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基于Toll样受体4/髓样分化因子88/核转录因子κB信号通路探讨针刺“蝶腭穴”改善变应性鼻炎大鼠免疫炎性反应的机制

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针刺研究 2024年第5期49卷 456-462页

作者：田美慧张亚男孙维芳刘欢汤勇长春中医药大学中医学院长春130117 长春中医药大学临床医学院长春130117 长春中医药大学附属医院长春130021

目的:探讨针刺“蝶腭穴”对变应性鼻炎(AR)大鼠Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、核转录因子κB(NF-κB)、转录因子T-bet(T-bet)、GATA结合蛋白-3(GATA-3)的蛋白表达水平及相关炎性细胞因子的影响。方法:SD大鼠随机分为空白... 详细信息

目的:探讨针刺“蝶腭穴”对变应性鼻炎(AR)大鼠Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、核转录因子κB(NF-κB)、转录因子T-bet(T-bet)、GATA结合蛋白-3(GATA-3)的蛋白表达水平及相关炎性细胞因子的影响。方法:SD大鼠随机分为空白组、模型组、针刺组、假针刺组,每组6只。采用卵清蛋白诱导建立AR大鼠模型。针刺组大鼠行双侧“蝶腭穴”针刺,假针刺组仅行假针刺,均每日1次,共6次。记录各组大鼠行为学评分;HE染色法观察大鼠鼻黏膜形态变化;ELISA法检测大鼠血清免疫球蛋白E(IgE)、卵清蛋白特异性IgE(OVA-sIgE)、干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL)-4、IL-10、IL-17的含量;Western blot法检测大鼠鼻黏膜中TLR4、MyD88、NF-κB p65、T-bet、GATA-3蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组行为学评分升高(P<0.05),血清IgE、OVA-sIgE、IL-4、IL-17的含量及鼻黏膜中GATA-3、TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白表达水平升高(P<0.05),血清IFN-γ、IL-10含量及鼻黏膜T-bet蛋白表达水平降低(P<0.05)。与模型组比较,针刺组行为学评分降低(P<0.05),血清IgE、OVA-sIgE、IL-4、IL-17的含量及鼻黏膜中GATA-3、TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白表达水平降低(P<0.05),血清IFN-γ、IL-10的含量及鼻黏膜T-bet蛋白表达水平升高(P<0.05);假针刺组以上指标差异均无统计学意义。模型组和假针刺组可见鼻黏膜炎性浸润,针刺组鼻黏膜炎性反应明显减轻。结论:针刺“蝶腭穴”可减轻OVA诱导的AR大鼠的症状,改善鼻黏膜炎性反应,其机制可能与抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路,有效调控Th1/Th2、Treg/Th17细胞因子及T-bet/GATA-3的平衡有关。

关键词：蝶腭穴变应性鼻炎免疫炎性反应 Toll样受体4/髓样分化因子88/核转录因子κB信号通路

核因子E2相关因子2蛋白通过调控铁死亡介导脓毒症相关性肝损伤

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中华危重病急救医学 2024年第5期36卷 491-495页

作者：钟朕欧阳训彦郭起财熊力刘先发赣南医学院第一附属医院急诊科江西赣州341000 赣南医学院第一附属医院骨科江西赣州341000

目的探讨核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白对小鼠脓毒症相关性肝损伤(SALI)铁死亡的作用。方法按随机数字表法将雄性SD小鼠分成6组,每组6只。采用盲肠结扎穿孔术(CLP)构建小鼠SALI模型,假手术(Sham)组仅开腹处理。CLP+Fer-1组、CLP+Erastin... 详细信息

目的探讨核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白对小鼠脓毒症相关性肝损伤(SALI)铁死亡的作用。方法按随机数字表法将雄性SD小鼠分成6组,每组6只。采用盲肠结扎穿孔术(CLP)构建小鼠SALI模型,假手术(Sham)组仅开腹处理。CLP+Fer-1组、CLP+Erastin组、CLP+ML385组、CLP+Curcumin组分别于术后经腹腔注射铁死亡抑制剂Ferrostatin-1(Fer-1)10 mg·kg^(-1)·d^(-1)、铁死亡激活剂Erastin 20 mg·kg^(-1)·d^(-1)、Nrf2抑制剂ML38530 mg·kg^(-1)·d^(-1)、Nrf2激活剂Curcumin 100 mg·kg^(-1)·d^(-1)进行干预;Sham组、CLP组予生理盐水10 mg·kg^(-1)·d^(-1),均连续给药10 d。术后10 d收集小鼠血清和肝组织,检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST),以及肝组织匀浆液中丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和Fe2+水平;苏木素-伊红(HE)染色后光镜下观察肝组织病理学改变;透射电镜下观察肝细胞线粒体形状和长度;蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测肝组织Nrf2、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、前列腺素-内过氧化物合酶2(PTGS2)的蛋白表达。结果与Sham组比较,CLP组小鼠血清ALT、AST水平明显升高;镜下可见肝索排列紊乱,细胞肿胀、坏死,线粒体长度明显变短;肝组织中MDA、Fe2+水平明显上升,GSH含量明显下降,Nrf2、GPX4蛋白表达下降,PTGS2蛋白表达明显升高。与CLP组比较,CLP+Fer-1组和CLP+Curcumin组血清ALT、AST水平明显降低〔ALT(U/L):80.65±19.44、103.45±20.52比283.50±37.12,AST(U/L):103.33±11.90、127.33±15.79比288.67±36.82,均P<0.05〕;镜下可见肝索欠规整,细胞轻微肿胀,线粒体长度明显增加(μm:1.42±0.09、1.43±0.21比1.07±0.25,均P<0.05);肝组织中MDA、Fe2+水平明显下降,GSH含量明显升高〔MDA(mol/g):0.87±0.23、1.85±0.43比4.47±0.95,Fe2+(μg/g):63.80±7.15、67.48±6.28比134.52±14.32,GSH(mol/g):1.95±0.29、1.95±0.45比0.55±0.29,均P<0.05〕;肝组织Nrf2、GPX4蛋白表达明显升高,PTGS2蛋白表达明显下降(Nrf2/GAPDH:1.80±0.28、2.10±0.43比0.70±0.24,GPX4/GAPDH:0.80±0.06、0.93±0.07比0.48±0.02,PTGS2/GAPDH:0.76±0.05、0.84±0.01比1.02±0.09,均P<0.05);而CLP+Erastin组、CLP+ML385组上述指标结果则相反,血清ALT、AST水平明显升高〔ALT(U/L):344.52±40.79、321.70±21.10比283.50±37.12,AST(U/L):333.50±27.90、333.00±16.67比288.67±36.82,均P<0.05〕;镜下可见肝索排列紊乱,细胞明显肿胀、坏死,线粒体长度明显变短(μm:0.78±0.13、0.67±0.07比1.07±0.25,均P<0.05);肝组织中MDA、Fe2+水平明显升高,GSH含量明显下降〔MDA(mol/g):5.92±1.06、5.62±0.56比4.47±0.95,Fe2+(μg/g):151.40±8.03、151.88±8.68比134.52±14.32,GSH(mol/g):0.25±0.08和0.23±0.11比0.55±0.29,均P<0.05〕;肝组织Nrf2、GPX4蛋白表达明显下降,PTGS2蛋白表达明显升高(Nrf2/GAPDH:0.46±0.09、0.46±0.11比0.70±0.24,GPX4/GAPDH:0.34±0.05、0.40±0.01比0.48±0.02,PTGS2/GAPDH:1.24±0.13、1.16±0.11比1.02±0.09,均P<0.05)。结论CLP诱导的SALI可导致小鼠肝细胞铁死亡,肝组织Nrf2蛋白可通过调节铁死亡介导SALI。

关键词：脓毒症相关性肝损伤铁死亡核因子E2相关因子2

黄精丸对学习记忆障碍小鼠海马神经元自噬的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年第16期 19-26页

作者：廖可欣姜劼琳肖移生江西中医药大学中医学院

目的：观察黄精丸（CHP）对D-半乳糖联合东莨菪碱所致学习记忆障碍小鼠海马神经自噬的影响，探讨其可能的作用机制。方法：将90只8周龄雄性昆明小鼠随机分为正常组、模型组、多奈哌齐组、CHP低、中、高剂量组。除正常组外，前3周各组小... 详细信息

目的：观察黄精丸（CHP）对D-半乳糖联合东莨菪碱所致学习记忆障碍小鼠海马神经自噬的影响，探讨其可能的作用机制。方法：将90只8周龄雄性昆明小鼠随机分为正常组、模型组、多奈哌齐组、CHP低、中、高剂量组。除正常组外，前3周各组小鼠每日颈背部皮下注射1次0.14 g·kg-1D-半乳糖、后2周改为每日腹腔注射1次2 mg·kg-1东莨菪碱复制学习记忆障碍小鼠以模拟阿尔茨海默病（AD）。造模开始1周后，多奈哌齐组给予0.65 mg·kg-1多奈哌齐，CHP低、中、高剂量组分别给予1.25、2.5、7.5 g·kg-1CHP提取液，模型组给予生理盐水0.5 m L，每天灌胃1次，连续4周。以水迷宫装置观察各小鼠行为学改变，尼氏染色分析各小鼠海马形态学变化，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测各小鼠海马组织哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（m TOR）、自噬效应蛋白-1（Beclin-1）及泛素结合蛋白p62（p62）的m RNA表达水平差异，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组小鼠海马组织m TOR、Beclin-1、微管相关蛋白1轻链3Ⅱ（LC3Ⅱ）、微管相关蛋白1轻链3Ⅰ（LC3Ⅰ）、p62的蛋白表达水平差异，免疫组化探测各组小鼠海马神经元Beclin-1阳性表达。结果：与正常组比较，模型组小鼠学习记忆障碍、痴呆症状明显，其海马结构紊乱、神经元数量减少（P<0.01）,m TOR、Beclin-1的m RNA及蛋白表达水平均显著降低，LC3Ⅱ/LC3Ⅰ显著降低，p62的m RNA及蛋白表达水平显著升高（P<0.01）；与模型组比较，多奈哌齐组及CHP各组小鼠痴呆症状及学习记忆好转，海马神经结构紊乱有所改善、神经元数量增加（P<0.05,P<0.01）,m TOR、Beclin-1的m RNA及蛋白表达水平均明显升高，LC3Ⅱ/LC3Ⅰ明显升高，p62的m RNA及蛋白表达水平均明显降低（P<0.05,P<0.01）。结论：CHP能促进海马神经元自噬发挥治疗AD的作用，其机制可能与激活m TOR信号通路有关。

关键词：黄精丸阿尔茨海默病学习记忆障碍自噬哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路

基于Bcl-2/Bax/Caspase-3信号通路探究参红通络方对心肌缺血再灌注损伤大鼠细胞凋亡的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年第11期30卷 104-110页

作者：赖颖蓉赵倩琳姜丽红长春中医药大学中医学院长春130117 长春中医药大学附属医院长春130117

目的:探讨参红通络方加减对心肌缺血再灌注损伤(MI/RI)大鼠细胞凋亡的作用机制。方法:60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、参红通络方剂低、中、高剂量组和辛伐他汀组。除空白组外,采用线栓结扎冠状动脉左前降支方式制备心肌缺血再灌注... 详细信息

目的:探讨参红通络方加减对心肌缺血再灌注损伤(MI/RI)大鼠细胞凋亡的作用机制。方法:60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、参红通络方剂低、中、高剂量组和辛伐他汀组。除空白组外,采用线栓结扎冠状动脉左前降支方式制备心肌缺血再灌注损伤大鼠模型(MI/RI模型),造模成功后第1天起,空白组(生理盐水1.0 mL·kg^(-1))、模型组(生理盐水1.0 mL·kg^(-1))、参红通络方剂低、中、高剂量组(1.031、2.063、4.126 g·kg^(-1)参红通络方标准浓缩液)和辛伐他汀组(辛伐他汀0.71 mg·kg^(-1)),定时灌胃给药,每日1次,连续2周。苏木素-伊红(HE)染色法观察心肌细胞病理形态学变化;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平变化;原位末端转移酶标记技术(TUNEL)染色法检测大鼠心肌细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和胱天蛋白酶-3(Caspase-3)表达水平。结果:与空白组比较,模型组HE染色可见心肌细胞排列紊乱,纤维不完整,心肌细胞小灶性坏死,并伴有炎性细胞浸润;血清CK-MB、IL-6和TNF-α水平明显上升(P<0.05);心肌细胞凋亡率明显升高(P<0.05),Bax、Caspase-3蛋白表达水平则明显升高,Bcl-2明显下降(P<0.05);与模型组比较,参红通络方剂加减低、中、高剂量组可明显降低CK-MB、IL-6和TNF-α水平(P<0.05);明显下调心肌细胞凋亡率(P<0.05);Bax、Caspase-3蛋白显著降低,Bcl-2表达水平明显增加(P<0.05)。参红通络方剂加减组中Bax、Caspase-3蛋白随参红通络方给药剂量的增加而明显降低,Bcl-2表达水平随参红通络方给药剂量的增加而明显升高(P<0.05)。结论:参红通络方加减可通过减轻心肌组织病理损伤并降低心肌细胞凋亡,可能与抑制Caspase-3、Bax表达、促进Bcl-2水平表达有关。

关键词：参红通络方心肌缺血再灌注损伤细胞凋亡 B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2) Bcl-2相关X蛋白(Bax) 胱天蛋白酶-3(Caspase-3)

中药生发酊联合梅花针治疗雄激素性秃发的疗效观察

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时珍国医国药 2024年第2期35卷 388-391页

作者：李玉珠郭文申桦桂建朝刘雨杭靳秋月云璐李伟业刘湘河北中医学院第一附属医院河北石家庄050011

目的探讨中药生发酊联合梅花针治疗雄激素性秃发(AGA)的临床疗效及安全性。方法将80例AGA患者按照随机数字表法分为观察组(40例,脱落3例)与对照组(40例,脱落5例)。观察组给予中药生发酊外用,对照组给予米诺地尔搽剂外用,两组患者均联合... 详细信息

目的探讨中药生发酊联合梅花针治疗雄激素性秃发(AGA)的临床疗效及安全性。方法将80例AGA患者按照随机数字表法分为观察组(40例,脱落3例)与对照组(40例,脱落5例)。观察组给予中药生发酊外用,对照组给予米诺地尔搽剂外用,两组患者均联合梅花针叩刺,连续治疗24周。比较治疗前后患者固定脱发观察区在毛发镜下的客观指标(毛发密度、毛发直径)以及临床症状评分(头皮油腻度、瘙痒、脱屑)、汉密尔顿抑郁量表(Hamilton DePression Scale,HAMD)评分、汉密尔顿焦虑量表(Hamilton Anxiety Scale,HAMA)评分,探讨中药生发酊对AGA的治疗效果;并通过比较两组不良反应发生率,评价中药生发酊治疗AGA的安全性。结果治疗24周后,观察组和对照组总有效率分别为86.49%和71.43%,观察组疗效优于对照组(P<0.05);经治疗后观察组毛发密度改善程度高于对照组(P<0.05),临床症状评分、HAMA评分、HAMD评分、不良反应率均低于对照组(P<0.05)。结论中药生发酊联合梅花针治疗AGA临床疗效显著且使用便捷,未发生明显不良反应。

关键词：雄激素性秃发中药生发酊梅花针

原发性失眠患者奖赏网络关键核团在静息态fMRI功能连接的改变

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海南医学院学报 2024年

作者：孙曌冉彬艳阚丽娜黄禄宇吴琼王乙翔康晓娜李丹丹王晓彤王小龙靳丹阳沈巍海南医学院中医学院海南医学院第一附属医院中山市中医院

目的：利用功能性磁共振成像（fMRI）技术观察原发性患者奖赏网络区域中脑腹侧被盖（Ventral ttegmental area，VTA）以及伏隔核（Nucleus accumbens，NAcc）脑功能连接的改变。方法：28例原发性失眠比较26例健康对照组脑功能成像的改... 详细信息

目的：利用功能性磁共振成像（fMRI）技术观察原发性患者奖赏网络区域中脑腹侧被盖（Ventral ttegmental area，VTA）以及伏隔核（Nucleus accumbens，NAcc）脑功能连接的改变。方法：28例原发性失眠比较26例健康对照组脑功能成像的改变，并分析中脑腹侧被盖以及伏隔核功能连接的改变与失眠的情绪障碍障碍之间的关系。结果：比较原发性失眠患者对比健康对照组，VTA与NAcc全脑的功能连接均降低，与VTA-l功能连接增降低的脑区为双侧前扣带回、左侧眶额回，与VTA-r功能连接增降低的脑区为双侧前扣带回、左侧眶额回、右侧中央前回，与NAcc-l功能连接降低的脑区为双侧丘脑、辅助运动区，与NAcc-r功能连接降低的脑区为双侧丘脑、小脑。结论：睡眠障碍会显著降低奖赏网络中VTA与NAcc的功能连接，说明长期睡眠障碍可能影响在原发性失眠患者奖赏处理能力，导致失眠患者情感功能发生障碍。

关键词：功能性磁共振成像广泛性焦虑障碍脑功能前扣带回前额叶

中医药调控NLRP3 炎症小体缓解糖尿病肾病肾间质纤维化的机制研究进展

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中国中药杂志 2024年第5期49卷 1164-1171页

作者：乔琳金艳郭兆安山东中医药大学中医学院山东济南250014 济南市中医医院肾病科山东济南250002 山东中医药大学附属医院肾内科山东济南250014

糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是一种因糖尿病诱发的进行性慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD),是终末期肾病的主要病因。肾间质纤维化(renal interstitial fibrosis,RIF)是DN肾功能进展、恶化的不可逆因素。慢性炎症反应... 详细信息

糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是一种因糖尿病诱发的进行性慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD),是终末期肾病的主要病因。肾间质纤维化(renal interstitial fibrosis,RIF)是DN肾功能进展、恶化的不可逆因素。慢性炎症反应已成为DN-RIF发病机制中的关键一环,NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)炎症小体作为重要的炎症调节因子,受多种信号调节,促进促炎性因子的产生,诱导肾脏炎症细胞浸润参与肾纤维化进程,其作用机制复杂。目前已有大量中医药实验研究证明了中医药可通过调控NLRP3炎症小体的相关通路减轻炎症反应,进而延缓DN-RIF进展,改善肾功能。该文就NLRP3炎症小体与DN-RIF的关系及中医药干预NLRP3炎症小体缓解DN-RIF机制研究进展进行综述,旨在为DN-RIF靶向治疗提供新的思路。

关键词： NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3) 糖尿病肾病肾间质纤维化中医药炎症

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中医杂志 2024年第13期65卷 1383-1391页

作者：邱明亮熊佳丽肖晨晓周鑫珠莫丽莎柯诗文朱国双刘良徛江西中医药大学临床医学院江西省南昌市330006 江西中医药大学附属医院江西中医药大学中医学院

目的探讨温肺化纤汤治疗系统性硬化症相关间质性肺病(SSc-ILD)肺纤维化的作用机制。方法将60只C3H/He雌鼠随机分为对照组、模型组、吡非尼酮组及温肺化纤汤低、中、高剂量组。除对照组外,其余各组小鼠予博来霉素溶液0.04 mg/d背部皮下... 详细信息

目的探讨温肺化纤汤治疗系统性硬化症相关间质性肺病(SSc-ILD)肺纤维化的作用机制。方法将60只C3H/He雌鼠随机分为对照组、模型组、吡非尼酮组及温肺化纤汤低、中、高剂量组。除对照组外,其余各组小鼠予博来霉素溶液0.04 mg/d背部皮下连续注射28天建立SSc-ILD小鼠模型。造模成功后,吡非尼酮组予吡非尼酮胶囊300 mg/(kg·d)灌胃,温肺化纤汤低、中、高剂量组分别给予温肺化纤汤7.81、15.62、31.24 g/(kg·d)灌胃,对照组及模型组予生理盐水0.1 ml/10 g灌胃,共21天。干预结束后采用HE染色和Masson染色观察小鼠皮肤及肺组织的病理变化;检测小鼠皮肤及肺组织的羟脯氨酸含量;Western blot法测定小鼠肺组织中的内质网应激相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(BIP)和C/EBP同源蛋白(CHOP)及核因子κB(NF-κB)通路中p65的蛋白表达水平;ELISA测定小鼠血清中的γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达水平。结果HE染色、Masson染色结果显示,与对照组比较,模型组小鼠皮肤组织表皮棘层肥厚,胶原纤维明显增粗、膨大,数量增多,炎性细胞明显增多;肺组织出现明显的炎性细胞反应,大量胶原纤维增生,并伴有炎性细胞浸润。与模型组比较,吡非尼酮组和温肺化纤汤各剂量组皮肤组织和肺组织胶原纤维增生明显减少,炎性细胞浸润减少,且吡非尼酮组和温肺化纤汤中、高剂量组效果基本相当。与对照组比较,模型组小鼠皮肤组织和肺组织羟脯氨酸含量,血清IFN-γ、IL-6、TNF-α含量,肺组织BIP和CHOP蛋白表达水平均升高(P<0.05)。与模型组比较,吡非尼酮组和温肺化纤汤低、中剂量组皮肤组织羟脯氨酸含量降低,温肺化纤汤中剂量组肺组织羟脯氨酸含量下降,吡非尼酮组和温肺化纤汤高剂量组小鼠血清IFN-γ、IL-6、TNF-α含量及肺组织BIP、CHOP和p65蛋白表达水平降低(P<0.05)。温肺化纤汤中剂量组肺组织羟脯氨酸含量明显低于温肺化纤汤低、高剂量组,温肺化纤汤低、中剂量组小鼠血清IFN-γ、IL-6、TNF-α含量高于温肺化纤汤高剂量组,温肺化纤汤高剂量组BIP蛋白表达水平明显低于温肺化纤汤低、中剂量组(P<0.05)。结论温肺化纤汤可改善SSc-ILD模型小鼠皮肤组织及肺组织纤维化,其作用机制可能是通过抗炎、抑制NF-κB通路,进而抑制内质网应激,最终阻抑纤维化进程。

关键词：系统性硬化症间质性肺病温肺化纤汤内质网应激核因子κB