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改良TLC-生物自显影引导裸脚菇中抗青、绿霉物质的分离

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中国食品学报 2020年第1期20卷 268-274页

作者：吴天福霍光华韩启灿吴胜邹长江江西农业大学生物科学与工程学院菌物资源保护与利用江西省重点实验室

目的:分离和追踪野生裸脚菇属(0612-9)中抗青、绿霉活性物质。方法:采用正相硅胶柱色谱、ODS柱色谱、半制备HPLC等分离活性成分,用改良薄层色谱-生物自显影(即浇注法)追踪活性成分,牛津杯法、薄层色谱-紫外荧光法、10%浓硫酸乙醇显色等... 详细信息

目的:分离和追踪野生裸脚菇属(0612-9)中抗青、绿霉活性物质。方法:采用正相硅胶柱色谱、ODS柱色谱、半制备HPLC等分离活性成分,用改良薄层色谱-生物自显影(即浇注法)追踪活性成分,牛津杯法、薄层色谱-紫外荧光法、10%浓硫酸乙醇显色等方法作为验证方法。结果:共制备5种化合物,分别为Ⅰ1.1、Ⅰ1.2、Ⅰ2、Ⅰ3和Ⅱ,改良TLC-生物自显影追踪到4种抗菌活性物质,即Ⅰ1.1、Ⅰ2、Ⅰ3和Ⅱ,样品检测量低至18.6μg/mL。结论:本方法具有清晰、准确的优点,适于引导中度极性活性物质,如该裸脚菇抗菌活性物质等的分离。

关键词：薄层色谱浇注法生物自显影抗菌物质分离裸脚菇柑橘青、绿霉菌

松乳菇与平菇原生质体杂交及其融合菌株的特性

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中国食品学报 2014年第1期14卷 39-46页

作者：霍光华孙娇娇罗桂祥韩启灿江西农业大学生物科学与工程学院江西农业大学生物资源保护和利用研究所南昌330045

以双灭活原生质体作为遗传标记,将高产的平菇与松乳菇进行融合杂交。采用菌落表型比较、拮抗试验、酯同工酶及全蛋白电泳图谱比对鉴定融合菌株,用比色法和重量法分别测定融合菌株与其亲本的4种酶的活力和生物量。试验结果表明:融合菌株... 详细信息

以双灭活原生质体作为遗传标记,将高产的平菇与松乳菇进行融合杂交。采用菌落表型比较、拮抗试验、酯同工酶及全蛋白电泳图谱比对鉴定融合菌株,用比色法和重量法分别测定融合菌株与其亲本的4种酶的活力和生物量。试验结果表明:融合菌株形成了稳定的新遗传性酶谱;具有更强利用基质的能力,淀粉酶、羧甲基纤维素酶、漆酶活力分别为亲本松乳菇的377.32%,194.83%,149.64%,亲本平菇的539.27%,209.26%、195.24%,而木聚糖酶活力介于两亲本之间。融合菌株鲜干菌丝重高达亲本松乳菇的168.09%,149.92%,平菇的525.02%,253.79%。融合菌株R6可作为高产发酵生产菌丝体的起始菌株。

关键词：松乳菇平菇原生质体杂交融合菌株产酶和生长特性

丙酮丁醇产生菌的筛选、鉴定及其产丁醇性能优化

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食品与发酵工业 2019年第4期45卷 31-35,41页

作者：周智友许张柯张庆华刘孟荧黎秋玲李汉广江西农业大学生物科学与工程学院江西农业微生物资源开发与利用工程实验室江西省菌物资源保护与利用重点实验室江西南昌330045

由于丁醇对生产菌的抑制甚至毒害作用导致丙酮丁醇发酵过程中出现低产物浓度、低产率现象是目前生物法获取丁醇过程中亟待解决的一个关键科学问题。为获得高丁醇耐受性及高丁醇产量生产的菌株,该文采用自行设计的"三明治"筛选方法,从土... 详细信息

由于丁醇对生产菌的抑制甚至毒害作用导致丙酮丁醇发酵过程中出现低产物浓度、低产率现象是目前生物法获取丁醇过程中亟待解决的一个关键科学问题。为获得高丁醇耐受性及高丁醇产量生产的菌株,该文采用自行设计的"三明治"筛选方法,从土壤中筛选出4株高丁醇耐受性菌株,其中菌株a914的发酵性能最佳,经P2培养基和木薯粉培养基发酵后其丁醇的产量分别为5.44和3.02 g/L。菌株a914经16S r DNA鉴定其与拜氏梭菌(Clostridium beijerinckii)的同源性高达99%,以及结合菌株a914的生理生化特性最终确定菌株a914为拜氏梭菌(Clostridium beijerinckii)。同时还对菌株a914的发酵性能进行了初步研究,试验结果表明,其最适的木薯粉浓度为80.0 g/L、酵母浸粉浓度为3.0 g/L、碳酸钙添加量为3.0 g/L,在此条件下丁醇和总溶剂产量分别达到6.73和9.83 g/L。

关键词：拜氏梭菌丙酮丁醇发酵菌株鉴定

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富油微藻的选育及规模化培养研究进展

中国油脂 2019年第7期44卷 122-127页

作者：黎秋玲李志张庆华刘孟荧周智友李汉广江西农业大学生物科学与工程学院江西农业微生物资源开发与利用工程实验室江西省菌物资源保护与利用重点实验室

随着化石能源的逐年消耗,以可再生资源生产能源物质成为解决能源问题的重要途径之一,其中产油微藻制备生物柴油成为生物质能源领域的研究热点。介绍了微藻生物柴油的国内外发展概况以及其规模化培育过程中藻种的选育情况,探讨了藻种规... 详细信息

随着化石能源的逐年消耗,以可再生资源生产能源物质成为解决能源问题的重要途径之一,其中产油微藻制备生物柴油成为生物质能源领域的研究热点。介绍了微藻生物柴油的国内外发展概况以及其规模化培育过程中藻种的选育情况,探讨了藻种规模化培育过程中的关键技术环节以及存在的主要问题,并对微藻生物柴油的发展趋势和面临的挑战进行了评述。

关键词：微藻生物柴油规模化培养培养方式光生物反应器

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利用木质纤维素生产丁醇的研究进展

微生物学通报 2019年第12期46卷 3461-3468页

作者：周智友李志张庆华刘孟荧黎秋玲李汉广江西农业大学生物科学与工程学院江西农业微生物资源开发与利用工程实验室江西省菌物资源保护与利用重点实验室

随着化石燃料的逐年减少,以生物质为原料的生物能源研究近年来成为能源领域的研究热点,充分利用可再生生物质为发展经济的生物燃料生产工艺提供了一个极好的机会。与燃料乙醇和生物柴油相比,生物丁醇更具有优越性,以可再生木质纤维素生... 详细信息

随着化石燃料的逐年减少,以生物质为原料的生物能源研究近年来成为能源领域的研究热点,充分利用可再生生物质为发展经济的生物燃料生产工艺提供了一个极好的机会。与燃料乙醇和生物柴油相比,生物丁醇更具有优越性,以可再生木质纤维素生物质为原料进行发酵生产丁醇在近年来被广泛的研究。对于利用可再生生物质为原料生产丁醇,需要解决原料的选择、产品收率低、抑制物对生产菌株毒性等问题。本文对以木质纤维素生物质为原料进行生物丁醇发酵过程中的原料预处理、抑制物对丁醇生产菌的影响,以及水解液的脱毒和耐抑制物菌株的选育等方面进行综述,并对以木质纤维素生产燃料丁醇所面临的机遇与问题进行了简要评述。

关键词：木质纤维素丁醇抑制物脱毒

敌草快对鸡输卵管膨大部组织结构、细胞凋亡及繁殖性能相关基因表达的影响

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农业生物技术学报 2025年第1期33卷 146-156页

作者：戴逸园丁香胡威刘犇肖佩怡杨雪郑文亚樊庆灿宜春学院生命科学与资源环境学院江西省高等学校硒农业工程技术研究中心江西绿科农牧科技有限公司

联吡啶类除草剂敌草快(Diquat)作为现代农业生产中常用的农药，极易引起禽类发生氧化应激，为探究敌草快诱导的氧化应激对鸡输卵管膨大部的影响，本研究选取45只健康且体重相近的180日龄康乐黄母鸡(Gallus gallus)，随机分成3组，每组1... 详细信息

联吡啶类除草剂敌草快(Diquat)作为现代农业生产中常用的农药，极易引起禽类发生氧化应激，为探究敌草快诱导的氧化应激对鸡输卵管膨大部的影响，本研究选取45只健康且体重相近的180日龄康乐黄母鸡(Gallus gallus)，随机分成3组，每组15只。各组鸡均饲喂基础饲粮且自由饮水，经1周适应性饲养后，实验组分别一次性腹腔注射10和20 mg/kg BW(body weight,体重)的敌草快，对照组腹腔注射等剂量的生理盐水，21 d后采集输卵管膨大部组织，利用抗氧化功能检测试剂盒检测抗氧化指标，利用苏木素-伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色技术观察病理损伤，利用免疫组织化学(immunohistochemistry, IHC)技术检测相关蛋白的分布，利用qPCR和Western blot技术检测细胞凋亡和繁殖性能相关基因及蛋白的表达。结果显示，敌草快组的输卵管膨大部中过氧化氢酶(catalase, CAT)、总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase, T-SOD)活性显著降低(P保护繁殖性能提供理论参考。

关键词：敌草快氧化应激母鸡输卵管膨大部细胞凋亡繁殖性能相关基因

裸脚菇0612-9液体菌种优化及其对后续发酵产活性物质的影响

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菌物学报 2019年第6期38卷 970-981页

作者：花纪颜俊清霍光华张诚胡殿明刘英杰吴鑫江西农业大学生物科学与工程学院江西省菌物资源保护与利用重点实验室江西南昌330045 江西省农业科学院农业应用微生物研究所江西南昌330200

裸脚菇0612-9次级代谢产物具有强烈抗青绿霉活性,可作为微生物源防腐剂用于柑橘保藏,但是其发酵周期长,产出能耗大效率低。用摇瓶对裸脚菇0612-9的液体菌种培养基、培养条件进行优化并对优化后液体菌种接种种龄、接种量进行探索,最后用5... 详细信息

裸脚菇0612-9次级代谢产物具有强烈抗青绿霉活性,可作为微生物源防腐剂用于柑橘保藏,但是其发酵周期长,产出能耗大效率低。用摇瓶对裸脚菇0612-9的液体菌种培养基、培养条件进行优化并对优化后液体菌种接种种龄、接种量进行探索,最后用5L发酵罐进行放大发酵验证。取样计数测定菌丝球数量、过滤称重测定菌丝干重、HPLC监测活性物质Ⅱ的积累、牛津杯法评价抗青绿霉活性。经研究最佳碳源为玉米粉和麦芽糖,最佳氮源为蛋白胨,最佳液体菌种培养基组成为:玉米粉30g/L、麦芽糖10g/L、蛋白胨15g/L、KH2PO4 2g/L、MgSO4·7H2O 1g/L;最佳培养条件:起始pH 5、接种3×Ф7mm菌块、装液量100mL/250mL三角瓶、温度28℃、转速160r/min;优化前菌丝球数46个/10mL,菌丝干重0.28g/100mL,优化后菌球数达985个/10mL,菌丝干重达0.69g/100mL,分别为优化前的21.4倍、2.43倍;后续发酵使用种龄9d的液体菌种、接种量7.5%。优化后液体菌种在发酵罐中后续发酵周期从10d缩短至5d,缩短50%,产量比优化前提高8.28%。

关键词：液体菌种后续发酵发酵产活性物质

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微藻油脂含量的高效测定方法

生物技术通报 2019年第12期35卷 189-195页

作者：李志周秋香黎秋玲刘孟荧周智友李汉广江西农业大学生物科学与工程学院江西农业微生物资源开发与利用工程实验室/江西省菌物资源保护与利用重点实验室南昌330045 江西农业大学医院南昌330045

随着化石能源的逐年消耗以及人们环境保护意识的不断增强,微藻作为一种可持续的绿色能源近年来逐渐成为世界各国科学工作者研究的热点。选育高油脂含量微藻是发展微藻生物能源的重要一环,而高效快速的油脂测定方法则是选育过程中的关键... 详细信息

随着化石能源的逐年消耗以及人们环境保护意识的不断增强,微藻作为一种可持续的绿色能源近年来逐渐成为世界各国科学工作者研究的热点。选育高油脂含量微藻是发展微藻生物能源的重要一环,而高效快速的油脂测定方法则是选育过程中的关键技术之一。概述了几种高效、准确、简便的微藻油脂含量测定方法的基本原理和研究现状,主要包括尼罗红荧光光谱法、BODIPY 505/515荧光染色法、铜试剂法、苏丹黑B染色法、傅里叶变换红外光谱法、时域核磁共振法、可见/近红外光谱法等,并对这些方法各自的优缺点进行了比较,以期为微藻油脂含量测定提供一定的参考,同时为微藻油脂研究和生产实践提供理论依据。

关键词：微藻油脂测定高效测定方法生物能源

裸脚菇属菌0612-9拮抗柑橘青霉及绿霉活性物质稳定性分析

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食品科技 2018年第10期43卷 31-38页

作者：吴天福何甜龙昊知陈明辉刘景利胡殿明霍光华江西农业大学菌物资源保护与利用江西省重点实验室/生物科学与工程学院南昌330045

青霉及绿霉病害会导致柑橘采后腐烂并引起巨大经济损失,裸脚菇属菌0612-9可抑制青、绿霉菌的生长。为探究该菌拮抗病原菌的物质基础及其稳定性,采用大孔树脂柱层析、硅胶柱色谱、薄层色谱法等分离,采用牛津杯法和分析型高效液相色谱检... 详细信息

青霉及绿霉病害会导致柑橘采后腐烂并引起巨大经济损失,裸脚菇属菌0612-9可抑制青、绿霉菌的生长。为探究该菌拮抗病原菌的物质基础及其稳定性,采用大孔树脂柱层析、硅胶柱色谱、薄层色谱法等分离,采用牛津杯法和分析型高效液相色谱检测其在不同温度、pH、紫外线照射(UV)、光照和氧化等不同条件下的稳定性。结果表明,裸脚菇属菌0612-9抑制青、绿霉菌生长的活性物质有2种,即I和II,物质I、II对意大利青霉和指状绿霉的EC50分别为95.72、137.36μg/mL和213.61、319.28μg/mL。物质I在高温(121℃)、UV、氧化和较广泛pH(pH2～10)条件下都稳定,光照7 d后抑菌效果有所减弱;物质Ⅱ在100℃及以下和酸性(pH2～7)条件下都较稳定,在光照、氧化下分别处理4、9 d后和UV处理4 h后抑菌效果才开始减弱。说明物质I、II在化学结构上可能存在较大差别,两者均有潜在柑橘采后防腐的生防价值。

关键词：裸脚菇属菌0612-9 抗菌物质分离稳定性青霉及绿霉