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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：唐伟郑美群王晓琳陈智勇车驰鲁宗琼郭佳帅邹小妹徐丽丽李林江西中医药大学梅州市第二中医院江西省中西医结合医院江西中医药大学附属医院江西中医药大学第二附属医院

目的：探讨真武汤含药血清对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的心肌肥大细胞凋亡的影响，以及对细胞凋亡和线粒体自噬相关性的机制研究。方法：本实验首先采用不同浓度AngⅡ和真武汤含药血清对H9C2心肌细胞干预24h，利用细胞增殖与活性检测（... 详细信息

目的：探讨真武汤含药血清对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的心肌肥大细胞凋亡的影响，以及对细胞凋亡和线粒体自噬相关性的机制研究。方法：本实验首先采用不同浓度AngⅡ和真武汤含药血清对H9C2心肌细胞干预24h，利用细胞增殖与活性检测（CCK-8）法检测H9C2心肌细胞存活率，筛选实验最适宜浓度；利用酶联免疫吸附测定（ELISA）检测细胞培养上清液中B型钠尿肽（BNP）含量和免疫荧光检测细胞表面积验证心肌肥大细胞模型的构建。随后将实验分为空白组（20%空白血清）、模型组(20%空白血清+5×10-5mol·L-1AngⅡ)、真武汤含药血清低、中、高（5%、10%、20%含药血清）组、及自噬抑制剂组(10-4mol·L-13-MA)、自噬诱导剂组(10-7mol·L-1雷帕霉素)。利用流式细胞术检测H9C2细胞凋亡水平及线粒体膜电位变化情况；溶酶体探针（Lyso Tracker）和线粒体探针Mito Tracker共定位检测细胞自噬发生情况；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测细胞凋亡相关通路含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（Caspase-3）、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9（Caspase-9）、Bcl-2关联的X蛋白（Bax）、B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）、细胞色素C（Cyt-C）及线粒体自噬相关通路中泛素蛋白连接酶（Parkin）、PTEN诱导的激酶1（PINK1）、螯合体1（P62）等基因mRNA相对表达情况；蛋白质印迹法（Western blot）检测细胞凋亡相关通路裂解的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（Cleaved-Caspase-3）、裂解的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9（Cleaved-Caspase-9）、Bax、Bcl-2、Cyt-C和线粒体自噬通路磷酸化泛素蛋白连接酶（p-Parkin）、磷酸化PTEN诱导的激酶1（p-PINK1）、P62、Bcl-2同源结构域蛋白（Beclin1）蛋白的相对表达情况，以及微管相关蛋白1B轻链3（LC3Ⅱ/Ⅰ）比值变化情况。结果：CCK-8显示，AngII浓度在5×10-5mol·L-1时细胞活性最低，且无细胞毒性；该浓度下心肌细胞表面积显著增大（P<0.01）、培养基上清液中BNP含量显著提高（P<0.05），故选用5×10-5mol·L-1的AngII用于后续心肌肥大细胞的造模处理。与空白组比，模型组与自噬抑制剂3-MA组细胞凋亡率及显著升高（P<0.01）、线粒体膜电位显著下降（P<0.01）；模型组细胞中红色和绿色荧光点数量明显减少；Bax、Caspase-3、Caspase-9、Cyt-C、p62基因的mRNA相对表达趋势显著上调（P<0.01），Bcl-2、Parkin、PINK1基因的mRNA相对表达趋势显著下调（P<0.01）；且Bax、Cleaved-Caspase-3、Cleaved-Caspase-9、Cyt-C、P62蛋白相对表达趋势显著上调（P<0.01），LC3Ⅱ/Ⅰ比值显著降低，Bcl-2、p-Parkin、p-PINK1、Beclin1蛋白相对表达趋势显著下调（P<0.01）；与模型组比，真武汤含药血清各组以及自噬诱导剂组细胞凋亡率显著下降（P<0.01）、线粒体膜电位下降比率显著减少（P<0.01），且呈现剂量依赖关系，且可见红色荧光和绿色荧光均增多，3-MA组红色和绿色荧光点数量显著减少；Bax、Caspase-3、Caspase-9、Cyt-C、P62基因的mRNA相对表达趋势显著下调（P<0.01，P<0.05），Bcl-2、Parkin、PINK1基因的mRNA相对表达趋势显著上调（P<0.01）；真武汤含药血清各组中Bax、Cleaved-Caspase-3、Cleaved-Caspase-9、Cyt-C、P62蛋白相对表达趋势显著下调（P<0.01，P<0.05），LC3Ⅱ/Ⅰ值显著上升，Bcl-2、p-Parkin、p-PINK1、Beclin1蛋白相对表达趋势显著上调（P<0.01）。结论：真武汤含药血清具有降低肥大细胞的凋亡，提高细胞内线粒体自噬的作用。这与抑制细胞内Bax/Bcl-2/Caspase-3凋亡通路，调节线粒体自噬Parkin/PINK1通路有关。

关键词：心力衰竭真武汤细胞凋亡线粒体自噬 H9C2

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“灵枢经关刺法联合开四关法”治疗痛性糖尿病周围神经病变的有效性研究

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时珍国医国药 2024年第9期 2202-2205页

作者：叶翔王志明史俊丽黄艳丽江西省中西医结合医院江西中医药大学附属医院

目的评价特色针灸疗法“灵枢经关刺法联合开四关法”治疗PDPN疗效，为PDPN的防治提供临床依据。方法将临床诊断为痛性糖尿病周围神经病变的患者随机分为“灵枢经关刺法联合开四关法”针灸治疗组(简称关刺组)、普通针刺治疗对照组(普... 详细信息

目的评价特色针灸疗法“灵枢经关刺法联合开四关法”治疗PDPN疗效，为PDPN的防治提供临床依据。方法将临床诊断为痛性糖尿病周围神经病变的患者随机分为“灵枢经关刺法联合开四关法”针灸治疗组(简称关刺组)、普通针刺治疗对照组(普通针刺组)及西药基础治疗对照组(西药组)各30例。评估各组治疗前、治疗后密歇根量表评分总评分和VAS评分、正中神经、腓总神经和腓肠神经传导速度变化以评价疗效。结果三组均可不同程度降低密歇根神经病变筛选法评分及VAS疼痛评分，提高正中神经、腓总神经和腓肠神经传导速度。组间比较，关刺组改善作用明显优于普通针刺组(P<0.05),西药组VAS疼痛评分优于关刺组及普通针刺组(P<0.05),但密歇根神经病变筛选法评分及神经传导速度关刺组及普通针刺组改善更明显(P<0.05)。结论应用针刺关刺法联合开四关法可有效缓解糖尿病周围神经病变引起的疼痛麻木，改善神经功能，今后将通过后续研究来进一步探讨其作用机制。

关键词：痛性糖尿病周围神经病变关刺法开四关法五腧穴

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益气活血方调节自噬促进破裂型腰椎间盘突出症重吸收

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中国中西医结合杂志 2024年

作者：白雪孙孝先刘锦涛刘孟敏郭杨林顺马勇姜宏南京中医药大学骨伤修复与重建新技术实验室南京中医药大学中西医结合学院南京中医药大学附属苏州市中医院骨伤科

目的观察益气活血方对破裂型腰椎间盘突出症模型大鼠的干预作用，探讨其促进破裂型腰椎间盘突出症重吸收的作用及机制。方法将75只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为假手术组，模型组，益气活血方高、中、低剂量组（15.48、7.74、3.87 g... 详细信息

目的观察益气活血方对破裂型腰椎间盘突出症模型大鼠的干预作用，探讨其促进破裂型腰椎间盘突出症重吸收的作用及机制。方法将75只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为假手术组，模型组，益气活血方高、中、低剂量组（15.48、7.74、3.87 g/kg），每组15只。除假手术组外，其余各组大鼠建立破裂型腰椎间盘突出症模型，各给药组大鼠灌胃益气活血方，假手术组和模型组给予等量生理盐水，每天给药1次，连续8周。磁共振成像（MRI）评估大鼠椎间盘突出严重情况；HE及Masson染色观察椎间盘组织形态学变化；ELISA检测血清中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、血管内皮生长因子（VEGF）水平；免疫组织化学法检测椎间盘组织中微管相关蛋白轻链3B（LC3B）、苄氯素1（Beclin-1）阳性细胞百分比；蛋白质印迹法（Western Blot）检测椎间盘组织中VEGF、LC3B、p62、核因子κB（NF-κB） p65、低氧诱导因子-1α（HIF-1α）、Bcl-2-腺病毒E1B相互作用蛋白3（BNIP3）、Beclin-1蛋白表达；实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-PCR）检测椎间盘组织中TNF-α、NF-κB p65、HIF-1α mRNA表达。结果干预4、8周后，与假手术组比较，模型组大鼠L4-L5、L5-L6髓核信号降低，与纤维环界限模糊，Pfirmann分级评分显著增加（P<0.05）;TNF-α、VEGF含量升高（P<0.05），椎间盘组织中Beclin-1、LC3B阳性细胞及蛋白表达增加（P<0.05）,NF-κB p65、HIF-1α、BNIP3、Beclin-1蛋白表达水平显著降低（P<0.05）,TNF-α、NF-κB p65及HIF-1α mRNA表达增加（P<0.05）。与模型组比较，益气活血方高、中、低组髓核细胞形状较完整，纤维环轻度紊乱；椎间盘组织中LC3B、Beclin-1阳性细胞比率增加（P<0.01）；血清中VEGF、TNF-α表达增加（P<0.05）；椎间盘组织中VEGF、LC3B、NF-κB p65、HIF-1α、BNIP3、Beclin-1蛋白表达增高（P<0.05）,P62蛋白表达降低（P<0.05）;NF-κB p65、TNF-α及HIF-1α mRNA表达升高（P<0.05）。结论益气活血方能促进破裂型腰椎间盘突出症重吸收，具体机制可能与其促进椎间盘新生血管VEGF表达，聚集炎性因子TNF-α激活NF-κB信号通路，通过NF-κB信号通路实现HIF-1α高表达，进一步正向调控HIF-1α/BNIP3/Beclin-1通路，增强椎间盘的自噬水平有关。

关键词：益气活血方腰椎间盘突出症重吸收低氧诱导因子-1α/Bcl-2-腺病毒E1B相互作用蛋白3/苄氯素1通路自噬中药复方中西医结合

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基于“脾失散精、浊邪内生”理论探讨线粒体自噬和巨噬细胞极化与动脉粥样硬化的相关性

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中国免疫学杂志 2024年

作者：袁一顺徐驲刘言薇刘中勇江西中医药大学附属医院江西中医药大学

动脉粥样硬化作为心血管常见基础病，其发病率在逐年升高，引起的心脑血管疾病也已成为世界上首位死亡原因。线粒体自噬和巨噬细胞M1/M2极化作为保持线粒体质量及维持炎症动态平衡起着重要作用。根据“取类比象”指导思想，中医认为“... 详细信息

动脉粥样硬化作为心血管常见基础病，其发病率在逐年升高，引起的心脑血管疾病也已成为世界上首位死亡原因。线粒体自噬和巨噬细胞M1/M2极化作为保持线粒体质量及维持炎症动态平衡起着重要作用。根据“取类比象”指导思想，中医认为“脾失散精、浊邪内生”导致动脉粥样硬化的发病机制与线粒体自噬、巨噬细胞极化导致动脉粥样硬化相类似。故本文将基于“脾失散精、浊邪内生”理论从中、西医不同的角度以及运用中医药调控线粒体自噬和巨噬细胞极化治疗动脉粥样硬化等方面，深入探讨线粒体自噬、巨噬细胞极化、动脉粥样硬化三者所存在的联系，为中医药现代化研究提供可靠依据和新的治疗思路。

关键词：脾气散精浊邪线粒体自噬巨噬细胞极化动脉粥样硬化

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胃肠安方含药血清诱导胃癌MKN-45细胞铁死亡及其机制

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：李鑫杨金祖钱建新陶丽陈舲上海中医药大学附属龙华医院上海中医药大学附属龙华医院江西医院上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院

目的：观察胃肠安方含药血清对人胃癌细胞铁死亡的影响，并探讨其潜在作用机制。方法：分别灌胃SD大鼠18、36、72 g·kg-1·d-1胃肠安方药液后制备不同剂量的含药血清。不同剂量的胃肠安方含药血清处理MKN-45细胞后，细胞活力检测法（CC... 详细信息

目的：观察胃肠安方含药血清对人胃癌细胞铁死亡的影响，并探讨其潜在作用机制。方法：分别灌胃SD大鼠18、36、72 g·kg-1·d-1胃肠安方药液后制备不同剂量的含药血清。不同剂量的胃肠安方含药血清处理MKN-45细胞后，细胞活力检测法（CCK-8）检测细胞增殖活力的改变；同时添加凋亡抑制剂、坏死性凋亡抑制剂及铁死亡抑制剂观察细胞在胃肠安方含药血清处理后的存活情况；活性氧荧光探针（DCF-DA）检测细胞内活性氧（ROS）水平；脂质过氧化荧光探针（C11-BODIPY）检测细胞内脂质过氧化水平；酶联免疫吸附试验（ELISA）检测亚铁离子(Fe2+)、谷胱甘肽（GSH）和丙二醛（MDA）水平；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）分别检测核因子E2相关因子2（NRF2），醛酮还原酶1成员B1（AKR1B1），谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4），酰基辅酶A合成酶长链家族成员4（ACSL4）及信号转导和转录激活因子3（STAT3），丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）相关分子表达。结果：与空白组比较，胃肠安方含药血清处理后MKN-45细胞活力明显降低（P<0.05， P<0.01），具有时间及浓度依赖性。与胃肠安方组比较，凋亡抑制剂+胃肠安方组及铁死亡抑制剂+胃肠安方组细胞活力明显升高（P<0.05， P<0.01）。与空白组比较，胃肠安方组细胞内ROS，脂质过氧化水平，细胞内Fe2+浓度、MDA含量明显升高（P<0.05， P<0.01），GSH含量显著降低（P<0.05， P<0.01），呈浓度依赖性。与空白组比较，胃肠安方组NRF2、AKR1B1、GPX4的mRNA和蛋白表达明显降低（P<0.05， P<0.01），ACSL4的mRNA和蛋白表达明显升高（P<0.05， P<0.01），呈浓度依赖性。与空白组比较，胃肠安方组p-STAT3、p-ERK蛋白表达明显降低（P<0.05， P<0.01），呈浓度依赖性。结论：胃肠安方含药血清可诱导胃癌铁死亡抑制MKN-45细胞增殖，其机制可能与调控STAT3及MAPK通路相关。

关键词：胃癌胃肠安方含药血清铁死亡醛酮还原酶1成员B1 信号转导和转录激活因子3 丝裂原活化蛋白激酶

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定量磁共振T_(1)ρ评估椎间盘退变研究进展

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临床放射学杂志 2024年第9期43卷 1616-1620页

作者：何敢声(综述) 谢林(审校) 南京中医药大学附属中西医结合医院骨伤科 210023 南京中医药大学第三临床医学院 210023

椎间盘退变(intervertebral disc degeneration,IDD)是一系列脊柱退行性疾病如椎间盘(IVD)突出症、腰椎管狭窄症、退行性腰椎滑脱症的病理基础。IDD的影像学诊断主要依靠MRI,以腰椎矢状位T_(2)WI为基础的Pfirrmann分级[1]是目前使用最... 详细信息

椎间盘退变(intervertebral disc degeneration,IDD)是一系列脊柱退行性疾病如椎间盘(IVD)突出症、腰椎管狭窄症、退行性腰椎滑脱症的病理基础。IDD的影像学诊断主要依靠MRI,以腰椎矢状位T_(2)WI为基础的Pfirrmann分级[1]是目前使用最广泛的评估IDD的方法。但基于检查者视觉解读的半定量定性评价方法使其在重现性、观察者之间的一致性以及与临床症状的相关性等方面存在局限性。

关键词：腰椎管狭窄症退行性腰椎滑脱症椎间盘退变脊柱退行性疾病突出症 IDD 影像学诊断

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补肾化瘀强骨方对肾虚血瘀型老年骨质疏松性腰椎骨折的疗效

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实用医学杂志 2024年第1期40卷 114-118页

作者：邱国栋孙雷谢水华江西中医药大学研究生院南昌330006 江西省中西医结合医院骨伤一科南昌330009

目的探讨补肾化瘀强骨方在肾虚血瘀型老年骨质疏松性腰椎骨折治疗中的应用价值。方法所有肾虚血瘀型老年骨质疏松性腰椎骨折患者均于2021年9月至2023年3月在江西省中西医结合医院就诊,随机分为两组均68例,对照组采用西医常规治疗,观察... 详细信息

目的探讨补肾化瘀强骨方在肾虚血瘀型老年骨质疏松性腰椎骨折治疗中的应用价值。方法所有肾虚血瘀型老年骨质疏松性腰椎骨折患者均于2021年9月至2023年3月在江西省中西医结合医院就诊,随机分为两组均68例,对照组采用西医常规治疗,观察组联合补肾化瘀强骨方治疗,治疗12周。结果治疗后观察组血清D-二聚体(D-D)、白细胞介素-6(IL-6)、前列腺素E2(PGE2)等指标低于对照组,血管内皮生长因子(VEGF)、β-内啡肽(β-EP)更高(P中医总症状积分、Cobb角更低(P<0.05);观察组总有效率高达95.59%(65/68),高于对照组的80.88%(55/68)(P<0.05)。结论对于肾虚血瘀型老年骨质疏松性腰椎骨折而言联合补肾化瘀强骨方治疗有助于减轻炎症反应,调控骨代谢,促进骨密度提高,进而提高临床疗效。

关键词：补肾化瘀强骨方肾虚血瘀型骨质疏松性腰椎骨折

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基于脾脏代谢组学研究肿节风总黄酮治疗免疫性血小板减少症的作用机制

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北京中医药大学学报 2024年第2期47卷 213-222页

作者：卢震尚广彬卢晓南张钟康刘慧珍曾英坚江西中医药大学附属医院南昌330006 江西中医药大学中医基础理论分化发展中心江西中医药大学中医学院

目的运用代谢组学技术研究肿节风总黄酮干预免疫性血小板减少症(ITP)的作用机制。方法48只雄性SD大鼠使用Excel随机函数分为正常对照组,模型组,肿节风总黄酮低、中、高剂量组和醋酸泼尼松龙组,每组8只。除正常对照组外,其他各组大鼠第1... 详细信息

目的运用代谢组学技术研究肿节风总黄酮干预免疫性血小板减少症(ITP)的作用机制。方法48只雄性SD大鼠使用Excel随机函数分为正常对照组,模型组,肿节风总黄酮低、中、高剂量组和醋酸泼尼松龙组,每组8只。除正常对照组外,其他各组大鼠第1、3、4、6、7、8天腹腔注射兔抗大鼠血小板血清(5 mL/kg)复制ITP大鼠模型,正常对照组大鼠腹腔注射等体积生理盐水。造模日同时给药干预,每日1次。肿节风总黄酮低、中、高剂量组分别灌胃肿节风总黄酮(31.5、63.0、94.5 mg/kg),醋酸泼尼松龙组腹腔注射醋酸泼尼松龙(10.0 mg/kg)。第0、3、6、9天检测各组大鼠外周血小板数量,第10天称量脾脏质量,并计算脾脏指数。利用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱技术和多元统计分析对各组大鼠脾脏差异代谢物进行筛选和鉴定,并进行通路富集分析。结果与正常对照组比较,模型组大鼠第6、9天外周血小板减少,脾脏质量增加,脾脏系数升高(P<0.05)。与模型组比较,肿节风总黄酮低、中、高剂量组第6、9天外周血小板数量增加,肿节风总黄酮高剂量组脾脏质量减少,肿节风总黄酮中、高剂量组脾脏指数降低(P<0.05)。脾脏代谢组学分析筛选得到24种与ITP相关的生物标志物,肿节风总黄酮高剂量组可以回调其中的21种,主要涉及亚油酸代谢、半胱氨酸和蛋氨酸代谢、甘油磷脂代谢。结论肿节风总黄酮可能通过调节脾脏亚油酸代谢、半胱氨酸和蛋氨酸代谢、甘油磷脂代谢等代谢通路恢复免疫系统的正常调节能力,以抑制血小板过度破坏,发挥治疗ITP的作用。

关键词：肿节风总黄酮免疫性血小板减少症代谢组学脾脏免疫大鼠

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电针“足三里”“太冲”对功能性消化不良模型大鼠胃肠道功能及脑-肠轴的影响

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北京中医药大学学报 2024年第4期47卷 570-579页

作者：王琼张艺邹燃周利杨敏徐派的武汉市第一医院(武汉市中西医结合医院)针灸科武汉430030 湖北中医药大学针灸骨伤学院

目的探究电针“足三里”(ST36)与“太冲”(LR3)对功能性消化不良(FD)模型大鼠胃肠道动力障碍、胃肠激素及脑-肠轴的影响。方法48只SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、模型组、西沙比利组及电针组,每组12只。采用轻度夹尾刺激配合间... 详细信息

目的探究电针“足三里”(ST36)与“太冲”(LR3)对功能性消化不良(FD)模型大鼠胃肠道动力障碍、胃肠激素及脑-肠轴的影响。方法48只SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、模型组、西沙比利组及电针组,每组12只。采用轻度夹尾刺激配合间断饮食法构建FD大鼠模型。记录各组大鼠造模前后体质量、进食量和糖水偏好率,验证FD模型是否复制成功。造模成功后,正常对照组和模型组不做任何干预;西沙比利组大鼠灌胃西沙比利[0.4 g/(kg·d)],连续6 d为1个疗程,隔日继续下一疗程;电针组大鼠接受双侧“足三里”“太冲”电针刺激(直流电,疏密波,2/100 Hz,2~5 mA。通电30 min),每隔24 h刺激1次,连续6次为1个疗程,隔日继续下一疗程。2个疗程后取材,比较各组大鼠胃肠动力指标,血液胃肠激素[胃动素、胃泌素、5-羟色胺(5-HT)、一氧化氮(NO)]水平,血清、下丘脑、胃窦、十二指肠内源性脑肠肽[促胆囊收缩素(CCK)、降钙素相关基因肽(CGRP)、神经肽Y(NPY)]水平,下丘脑、脊髓、胃窦、结肠组织中胃饥饿素和P物质的蛋白表达。结果模型大鼠体质量、进食量和糖水偏好率均较正常大鼠降低(P<0.05)。与模型组比较,电针组与西沙比利组大鼠胃内残留率降低,小肠推进率、胃电慢波主频率和主功率升高(P<0.05);胃动素、胃泌素、5-HT水平升高,NO水平降低(P<0.05);血清CCK含量增加、CGRP和NPY含量降低(P<0.05);下丘脑、胃窦、十二指肠CCK蛋白阳性表达细胞增加,CGRP和NPY蛋白阳性表达细胞减少(P<0.05);下丘脑、脊髓、胃窦、结肠组织中胃饥饿素蛋白表达上调,P物质蛋白表达下调(P<0.05)。西沙比利组和电针组比较,各指标差异均无统计学意义。结论电针“足三里”与“太冲”可有效缓解FD大鼠胃肠道动力障碍,调节胃肠激素水平,纠正异常脑肠肽表达,调节脑-肠互动平衡。

关键词：电针足三里太冲功能性消化不良胃肠道动力障碍脑肠肽胃肠激素大鼠

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黄芩汤调控TLR2/NF-κB/NLRP3通路对溃疡性结肠炎细胞焦亡的影响

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时珍国医国药 2024年第2期35卷 257-261页

作者：陈嘉琪李重史秀丽朱璠管城艳杨云青吴娜江西中医药大学研究生院江西南昌330004 江西省中西医结合医院江西南昌330003 江西中医药大学附属医院江西南昌330006

目的基于TLR2/NF-κB/NLRP3通路探讨黄芩汤对溃疡性结肠炎细胞焦亡的影响。方法实验分为空白组、模型组、低中高中药血清组。LPS+ATP构建焦亡模型,cck-8法检测生长情况,流式细胞术检测凋亡,Elisa检测IL-18、IL-1β、TNF-α水平,qRT-PCR... 详细信息

目的基于TLR2/NF-κB/NLRP3通路探讨黄芩汤对溃疡性结肠炎细胞焦亡的影响。方法实验分为空白组、模型组、低中高中药血清组。LPS+ATP构建焦亡模型,cck-8法检测生长情况,流式细胞术检测凋亡,Elisa检测IL-18、IL-1β、TNF-α水平,qRT-PCR检测IL-1β、NLRP3、Caspase-1、IL-18、ASC、GSDMD mRNA表达情况,WB检测TLR2、p-NF-κB-p65、GSDMD蛋白水平。结果与模型组相比,三组中药血清细胞活力均明显上升(P<0.05)、凋亡率均显著降低(P<0.01)。与模型组相比,三组中药血清IL-18、IL-1β、TNF-α水平均明显降低(P<0.05)。与模型组相比,中剂量组Caspase-1、NLRP3、ASC、IL-18的mRNA表达明显降低(P<0.05),高剂量组IL-1β、NLRP3、Caspase-1、IL-18、ASC、GSDMD的mRNA表达均显著降低(P<0.01)。与模型组相比,中、高剂量组TLR2、p-NF-κB-p65及高剂量组GSDMD蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论黄芩汤抑制溃疡性结肠炎焦亡的机制可能是调控TLR2/NF-κB/NLRP3通路。

关键词：溃疡性结肠炎黄芩汤细胞焦亡 TLR2/NF-κB/NLRP3

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