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基于Wnt/β-catenin信号通路的健骨伸筋汤对膝骨关节炎患者的干预作用研究

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世界中医药 2024年第9期19卷 1252-1257页

作者：刘洪波靖春颖黎正卿刘彩凤张熙思蒲新伟林日亮海南医学院中医学院海口571199

目的:健骨伸筋汤通过Wnt蛋白/β-连环素(Wnt/β-catenin)信号通路对膝骨关节炎(KOA)干预效果的研究。方法:将48只雌性斯泼累格·多雷(SD)大鼠随机分成空白对照组、模型组、美洛昔康片组、抗骨增生片组及健骨伸筋汤中剂量、高剂量组,每组... 详细信息

目的:健骨伸筋汤通过Wnt蛋白/β-连环素(Wnt/β-catenin)信号通路对膝骨关节炎(KOA)干预效果的研究。方法:将48只雌性斯泼累格·多雷(SD)大鼠随机分成空白对照组、模型组、美洛昔康片组、抗骨增生片组及健骨伸筋汤中剂量、高剂量组,每组8只。除空白对照组外,其余大鼠均向关节腔注射木瓜蛋白酶进行KOA造模。造模成功后空白对照组与模型组予以正常饮食饮水,其余大鼠分别予以美洛昔康药液、抗骨增生药液及健骨伸筋汤药液灌胃,干预4周。观察大鼠行动程度、膝关节肿胀度;检测血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)炎症介质水平,观察关节软骨病理变化,检测软骨中的β-catenin和Wnt4mRNA表达水平。结果:IL-1β、IL-6和TNF-α的浓度比较,模型组高于空白对照组;美洛昔康组与抗骨增生组比较差异无统计学意义;与模型组比较,用药4组低于模型组;健骨中剂量组低于健骨高剂量组;与健骨中剂量组比较,美洛西康组和抗骨增生组略高于健骨中剂量组,差异无统计学意义;Wnt4与β-catenin的mRNA表达水平:Wnt4模型组表达水平提高,在各给药组水平有所降低;β-catenin的mRNA表达水平,模型组有所降低,在各给药组水平有所提高,健骨伸筋汤骨代谢调节有效。结论:健骨伸筋汤治疗KOA可能是通过Wnt/β-catenin信号通路来抑制炎症介质,调控信号通路内的蛋白来影响骨代谢。

关键词：健骨伸筋汤治疗 Wnt/β-catenin信号通路 β-连环素膝骨关节炎

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西黄丸抑制卵巢癌细胞线粒体能量代谢的效应及机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第1期30卷 70-76页

作者：颜显欣洪守亿马瑞瑞王艳秋布筠艺马民暨南大学中医学院广州510632

目的:研究西黄丸浸提液对卵巢癌SKOV3和HEY细胞线粒体能量代谢的影响,并探讨其作用机制。方法:体外培养卵巢癌SKOV3和HEY细胞,分别加入不同质量浓度(0、5、10、15、20 g·L^(-1))西黄丸浸提液干预SKOV3和HEY细胞,采用噻唑蓝(MTT)比色法... 详细信息

目的:研究西黄丸浸提液对卵巢癌SKOV3和HEY细胞线粒体能量代谢的影响,并探讨其作用机制。方法:体外培养卵巢癌SKOV3和HEY细胞,分别加入不同质量浓度(0、5、10、15、20 g·L^(-1))西黄丸浸提液干预SKOV3和HEY细胞,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测西黄丸浸提液对SKOV3和HEY细胞存活率的影响;用蛋白质量检测SKOV3和HEY细胞三磷酸腺苷(ATP)浓度;流式细胞术检测SKOV3和HEY细胞活性氧(ROS)含量;用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测西黄丸浸提液对SKOV3和HEY细胞线粒体相关蛋白过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(PGC1α)、线粒体转录因子A(TFAM)、线粒体外膜转位酶20(TOMM20)及印迹抑癌基因Ras同源家族Ⅰ(ARHⅠ)的表达;Mito-Tracker Green染色观察SKOV3和HEY细胞线粒体形态学变化。结果:与空白组比较,不同浓度西黄丸浸提液给药24、48 h能明显抑制卵巢癌SKOV3和HEY细胞存活率(P组比较,西黄丸浸提液组(10、15、20 g·L^(-1))的ATP水平明显降低(P组(10、15 g·L^(-1))比较,西黄丸组(20 g·L^(-1))ATP浓度明显降低(P组比较,西黄丸浸提液组(10、15、20 g·L^(-1))SKOV3和HEY细胞内ROS含量明显增加(P组(10 g·L^(-1))比较,西黄丸浸提液组(20 g·L^(-1))ROS含量明显增加(P组比较,西黄丸浸提液组(10、15、20 g·L^(-1))SKOV3和HEY细胞的ARHⅠ蛋白表达水平明显升高(P组(10、15 g·L^(-1))比较,西黄丸浸提液组(20 g·L^(-1))ARHⅠ蛋白表达水平明显升高(P组比较,西黄丸浸提液组(10、15、20 g·L^(-1))SKOV3和HEY细胞的PGC1α、TFAM、TOMM20蛋白表达水平明显降低(P组(10、15 g·L^(-1))比较,西黄丸浸提液组(20 g·L^(-1))HEY细胞TFAM、TOMM20蛋白表达水平明显降低(P组比较,西黄丸浸提液组(20 g·L^(-1))SKOV3和HEY细胞Mito-Tracker荧光强度明显降低(P<0.05)。结论:西黄丸能破坏卵巢癌SKOV3和HEY细胞线粒体功能并降低细胞能量代谢,从而抑制SKOV3和HEY细胞增殖,其机制可能是通过上调ARHⅠ,抑制PGC1α/TFAM信号轴实现的。

关键词：西黄丸印迹抑癌基因Ras同源家族Ⅰ(ARHⅠ) 卵巢癌线粒体能量代谢

DSS/DMH复合法诱导Wistar大鼠结肠炎癌转化模型的建立及评价

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中华中医药杂志 2024年第4期39卷 1973-1978页

作者：张海霞赵慧巧张萌靳国印王莹卢年华张永鹏李俊珂河北北方学院中医学院张家口075000

目的:基于葡聚糖硫酸钠(DSS)/二甲基肼(DMH)联用,建立Wistar大鼠结肠炎癌转化模型并进行模型评价。方法:取40只Wistar大鼠,按每只30 mL/d剂量给予4%DSS饮用3 d,建立溃疡性结肠炎(UC)炎症期模型;随机取UC炎症期模型大鼠34只,继续给予DSS... 详细信息

目的:基于葡聚糖硫酸钠(DSS)/二甲基肼(DMH)联用,建立Wistar大鼠结肠炎癌转化模型并进行模型评价。方法:取40只Wistar大鼠,按每只30 mL/d剂量给予4%DSS饮用3 d,建立溃疡性结肠炎(UC)炎症期模型;随机取UC炎症期模型大鼠34只,继续给予DSS至第7天(死亡8只),建立UC活动期模型;随机取UC活动期模型大鼠20只,按每周25 mg/kg剂量颈部注射DMH 17周(死亡4只),建立UC相关性结肠癌(UC-CAC)转化期模型;随机取UC-CAC转化期模型大鼠10只,继续给予DMH至第24周(死亡4只),建立CAC模型,另设正常组和PBS对照组,每组6只。对结肠炎癌转化各时期大鼠和瘤体特征观察,检测结肠长度、壁厚、湿质量指数,对DAI和CMDI评分进行评价,检测各时期模型CRP、ESR、HGB水平,Masson染色观察结肠病理变化,免疫组化检测结肠瘤体MLH1、PMS2、MSH2、MSH6蛋白表达。结果:UC炎症期大鼠表现稀血便,UC活动期大鼠腹泻与血便量多次频;UC-CAC转化期大鼠结肠成瘤率66.67%(4/6),CAC期大鼠结肠成瘤率100.00%(6/6);CAC期大鼠在第11~18周体质量进入代偿期,之后进入失代偿期;各组比较,CAC期结肠长度最低,湿质量指数和壁厚最高;DAI与CMDI评分分别在UC活动期和CAC期最高;在UC活动期CRP水平最高,ESR和HGB在CAC期分别达到最高和最低;UC炎症期可见结肠隐窝扭曲变形,UC活动期可见隐窝脓肿,组织溃烂,UC-CAC转化期表现为管状中高度分化腺瘤;CAC期表现为高分化锯齿状腺瘤;MLH1、PMS2、MSH2、MSH6蛋白检测均为阴性。结论:DSS/DMH复合法可成功建立UC炎症期、UC活动期、UC-CAC转化期和CAC期结肠炎癌转化模型,方法可靠,特异性强,与中医湿热瘀毒发为癌肿的中医病机较契合。

关键词： Wistar大鼠结肠炎炎癌转化葡聚糖硫酸钠/二甲基肼模型评价

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下田菊叶片转录组测序及生物信息学分析

分子植物育种 2024年

作者：夏铭泽唐慧琳张欣伟李彦潍坊医学院药学院潍坊医学院中医学院

为全面挖掘下田菊(Adenostemma lavenia)转录组信息，本研究采用二代高通量测序技术对下田菊叶片开展转录组测序，并进行生物信息学分析。结果表明，下田菊叶片转录组共获得131 591个Transcripts和75 944个Unigene，总长度分别为96 550 ... 详细信息

为全面挖掘下田菊(Adenostemma lavenia)转录组信息，本研究采用二代高通量测序技术对下田菊叶片开展转录组测序，并进行生物信息学分析。结果表明，下田菊叶片转录组共获得131 591个Transcripts和75 944个Unigene，总长度分别为96 550 108 bp和45 780 071 bp。与多个数据库进行比对，发现共75 944个基因获得注释，其中含40 352个(53.13%) NR数据库注释信息；39 171个(51.58%) GO数据库注释信息；23 668个(31.17%) KOG数据库Unigene功能分类信息；4 037个(5.32%) KEGG数据库代谢通路注释信息。对其SSR和SNP进行检测，发现共有4 185个SSR位点，其中优势基元为三核苷酸重复，长度大于20 bp的SSR有1 127条，表明其SSR具有较高的多态性潜能；在SNP中，共有9 278个位点，其中颠换类型明显低于转换类型。本研究可为下田菊EST-SSR分子标记的开发和药用活性成分的生物合成途径提供理论依据，为其植物资源开发与利用提供科学依据。

关键词：下田菊转录组功能基因注释 SSR SNP

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外泌体与肺纤维化研究进展

中国生物工程杂志 2024年第4期44卷 67-75页

作者：叶灏鑫王晓旭李明霏王宇河北大学中医学院保定071002

肺纤维化是一种由肺泡外基质蛋白过度沉积导致的肺部不可逆的结构和功能改变的肺部疾病,表现为纤维化重构和肺泡破坏。外泌体作为一种细胞外囊泡,可通过递送特定细胞类型产生的功能性核酸和蛋白质来介导细胞间通讯。近年来的研究发现,... 详细信息

肺纤维化是一种由肺泡外基质蛋白过度沉积导致的肺部不可逆的结构和功能改变的肺部疾病,表现为纤维化重构和肺泡破坏。外泌体作为一种细胞外囊泡,可通过递送特定细胞类型产生的功能性核酸和蛋白质来介导细胞间通讯。近年来的研究发现,外泌体在肺纤维化的诊断和治疗中具有重要作用,被认为是一种潜在的生物治疗方法和药物递送载体。研究外泌体在肺纤维化发生发展中的作用,以期为肺纤维化的外泌体治疗研究提供新的思路。

关键词：外泌体肺纤维化细胞外囊泡药物递送载体诊断和治疗

中医药治疗阿尔茨海默病随机对照试验结局指标的现状分析

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中国中药杂志 2024年第11期49卷 3113-3124页

作者：吴千言徐小港张清源黄晟赫章德林江西中医药大学中医学院江西南昌330004 江西中医药大学临床医学院江西南昌330004

该研究探析中医药治疗阿尔茨海默病随机对照试验(RCT)结局指标的现状,为建立该领域核心指标集提供参考依据。系统检索中国知网(CNKI)、万方(Wanfang)、维普(VIP)、中国生物医学文献服务系统(SinoMed)、EMbase、PubMed、Medline、Cochran... 详细信息

该研究探析中医药治疗阿尔茨海默病随机对照试验(RCT)结局指标的现状,为建立该领域核心指标集提供参考依据。系统检索中国知网(CNKI)、万方(Wanfang)、维普(VIP)、中国生物医学文献服务系统(SinoMed)、EMbase、PubMed、Medline、Cochrane Library,根据纳入、排除标准独立筛选文献并提取信息,采用Ro B 2.0工具进行偏倚风险评估。共纳入78篇RCTs,涉及患者6379例,累计结局指标122种。结局指标根据功能属性分为中医病证(3种,13次)、症状/体征(26种,196次)、理化检测(68种,149次)、生活质量(1种,2次)、远期预后(2种,2次)、经济学评估(0种)、安全性事件(21种,194次)、其他指标(1种,1次)7个领域。结果表明,中医药治疗阿尔茨海默病RCT的文献评估总体呈“有一定风险”,结局指标选择存在缺乏中医药特色、主次结局指标区分不显著、远期预后与经济学评估指标匮乏、安全性事件报告不规范等问题。建议未来研究者建立突出中医药特色的阿尔茨海默病核心指标集,继而提升临床试验的质量。

关键词：中医药阿尔茨海默病随机对照试验结局指标

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乌梅丸对乳腺癌小鼠原位瘤微环境基因表达谱及免疫相关基因表达的影响

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中华中医药杂志 2024年第2期39卷 913-920页

作者：王萍李锦超任美玲吴紫葶杨海燕江西中医药大学中医学院南昌330004

目的:通过研究乌梅丸对乳腺癌小鼠原位瘤微环境基因表达谱及免疫相关基因表达的影响,探讨乌梅丸抑制乳腺癌的作用机制。方法:通过在小鼠第2对乳腺脂肪垫内注射4T1乳腺癌细胞构建乳腺癌小鼠模型。模型分为乌梅丸高(32.88 g/kg)、低(16.44... 详细信息

目的:通过研究乌梅丸对乳腺癌小鼠原位瘤微环境基因表达谱及免疫相关基因表达的影响,探讨乌梅丸抑制乳腺癌的作用机制。方法:通过在小鼠第2对乳腺脂肪垫内注射4T1乳腺癌细胞构建乳腺癌小鼠模型。模型分为乌梅丸高(32.88 g/kg)、低(16.44 g/kg)剂量组及阳性对照组(卡培他滨,359 mg/kg)、空白对照组,给予相应药物灌胃。通过观测小鼠原位乳腺癌的体积、瘤重、抑瘤率判断药物的抑瘤效应。通过基因表达谱芯片技术检测原位瘤微环境中基因表达谱的特征,并采用生物信息学方法分析基因表达谱的GO和KEGG通路特点;比较药物观察组(即抑瘤效果较好的乌梅丸低剂量组)乌梅丸和阳性对照组(卡培他滨)在基因表达影响方面的差异。采用RT-PCR、免疫组织化学和蛋白质印迹方法分析了乌梅丸所影响的免疫相关基因的表达情况。结果:乌梅丸高、低剂量组在瘤体积、瘤重和抑瘤率方面虽然效果不如阳性对照组,但与空白对照组比较仍显示具有一定的抑瘤效果;乌梅丸低剂量组效果略优于乌梅丸高剂量组。乌梅丸干预后共有54条差异基因,其中上调基因30条,下调基因24条;卡培他滨干预后共有104条差异基因,其中上调基因54条,下调基因50条;两者只有1条差异基因相同。乌梅丸调控的基因涉及152个GO项,而卡培他滨只涉及9个GO项;乌梅丸涉及的KEGG通路3条,卡培他滨涉及1条。与空白对照组比较,乌梅丸干预后免疫相关基因Bmp4、Fzd9、Capn3、Fndc5、Sfpq mRNA和蛋白表达下降,但Slc15a3、Tnfsf13b、Il1a mRNA表达上升,而蛋白下降。结论:乌梅丸能一定程度上抑制乳腺癌的生长;乌梅丸对乳腺癌组织微环境中基因表达的影响,与西药卡培他滨完全不同,涉及更多的生物学过程、细胞组分、分子功能,调控更为广泛;乌梅丸能下调免疫相关基因Bmp4、Fzd9、Capn3、Fndc5、Sfpq的表达,对Slc15a3、Tnfsf13b、Il1a表达的影响还需进一步分析,乌梅丸对乳腺癌小鼠原位瘤微环境中基因表达的调控作用可能是其发挥抑瘤作用的机制之一。

关键词：乌梅丸乳腺癌微环境基因表达谱免疫功能调节机制生物信息学

黄精丸对学习记忆障碍小鼠海马神经元自噬的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年第16期30卷 19-26页

作者：廖可欣姜劼琳肖移生江西中医药大学中医学院南昌330004

目的:观察黄精丸(CHP)对D-半乳糖联合东莨菪碱所致学习记忆障碍小鼠海马神经自噬的影响,探讨其可能的作用机制。方法:将90只8周龄雄性昆明小鼠随机分为正常组、模型组、多奈哌齐组、CHP低、中、高剂量组。除正常组外,前3周各组小鼠每日... 详细信息

目的:观察黄精丸(CHP)对D-半乳糖联合东莨菪碱所致学习记忆障碍小鼠海马神经自噬的影响,探讨其可能的作用机制。方法:将90只8周龄雄性昆明小鼠随机分为正常组、模型组、多奈哌齐组、CHP低、中、高剂量组。除正常组外,前3周各组小鼠每日颈背部皮下注射1次0.14 g·kg^(-1)D-半乳糖、后2周改为每日腹腔注射1次2 mg·kg^(-1)东莨菪碱复制学习记忆障碍小鼠以模拟阿尔茨海默病(AD)。造模开始1周后,多奈哌齐组给予0.65 mg·kg^(-1)多奈哌齐,CHP低、中、高剂量组分别给予1.25、2.5、7.5 g·kg^(-1)CHP提取液,模型组给予生理盐水0.5 mL,每天灌胃1次,连续4周。以水迷宫装置观察各小鼠行为学改变,尼氏染色分析各小鼠海马形态学变化,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各小鼠海马组织哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、自噬效应蛋白-1(Beclin-1)及泛素结合蛋白p62(p62)的mRNA表达水平差异,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组小鼠海马组织mTOR、Beclin-1、微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)、微管相关蛋白1轻链3Ⅰ(LC3Ⅰ)、p62的蛋白表达水平差异,免疫组化探测各组小鼠海马神经元Beclin-1阳性表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠学习记忆障碍、痴呆症状明显,其海马结构紊乱、神经元数量减少(P组比较,多奈哌齐组及CHP各组小鼠痴呆症状及学习记忆好转,海马神经结构紊乱有所改善、神经元数量增加(P<0.05,P<0.01),mTOR、Beclin-1的mRNA及蛋白表达水平均明显升高,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ明显升高,p62的mRNA及蛋白表达水平均明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论:CHP能促进海马神经元自噬发挥治疗AD的作用,其机制可能与激活mTOR信号通路有关。

关键词：黄精丸阿尔茨海默病学习记忆障碍自噬哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路

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中医药通过干预细胞自噬治疗肥胖的研究进展

中药药理与临床 2024年第1期40卷 106-112页

作者：旷昕杨铮吴地尧陈晓凡江西中医药大学中医学院南昌330004

超重和肥胖症在全世界流行,已成为严峻的公共卫生危机之一。现代医学研究已表明肥胖与自噬机制密切相关,通过调节自噬途径治疗肥胖已成为中医药研究的新热点。本文通过文献分析法,对干预细胞自噬治疗肥胖的中药化合物、中药方剂、中医... 详细信息

超重和肥胖症在全世界流行,已成为严峻的公共卫生危机之一。现代医学研究已表明肥胖与自噬机制密切相关,通过调节自噬途径治疗肥胖已成为中医药研究的新热点。本文通过文献分析法,对干预细胞自噬治疗肥胖的中药化合物、中药方剂、中医治疗手段展开综合性评述,并对相关自噬靶点、信号通路和作用机制进行综述,为治疗肥胖的中药活性成分挖掘和机制研究提供有益参考。

关键词：中医药自噬肥胖研究进展