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^(1)H-NMR技术结合多元统计分析鉴别降香及其伪品

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中国实验方剂学杂志 2023年第13期29卷 173-179页

作者：危先文陈兰英孟晓伟朱清俞洪华郑启万任佳慧林丽华刘荣华江西中医药大学药学院南昌330004 江西中医药大学中药固体制剂制造技术国家工程研究中心南昌330006

目的采用核磁共振氢谱(^(1)H-NMR)技术结合多元统计分析建立降香及其伪品的鉴别方法。方法获得降香及其伪品的^(1)H-NMR图谱,建立全成分信息并转化为数据矩阵,检测条件为以含0.03%四甲基硅烷(TMS)的氘代二甲基亚砜(DMSO-d6)为溶剂,恒温2... 详细信息

目的采用核磁共振氢谱(^(1)H-NMR)技术结合多元统计分析建立降香及其伪品的鉴别方法。方法获得降香及其伪品的^(1)H-NMR图谱,建立全成分信息并转化为数据矩阵,检测条件为以含0.03%四甲基硅烷(TMS)的氘代二甲基亚砜(DMSO-d6)为溶剂,恒温298 K(1 K=-272.15℃),脉冲间隔1.00 s,谱宽12019.23 Hz,扫描数16次,采样时间1.08 s。对降香及其伪品数据矩阵进行相似度考察和层次聚类分析(HCA),采用正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)对数据矩阵进行分析,找出降香与其伪品之间的差异性成分;建立OPLS-DA类别变量值模型,设定降香类别变量值为1,降香伪品类别变量值为0,阈值±0.3,用于市售降香的真伪鉴别;以OPLS-DA得分图确定市售降香中伪品的种类,并通过薄层色谱法(TLC)进行验证。结果相似度分析与HCA结果表明,降香与其伪品之间差异明显;OPLS-DA发现降香与其伪品显著性差异成分为反式-橙花叔醇;建立的类别变量值模型可成功对市售降香进行真伪鉴别;OPLS-DA得分图结果显示,市售降香中存在交趾黄檀心材和斜叶黄檀心材,并与TLC验证结果相吻合。结论市场上存在以交趾黄檀心材和斜叶黄檀心材代替降香出售的现象,^(1)H-NMR图谱结合多元统计分析能有效区分降香及其伪品,可为降香及其伪品的鉴别提供参考。

关键词：降香核磁共振氢谱(^(1)H-NMR) 相似度层次聚类分析(HCA) 真伪鉴别正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA) 薄层色谱法(TLC)

白头翁皂苷B4对慢性子宫内膜炎大鼠的治疗作用及其相关因子的影响

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中国实验方剂学杂志 2020年第15期26卷 54-60页

作者：王玲玲崔亚茹陈兰英李雪亮罗颖颖张国松程林辉江西中医药大学中药固体制剂制造技术国家工程研究中心南昌330006 江西中医药大学药学院南昌330004

目的:通过体内外实验研究白头翁皂苷B4对子宫内膜炎大鼠的影响。方法:动物实验采用25%的苯酚胶浆制备子宫内膜炎模型,60只SD雌性大鼠随机分为空白组、模型组、苦参凝胶组(0.005 g·kg^-1),白头翁皂苷B4凝胶低、中、高剂量组(0.005,0.01,... 详细信息

目的:通过体内外实验研究白头翁皂苷B4对子宫内膜炎大鼠的影响。方法:动物实验采用25%的苯酚胶浆制备子宫内膜炎模型,60只SD雌性大鼠随机分为空白组、模型组、苦参凝胶组(0.005 g·kg^-1),白头翁皂苷B4凝胶低、中、高剂量组(0.005,0.01,0.02 g·kg^-1),每组10只,除空白组外,各组大鼠每2 d向其阴道内注入25%苯酚胶浆,造模持续30 d。造模后当天开始给药,白头翁皂苷B4凝胶低、中、高剂量组每日直肠给药,苦参凝胶组每日阴道给药,空白组和模型组以同样的方法给予等量的生理盐水,给药连续30 d。末次给药后,取各组大鼠子宫及其附件,进行大鼠子宫形态、子宫指数分析;苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠子宫组织病理变化;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组大鼠子宫组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-6(IL-6),信号转导蛋白130(gp130),信号传导及转录激活因子3(STAT3)mRNA的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠子宫组织中IL-6和STAT3蛋白的表达;细胞实验,以脂多糖(LPS)诱导大鼠子宫内膜上皮细胞制备体外炎症模型,Real-time PCR检测各组大鼠子宫内膜上皮细胞中IL-6,gp130和STAT3 mRNA的表达。结果:动物实验结果显示,与空白组比较,模型组大鼠子宫宫腔黏连不全,子宫内膜出现水肿及充血病变;与模型组比较,白头翁皂苷B4凝胶高剂量组和苦参凝胶组大鼠子宫宫腔无黏连现象,子宫组织较为完整,子宫病理结构得到明显的改善。与空白组比较,模型组大鼠子宫指数明显升高(P实验结果显示,与空白组比较,模型组大鼠子宫内膜上皮细胞中IL-6和gp130的mRNA表达显著升高(P<0.01),STAT3的mRNA表达明显升高(P<0.05);与模型组比较,白头翁皂苷B4高剂量组中IL-6,gp130和STAT3的mRNA表达水平明显下降(P<0.05)。结论:白头翁皂苷B4可改善大鼠慢性子宫内膜炎的炎症反应,降低炎症因子IL-6的释放,其机制可能与IL-6/STAT3通路的下调有关。

关键词：子宫内膜炎白头翁皂苷B4 子宫内膜上皮细胞白细胞介素-6(IL-6)/信号转导和转录激活因子3(STAT3) 炎症反应

针对神经退行性疾病的蛋白水解靶向嵌合体研究进展

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中国药学杂志 2023年第19期58卷 1721-1730页

作者：刘鹏曹端源罗金重谢赛赛刘婧江西中医药大学中药固体制剂制造技术国家工程研究中心南昌330004 江西中医药大学药学院南昌330004

神经退行性疾病(neurodegenerative disorders,NDs)是一类引起神经细胞损伤或导致运动性、认知性功能障碍的疾病,其中一个最主要的病理特征为患者大脑中出现异常折叠的蛋白质聚集物,目前缺乏积极有效的药物用于NDs的治疗。而蛋白水解靶... 详细信息

神经退行性疾病(neurodegenerative disorders,NDs)是一类引起神经细胞损伤或导致运动性、认知性功能障碍的疾病,其中一个最主要的病理特征为患者大脑中出现异常折叠的蛋白质聚集物,目前缺乏积极有效的药物用于NDs的治疗。而蛋白水解靶向嵌合体(proteolysis-targeting chimera,PROTAC)是一种双功能的小分子化合物,它可以将靶蛋白和E3泛素连接酶招募形成三元复合物,然后通过泛素蛋白酶体系统(ubiquitin-proteasome system,UPS)实现对靶蛋白的降解。理论上该技术有望靶向降解不可成药蛋白,因此在NDs研究中具有巨大潜力和发展空间,目前也受到了广泛关注。因此笔者对PROTAC技术进行了简要介绍,主要综述了其在NDs中的应用,并总结了PROTAC在NDs中应用的优势和挑战。

关键词：蛋白水解靶向嵌合体神经退行性疾病蛋白质降解泛素-蛋白酶体系统双功能分子

基于组蛋白去乙酰化酶设计的多靶点抗肿瘤药物研究进展

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中国新药杂志 2021年第3期30卷 236-245页

作者：丁娇丽张志鹏刘婧周维新金一谢赛赛江西中医药大学中药固体制剂制造技术国家工程研究中心南昌330004 江西中医药大学药学院南昌330004

肿瘤的发生是一个多因子、多步骤的复杂过程。多靶点抗肿瘤药物能同时作用于肿瘤发生的多个疾病通路,比单靶点抗肿瘤药物有更好的治疗效果。研究显示,组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDACs)在多种肿瘤细胞中过度表达,是肿瘤发生... 详细信息

肿瘤的发生是一个多因子、多步骤的复杂过程。多靶点抗肿瘤药物能同时作用于肿瘤发生的多个疾病通路,比单靶点抗肿瘤药物有更好的治疗效果。研究显示,组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDACs)在多种肿瘤细胞中过度表达,是肿瘤发生的关键靶点,因此以抑制HDACs为基础设计兼顾作用于其他靶点的多靶点抗肿瘤药物,成为重要的研究方向。目前已有5个HDAC抑制剂被批准上市用于治疗皮肤T细胞淋巴瘤、多发性骨髓瘤和外周T细胞淋巴瘤,还有十几个HDAC抑制剂正处于不同的临床研究阶段用于治疗各种癌症。基于此,本文综述了近年来此类多靶点分子的设计和生物活性研究,以期为进一步研发此类多靶点药物提供参考。

关键词：组蛋白去乙酰化酶抑制剂多靶点抗肿瘤药物激酶协同作用

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五味子酯甲对缺氧复氧心肌细胞的保护作用

中国新药杂志 2018年第17期27卷 2052-2056页

作者：张武岗张琛李木兰杜文迪周赛君杨武亮陈海芳江西中医药大学中药固体制剂制造技术国家工程研究中心南昌330006 江西中医药大学现代中药制剂教育部重点实验室南昌330004

目的:研究五味子酯甲对缺氧/复氧(H/R)H_9C_2心肌细胞凋亡的保护作用机制。方法:制备H/R H_9C_2细胞损伤模型,采用MTT法检测心肌细胞存活率,以DCFH-DA荧光标记法观察细胞内ROS水平,Western Blot法检测H_9C_2心肌细胞caspase-3,Bcl-2和Ba... 详细信息

目的:研究五味子酯甲对缺氧/复氧(H/R)H_9C_2心肌细胞凋亡的保护作用机制。方法:制备H/R H_9C_2细胞损伤模型,采用MTT法检测心肌细胞存活率,以DCFH-DA荧光标记法观察细胞内ROS水平,Western Blot法检测H_9C_2心肌细胞caspase-3,Bcl-2和Bax蛋白表达。结果:H/R后,模型组中H_9C_2细胞存活率明显降低,胞内ROS和LDH释放均显著增多,caspase-3的表达和Bax/Bcl-2比率显著上调。与模型组比较,药物组细胞存活率均明显升高,Bax/Bcl-2比率明显下调,caspase-3表达水平被显著抑制。结论:五味子酯甲对H/R诱导的H_9C_2心肌细胞具有保护作用,其作用可能与抑制心肌细胞凋亡、减轻氧化损伤有关。

关键词：五味子酯甲缺氧复氧心肌细胞凋亡

基于化学计量学分析的桃仁炮制前后指纹图谱研究

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中国现代应用药学 2020年第8期37卷 971-976页

作者：张晓男魏惠珍张丹杨磊肖柳君丁若雯饶毅江西中医药大学药学院南昌330004 中药固体制剂制造技术国家工程研究中心南昌330006

目的建立桃仁炮制前、后HPLC指纹图谱,比较桃仁炮制前后的质量差异以及桃仁与种皮的差异。方法采用高效液相色谱法测定桃仁饮片(生桃仁、燀桃仁、炒桃仁)各10批的指纹图谱,使用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012.130723版)"进行相... 详细信息

目的建立桃仁炮制前、后HPLC指纹图谱,比较桃仁炮制前后的质量差异以及桃仁与种皮的差异。方法采用高效液相色谱法测定桃仁饮片(生桃仁、燀桃仁、炒桃仁)各10批的指纹图谱,使用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012.130723版)"进行相似度评价,并采用SIMCA统计软件对结果进行偏最小二乘法判别分析。结果生桃仁、燀桃仁、炒桃仁HPLC指纹图谱均含8个共有峰、种皮HPLC指纹图谱含有6个共有峰,相对应的指纹图谱相似度均>0.90。统计结果显示桃仁饮片炮制前、后的指纹图谱可明显区分,并揭示了对此区分贡献最大的4个潜在标志性色谱峰。结论该方法准确、稳定,反映了桃仁饮片炮制前后以及桃仁与种皮的差异性,为桃仁饮片临床用药、质量控制提供一定的参考。

关键词：桃仁炮制指纹图谱高效液相色谱法偏最小二乘法判别分析

交趾黄檀提取物对大鼠急性心肌缺血的保护作用及机制研究

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中国药学杂志 2023年第17期58卷 1563-1572页

作者：欧阳灿玥李安陈兰英汪文龙张莹徐维欣罗颖颖刘荣华中药固体制剂制造技术国家工程研究中心南昌330006 江西中医药大学药学院南昌330004

目的探讨交趾黄檀提取物对大鼠冠状动脉左前降支结扎所致急性心肌缺血的心脏保护作用及可能机制。方法60只SD雄鼠随机分为假手术组、模型组、尼可地尔(3 mg·kg^(-1))组、交趾黄檀提取物组(1.5、3和6 g·kg^(-1)),每组10只,通过结扎冠... 详细信息

目的探讨交趾黄檀提取物对大鼠冠状动脉左前降支结扎所致急性心肌缺血的心脏保护作用及可能机制。方法60只SD雄鼠随机分为假手术组、模型组、尼可地尔(3 mg·kg^(-1))组、交趾黄檀提取物组(1.5、3和6 g·kg^(-1)),每组10只,通过结扎冠脉左前降支建立大鼠急性心肌缺血模型,造模24 h后给药,连续10 d每天给药1次,假手术组和模型组给予相应剂量的蒸馏水,末次给药1h后进行观察和取材。PowerLab电生理记录仪检测大鼠血流动力学指标动脉收缩压(systolic blood pressure,SBP)、动脉舒张压(diastolic blood pressure,DBP)、平均血压(mean blood pressure,MBP)、左室收缩压(left ventricular systolic pressure,LVSP)、等容收缩期左心室内压最大上升和下降速率(±maximal left ventricular pressure rising rate,±dp/dtmax);HE染色观察心肌病理变化;生化法检测血清中乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)、肌酸激酶同工酶(creatine kinase-MB,CKMB);定磷法测定心肌组织中Ca2+-ATP酶活力;检测血浆中总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)及低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、葡萄糖(glucose,GLU)、乳酸(lactate,LA)的含量;RT-PCR法检测心肌组织中腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子-1α(peroxisome proliferator activated receptorγcoactivator 1α,PGC-1α)、脂肪酸转位酶(fatty acid translocase gene,CD36)、长链酰基辅酶a合成酶1(long-chain acyl-CoA synthetase 1,ACSL1)、丙酮酸激酶(pyruvate kinase M,PKM)、磷酸果糖激酶2(phosphofructokinase 2,PFK2)mRNA的表达。Western Blot法检测心肌组织磷酸化AMPK(p-AMPK)、AMPK、PGC-1α蛋白表达水平。结果与模型组相比,交趾黄檀提取物中、高剂量组可显著升高大鼠SBP,各给药组均可升高心肌缺血大鼠DBP和MBP,LVSP和±dp/dtmax;HE染色病理切片显示交趾黄檀提取物能明显改善心肌缺血大鼠心肌梗死区和梗死边界区病理损伤情况,减轻心肌细胞萎缩程度;与模型组比较,交趾黄檀提取物可显著降低大鼠血清中LDH和CK-MB水平;降低大鼠血浆中TG、LDL-C含量,升高HDL-C含量,降低大鼠血浆中GLU、LA含量;升高心肌组织中Ca2+-ATP酶活力;交趾黄檀提取物可显著降低升高AMPK、PGC-1α、CD36、ACSL1、PKM、PFK2 mRNA相对表达量,此外,交趾黄檀提取物可显著升高p-AMPK/AMPK、PGC-1α蛋白相对表达水平。结论交趾黄檀提取物对冠脉结扎所致急性心肌缺血大鼠的心肌损伤具有改善作用,并对心肌组织能量代谢相关指标和因子具有一定的影响,提示其可能具有改善急性心肌缺血所致心肌损伤的作用,其作用机制可能为参与AMPK/PGC-1α信号通路,调控心肌能量代谢,增强脂肪酸氧化和三羧酸循环,促进ATP的生成从而改善缺血所致的心肌损伤。

关键词：交趾黄檀心肌缺血心肌损伤能量代谢

多中心切割2D-HPLC-QTOF法对表柔比星脂质体制剂中未知杂质的分离与结构推断

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中国抗生素杂志 2023年第1期48卷 79-86页

作者：计小凡欧阳辉冯育林饶毅罗晓健江西中医药大学中药固体制剂制造技术国家工程研究中心南昌330006

目的建立多中心切割(MHC)二维高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱(2D-HPLC-QTOF)法分离和推断表柔比星脂质体制剂中未知杂质的方法。方法一维液相色谱采用Symmetry-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,以乙腈和甲醇(6:1)为流动相A,以加入... 详细信息

目的建立多中心切割(MHC)二维高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱(2D-HPLC-QTOF)法分离和推断表柔比星脂质体制剂中未知杂质的方法。方法一维液相色谱采用Symmetry-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,以乙腈和甲醇(6:1)为流动相A,以加入十二烷基硫酸钠的磷酸缓冲液为流动相B,流动相A与流动相B体积比为57:43进行等度洗脱;二维高效液相色谱采用Agilent Eclipse-C18(50 mm×2.1 mm,1.8μm)为色谱柱,以0.1%的甲酸水和乙腈为流动相,采用梯度洗脱。将一维液相色谱条件下分离的杂质峰进行多中心切割储存在定量环中,并转移至二维进行分离,以四极杆飞行时间质谱(QTOF)进行结构推断。结果该方法可以使表柔比星与杂质峰较好地分离,并且可以得到高质量杂质峰进行结构推断。在表柔比星脂质体制剂中对6个未知杂质进行有效的推断。结论建立的多中心切割二维高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱法可高效准确的分离并推断表柔比星脂质体制剂中的未知杂质,特别是微量和难以分离的杂质,对表柔比星制剂的质量控制提供了新方法。

关键词： 2D-HPLC-QTOF 多中心切割表柔比星脂质体未知杂质

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS的芒果核化学成分分析

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天然产物研究与开发 2023年第6期35卷 949-965页

作者：武俊颖张武岗郎一帆黄智超杨武亮杨婕陈海芳江西中医药大学现代中药制剂教育部重点实验室江西中医药大学中药固体制剂制造技术国家工程研究中心南昌330004

为了对芒果核中的化学成分进行系统全面地分析,本研究采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)对芒果核中的化学成分进行了分析和鉴定。采用电喷雾离子源(ESI),于负离子模式下采集数据;结合对照品质谱数据及相关文献... 详细信息

为了对芒果核中的化学成分进行系统全面地分析,本研究采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)对芒果核中的化学成分进行了分析和鉴定。采用电喷雾离子源(ESI),于负离子模式下采集数据;结合对照品质谱数据及相关文献,对样品中成分的二级质谱数据进行分析,共鉴定出135个化合物,主要包括没食子酸鞣质类47个、黄酮类47个、有机酸类30个、香豆素类3个、环烯醚萜苷类8个,其中17个化合物首次在芒果核中鉴定得出。本实验运用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术对芒果核的化学成分进行了较为全面系统地解析,可为其后续的药效物质基础研究及临床应用奠定基础。

关键词： UPLC-Q-TOF-MS/MS 芒果核化学成分质谱分析