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肺癌细胞外泌体诱导M2型巨噬细胞的极化促进肺癌细胞迁移和侵袭作用及其机制研究

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中国免疫学杂志 2024年

作者：周薇李金权马文卓王有德童红梅甘肃医学院病理生理学教研室平凉市崆峒区中医医院内科

目的探究肺癌细胞外泌体对M2型巨噬细胞诱导的肺癌细胞迁移和侵袭的影响。方法提取并鉴定16HBE、A549、H522细胞所分泌的外泌体(16HBEexo、A549exo、H522exo)，将10μg/ml16HBEexo、A549exo、H522exo、等体积PBS与M0型巨噬细胞共孵育(... 详细信息

目的探究肺癌细胞外泌体对M2型巨噬细胞诱导的肺癌细胞迁移和侵袭的影响。方法提取并鉴定16HBE、A549、H522细胞所分泌的外泌体(16HBEexo、A549exo、H522exo)，将10μg/ml16HBEexo、A549exo、H522exo、等体积PBS与M0型巨噬细胞共孵育(16HBEexo组、A549exo组、H522exo组、PBS组)，qRT-PCR检测各组巨噬细胞Arginase-1、CD206、CD163、TGF-β、iNOS、IL-1β表达，流式细胞术检测各组巨噬细胞中CD206和CD163的表达，Westernblot检测ERK1/2和STAT3磷酸化水平。将A549和H522细胞与上述各组巨噬细胞共孵育(16HBEexo+M0组、A549exo+M0组、H522exo+M0组、PBS+M0组)，使用Transwell检测A549和H522细胞迁移和侵袭能力。结果相比于PBS组，A549exo组和H522exo组巨噬细胞Arginase-1、CD206、CD163、TGF-β表达显著上调(P＜0.001)，iNOS和IL-1β表达显著下调(P＜0.001)，CD206+CD163+巨噬细胞比例显著增加(P＜0.001)，ERK1/2和STAT3磷酸化水平显著增加(P＜0.001)。A549exo+M0组和H522exo+M0组A549和H522细胞迁移和侵袭数均显著增加(P＜0.001)。结论肺癌细胞外泌体可通过激活ERK1/2/STAT3信号通路诱导M2型巨噬细胞极化而促进肿瘤的迁移和侵袭。

关键词：肺癌外泌体 M2型巨噬细胞迁移侵袭

糖尿病心肌病发病机制及中医药作用研究组学技术应用进展

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中国中西医结合杂志 2024年

作者：高艳奎梁永林朱向东柳荣甘肃中医药大学基础医学院宁夏医科大学中医学院江西中医药大学中医学院

糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy,DCM)作为糖尿病(diabetes mellitus,DM)患者的一种特定的心脏表现，独立于冠状动脉疾病、高血压病或心脏瓣膜病而存在，临床表现以早期舒张功能障碍、心肌纤维化、心脏肥大、收缩功能障碍和其他...

糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy,DCM)作为糖尿病(diabetes mellitus,DM)患者的一种特定的心脏表现，独立于冠状动脉疾病、高血压病或心脏瓣膜病而存在，临床表现以早期舒张功能障碍、心肌纤维化、心脏肥大、收缩功能障碍和其他复杂的病理生理事件，最终导致心力衰竭为主[1-3]。DCM的发病机制复杂，活性氧(reactive oxygen species,ROS)介导的氧化应激、内皮功能障碍引起的心肌灌注减少、自主神经功能障碍和胰岛素抵抗引起的血糖水平受损等代谢变化是其主要研究方向[4,5]。

关键词：

基于形气神三位一体生命观探讨2型糖尿病发病机理

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南京中医药大学学报 2024年第2期40卷 115-119页

作者：刘锋苏搏超章文春江西中医药大学中医学院江西南昌330004

形、气、神构成了生命的三个要素,基于形、气、神三位一体生命观探讨2型糖尿病(T2DM)的发病机理。指出T2DM的发生、发展是形、气、神发生了病理改变。并且分别从形、气、神三个方面展开论述。其中形的改变有形态结构改变、形体动作异常... 详细信息

形、气、神构成了生命的三个要素,基于形、气、神三位一体生命观探讨2型糖尿病(T2DM)的发病机理。指出T2DM的发生、发展是形、气、神发生了病理改变。并且分别从形、气、神三个方面展开论述。其中形的改变有形态结构改变、形体动作异常和有形精微物质改变;气的改变有气不足和气化失常;神的改变有嗜欲太过和情志失调,为临床诊治T2DM提供新思路。

关键词：形气神 2型糖尿病生命观发病机理

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穿山龙薯蓣皂苷通过调控自噬治疗胶原诱导性关节炎小鼠模型的机制

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中国药理学通报 2024年第4期40卷 645-651页

作者：江涛由涌夏东帅薄思涵王永为高亚贤宋鸿儒承德医学院基础医学院免疫学教研室河北承德067000 承德医学院基础医学院解剖学教研室河北承德067000 河北北方学院医学检验学院免疫学教研室河北张家口075000

目的探讨穿山龙薯蓣皂苷通过自噬治疗胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)模型小鼠的作用机制。方法通过鸡Ⅱ型胶原乳剂建立CIA模型小鼠,初次免疫DBA1小鼠(0.1 mL),第21天后再次给予相同剂量刺激。加强免疫后将胶原免疫... 详细信息

目的探讨穿山龙薯蓣皂苷通过自噬治疗胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)模型小鼠的作用机制。方法通过鸡Ⅱ型胶原乳剂建立CIA模型小鼠,初次免疫DBA1小鼠(0.1 mL),第21天后再次给予相同剂量刺激。加强免疫后将胶原免疫的50只小鼠随机分组为CIA模型组、雷公藤组和穿山龙薯蓣皂苷低、中、高剂量组,另有10只小鼠注射等量生理盐水作为对照组。在对小鼠进行连续14天灌胃治疗并观察各组小鼠足爪的炎症程度,取下各组小鼠脾、腹股沟淋巴结和踝关节、膝关节,对踝关节、膝关节进行HE染色,检测各组淋巴结、脾组织中mRNA和蛋白质水平的相关自噬指标。结果与CIA模型组相比,穿山龙薯蓣皂苷高剂量组关节炎指数(AI)评分降低(P<0.05);雷公藤组及穿山龙薯蓣皂苷组足爪厚度差值减小(P<0.01)。与对照组相比,CIA模型组体质量明显下降(P<0.01);小鼠膝关节滑膜和足爪踝关节HE染色结果显示CIA模型组对比对照组出现免疫细胞浸润、骨质侵蚀、软骨破坏和滑膜增生的症状;雷公藤组与穿山龙薯蓣皂苷中、高剂量组对CIA模型有不同程度的治疗作用,可以减轻和预防症状。与CIA模型组相比,雷公藤组和穿山龙薯蓣皂苷治疗组中LC3、Beclin-1的mRNA水平和蛋白水平的表达升高,p62的mRNA水平和蛋白水平的表达降低。结论穿山龙薯蓣皂苷可能通过抑制自噬对CIA模型小鼠起到治疗作用。

关键词：穿山龙薯蓣皂苷自噬类风湿性关节炎胶原诱导性关节炎 p62 LC3 Beclin-1

青钱柳多糖调节胰岛和肝脏葡萄糖转运蛋白4转位干预2型糖尿病大鼠的作用机制

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医药导报 2024年第1期43卷 13-19页

作者：刘海云石淼婷骆欣怡孙敏燕徐晨曦陈鲲翰王晓敏舒任庚江西中医药大学中医学院南昌330004

目的观察青钱柳多糖调节胰岛和肝脏葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)转位改善2型糖尿病(T2DM)大鼠外周胰岛抵抗的作用。方法建立T2DM大鼠模型(给予高脂饲料后注射链脲佐菌素35 mg·kg^(-1)),将造模成功的大鼠随机分为模型对照组,青钱柳多糖提... 详细信息

目的观察青钱柳多糖调节胰岛和肝脏葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)转位改善2型糖尿病(T2DM)大鼠外周胰岛抵抗的作用。方法建立T2DM大鼠模型(给予高脂饲料后注射链脲佐菌素35 mg·kg^(-1)),将造模成功的大鼠随机分为模型对照组,青钱柳多糖提取物小、大剂量组(5,10 g·kg^(-1))和盐酸二甲双胍组(0.25 g·kg^(-1)),每组9只,给药8周。测定空腹血糖、血脂变化;苏木精-伊红染色法观察胰岛和肝脏病理形态的改变;免疫组化法观察胰岛磷酸化磷酯酰肌醇3激酶(p-PI3K)、磷酸化丝氨酸苏氨酸蛋白激酶1(p-Akt1)、GLUT4蛋白的表达;免疫荧光观察肝脏和胰岛GLUT4转位。结果与模型对照组比较,青钱柳多糖提取物小、大剂量组和盐酸二甲双胍组大鼠胰岛和肝脏结构较完整,血糖下降(P<0.05),高密度脂蛋白升高(P<0.05),胰岛p-PI3K、p-Akt1、GLUT4蛋白表达升高(P<0.05),肝脏和胰岛GLUT4转位增强(P<0.05)。结论青钱柳多糖可调节T2DM大鼠糖脂紊乱,其机制可能是增强胰岛p-PI3K、p-Akt1、GLUT4蛋白的表达,促进肝脏和胰岛GLUT4转位,从而调节外周胰岛抵抗。

关键词：青钱柳多糖葡萄糖转运蛋白4转位外周胰岛素抵抗 2型糖尿病

慢病毒载体介导的类固醇生成因子-1沉默调控子宫内膜基质细胞蜕膜化与自噬

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解剖学报 2024年第2期55卷 188-195页

作者：任健陈晓燕江苏大学医学院病理学教研室江苏镇江212000 无锡市康复医院心肺康复科江苏无锡214000 重庆市中医院妇产科重庆400000

目的探讨慢病毒载体介导的类固醇生成因子-1(SF-1)沉默对人子宫内膜基质细胞(hESCs)蜕膜化进程的影响及机制。方法收集子宫内膜异位症(EM)患者与正常妊娠者的子宫内膜组织,通过Real-time PCR和免疫组织化学染色检测SF-1的差异表达情况... 详细信息

目的探讨慢病毒载体介导的类固醇生成因子-1(SF-1)沉默对人子宫内膜基质细胞(hESCs)蜕膜化进程的影响及机制。方法收集子宫内膜异位症(EM)患者与正常妊娠者的子宫内膜组织,通过Real-time PCR和免疫组织化学染色检测SF-1的差异表达情况。从正常妊娠者的子宫内膜组织中分离并鉴定hESCs,将hESCs分为对照组、雌二醇(E_(2))+孕酮(P4)组、短发夹RNA(shRNA,sh)-正常对照(NC)+E_(2)+P4组、sh-SF-1+E_(2)+P4组,进行对应处理后,倒置显微镜下观察hESCs形态变化,Real-time PCR和Western blotting分别检测细胞内人胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)、泌乳素(PRL)的mRNA表达水平和蛋白表达水平,流式细胞术测定细胞周期分布,免疫荧光染色观察细胞内自噬标记物微管相关蛋白轻链3(LC3)表达情况,Western blotting测定细胞内自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、LC3-Ⅰ、Beclin-1表达水平。结果EM患者子宫内膜组织中SF-1 mRNA相对表达量和SF-1蛋白阳性率均高于正常妊娠者子宫内膜组织(P<0.05)。与sh-NC+E_(2)+P4组比较,sh-SF-1+E_(2)+P4组细胞多为长梭形,未见明显蜕膜化,IGFBP1、PRL的mRNA相对表达量与蛋白相对表达量均显著下调(P<0.05),G_(0)/G_(1)期细胞比例显著减少而S期细胞比例显著增加(P<0.05),细胞内LC3荧光表达增强,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值显著升高,Beclin-1蛋白相对表达量也显著上调(P<0.05)。结论EM患者子宫内膜组织内SF-1表达升高,通过慢病毒载体介导的SF-1沉默能够抑制hESCs蜕膜化过程,该作用可能与调控细胞自噬水平相关。

关键词：子宫内膜基质细胞类固醇生成因子-1 蜕膜化自噬免疫印迹法人

基于“阳化气、阴成形”理论的代谢综合征发病机理微探

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北京中医药大学学报 2024年

作者：王春雨成佳琳韩金华张浩嘉董利洋王雪茜王庆国程发峰北京中医药大学中医学院

“阳化气，阴成形”理论出自《黄帝内经》，描述了以“阳化气”为主导的人体代谢的基本形式。“阳化气”作用主导人体的能量代谢，而“阴成形”作用主导物质代谢。代谢综合征是蛋白质、脂肪、碳水化合物等物质发生代谢紊乱的病理状态，... 详细信息

“阳化气，阴成形”理论出自《黄帝内经》，描述了以“阳化气”为主导的人体代谢的基本形式。“阳化气”作用主导人体的能量代谢，而“阴成形”作用主导物质代谢。代谢综合征是蛋白质、脂肪、碳水化合物等物质发生代谢紊乱的病理状态，“阳化气，阴成形”理论对于代谢综合征的病机分析和临床辨治有很强的指导价值。阴阳代表了事物变化发展的两种基本趋势，成形与化气两种作用是其在人体新陈代谢中的主要体现，由此角度出发，本文提出以阴阳互根互用为基础，“阳化气不足，阴成形受损”当为代谢综合征发病的关键，这与现代医家“阳化气不足，阴成形太过”理论不同。在此基础上，本文将燮理阴阳，复其互生作为代谢综合征论治的主要方向，为代谢综合征的治疗提供了一种新的思路。

关键词：代谢综合征阳化气,阴成形无序之形燮理阴阳

基膜聚糖通过抑制1型辅助T细胞分化提高耐药性卵巢癌治疗效果

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细胞与分子免疫学杂志 2024年

作者：陈萍吴若琳高星赵元琳袁媛江西省鹰潭市妇幼保健院妇产科空军军医大学基础医学院病理学教研室暨西京医院病理科

目的探讨基膜聚糖（LUM）在卵巢癌顺铂耐药中的作用机制，并初步探索其对Th1细胞分化的影响。方法通过基因表达数据集（GEO）筛选卵巢癌顺铂耐药株及敏感株中差异表达的基因，通过实时定量PCR检测其表达水平。利用小干扰RNA（siRNA）... 详细信息

目的探讨基膜聚糖（LUM）在卵巢癌顺铂耐药中的作用机制，并初步探索其对Th1细胞分化的影响。方法通过基因表达数据集（GEO）筛选卵巢癌顺铂耐药株及敏感株中差异表达的基因，通过实时定量PCR检测其表达水平。利用小干扰RNA（siRNA）敲低人卵巢癌细胞中LUM表达，并用Westernblot法验证敲低效率。通过流式细胞术检测敲低LUM对顺铂处理后的卵巢癌细胞系周期及凋亡的影响。通过蛋白质相互作用（PPI）网络筛选LUM潜在靶蛋白，并用分子对接验证其相互作用。肿瘤免疫评估资源数据库（TIMER）筛选LUM对卵巢癌系分泌细胞因子的影响，并利用ELISA与实时定量PCR验证。流式细胞术分析LUM对共培养的CD4+T分化的调控作用。结果 GEO数据显示LUM在顺铂耐药株中显著上调，且其表达水平与患者预后相关。LUM在卵巢癌顺铂耐药细胞株中表达水平较高，且顺铂治疗能促进LUM的表达。敲低LUM增加顺铂诱导的卵巢癌细胞的凋亡和细胞周期阻滞，提高药物敏感性。靶基因筛选表明，LUM可能通过与Src同源域磷酸酶2（SHP2）相互作用调控卵巢癌细胞对顺铂的敏感性。另外，TIMER分析结果提示高表达LUM抑制1型辅助T（Th1）细胞分化，在卵巢癌耐药株中敲低LUM促进Th1细胞分化，通过调控γ干扰素（IFN-γ）和白细胞介素12（IL-12）分泌影响免疫细胞的肿瘤杀伤力。结论 LUM在卵巢癌顺铂耐药中表达上调，可能通过调控SHP-2相关信号通路降低卵巢癌细胞顺铂敏感性。LUM还通过调控卵巢癌细胞细胞因子分泌，进而抑制Th1细胞分化，促进肿瘤耐药性产生，可能是卵巢癌治疗新的潜在靶点。

关键词：基膜聚糖(lumican) 卵巢癌顺铂 1型辅助T(Th1)细胞

贝母素乙通过下调CDK2/CDK4/CDK6和cyclin D1表达抑制人结肠腺癌SW480细胞活力

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中国病理生理杂志 2024年第6期40卷 1070-1077页

作者：杨霞李雅茹李玥毛泓月白冰李一权韩继成万怡宁谢诗敏朱羿龙金宁一延边大学医学院病理学与病理生理学教研室吉林延吉136200 长春中医药大学院士工作室吉林长春130117 中国农业科学研究院长春兽医研究所吉林长春130122

目的:探究贝母素乙(peiminine)对人结肠腺癌细胞(SW480)活力、迁移和侵袭的抑制作用并探讨其抑制SW480增殖的作用机制。方法:用不同剂量的贝母素乙处理人结肠腺癌细胞SW480和人正常结肠上皮细胞CCD-841CoN,通过CCK-8实验确定贝母素乙抑... 详细信息

目的:探究贝母素乙(peiminine)对人结肠腺癌细胞(SW480)活力、迁移和侵袭的抑制作用并探讨其抑制SW480增殖的作用机制。方法:用不同剂量的贝母素乙处理人结肠腺癌细胞SW480和人正常结肠上皮细胞CCD-841CoN,通过CCK-8实验确定贝母素乙抑制SW480活力的最适剂量和最佳作用时间;划痕和Transwell实验检测贝母素乙对SW480迁移与侵袭能力的影响;流式细胞术和Western blot检测贝母素乙对SW480细胞周期及细胞周期相关蛋白表达的影响;构建SW480移植瘤裸鼠模型,在体内分析贝母素乙对SW480活力及细胞周期相关蛋白表达的影响。结果:与对照组相比,当贝母素乙作用浓度为110 mg/L时能够显著抑制SW480细胞活力、迁移和侵袭能力(P<0.01),并诱导SW480细胞周期G1期阻滞,周期相关蛋白细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)、CDK4、CDK6、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、p-Rb/Rb、E2F1、E2F3和E2F4的表达水平受到显著抑制(P<0.05);在体内,贝母素乙抑制SW480移植瘤的活力、延长荷瘤裸鼠的生存周期,影响肿瘤组织中CDK2、CDK4、CDK6和cyclin D1的表达。结论:贝母素乙通过下调CDK2、CDK4、CDK6和cyclin D1的表达,引起SW480细胞的G1期阻滞,进而抑制人结肠腺癌细胞SW480增殖。

关键词： SW480细胞贝母素乙周期蛋白依赖性激酶细胞周期