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西黄丸抑制卵巢癌细胞线粒体能量代谢的效应及机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第1期30卷 70-76页

作者：颜显欣洪守亿马瑞瑞王艳秋布筠艺马民暨南大学中医学院广州510632

目的:研究西黄丸浸提液对卵巢癌SKOV3和HEY细胞线粒体能量代谢的影响,并探讨其作用机制。方法:体外培养卵巢癌SKOV3和HEY细胞,分别加入不同质量浓度(0、5、10、15、20 g·L^(-1))西黄丸浸提液干预SKOV3和HEY细胞,采用噻唑蓝(MTT)比色法... 详细信息

目的:研究西黄丸浸提液对卵巢癌SKOV3和HEY细胞线粒体能量代谢的影响,并探讨其作用机制。方法:体外培养卵巢癌SKOV3和HEY细胞,分别加入不同质量浓度(0、5、10、15、20 g·L^(-1))西黄丸浸提液干预SKOV3和HEY细胞,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测西黄丸浸提液对SKOV3和HEY细胞存活率的影响;用蛋白质量检测SKOV3和HEY细胞三磷酸腺苷(ATP)浓度;流式细胞术检测SKOV3和HEY细胞活性氧(ROS)含量;用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测西黄丸浸提液对SKOV3和HEY细胞线粒体相关蛋白过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(PGC1α)、线粒体转录因子A(TFAM)、线粒体外膜转位酶20(TOMM20)及印迹抑癌基因Ras同源家族Ⅰ(ARHⅠ)的表达;Mito-Tracker Green染色观察SKOV3和HEY细胞线粒体形态学变化。结果:与空白组比较,不同浓度西黄丸浸提液给药24、48 h能明显抑制卵巢癌SKOV3和HEY细胞存活率(P<0.05,P<0.01),呈浓度依赖关系。与空白组比较,西黄丸浸提液组(10、15、20 g·L^(-1))的ATP水平明显降低(P<0.05,P<0.01);与西黄丸浸提液组(10、15 g·L^(-1))比较,西黄丸组(20 g·L^(-1))ATP浓度明显降低(P<0.05)。与空白组比较,西黄丸浸提液组(10、15、20 g·L^(-1))SKOV3和HEY细胞内ROS含量明显增加(P<0.05,P<0.01),且呈浓度依赖性;与西黄丸浸提液组(10 g·L^(-1))比较,西黄丸浸提液组(20 g·L^(-1))ROS含量明显增加(P<0.05)。与空白组比较,西黄丸浸提液组(10、15、20 g·L^(-1))SKOV3和HEY细胞的ARHⅠ蛋白表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01),且随着西黄丸浸提液浓度升高,ARHⅠ蛋白表达逐渐升高;与西黄丸组(10、15 g·L^(-1))比较,西黄丸浸提液组(20 g·L^(-1))ARHⅠ蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与空白组比较,西黄丸浸提液组(10、15、20 g·L^(-1))SKOV3和HEY细胞的PGC1α、TFAM、TOMM20蛋白表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01),且呈浓度依赖性;与西黄丸浸提液组(10、15 g·L^(-1))比较,西黄丸浸提液组(20 g·L^(-1))HEY细胞TFAM、TOMM20蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。与空白组比较,西黄丸浸提液组(20 g·L^(-1))SKOV3和HEY细胞Mito-Tracker荧光强度明显降低(P<0.05)。结论:西黄丸能破坏卵巢癌SKOV3和HEY细胞线粒体功能并降低细胞能量代谢,从而抑制SKOV3和HEY细胞增殖,其机制可能是通过上调ARHⅠ,抑制PGC1α/TFAM信号轴实现的。

关键词：西黄丸印迹抑癌基因Ras同源家族Ⅰ(ARHⅠ) 卵巢癌线粒体能量代谢

补肾活血类中药调控Wnt信号通路防治老年痴呆的研究进展

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中国现代应用药学 2024年第17期 2438-2446页

作者：廖可欣董琦侯吉华肖移生江西中医药大学中医学院

Wnt信号通路有Wnt/β-catenin经典通路、Wnt/PCP与Wnt/Ca2+非经典通路，其可调控神经元生长、发育、成熟、分化和增殖等多个过程，与老年痴呆的发生、发展及防治均有着密切联系。目前已有许多关于中药调控Wnt信号通路防治老年痴呆的研... 详细信息

Wnt信号通路有Wnt/β-catenin经典通路、Wnt/PCP与Wnt/Ca2+非经典通路，其可调控神经元生长、发育、成熟、分化和增殖等多个过程，与老年痴呆的发生、发展及防治均有着密切联系。目前已有许多关于中药调控Wnt信号通路防治老年痴呆的研究报道，但尚缺乏总结性分析。作者综合了近年来国内外文献关于淫羊藿、人参、姜黄、西红花、丹参、琥珀等有效成分及黑逍遥散、复方地黄、大补元煎、黄精丸、养血清脑颗粒等中药复方防治阿尔茨海默病、脑血管性痴呆等老年痴呆的研究成果，分析发现这些中药单体或是中药复方均具补肾或活血功效，且均可激活老年痴呆动物脑内Wnt相关信号通路，通过多靶点防治阿尔茨海默病、脑血管性痴呆。因此，调控中枢神经Wnt信号通路可作为当前中药抗老年痴呆的重要策略之一，其研发可围绕具有此类功效的中药或复方进行重点筛选。

关键词：中药 Wnt信号通路老年痴呆研究进展

中药治疗慢性肾炎合并脂代谢紊乱的临床应用和作用机制研究进展

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中草药 2024年第19期55卷 6820-6830页

作者：马东云张露颜培正范晓璇江明翰张庆祥山东中医药大学中医学院

慢性肾炎是由多种原因导致的肾功能不全性疾病，临床发现，本病多伴有脂代谢紊乱，而脂代谢紊乱又会加重肾炎的发生。慢性肾炎合并脂代谢紊乱的病位在肾，与脾肺肝相关，基本病机为本虚标实，治疗上注重健脾益肾、活血祛湿，又可根据其... 详细信息

慢性肾炎是由多种原因导致的肾功能不全性疾病，临床发现，本病多伴有脂代谢紊乱，而脂代谢紊乱又会加重肾炎的发生。慢性肾炎合并脂代谢紊乱的病位在肾，与脾肺肝相关，基本病机为本虚标实，治疗上注重健脾益肾、活血祛湿，又可根据其病机特点，分别予以养肝、调肺之法。中医学注重整体观念和辨证论治，结合望闻问切四诊合参，采用个体化处方，临床疗效显著。将对近10年慢性肾炎合并脂代谢紊乱的病因病机、中药治疗以及作用机制进行总结，以期为中医药治疗本病提供优选思路，进而更好的服务于临床。

关键词：慢性肾炎脂代谢紊乱临床应用机制研究黄芪茯苓

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外泌体与肺纤维化研究进展

中国生物工程杂志 2024年第4期44卷 67-75页

作者：叶灏鑫王晓旭李明霏王宇河北大学中医学院保定071002

肺纤维化是一种由肺泡外基质蛋白过度沉积导致的肺部不可逆的结构和功能改变的肺部疾病,表现为纤维化重构和肺泡破坏。外泌体作为一种细胞外囊泡,可通过递送特定细胞类型产生的功能性核酸和蛋白质来介导细胞间通讯。近年来的研究发现,... 详细信息

肺纤维化是一种由肺泡外基质蛋白过度沉积导致的肺部不可逆的结构和功能改变的肺部疾病,表现为纤维化重构和肺泡破坏。外泌体作为一种细胞外囊泡,可通过递送特定细胞类型产生的功能性核酸和蛋白质来介导细胞间通讯。近年来的研究发现,外泌体在肺纤维化的诊断和治疗中具有重要作用,被认为是一种潜在的生物治疗方法和药物递送载体。研究外泌体在肺纤维化发生发展中的作用,以期为肺纤维化的外泌体治疗研究提供新的思路。

关键词：外泌体肺纤维化细胞外囊泡药物递送载体诊断和治疗

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下田菊叶片转录组测序及生物信息学分析

分子植物育种 2024年

作者：夏铭泽唐慧琳张欣伟李彦潍坊医学院药学院潍坊医学院中医学院

为全面挖掘下田菊(Adenostemma lavenia)转录组信息，本研究采用二代高通量测序技术对下田菊叶片开展转录组测序，并进行生物信息学分析。结果表明，下田菊叶片转录组共获得131 591个Transcripts和75 944个Unigene，总长度分别为96 550 ... 详细信息

为全面挖掘下田菊(Adenostemma lavenia)转录组信息，本研究采用二代高通量测序技术对下田菊叶片开展转录组测序，并进行生物信息学分析。结果表明，下田菊叶片转录组共获得131 591个Transcripts和75 944个Unigene，总长度分别为96 550 108 bp和45 780 071 bp。与多个数据库进行比对，发现共75 944个基因获得注释，其中含40 352个(53.13%) NR数据库注释信息；39 171个(51.58%) GO数据库注释信息；23 668个(31.17%) KOG数据库Unigene功能分类信息；4 037个(5.32%) KEGG数据库代谢通路注释信息。对其SSR和SNP进行检测，发现共有4 185个SSR位点，其中优势基元为三核苷酸重复，长度大于20 bp的SSR有1 127条，表明其SSR具有较高的多态性潜能；在SNP中，共有9 278个位点，其中颠换类型明显低于转换类型。本研究可为下田菊EST-SSR分子标记的开发和药用活性成分的生物合成途径提供理论依据，为其植物资源开发与利用提供科学依据。

关键词：下田菊转录组功能基因注释 SSR SNP

DSS/DMH复合法诱导Wistar大鼠结肠炎癌转化模型的建立及评价

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中华中医药杂志 2024年第4期39卷 1973-1978页

作者：张海霞赵慧巧张萌靳国印王莹卢年华张永鹏李俊珂河北北方学院中医学院张家口075000

目的:基于葡聚糖硫酸钠(DSS)/二甲基肼(DMH)联用,建立Wistar大鼠结肠炎癌转化模型并进行模型评价。方法:取40只Wistar大鼠,按每只30 mL/d剂量给予4%DSS饮用3 d,建立溃疡性结肠炎(UC)炎症期模型;随机取UC炎症期模型大鼠34只,继续给予DSS... 详细信息

目的:基于葡聚糖硫酸钠(DSS)/二甲基肼(DMH)联用,建立Wistar大鼠结肠炎癌转化模型并进行模型评价。方法:取40只Wistar大鼠,按每只30 mL/d剂量给予4%DSS饮用3 d,建立溃疡性结肠炎(UC)炎症期模型;随机取UC炎症期模型大鼠34只,继续给予DSS至第7天(死亡8只),建立UC活动期模型;随机取UC活动期模型大鼠20只,按每周25 mg/kg剂量颈部注射DMH 17周(死亡4只),建立UC相关性结肠癌(UC-CAC)转化期模型;随机取UC-CAC转化期模型大鼠10只,继续给予DMH至第24周(死亡4只),建立CAC模型,另设正常组和PBS对照组,每组6只。对结肠炎癌转化各时期大鼠和瘤体特征观察,检测结肠长度、壁厚、湿质量指数,对DAI和CMDI评分进行评价,检测各时期模型CRP、ESR、HGB水平,Masson染色观察结肠病理变化,免疫组化检测结肠瘤体MLH1、PMS2、MSH2、MSH6蛋白表达。结果:UC炎症期大鼠表现稀血便,UC活动期大鼠腹泻与血便量多次频;UC-CAC转化期大鼠结肠成瘤率66.67%(4/6),CAC期大鼠结肠成瘤率100.00%(6/6);CAC期大鼠在第11~18周体质量进入代偿期,之后进入失代偿期;各组比较,CAC期结肠长度最低,湿质量指数和壁厚最高;DAI与CMDI评分分别在UC活动期和CAC期最高;在UC活动期CRP水平最高,ESR和HGB在CAC期分别达到最高和最低;UC炎症期可见结肠隐窝扭曲变形,UC活动期可见隐窝脓肿,组织溃烂,UC-CAC转化期表现为管状中高度分化腺瘤;CAC期表现为高分化锯齿状腺瘤;MLH1、PMS2、MSH2、MSH6蛋白检测均为阴性。结论:DSS/DMH复合法可成功建立UC炎症期、UC活动期、UC-CAC转化期和CAC期结肠炎癌转化模型,方法可靠,特异性强,与中医湿热瘀毒发为癌肿的中医病机较契合。

关键词： Wistar大鼠结肠炎炎癌转化葡聚糖硫酸钠/二甲基肼模型评价

乌梅丸对乳腺癌小鼠原位瘤微环境基因表达谱及免疫相关基因表达的影响

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中华中医药杂志 2024年第2期39卷 913-920页

作者：王萍李锦超任美玲吴紫葶杨海燕江西中医药大学中医学院南昌330004

目的:通过研究乌梅丸对乳腺癌小鼠原位瘤微环境基因表达谱及免疫相关基因表达的影响,探讨乌梅丸抑制乳腺癌的作用机制。方法:通过在小鼠第2对乳腺脂肪垫内注射4T1乳腺癌细胞构建乳腺癌小鼠模型。模型分为乌梅丸高(32.88 g/kg)、低(16.44... 详细信息

目的:通过研究乌梅丸对乳腺癌小鼠原位瘤微环境基因表达谱及免疫相关基因表达的影响,探讨乌梅丸抑制乳腺癌的作用机制。方法:通过在小鼠第2对乳腺脂肪垫内注射4T1乳腺癌细胞构建乳腺癌小鼠模型。模型分为乌梅丸高(32.88 g/kg)、低(16.44 g/kg)剂量组及阳性对照组(卡培他滨,359 mg/kg)、空白对照组,给予相应药物灌胃。通过观测小鼠原位乳腺癌的体积、瘤重、抑瘤率判断药物的抑瘤效应。通过基因表达谱芯片技术检测原位瘤微环境中基因表达谱的特征,并采用生物信息学方法分析基因表达谱的GO和KEGG通路特点;比较药物观察组(即抑瘤效果较好的乌梅丸低剂量组)乌梅丸和阳性对照组(卡培他滨)在基因表达影响方面的差异。采用RT-PCR、免疫组织化学和蛋白质印迹方法分析了乌梅丸所影响的免疫相关基因的表达情况。结果:乌梅丸高、低剂量组在瘤体积、瘤重和抑瘤率方面虽然效果不如阳性对照组,但与空白对照组比较仍显示具有一定的抑瘤效果;乌梅丸低剂量组效果略优于乌梅丸高剂量组。乌梅丸干预后共有54条差异基因,其中上调基因30条,下调基因24条;卡培他滨干预后共有104条差异基因,其中上调基因54条,下调基因50条;两者只有1条差异基因相同。乌梅丸调控的基因涉及152个GO项,而卡培他滨只涉及9个GO项;乌梅丸涉及的KEGG通路3条,卡培他滨涉及1条。与空白对照组比较,乌梅丸干预后免疫相关基因Bmp4、Fzd9、Capn3、Fndc5、Sfpq mRNA和蛋白表达下降,但Slc15a3、Tnfsf13b、Il1a mRNA表达上升,而蛋白下降。结论:乌梅丸能一定程度上抑制乳腺癌的生长;乌梅丸对乳腺癌组织微环境中基因表达的影响,与西药卡培他滨完全不同,涉及更多的生物学过程、细胞组分、分子功能,调控更为广泛;乌梅丸能下调免疫相关基因Bmp4、Fzd9、Capn3、Fndc5、Sfpq的表达,对Slc15a3、Tnfsf13b、Il1a表达的影响还需进一步分析,乌梅丸对乳腺癌小鼠原位瘤微环境中基因表达的调控作用可能是其发挥抑瘤作用的机制之一。

关键词：乌梅丸乳腺癌微环境基因表达谱免疫功能调节机制生物信息学

黄精丸对学习记忆障碍小鼠海马神经元自噬的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年第16期30卷 19-26页

作者：廖可欣姜劼琳肖移生江西中医药大学中医学院南昌330004

目的:观察黄精丸(CHP)对D-半乳糖联合东莨菪碱所致学习记忆障碍小鼠海马神经自噬的影响,探讨其可能的作用机制。方法:将90只8周龄雄性昆明小鼠随机分为正常组、模型组、多奈哌齐组、CHP低、中、高剂量组。除正常组外,前3周各组小鼠每日... 详细信息

目的:观察黄精丸(CHP)对D-半乳糖联合东莨菪碱所致学习记忆障碍小鼠海马神经自噬的影响,探讨其可能的作用机制。方法:将90只8周龄雄性昆明小鼠随机分为正常组、模型组、多奈哌齐组、CHP低、中、高剂量组。除正常组外,前3周各组小鼠每日颈背部皮下注射1次0.14 g·kg^(-1)D-半乳糖、后2周改为每日腹腔注射1次2 mg·kg^(-1)东莨菪碱复制学习记忆障碍小鼠以模拟阿尔茨海默病(AD)。造模开始1周后,多奈哌齐组给予0.65 mg·kg^(-1)多奈哌齐,CHP低、中、高剂量组分别给予1.25、2.5、7.5 g·kg^(-1)CHP提取液,模型组给予生理盐水0.5 mL,每天灌胃1次,连续4周。以水迷宫装置观察各小鼠行为学改变,尼氏染色分析各小鼠海马形态学变化,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各小鼠海马组织哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、自噬效应蛋白-1(Beclin-1)及泛素结合蛋白p62(p62)的mRNA表达水平差异,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组小鼠海马组织mTOR、Beclin-1、微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)、微管相关蛋白1轻链3Ⅰ(LC3Ⅰ)、p62的蛋白表达水平差异,免疫组化探测各组小鼠海马神经元Beclin-1阳性表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠学习记忆障碍、痴呆症状明显,其海马结构紊乱、神经元数量减少(P<0.01),mTOR、Beclin-1的mRNA及蛋白表达水平均显著降低,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ显著降低,p62的mRNA及蛋白表达水平显著升高(P<0.01);与模型组比较,多奈哌齐组及CHP各组小鼠痴呆症状及学习记忆好转,海马神经结构紊乱有所改善、神经元数量增加(P<0.05,P<0.01),mTOR、Beclin-1的mRNA及蛋白表达水平均明显升高,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ明显升高,p62的mRNA及蛋白表达水平均明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论:CHP能促进海马神经元自噬发挥治疗AD的作用,其机制可能与激活mTOR信号通路有关。

关键词：黄精丸阿尔茨海默病学习记忆障碍自噬哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路

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中医药通过干预细胞自噬治疗肥胖的研究进展

中药药理与临床 2024年第1期40卷 106-112页

作者：旷昕杨铮吴地尧陈晓凡江西中医药大学中医学院南昌330004

超重和肥胖症在全世界流行,已成为严峻的公共卫生危机之一。现代医学研究已表明肥胖与自噬机制密切相关,通过调节自噬途径治疗肥胖已成为中医药研究的新热点。本文通过文献分析法,对干预细胞自噬治疗肥胖的中药化合物、中药方剂、中医... 详细信息

超重和肥胖症在全世界流行,已成为严峻的公共卫生危机之一。现代医学研究已表明肥胖与自噬机制密切相关,通过调节自噬途径治疗肥胖已成为中医药研究的新热点。本文通过文献分析法,对干预细胞自噬治疗肥胖的中药化合物、中药方剂、中医治疗手段展开综合性评述,并对相关自噬靶点、信号通路和作用机制进行综述,为治疗肥胖的中药活性成分挖掘和机制研究提供有益参考。

关键词：中医药自噬肥胖研究进展