6侧占18.2%;②压痕性交叉:C_(2N)横跨V_(3)v段呈扁带状或纵向凹痕状,共7侧占21.2%;③半缠绕压扁带性交叉:C_(2N)前支呈扁带状横向半环形缠绕V_(3)v,共20侧占60.6%。交叉处呈直角交叉16侧占48.5%。V_(3)v交叉前和交叉处管径分别为(3.82±0.07)mm、(3.35±0.05)mm;交叉前和交叉处C_(2N)前支宽径为(2.38±0.05)mm、(3.53±0.09)mm。交叉处距中线距离(23.25±0.39)mm;交叉处距同侧寰枢外侧关节囊距离(6.26±0.2)mm;距同侧C2-3关节突关节距离(11.78±0.3)mm。结论V_(3)v与C_(2N)前支形成横向交叉性接触,其中以半缠绕压扁带性交叉为主,这种毗邻关系可能使C_(2N)前支压迫V_(3)v使大脑供血减少,可能是CSA发生机制之一和/或高血压合并枕颈痛的形态学基础。

关键词：椎动脉第3段第2颈神经枕颈痛椎动脉型颈椎病解剖剥离标本

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咬肌各层对面侧区骨性结构的影响

解剖学报 2025年第2期56卷 208-213页

作者：赵宇琦蒋金锐陈劲燃王泽川周厚恩许雯娣雍刘军成都医学院临床医学系2021~2022级成都医学院人体解剖学教研室成都610500

目的通过成人面侧区大体解剖,观测浅、中、深层咬肌与相关骨性结构的形态,探讨咬肌各层对面侧区骨性结构的影响。方法对12具成人尸体的双侧咬肌进行暴露,分离浅、中、深层咬肌,分别测量肌长、肌腱长度、肌腹长度;剥离咬肌后测量总厚度,... 详细信息

目的通过成人面侧区大体解剖,观测浅、中、深层咬肌与相关骨性结构的形态,探讨咬肌各层对面侧区骨性结构的影响。方法对12具成人尸体的双侧咬肌进行暴露,分离浅、中、深层咬肌,分别测量肌长、肌腱长度、肌腹长度;剥离咬肌后测量总厚度,暴露下颌骨、颧弓,测量下颌角角度、颧弓厚度、颧弓宽度,观察咬肌粗隆,并对其之间的相关关系进行统计学分析。结果颧弓厚度与浅、中、深层咬肌肌长及浅、中层肌腹长度成正相关(r浅层肌长=0.624、r中层肌长=0.787、r深层肌长=0.423、r浅层肌腹长度=0.493、r中层肌腹长度=0.548),颧弓宽度与浅、中层咬肌肌长、中层肌腹长度成正相关(r浅层肌长=0.527、r中层肌长=0.521、r中层肌腹长度=0.437),下颌角角度仅与中层肌腹长度成负相关(r=-0.422),浅、中层咬肌粗隆不受相关层次咬肌影响;深层咬肌粗隆与深层肌长、深层肌腱长度成负相关(r深层肌长=-0.543、r深层肌腱长度=-0.443)。结论在国人咬肌层次中,浅、中层咬肌对面侧区骨性结构的影响最大,其对面侧区结构的重塑具有指导意义。

关键词：咬肌分层下颌角颧弓咬肌粗隆应用解剖学成人

小胶质细胞介导的铁死亡在缺氧缺血性脑损伤中的研究进展

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细胞与分子免疫学杂志 2025年

作者：郭涛左涵珺匡显锋张树坤陈柏霖罗李兴杨逍王朝李娟娟昆明医科大学基础医学院人体解剖学与组织胚胎学系昆明理工大学医学部基础医学院解剖学教研室

在缺氧缺血性脑损伤（HIBD）中，程序性细胞死亡方式——铁死亡现象被严重激活，而小胶质细胞对铁的积累具有高度敏感性。研究如何调控小胶质细胞在HIBD中的双重作用，转变为适度可控的铁死亡，对HIBD关于小胶质细胞铁死亡的靶向治疗具... 详细信息

在缺氧缺血性脑损伤（HIBD）中，程序性细胞死亡方式——铁死亡现象被严重激活，而小胶质细胞对铁的积累具有高度敏感性。研究如何调控小胶质细胞在HIBD中的双重作用，转变为适度可控的铁死亡，对HIBD关于小胶质细胞铁死亡的靶向治疗具有较大意义。本文以HIBD为疾病模型，围绕小胶质细胞，分别从病理生理机制、小胶质细胞的极化和功能、铁死亡的分子机制、信号通路和治疗策略等方面，对小胶质细胞介导的铁死亡在HIBD中的研究作一综述。为小胶质细胞中铁死亡的研究提供参考。

关键词：缺氧缺血性脑损伤(HIBD) 小胶质细胞铁死亡信号机制综述

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左侧椎动脉合并脑膜中动脉变异1例

中华解剖与临床杂志 2025年第2期30卷 131-132页

作者：刘燕欣曾饴宣赵馨乐林伊雯高俊彦长治医学院第一临床学院临床医学系长治046000 长治医学院人体解剖学教研室长治046000

笔者在解剖一具成年尸体(来源于长治医学院人体解剖教研室)时,观察到尸体标本左锁骨下动脉分支之一的左椎动脉在起点、走行位置、颅内部外径方面存在变异,脑膜中动脉的起点存在变异。查阅国内外文献,少见此类变异报道。为积累国人椎动... 详细信息

笔者在解剖一具成年尸体(来源于长治医学院人体解剖教研室)时,观察到尸体标本左锁骨下动脉分支之一的左椎动脉在起点、走行位置、颅内部外径方面存在变异,脑膜中动脉的起点存在变异。查阅国内外文献,少见此类变异报道。为积累国人椎动脉、脑膜中动脉变异解剖学资料,报道如下。

关键词：遗传变异脑膜中动脉椎动脉

低氧环境对妊娠大鼠胎盘组织TNF-α、IL-10的表达及其生殖功能、胚胎发育的影响

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解剖学杂志 2025年第1期48卷 7-11,F0002页

作者：李丹李建华许佳佳青海大学医学院人体解剖学教研室西宁810016

目的:探讨高原低氧环境下妊娠大鼠体内,肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素10(IL-10)在胎盘中的表达及对生殖功能、子代发育的影响。方法:将20只雌鼠、10只雄鼠以2∶1为一笼随机分为低氧组(低压氧舱,模拟6000 m海拔)和常氧组(青海省西宁市... 详细信息

目的:探讨高原低氧环境下妊娠大鼠体内,肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素10(IL-10)在胎盘中的表达及对生殖功能、子代发育的影响。方法:将20只雌鼠、10只雄鼠以2∶1为一笼随机分为低氧组(低压氧舱,模拟6000 m海拔)和常氧组(青海省西宁市,平均2200 m海拔)饲养,记录每组雌鼠受孕率,直至妊娠第20天,2组妊娠大鼠禁食12h后,尾部采血测量空腹血糖,采取腹主动脉血液、取整个子宫,并剥离胎盘和胎鼠。记录2组妊娠大鼠子宫质量、胎鼠数量,计算2组妊娠大鼠子代畸形率。ELISA检测妊娠大鼠血清空腹胰岛素水平,H-E染色观察低氧下胎盘组织结构的改变,免疫组织化学染色检测妊娠大鼠胎盘组织TNF-α、IL-10阳性表达情况,RT-qPCR及免疫印迹检测妊娠大鼠胎盘组织TNF-α、IL-10mRNA及蛋白表达。结果:与常氧组相比,低氧组妊娠大鼠孕晚期子宫质量较轻;低氧组妊娠大鼠空腹血糖降低、空腹胰岛素水平升高;低氧组妊娠大鼠受孕率降低,胎鼠数量减少,胎鼠畸形率升高。低氧组妊娠大鼠胎盘结构不完整,血管分布增多,管壁增厚,绒毛发育缓慢且数目减少,绒毛间质血管分布密集,基底膜增厚,可见少量炎症细胞,合体滋养层增厚界限模糊。与常氧组比较,低氧组胎盘组织中TNF-α、IL-10 mRNA和蛋白表达均上调。结论:低氧环境下胎盘组织中的TNF-α、IL-10表达上调,可能与雌性大鼠生殖功能下降、不良妊娠有关。

关键词：高原低氧妊娠大鼠肿瘤坏死因子α 白介素10 生殖功能胎盘

自闭症谱系障碍模型小鼠的行为模式及海马神经发生

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解剖学报 2025年第2期56卷 171-179页

作者：牛晓洁刘姣张欣慰王泽涛闫柯企刘淇源郝婉云章培军山西大同大学医学院人体解剖学教研室山西大同大学医学院脑研究所山西大同037009

目的探讨CHD8^(+/-)小鼠的行为模式和海马神经发生的变化情况,为研究改善CHD8^(+/-)小鼠自闭样行为和海马神经发生提供行为学和形态基础。方法野生型(WT)和CHD8^(+/-)小鼠基因鉴定。雄、雌性WT和CHD8^(+/-)小鼠称重,进行3箱社交,自我捋... 详细信息

目的探讨CHD8^(+/-)小鼠的行为模式和海马神经发生的变化情况,为研究改善CHD8^(+/-)小鼠自闭样行为和海马神经发生提供行为学和形态基础。方法野生型(WT)和CHD8^(+/-)小鼠基因鉴定。雄、雌性WT和CHD8^(+/-)小鼠称重,进行3箱社交,自我捋毛,筑巢,Y迷宫自发交替,食物埋藏,旷场和黑白箱行为学实验。2%戊巴比妥钠(2 ml/kg)麻醉,4%多聚甲醛灌注,取脑,摄片,分析脑尺寸的变化;Western blotting及免疫荧光染色检测海马新生神经元的变化。结果Western blotting结果显示,雄、雌性CHD8^(+/-)小鼠的染色体域解旋酶DNA结合蛋白8(CHD8)蛋白水平均较WT小鼠减少。雄、雌性WT和CHD8^(+/-)小鼠体重和脑尺寸差异均无显著性。3箱社交行为实验显示,雄、雌性CHD8^(+/-)小鼠社交障碍(P<0.05);旷场实验结果显示,雄、雌性WT和CHD8^(+/-)小鼠活动总距离差异无显著性,但CHD8^(+/-)小鼠在旷场中心区域的停留时间较WT小鼠显著减少(P<0.01);黑白箱实验显示,雄、雌性CHD8^(+/-)小鼠在白箱内的探索时间较WT小鼠明显减少(P<0.05);而自我捋毛,筑巢,Y迷宫自发交替,食物埋藏实验均无显著变化。此外,Western blotting结果显示,CHD8^(+/-)小鼠海马区双肾上腺皮质激素(DCX)表达减少(P<0.001),免疫荧光染色也显示,CHD8^(+/-)小鼠海马DCX+细胞数量减少(P<0.01)。结论CHD8^(+/-)小鼠表现为社交障碍和焦虑样行为,海马新生神经元数量减少,神经发生障碍。

关键词：自闭症谱系障碍染色体域解旋酶DNA结合蛋白8 海马神经发生行为学检测小鼠

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右髂总静脉缺失合并闭孔静脉变异1例

中华解剖与临床杂志 2025年第03期30卷 202-203页

作者：张新惠李莹婷孙国栋魏凤阳林建杭罗阳晨长治医学院第二临床学院临床医学系长治长治医学院人体解剖学教研室长治长治医学院第一临床学院临床医学系长治

笔者在解剖1具成年男性尸体时观察到其右髂内静脉与右髂外静脉没有汇合形成右髂总静脉, 而是直接汇入下腔静脉, 同时发现右闭孔静脉注入右髂外静脉, 而没有注入到右髂内静脉。查阅国内外文献, Yahyayev等[1]曾报道过右髂总静脉缺失变异,... 详细信息

笔者在解剖1具成年男性尸体时观察到其右髂内静脉与右髂外静脉没有汇合形成右髂总静脉, 而是直接汇入下腔静脉, 同时发现右闭孔静脉注入右髂外静脉, 而没有注入到右髂内静脉。查阅国内外文献, Yahyayev等[1]曾报道过右髂总静脉缺失变异, 杜小敏等[2]报道双侧闭孔静脉变异, 且均注入髂外静脉。本例右髂总静脉缺失合并右闭孔静脉变异未见报道。为积累解剖学资料, 报道如下。

关键词：变异右髂静脉闭孔静脉

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不同胚层来源成体干细胞修复周围神经损伤

中国组织工程研究 2025年第19期29卷 4102-4110页

作者：郑家晨杨恩同朱弈舟刘芳海军军医大学基础医学院上海市200433 海军军医大学人体解剖学教研室上海市200433

背景:成体干细胞疗法是周围神经损伤修复与再生领域的研究热点之一。中胚层被视为成体干细胞的理想来源,间充质干细胞具有获得率高、来源广、增殖快等优异性能。而外胚层来源成体干细胞,尤其是神经嵴干细胞,具有神经源性,越来越受到研... 详细信息

背景:成体干细胞疗法是周围神经损伤修复与再生领域的研究热点之一。中胚层被视为成体干细胞的理想来源,间充质干细胞具有获得率高、来源广、增殖快等优异性能。而外胚层来源成体干细胞,尤其是神经嵴干细胞,具有神经源性,越来越受到研究人员的关注。目的:对来自外胚层和中胚层的多功能成体干细胞在周围神经损伤修复与再生中的作用及机制进行简要综述,探究不同来源成体干细胞的研究进展与应用前景,并结合临床研究,探讨成体干细胞疗法潜在的应用价值以及亟待解决的问题。方法:第一作者于2024年2月应用计算机在PubMed和SinoMed数据库检索2001年12月至2024年2月相关文献,以“ectodermal stem cells,mesenchymal stem cells,peripheral nerve injury,repair,regeneration”为英文检索词,以“外胚层干细胞、间充质干细胞、周围神经损伤、修复、再生”为中文检索词,最终纳入69篇文献进行分析论述。结果与结论:①外胚层来源成体干细胞具有优异的分化和再生潜能,尤其是毛囊神经嵴干细胞、嗅干细胞、牙外胚层干细胞等,具有神经源性,可在体外表达神经特异性标志物,但目前缺少临床试验研究。②中胚层来源成体干细胞种类多、易获得及纯化,其中骨髓间充质干细胞和脐带间充质干细胞在周围神经损伤修复的应用疗效及安全性方面有相关临床试验支持,能改善感觉及运动神经传导,且在随访中未出现并发症和明显不良反应。骨髓间充质干细胞的获取需行侵入性外科手术且要求患者与捐赠者骨髓配型吻合,应用受到一定限制;而脐带间充质干细胞虽无需侵入性获取,但分离较困难且表型不稳定。③内胚层来源成体干细胞常难以在体外生长,应用受限,目前应用于临床的可能性低。④综合来看,骨髓间充质干细胞仍为周围神经损伤干细胞治疗的首选细胞,适用于无外科手术禁忌且符合配型要求的情况,其次为脐带间充质干细胞,辅以分离方法的改进和表型稳定性的提高策略。⑤牙外胚层干细胞以及脂肪间充质干细胞具有较高应用潜能,有待进一步临床试验,其他外胚层、中胚层来源成体干细胞各以其优异特性在动物及细胞实验研究中具有显著优势。

关键词：成体干细胞周围神经损伤毛囊神经嵴干细胞嗅干细胞牙外胚层干细胞骨髓间充质干细胞脐带间充质干细胞羊水间充质干细胞皮肤干细胞肌肉间充质干细胞