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核因子E2相关因子2蛋白通过调控铁死亡介导脓毒症相关性肝损伤

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中华危重病急救医学 2024年第5期36卷 491-495页

作者：钟朕欧阳训彦郭起财熊力刘先发赣南医学院第一附属医院急诊科江西赣州341000 赣南医学院第一附属医院骨科江西赣州341000

目的探讨核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白对小鼠脓毒症相关性肝损伤(SALI)铁死亡的作用。方法按随机数字表法将雄性SD小鼠分成6组,每组6只。采用盲肠结扎穿孔术(CLP)构建小鼠SALI模型,假手术(Sham)组仅开腹处理。CLP+Fer-1组、CLP+Erastin... 详细信息

目的探讨核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白对小鼠脓毒症相关性肝损伤(SALI)铁死亡的作用。方法按随机数字表法将雄性SD小鼠分成6组,每组6只。采用盲肠结扎穿孔术(CLP)构建小鼠SALI模型,假手术(Sham)组仅开腹处理。CLP+Fer-1组、CLP+Erastin组、CLP+ML385组、CLP+Curcumin组分别于术后经腹腔注射铁死亡抑制剂Ferrostatin-1(Fer-1)10 mg·kg^(-1)·d^(-1)、铁死亡激活剂Erastin 20 mg·kg^(-1)·d^(-1)、Nrf2抑制剂ML38530 mg·kg^(-1)·d^(-1)、Nrf2激活剂Curcumin 100 mg·kg^(-1)·d^(-1)进行干预;Sham组、CLP组予生理盐水10 mg·kg^(-1)·d^(-1),均连续给药10 d。术后10 d收集小鼠血清和肝组织,检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST),以及肝组织匀浆液中丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和Fe2+水平;苏木素-伊红(HE)染色后光镜下观察肝组织病理学改变;透射电镜下观察肝细胞线粒体形状和长度;蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测肝组织Nrf2、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、前列腺素-内过氧化物合酶2(PTGS2)的蛋白表达。结果与Sham组比较,CLP组小鼠血清ALT、AST水平明显升高;镜下可见肝索排列紊乱,细胞肿胀、坏死,线粒体长度明显变短;肝组织中MDA、Fe2+水平明显上升,GSH含量明显下降,Nrf2、GPX4蛋白表达下降,PTGS2蛋白表达明显升高。与CLP组比较,CLP+Fer-1组和CLP+Curcumin组血清ALT、AST水平明显降低〔ALT(U/L):80.65±19.44、103.45±20.52比283.50±37.12,AST(U/L):103.33±11.90、127.33±15.79比288.67±36.82,均P<0.05〕;镜下可见肝索欠规整,细胞轻微肿胀,线粒体长度明显增加(μm:1.42±0.09、1.43±0.21比1.07±0.25,均P<0.05);肝组织中MDA、Fe2+水平明显下降,GSH含量明显升高〔MDA(mol/g):0.87±0.23、1.85±0.43比4.47±0.95,Fe2+(μg/g):63.80±7.15、67.48±6.28比134.52±14.32,GSH(mol/g):1.95±0.29、1.95±0.45比0.55±0.29,均P<0.05〕;肝组织Nrf2、GPX4蛋白表达明显升高,PTGS2蛋白表达明显下降(Nrf2/GAPDH:1.80±0.28、2.10±0.43比0.70±0.24,GPX4/GAPDH:0.80±0.06、0.93±0.07比0.48±0.02,PTGS2/GAPDH:0.76±0.05、0.84±0.01比1.02±0.09,均P<0.05);而CLP+Erastin组、CLP+ML385组上述指标结果则相反,血清ALT、AST水平明显升高〔ALT(U/L):344.52±40.79、321.70±21.10比283.50±37.12,AST(U/L):333.50±27.90、333.00±16.67比288.67±36.82,均P<0.05〕;镜下可见肝索排列紊乱,细胞明显肿胀、坏死,线粒体长度明显变短(μm:0.78±0.13、0.67±0.07比1.07±0.25,均P<0.05);肝组织中MDA、Fe2+水平明显升高,GSH含量明显下降〔MDA(mol/g):5.92±1.06、5.62±0.56比4.47±0.95,Fe2+(μg/g):151.40±8.03、151.88±8.68比134.52±14.32,GSH(mol/g):0.25±0.08和0.23±0.11比0.55±0.29,均P<0.05〕;肝组织Nrf2、GPX4蛋白表达明显下降,PTGS2蛋白表达明显升高(Nrf2/GAPDH:0.46±0.09、0.46±0.11比0.70±0.24,GPX4/GAPDH:0.34±0.05、0.40±0.01比0.48±0.02,PTGS2/GAPDH:1.24±0.13、1.16±0.11比1.02±0.09,均P<0.05)。结论CLP诱导的SALI可导致小鼠肝细胞铁死亡,肝组织Nrf2蛋白可通过调节铁死亡介导SALI。

关键词：脓毒症相关性肝损伤铁死亡核因子E2相关因子2

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入院24 h内全脑CT灌注指标对动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者发生分流依赖性脑积水的预测价值

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中华医学杂志 2024年第9期104卷 674-681页

作者：徐楚楚殷鹏展张超赵心同方兴根周运锋皖南医学院第一附属医院放射科，芜湖241001 皖南医学院第一附属医院神经外科，芜湖241001

目的探讨基于入院24 h内全脑CT灌注(CTP)及临床数据预测动脉瘤性蛛网膜下腔出血(aSAH)患者发生分流依赖性脑积水(SDHC)的价值。方法回顾性收集2018年3月至2022年8月在皖南医学院第一附属医院接受介入栓塞治疗的aSAH患者入院时的临床和... 详细信息

目的探讨基于入院24 h内全脑CT灌注(CTP)及临床数据预测动脉瘤性蛛网膜下腔出血(aSAH)患者发生分流依赖性脑积水(SDHC)的价值。方法回顾性收集2018年3月至2022年8月在皖南医学院第一附属医院接受介入栓塞治疗的aSAH患者入院时的临床和影像学数据。所有患者均在症状发生后24 h内完成一站式全脑CTP检查,并经后处理得到CTP的定性和定量参数。通过查阅电子病历或进行电话随访,每2个月随访1次,共随访6个月。根据是否发生SDHC,将患者分为SDHC组及非SDHC组,比较两组间的差异,采用logistic回归模型分析确定SDHC发生的影响因素,建立SDHC预测模型,通过绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估预测模型效能。结果共纳入414例患者,其中男132例,女282例,年龄为(59±11)岁。17.6%(73/414)患者发生SDHC。是否发生急性脑积水、世界神经外科联盟分级(WFNS)、Hunt-Hess分级、改良Fisher评分(mFS)、CTP定性及定量参数在两组间的差异有统计学意义(均P<0.001)。多因素logisitc回归分析显示急性脑积水(OR=8.621,95%CI:4.237~17.542)、高龄(OR=1.107,95%CI:1.068~1.148)、高mFS及高Hunt-Hess分级(OR=3.740,95%CI:1.352~10.342)是aSAH患者发生SDHC的危险因素,高平均脑血流量(mCBF)(OR=0.931,95%CI:0.885~0.980)是发生SDHC的保护因素,由这5个变量构建的预测模型的ROC曲线下面积(AUC)=0.923(95%CI:0.89~0.95),其灵敏度为84.5%、特异度为87.7%。结论aSAH患者入院24 h内的mCBF和急性脑积水、年龄、mFS、Hunt-Hess分级可用于预测其SDHC的发生。

关键词：蛛网膜下腔出血颅内动脉瘤 CT灌注分流依赖性脑积水回顾性队列研究

内质网应激相关基因在主动脉夹层疾病中的差异性表达及与免疫浸润的相关性

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南方医科大学学报 2024年第5期44卷 859-866页

作者：周伟聂军胡佳蒋艺枝张大发皖南医学院第一附属医院心胸外科安徽芜湖241002 皖南医学院第一附属医院神经内科安徽芜湖241002 皖南医学院第一附属医院血液内科安徽芜湖241002

目的探讨内质网应激相关基因(ERSAGs)在主动脉夹层疾病(AD)中的差异性表达及免疫浸润相关性,为AD的治疗寻找新的靶点。方法检索GEO数据库,下载GSE190635及GSE98770两个主动脉夹层mRNA数据集,R软件分析AD患者主动脉与正常主动脉差异表达... 详细信息

目的探讨内质网应激相关基因(ERSAGs)在主动脉夹层疾病(AD)中的差异性表达及免疫浸润相关性,为AD的治疗寻找新的靶点。方法检索GEO数据库,下载GSE190635及GSE98770两个主动脉夹层mRNA数据集,R软件分析AD患者主动脉与正常主动脉差异表达基因(DEGs),从GeneCards网站下载ERSAGs基因集。GeneMANIA数据库分析内质网应激(ERS)差异基因晚期糖基化终末产物受体(AGER)相互作用的蛋白。基于GSE98770数据集使用R语言CIBERSORT包计算AD患者主动脉壁组织内22种免疫细胞分布比例。临床收集20例主动脉壁标本,分为AD组和非AD组(n=10/组),qRT-PCR检测AGER表达量。使用TRRUST数据库和NetworkAnalyst数据库分析预测AGER上游转录因子、miRNA及调控作用化合物。结果获取到ERS差异基因AGER,与其相互作用的蛋白共有20种,主要生物功能:模式识别受体信号通路,DNA结合转录因子活性的正向调节,骨髓白细胞迁移,白细胞迁移,调节I-kappaB激酶/NF-kappaB信号传导。AD中AEGR表达水平与Treg细胞丰度间呈正相关(r=0.59,P<0.05)。qRT-PCR检测显示,AD组主动脉壁AGER表达量为1.00±0.30,非AD组表达量为1.76±0.68,差异具有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析显示,AGER预测AD的AUC=0.86(95%CI:0.67~1.00,P=0.0073),cut-off值为1.335,对应的敏感性和特异性分别为80%、90%。AGER调控网络预测到3种转录因子,3种miRNAs,27种化合物。结论内质网应激相关基因AGER在主动脉夹层疾病中的低表达,其可能通过Treg细胞影响AD的发生。

关键词：主动脉夹层内质网应激免疫浸润生物信息学

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基于倾向性评分匹配的机器人经自然腔道取标本手术与机器人辅助直肠癌根治术的短期疗效比较

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中华胃肠外科杂志 2024年第8期27卷 833-839页

作者：叶善平余宏鑫胡惠宇刘东宁吴灿邹睿祥何鹏辉李太原南昌大学第一附属医院普通外科南昌330006 南昌大学江西医学院第一临床医学院南昌330031

目的:比较机器人经自然腔道取标本手术(NOSES)与机器人辅助直肠癌根治术的短期疗效。方法:采用回顾性队列研究和倾向评分匹配(PSM)的研究方法,回顾性分析2018年6月至2024年3月于南昌大学第一附属医院行直肠癌根治术的547例患者的临床资... 详细信息

目的:比较机器人经自然腔道取标本手术(NOSES)与机器人辅助直肠癌根治术的短期疗效。方法:采用回顾性队列研究和倾向评分匹配(PSM)的研究方法,回顾性分析2018年6月至2024年3月于南昌大学第一附属医院行直肠癌根治术的547例患者的临床资料,其中机器人NOSES组157例,常规机器人组390例。采用PSM对直肠癌患者的术前一般资料[年龄、性别、体质指数、术前是否合并基础疾病、术前癌胚抗原异常(>6.5μg/L)、术前糖类蛋白199异常(>27 kU/L)、术前美国麻醉医师协会(ASA)分级、肿瘤长径、肿瘤距肛缘距离、TNM分期]进行1∶1匹配,卡钳值为0.05。PSM后,两组各纳入77例直肠癌患者,基线资料比较差异无统计学意义(均P>0.05)。主要比较机器人NOSES组与常规机器人组的手术情况、术后恢复情况、术后病理资料及术后并发症发生率。结果:与常规机器人组相比,机器人NOSES组术后首次排气时间更短[48(38,50)h比56(50,60)h,Z=-7.513,P0.05)。结论:机器人NOSES手术治疗直肠癌安全、可行,术后恢复更快。

关键词：直肠肿瘤机器人手术经自然腔道取标本手术短期疗效

游离旋髂浅动脉浅支穿支皮瓣联合皮瓣供区以远全厚皮片修复四肢较大创面的临床效果

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中华烧伤与创面修复杂志 2024年第1期40卷 72-77页

作者：刘洋洋吴敏朱军张宽宽牛海州高许斌韩仲兵刘奋斗蚌埠医学院第一附属医院手足显微外科蚌埠233004

目的探讨游离旋髂浅动脉(SCIA)浅支穿支皮瓣联合皮瓣供区以远全厚皮片修复四肢较大创面的临床效果。方法该研究为回顾性观察性研究。2020年1月—2022年6月,蚌埠医学院第一附属医院收治19例符合入选标准的四肢较大创面患者,其中男15例、... 详细信息

目的探讨游离旋髂浅动脉(SCIA)浅支穿支皮瓣联合皮瓣供区以远全厚皮片修复四肢较大创面的临床效果。方法该研究为回顾性观察性研究。2020年1月—2022年6月,蚌埠医学院第一附属医院收治19例符合入选标准的四肢较大创面患者,其中男15例、女4例,年龄28~75岁。Ⅰ期行清创、骨折复位固定、肌腱血管神经修复和负压封闭引流。Ⅱ期清创后,创面总面积为13.0 cm×8.0 cm~34.0 cm×15.0 cm。采用SCIA浅支穿支皮瓣(面积为10.0 cm×6.5 cm~15.0 cm×8.0 cm)修复肌腱、骨外露处创面(面积为9.0 cm×6.0 cm~14.0 cm×7.0 cm),采用皮瓣供区以远全厚皮片(面积为5.0 cm×3.5 cm~13.0 cm×8.0 cm)修复肉芽组织生长良好创面(面积为5.0 cm×3.5 cm~13.0 cm×8.0 cm)。供区创面均经拉拢缝合。记录患者手术时间、手术出血量,术后观察皮瓣和皮片成活情况。随访观察皮瓣和皮片情况、供区瘢痕情况及其对供区功能的影响。末次随访时,采用疗效满意度评分表评价患者对疗效的满意度。结果患者手术时间为2.0~3.5 h,手术出血量为100~320 mL。1例患者术后第2天皮瓣边缘出现瘀斑、静脉危象,经探查后皮瓣成活;其余患者皮瓣均顺利成活。患者皮片均顺利成活。2例患者因后期肥胖导致皮瓣臃肿,术后6个月行皮瓣削薄手术后达到预期效果。随访6~24个月,皮瓣均弹性好、质地软,皮片无磨损、破溃,供区均遗留线性瘢痕但功能未受到影响,患者对疗效均表示满意。结论采用游离SCIA浅支穿支皮瓣联合皮瓣供区以远全厚皮片修复四肢较大创面,安全可靠、创伤小、手术时间短、术后供受区外形和功能良好。

关键词：外科皮瓣穿支皮瓣显微外科手术四肢皮片移植创面修复

吡非尼酮联合PD-L1抑制剂抑制小鼠异位膀胱肿瘤的生长

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南方医科大学学报 2024年第2期44卷 210-216页

作者：陈守峰张舒超樊伟林孙巍刘贝贝刘建民郭园园蚌埠医学院第一附属医院泌尿外科安徽蚌埠233040

目的通过小鼠肿瘤模型观察吡非尼酮(PFD)联合程序性死亡受体-配体1(PD-L1)抑制剂对膀胱癌的疗效及对免疫微环境的调控作用。方法构建C57BL/6小鼠异位膀胱肿瘤模型共40只,根据不同处理随机分为4组(10只/组):对照组、PD-L1抑制剂组、PFD... 详细信息

目的通过小鼠肿瘤模型观察吡非尼酮(PFD)联合程序性死亡受体-配体1(PD-L1)抑制剂对膀胱癌的疗效及对免疫微环境的调控作用。方法构建C57BL/6小鼠异位膀胱肿瘤模型共40只,根据不同处理随机分为4组(10只/组):对照组、PD-L1抑制剂组、PFD组、联合治疗组。对照组:建立肿瘤模型正常饮食;PD-L1抑制剂组:建模后腹腔每3 d按12.5 mg/kg注射PD-L1抑制剂;PFD组:建模后每天按500 mg/kg口服PFD;联合治疗组:建模后PFD及PD-L1抑制剂按上述剂量联合应用。对比各组小鼠生存率和肿瘤生长速度,药物干预21 d后留取肿瘤组织及小鼠血清,免疫组化检测肿瘤组织中CD3、CD8、CD45、E-cadherin及N-cadherin的表达;免疫荧光观察骨髓来源抑制细胞(MDSCs)表达;生化分析小鼠血液中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、血尿素氮(BUN)、肌酐(CRE)及乳酸脱氢酶(LDH-L)的水平。结果与对照组相比,PD-L1抑制剂组和PFD组小鼠肿瘤相对生长速率及21 d肿瘤体积均减小(P0.05)。结论吡非尼酮联合PD-L1抑制剂可显著抑制膀胱癌的进展,其效应可能是通过调节肿瘤微环境,抑制肿瘤细胞的上皮间质转化来实现的。

关键词：吡非尼酮 PD-L1 膀胱癌免疫微环境髓系抑制细胞

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吲哚菁绿荧光成像在腹腔镜胰腺癌手术中的应用分析

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中华肝胆外科杂志 2024年第3期30卷 193-196页

作者：奚士航王小明王冠男蒋亚琦钱道海方小三皖南医学院第一附属医院肝胆外科芜湖241001

目的分析吲哚菁绿荧光成像在腹腔镜胰腺癌手术切除中的应用情况。方法回顾分析皖南医学院第一附属医院肝胆外科2022年6月至2023年3月术前诊断为胰腺癌并行手术切除的15例患者资料,其中男性13例,女性2例,年龄(67.0±8.6)岁。15例患者均... 详细信息

目的分析吲哚菁绿荧光成像在腹腔镜胰腺癌手术切除中的应用情况。方法回顾分析皖南医学院第一附属医院肝胆外科2022年6月至2023年3月术前诊断为胰腺癌并行手术切除的15例患者资料,其中男性13例,女性2例,年龄(67.0±8.6)岁。15例患者均行腹腔镜手术切除,术中注射吲哚菁绿使病变显影,显影范围外手术切除。记录手术方式、病变病理类型、吲哚菁绿显影、手术切缘等情况。结果15例患者中行腹腔镜胰十二指肠切除术7例,腹腔镜根治性顺行模块化胰脾切除术7例,1例为腹腔镜探查后中转开腹行胰十二指肠切除术,并联合肠系膜上静脉切除重建。术后病理证实为胰腺中分化腺癌9例,胰腺中低分化腺癌4例,胰腺腺泡细胞癌1例,胰腺炎性病变1例;所有肿瘤切缘阴性。15例患者中14例患者术中显影,1例未显影(系1例胰腺中分化腺癌)。在显影的14例患者中,13例病理为胰腺癌,表现为肿瘤被膜显影,1例为炎性病变,表现为病灶实质显影。结论腹腔镜手术术中注射吲哚菁绿能够使胰腺癌肿瘤被膜荧光显影,有利于肿瘤定位及判断切缘。

关键词：胰腺肿瘤吲哚菁绿荧光成像

生物反馈盆底肌训练对儿童肛肠疾病术后大便失禁的治疗效果及对患儿心理的影响

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中华实用儿科临床杂志 2024年第6期39卷 460-464页

作者：韩光辉张海洋饶旺苏丹贾茹宋翠萍新乡医学院第一附属医院小儿外科新乡453100

目的:探讨生物反馈盆底肌训练对儿童肛肠疾病术后大便失禁的治疗效果及对患儿心理的影响。方法:回顾性病例对照研究。选择2021年7月至2023年4月于新乡医学院第一附属医院因肛肠疾病术后大便失禁就诊的37例患儿,采用加拿大Laborie生物反... 详细信息

目的:探讨生物反馈盆底肌训练对儿童肛肠疾病术后大便失禁的治疗效果及对患儿心理的影响。方法:回顾性病例对照研究。选择2021年7月至2023年4月于新乡医学院第一附属医院因肛肠疾病术后大便失禁就诊的37例患儿,采用加拿大Laborie生物反馈治疗仪进行生物反馈盆底肌训练治疗,并每天进行不少于200次的盆底肌收缩功能锻炼。分别测量其治疗前、1个疗程结束时、治疗1个月及1年时的肛管电流强度、肛管基础运动肌电值、肛管收缩肌电差值及肛门持续收缩时间。选取10例健康同龄儿作为健康对照组。采用长处和困难问卷对大便失禁的患儿在治疗前、治疗1年时分别进行心理评估。采用配对样本t检验与独立样本t检验对研究结果进行比较分析。结果:大便失禁患儿治疗前、1个疗程结束时、治疗1个月时、治疗1年时肛管电流强度值分别为(11.32±1.92)mA、(10.22±1.28)mA、(8.45±1.09)mA、(7.80±1.23)mA,肛管基础运动肌电值分别为(235.58±55.03)μV、(185.65±34.30)μV、(124.81±36.56)μV、(93.99±28.29)μV,肛管收缩肌电差值分别为(45.64±20.38)μV、(64.20±16.59)μV、(93.63±25.53)μV、(109.83±26.95)μV,肛门持续收缩时间分别为(1.27±0.43)s、(1.58±0.40)s、(2.04±0.39)s、(2.47±0.38)s。将治疗前、1个疗程结束时、治疗1个月时数据与健康对照组[(7.20±1.09)mA、(88.65±21.76)μV、(120.73±27.57)μV、(2.68±0.29)s]进行比较,差异均有统计学意义(均P0.05)。情绪症状、多动症状、同伴交往、亲社会行为及困难总分评分治疗前后比较[(3.46±1.88)分比(2.59±1.32)分、(5.78±2.12)分比(3.70±1.78)分、(3.05±1.72)分比(2.49±1.30)分、(7.30±1.54)分比(8.27±1.39)分、(21.57±4.57)分比(18.54±3.14)分],差异均有统计学意义(均P一种可靠且无创伤的有效方法,且能有效改善患儿因大便失禁造成的心理及行为问题。

关键词：大便失禁肛肠疾病术后盆底肌训练生物反馈心理评估儿童

MiR-15b-5p靶向FOXO1对缺氧/复氧诱导的人肾小管上皮细胞损伤的调控作用及其机制

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解放军医学杂志 2024年

作者：李华锋张鸿毅肖克兵杨辉李子峰赵刚刚西安医学院第一附属医院泌尿外科

目的　探讨miR-15b-5p靶向叉头框蛋白O1(FOXO1)对缺氧/复氧(H/R)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)损伤的调控作用及其机制。方法　取对数生长期HK-2细胞，设置：(1)对照组(正常培养)、H/R组(H/R诱导培养)。倒置显微镜下观察HK-2细胞形态，... 详细信息

目的　探讨miR-15b-5p靶向叉头框蛋白O1(FOXO1)对缺氧/复氧(H/R)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)损伤的调控作用及其机制。方法　取对数生长期HK-2细胞，设置：(1)对照组(正常培养)、H/R组(H/R诱导培养)。倒置显微镜下观察HK-2细胞形态，采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测mi-15b-5p、FOXO1 mRNA的表达，Western blotting检测FOXO1蛋白的表达。(2)对照组(正常培养)、H/R组(H/R诱导培养)、H/R+mimic对照组(转染mimic对照质粒后H/R诱导培养)、H/R+miR-15b-5p mimic组(转染miR-15b-5p mimic后H/R诱导培养)、H/R+miR-15b-5p mimic+OE-NC组(共转染miR-15b-5p mimi和OE-NC质粒后H/R诱导培养)、H/R+miR-15b-5p mimic+OE-FOXO1组(共转染miR-15b-5p mimi和FOXO1过表达质粒后H/R诱导培养)。采用qRT-PCR检测mi-15b-5p的表达，Western blotting检测FOXO1、cleaved caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白的表达，CCK-8法检测细胞活性，TUNEL检测细胞凋亡情况。(3)对照组(正常培养)、H/R组(H/R诱导培养)、H/R+miR-15b-5p mimic组(转染miR-15b-5p mimic后进行H/R诱导培养)、H/R+miR-15b-5p mimic+OE-FOXO1组(共转染miR-15b-5p mimic和OE-FOXO1后进行H/R诱导培养)。采用Western blotting检测LC3、p62、Beclin-1蛋白的表达，LC3免疫荧光检测细胞自噬水平。双荧光素酶报告实验检测miR-15b-5p和FOXO1之间的靶向关系。结果　倒置显微镜下观察显示，对照组细胞数量较多，细胞大多呈典型鹅卵石形态，铺路石状生长；H/R组大部分细胞收缩变圆，贴壁细胞数量明显减少；与对照组比较，H/R组miR-15b-5p相对表达水平明显降低，FOXO1 mRNA和蛋白相对表达水平明显升高(P<0.05)。荧光素酶报告实验结果显示miR-15b-5p直接靶向作用于FOXO1的3’-UTR。miR-15b-5p过表达抑制H/R诱导的HK-2细胞活性，降低细胞凋亡，抑制细胞自噬(P<0.05)。与H/R+miR-15b-5p mimic组相比，H/R+miR-15b-5p mimic+OE-FOXO1组HK-2细胞活性降低，细胞凋亡和自噬水平增高(P<0.05)。结论　miR-15b-5p通过靶向抑制FOXO1降低细胞自噬减缓H/R诱导的HK-2细胞损伤。

关键词： miR-15b-5p 叉头框蛋白O1 人肾小管上皮细胞缺氧/复氧自噬