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4种藏药提取物与抗生素对产气荚膜梭菌生物被膜的影响

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中国兽医学报 2024年第4期44卷 766-773页

作者：罗润波蔡重振黄家旗吴丹郭晓庆白吉格桑卓玛边巴央拉苏中华索朗斯珠西藏农牧学院动物科学学院西藏林芝860000 农业农村部西藏包虫病防治重点实验室西藏林芝860000 西藏自治区动物疫病预防控制中心畜牧总站西藏拉萨850000

采用微量肉汤稀释法测定3种方法提取的4种藏药提取物及12种抗生素对(Clostridium perfringens,C.perfringens)的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC),棋盘法检测藏药提取物与抗生素的联合抑菌效果,结晶紫染色法测定20... 详细信息

采用微量肉汤稀释法测定3种方法提取的4种藏药提取物及12种抗生素对(Clostridium perfringens,C.perfringens)的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC),棋盘法检测藏药提取物与抗生素的联合抑菌效果,结晶紫染色法测定20株牦牛源产气荚膜梭菌生物被膜(biofilm,BF)成膜能力,并检测藏药提取物与抗生素单用及联合使用对BF的抑制效果。结果显示:水提诃子对45.0%的C.perfringens的MIC≤0.80g/L;波棱瓜子75%乙醇提取物及马兜铃甲醇提取物对20株C.perfringens的MIC均≤0.40g/L;强力霉素和氨苄西林对19株C.perfringens的MIC≤0.25mg/L,万古霉素的MIC均≤0.50mg/L;诃子75%乙醇提取物与庆大霉素联用抑菌效果较好,对70.0%的C.perfringens产生协同作用;20株产气荚膜梭菌均具有BF成膜能力,55.0%的菌株呈强成膜能力;被检抗生素中多黏菌素B对BF的抑制作用最强,在1/4MIC处有强抑制效果;被检藏药提取物中马兜铃甲醇提取物与诃子75%乙醇提取物在1/2MIC处对BF具有强抑制效果;庆大霉素与诃子75%乙醇提取物联用及多黏菌素B与马兜铃甲醇提取物联用在两者均为1/4MIC时对BF仍有强抑制效果。结果表明,4种藏药提取物对C.perfringens具有抑菌效果,对其BF的形成具有抑制作用,与抗生素联用能增强抑制效果,需进一步对藏药抑菌机制进行研究。

关键词：产气荚膜梭菌藏药 MIC 药敏试验 BF

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人体寄生虫的分类阶元

中国血吸虫病防治杂志 2022年第4期34卷 420-428页

作者：贾铁武汪伟周艺彪周杰梅仲秋李石柱中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所(国家热带病研究中心)、国家卫生健康委员会寄生虫病原与媒介生物学重点实验室、WHO热带病合作中心、国家级热带病国际联合研究中心上海200025 国家卫生健康委员会寄生虫病预防与控制技术重点实验室、江苏省寄生虫与媒介控制技术重点实验室、江苏省血吸虫病防治研究所江苏无锡214064 复旦大学公共卫生学院流行病学教研室、公共卫生安全教育部重点实验室、热带病学研究中心湖南省血吸虫病防治所

生物学分类可反映过去和现在种群间的进化关系。传统的人体寄生虫分类鉴定主要基于某些重要形态学特征,故在形态学特征相似的近缘物种分类中具有较大局限性。近年来分子生物学技术的发展,尤其是核糖体、线粒体基因等分子标记的有效应用... 详细信息

生物学分类可反映过去和现在种群间的进化关系。传统的人体寄生虫分类鉴定主要基于某些重要形态学特征,故在形态学特征相似的近缘物种分类中具有较大局限性。近年来分子生物学技术的发展,尤其是核糖体、线粒体基因等分子标记的有效应用和测序技术的快速发展,极大促进了人体寄生虫分子分类学的发展。国际上有关人体寄生虫分类也在不断修订和完善。本文对人体寄生原虫、吸虫、绦虫和线虫的分类阶元进行了梳理,旨在为研究寄生虫分子系统学和遗传进化提供参考。

关键词：人体寄生虫原虫吸虫绦虫线虫分类阶元

基于时空多成分模型的中缅边境地区景洪市登革热流行特征分析

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热带病与寄生虫学 2024年第2期22卷 83-88页

作者：唐烨榕周红宁李菁华肖建鹏云南省虫媒传染病防控关键技术创新团队云南省虫媒传染病防控研究重点实验室云南省热带传染病国际联合实验室云南省寄生虫病防治所云南普洱665000 中山大学公共卫生学院中山大学全球卫生研究中心广东省疾病预防控制中心广东省公共卫生研究院

目的了解中缅边境地区景洪市2019年登革热时空分布特征及传播影响因素。方法收集中缅边境地区景洪市2019年登革热本地病例逐日发病数,将人口密度、人均GDP、日平均气温、日平均相对湿度和日照时数等因素作为协变量,构建基于Power-law算... 详细信息

目的了解中缅边境地区景洪市2019年登革热时空分布特征及传播影响因素。方法收集中缅边境地区景洪市2019年登革热本地病例逐日发病数,将人口密度、人均GDP、日平均气温、日平均相对湿度和日照时数等因素作为协变量,构建基于Power-law算法的时空多成分模型,通过赤池信息量(Akaike information criterion,AIC)来评价模型的拟合效果。结果中缅边境地区景洪市2019年累计报告3303例登革热本地病例,发病率为763.44/10万。将人均GDP纳入时间自相关成分,同时将人口密度、日平均气温、日平均最高气温和日平均相对湿度纳入局部特性成分的时空多成分模型的拟合效果最优(AIC=2317),此时时间自相关成分为0.2151[95%CI:(0.0812,0.5702)]、空间流行成分为0.0004[95%CI:(0.0002,0.0010)]、局部特性成分为3.0152[95%CI:(1.6507,5.5078)]。协变量日平均相对湿度、人口密度、人均GDP、日平均气温、日平均最高气温的作用强度依次为2.8159[95%CI:(0.0216,367.1685)]、1.8227[95%CI:(1.4976,2.2183)]、1.2088[95%CI:(1.0577,1.3816)]、0.3561[95%CI:(0.0119,10.6739)]、0.3104[95%CI:(0.0036,126.5482)]。对发病数>20例的区域分析发现,允景洪街道、西双版纳旅游度假区和景洪工业园区时间自相关成分影响较大,嘎洒镇、勐龙镇和勐罕镇局部特性成分影响较大。结论景洪市不同区域登革热时空构成存在差异性,具有不同的时空传播特征。人均GDP会扩大前期疫情对后期疫情传播的影响,人口密度、日平均气温、日平均最高气温和日平均相对湿度则会影响研究区域登革热本地风险水平。

关键词：登革热中缅边境地区景洪市时空多成分模型

重组日本血吸虫虫卵核糖核酸酶SjCP1412体外抑制肝星状细胞LX-2活化作用的研究

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中国血吸虫病防治杂志 2022年第6期34卷 566-579页

作者：李其凤宋丽君杨莹莹董盼盼梅丛进李溢鑫张键锋熊春蓉余传信杨坤南京医科大学公共卫生学院江苏南京211166 江苏省血吸虫病防治研究所、国家卫生健康委员会寄生虫病预防与控制技术重点实验室、江苏省寄生虫与媒介控制技术重点实验室江苏无锡214064

目的观察重组日本血吸虫虫卵核糖核酸酶SjCP1412(r SjCP1412)对体外培养的人肝星状细胞LX-2增殖、细胞周期、凋亡及活化的作用,并探索其潜在机制。方法在大肠埃希菌BL21中采用原核表达方式表达rSjCP1412蛋白,并通过Ni-NTA亲和层析法及... 详细信息

目的观察重组日本血吸虫虫卵核糖核酸酶SjCP1412(r SjCP1412)对体外培养的人肝星状细胞LX-2增殖、细胞周期、凋亡及活化的作用,并探索其潜在机制。方法在大肠埃希菌BL21中采用原核表达方式表达rSjCP1412蛋白,并通过Ni-NTA亲和层析法及尿素梯度复性透析制备高纯度可溶性rSjCP1412蛋白。使用12.5、25.0、50.0μg rSjCP1412蛋白分别于37℃酶解酵母RNA 2、3、4 h,酶解产物采用1.5%琼脂糖凝胶电泳分析,观察rSjCP1412蛋白RNA酶活性。采用CCK-8法检测经不同浓度rSjCP1412蛋白刺激48 h后LX-2细胞增殖,采用Annexin V-FITC/PI细胞凋亡双染法检测经不同浓度rSjCP1412蛋白刺激48 h后LX-2细胞凋亡,采用DAPI染色法检测经不同浓度rSjCP1412蛋白刺激48 h后LX-2细胞周期中G0/G1、S、G2/M期细胞百分比,采用荧光实时定量PCR(qPCR)检测经不同浓度rSjCP1412蛋白刺激48 h后LX-2细胞中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA表达水平;采用Western blotting法检测经rSjCP1412蛋白刺激LX-2细胞48 h后Ⅰ型胶原、α-SMA和Smad4/7蛋白表达水平,以明确LX-2细胞活化。以上实验均设可溶性虫卵抗原(SEA)阳性对照和正常组(不含rSjCP1412蛋白的PBS)。采用rSjCP1412蛋白单独刺激或与转化生长因子-β1(TGF-β1)共同刺激LX-2细胞48 h后,采用Western blotting检测LX-2细胞中Ⅰ型胶原、α-SMA和Smad4蛋白表达水平,分析r SjCP1412作用于LX-2细胞的信号通路。结果成功表达并制备了高纯度可溶性的rSjCP1412蛋白,且rSjCP1412蛋白具有RNA酶活性。与正常组相比,12.5、25.0、50.0μg/mL r SjCP1412和SEA处理48 h后,LX-2细胞存活率均显著下降(F=22.417、20.448,P均<0.05);12.5、25.0、50.0μg/mL r SjCP1412蛋白处理48 h后,LX-2细胞凋亡率显著增加(F=11.350,P<0.05);12.5、25.0、50.0μg/mL rSjCP1412蛋白处理48 h后,可导致LX-2细胞G0/G1期阻滞(F=20.710,P<0.05)。12.5、25.0、50.0μg/mL rSjCP1412蛋白处理可导致LX-2细胞中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和α-SMA m RNA表达水平均显著下降(F=11.340、456.600、23.100,P均<0.05)。rSjCP1412与SEA均可导致LX-2细胞中Ⅰ型胶原、α-SMA和Smad4蛋白表达水平下调,活化水平下降(F=1302.000、49.750、52.420,P均<0.05)。此外,rSjCP1412蛋白抑制TGF-β1激活的LX-2细胞中Ⅰ型胶原、α-SMA和Smad4蛋白表达水平(F=66.290、31.300、27.010,P均<0.05)。结论SjCP1412在体外能诱导肝星状细胞LX-2凋亡,对LX-2细胞增殖、细胞周期及活化均具有一定抑制作用,其作用机制与下调Smad4信号分子表达水平相关。

关键词：日本血吸虫核糖核酸酶 SjCP1412 肝星状细胞 Smad4信号通路

白纹伊蚊不同发育阶段体内菌群结构及多样性分析

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中国血吸虫病防治杂志 2022年第5期34卷 475-483页

作者：赵永俏夏骜张梅花李菊林朱国鼎唐建霞南京医科大学公共卫生学院江苏南京211166 国家卫生健康委员会寄生虫病预防与控制技术重点实验室、江苏省寄生虫与媒介控制技术重点实验室、江苏省血吸虫病防治研究所江苏无锡214064

目的了解实验室品系白纹伊蚊不同发育阶段体内及幼虫生存水体中菌群多样性及其构成。方法收集实验室品系白纹伊蚊幼虫生存水体及不同发育阶段伊蚊,通过Illumina Miseq二代高通量测序技术对菌群16S核糖体RNA(16S ribosomal RNA,16S rR... 详细信息

目的了解实验室品系白纹伊蚊不同发育阶段体内及幼虫生存水体中菌群多样性及其构成。方法收集实验室品系白纹伊蚊幼虫生存水体及不同发育阶段伊蚊,通过Illumina Miseq二代高通量测序技术对菌群16S核糖体RNA(16S ribosomal RNA,16S rRNA)基因V3和V4区进行测序。采用alpha多样性指数分析白纹伊蚊不同发育阶段菌群丰度和多样性,采用主成分分析对不同发育阶段菌群结构进行差异分析,采用菌群构成柱状图和Venn图表示白纹伊蚊不同发育阶段菌群组成结构和相对丰度。结果白纹伊蚊幼虫生存水体及各个发育阶段共检测到16个门、30个纲、72个目、129个科和224个属细菌。多样性指数显示,白纹伊蚊幼虫期菌群多样性最高(Chao指数为125.20±30.48、Shannon指数为2.04±0.39),与其生存水体中的菌群多样性(Chao指数为118.52±15.07、Shannon指数为2.15±0.30)相似(t=0.35、-0.41,P均> 0.05);雌性成蚊体内菌群丰度和均匀度(Chao指数为42.50±3.54、Shannon指数为1.25±1.67)均高于雄蚊(Chao指数为18.50±2.13,Shannon指数为0.50±0.05)(t=8.23、6.00,P均所共有,其中蛹期以变形菌门居多,占90.36%;成蚊期以拟杆菌门居多,其在雌蚊和雄蚊体内菌群中分别占46.01%和86.11%;放线菌门是幼虫期菌群的重要组成部分,占32.10%。在属水平上,白纹伊蚊各发育阶段共同优势菌属为伊丽莎白菌属和拉恩氏菌属;其中拉恩氏菌属细菌是蛹期的主要组成部分,占87.56%;伊丽莎白菌属细菌是成蚊期的主要组成部分,在雌蚊和雄蚊体内分别占46.01%和86.11%;幼虫中微杆菌属细菌占比最高,为12.11%。在种水平上,代尔夫特菌属、伊丽莎白菌属、罗姆布茨菌、沙雷氏菌属、拉恩菌属、肠球菌属、微杆菌属等7种菌属细菌为白纹伊蚊各发育阶段所共有。在白纹伊蚊幼虫期及其生存水体中的共有菌属中,土壤杆菌属和鞘氨醇杆菌属细菌占比最高,分别占17.54%和13.93%。结论白纹伊蚊不同发育阶段菌群构成存在差异,但在门水平上保持了相似的菌群多样性,幼虫期体内菌群多样性与其生存水体中的菌群多样性相似。

关键词：白纹伊蚊幼虫蛹成蚊菌群多样性 16S核糖体RNA

尿液中外源日本血吸虫小分子DNA片段提取方法的建立与评价

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中国血吸虫病防治杂志 2023年第1期35卷 15-21页

作者：张乔乔赵松叶钰滢毕念念王鑫瑶张键锋李伟杨坤江苏省血吸虫病防治研究所、国家卫生健康委员会寄生虫病预防与控制技术重点实验室、江苏省寄生虫与媒介控制技术重点实验室江苏无锡214064 南京医科大学全球健康中心江苏南京211166

目的建立尿液中外源添加的日本血吸虫小分子DNA片段提取方法,评价不同方法处理尿液后的提取效果。方法以日本血吸虫SjG28基因片段作为靶序列,通过PCR扩增靶序列上的81 bp小分子DNA片段,经测序鉴定后作为拟添加到尿液样本中的外源小分子... 详细信息

目的建立尿液中外源添加的日本血吸虫小分子DNA片段提取方法,评价不同方法处理尿液后的提取效果。方法以日本血吸虫SjG28基因片段作为靶序列,通过PCR扩增靶序列上的81 bp小分子DNA片段,经测序鉴定后作为拟添加到尿液样本中的外源小分子DNA片段。以SjG28为靶基因设计引物及探针,建立实时荧光定量PCR(qPCR)方法;将外源小分子DNA片段以10为梯度倍比稀释后进行扩增,评价该方法的敏感性;以日本血吸虫、曼氏血吸虫、埃及血吸虫、巴贝虫、十二指肠钩口线虫、华支睾吸虫、卫氏并殖吸虫基因组DNA为模板进行检测,评价该方法的特异性。将外源小分子DNA片段添加至人工尿液及健康人尿液后,经调整p H值、离心、浓缩等处理后,采用QIAmp Viral RNA Mini Kit(Qiagen试剂盒)、BIOG游离DNA提取试剂盒(BIOG试剂盒)提取尿液中的外源小分子DNA片段,比较不同处理方式及提取方法的效果。结果成功制备81 bp外源日本血吸虫小分子DNA片段,建立的qPCR法最低能检测到100拷贝/μL的81 bp外源日本血吸虫小分子DNA片段。以上述7种寄生虫DNA为模板进行检测,仅日本血吸虫基因组DNA模板有荧光信号值增长。调整人工尿液pH值为5、6、7、8,采用Qiagen试剂盒提取其中的外源日本血吸虫小分子DNA片段回收率分别(49.12±2.09)%、(84.52±4.96)%、(89.38±3.32)%和(87.82±3.90)%;采用BIOG试剂盒提取小分子DNA片段回收率分别为(2.30±0.07)%、(8.11±0.26)%、(13.35±0.61)%、(20.82±0.68)%,两种方法提取回收率差异均有统计学意义(t=38.702、26.955、39.042、29.571,P均0.05)。人工尿液[(64.30±1.00)%vs.(58.87±0.26)%;t=12.033,P血吸虫小分子DNA片段的提取方法,Qiagen试剂盒提取效果较好。将尿液样本p H值调整至6~8、使用100K离心浓缩管浓缩健康人尿液样本均可提高提取效果。

关键词：日本血吸虫尿液游离DNA 小分子DNA片段实时荧光定量PCR

2023年贵州省六盘水市部分地区蜱传立克次体调查

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中国血吸虫病防治杂志 2024年第2期36卷 154-158页

作者：李丹尼李娅于永慧欧阳譞熊小路金山焦俊内蒙古农业大学兽医学院、农业部动物临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 北京微生物流行病研究所、病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 贵州省六盘水市人民医院肾内科贵州六盘水553000

目的了解贵州省六盘水市部分地区蜱携带立克次体感染率,为当地蜱传立克次体病防控工作提供参考依据。方法 2023年4—6月在贵州省六盘水市盘州市大山镇高兴村捕捉牛、羊体表寄生蜱,采用形态学和分子生物学方法对蜱种进行鉴定。采用巢式... 详细信息

目的了解贵州省六盘水市部分地区蜱携带立克次体感染率,为当地蜱传立克次体病防控工作提供参考依据。方法 2023年4—6月在贵州省六盘水市盘州市大山镇高兴村捕捉牛、羊体表寄生蜱,采用形态学和分子生物学方法对蜱种进行鉴定。采用巢式PCR法检测蜱携带的立克次体,包括斑点热群立克次体、柯克斯体属、无形体属、埃立克体属和东方体属,扩增的阳性片段测序后与Gen Bank已知序列进行同源性比对。结果共采集200只蜱,经鉴定均为微小扇头蜱。巢式PCR联合测序鉴定出蜱携带敬信立克次体暂定种(40.50%)、贝氏柯克斯体(1.50%)和柯克斯体共生菌(27.00%),未检测出无形体、埃立克体及东方体。结论贵州省六盘水市部分地区微小扇头蜱携带敬信立克次体暂定种、贝氏柯克斯体和柯克斯体共生菌;当地有关部门需加强家畜和人群蜱传立克次体感染监测,减少蜱传立克次体病危害。

关键词：微小扇头蜱立克次体敬信立克次体暂定种贝氏柯克斯体柯克斯体共生菌六盘水市

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华支睾吸虫病危险因素的Meta分析

中国热带医学 2023年第4期23卷 368-372页

作者：王依李成媛毛元春刘耀宝江苏省血吸虫/寄生虫病防治研究所国家卫生健康委员会寄生虫病预防与控制技术重点实验室和江苏省寄生虫与媒介控制技术重点实验室江苏无锡214064

目的系统评估华支睾吸虫病的相关危险因素,为华支睾吸虫病的预防提供参考。方法在中国生物医学文献数据库、万方数据资源系统(Wanfang Data)、中国期刊全文数据库(CNKI)、维普网、PubMed、Web of Science、Embase等中英文数据库检索2000... 详细信息

目的系统评估华支睾吸虫病的相关危险因素,为华支睾吸虫病的预防提供参考。方法在中国生物医学文献数据库、万方数据资源系统(Wanfang Data)、中国期刊全文数据库(CNKI)、维普网、PubMed、Web of Science、Embase等中英文数据库检索2000年1月—2020年12月有关华支睾吸虫病危险因素的相关文献,根据纳入和排除标准筛选文献,并对文献进行质量评价。采用RevMan 5.3软件对纳入的文献进行异质性检验,敏感性分析、偏倚检验和Meta分析。结果共检索到95篇文献,其中6篇纳入到本次Meta分析,研究类型均为病例对照研究,包括中文文献5篇,英文文献1篇,没有对结果影响较大的单篇文献,不存在发表偏倚。累计华支睾吸虫病1170例,对照1291例,大部分来源于医院就诊病人和社区居民,流动人口较少。Meta分析结果显示,共有3个独立危险因素:生食或半生食鱼类、生食或半生食虾类、生熟砧板混用,其合并OR(95%CI)分别为:2.32(1.86,2.88),3.99(2.42,6.58),2.18(1.51,3.14)。异质性检验支持总的样本结果,异质性较低,I2值分别为30%,12%,27%。偏倚检验结果显示文献无发表偏倚(P=0.731,0.725,0.334,P均>0.05)。结论生食或半生食鱼虾、混用砧板是华支睾吸虫病的主要危险因素,应加强引导和健康教育。同时,应加强对外出旅游、经商、求学等流动人口的华支睾吸虫病的监测工作。

关键词：华支睾吸虫病危险因素 Meta分析

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江苏省输入性疟疾初诊时间及影响因素分析

中国血吸虫病防治杂志 2022年第2期34卷 172-178,186页

作者：卢光玉曹园园王伟明杨蒙蒙刘耀宝章钰莹陈麒卢艳周华云朱国鼎曹俊扬州大学公共卫生学院江苏扬州225007 国家卫生健康委员会寄生虫病预防和控制技术重点实验室、江苏省寄生虫与媒介控制技术重点实验室、江苏省血吸虫病防治研究所江苏无锡214064 德国海德堡大学全球健康学院南京海关卫生检疫处

目的了解江苏省输入性疟疾病例回国后就医行为特征,分析病例初诊时间影响因素,为输入性疟疾病例早期发现、防止重症病例发生及继发传播提供科学依据。方法在中国疾病预防控制中心传染病报告信息管理系统和寄生虫病防治信息管理系统中... 详细信息

目的了解江苏省输入性疟疾病例回国后就医行为特征,分析病例初诊时间影响因素,为输入性疟疾病例早期发现、防止重症病例发生及继发传播提供科学依据。方法在中国疾病预防控制中心传染病报告信息管理系统和寄生虫病防治信息管理系统中,收集2019年江苏省报告的输入性疟疾病例个案信息以及发病及初诊时间信息。对输入性疟疾病例回国后就医行为及流行病学特征进行描述性分析,采用多因素logistic回归分析探索病例回国后初诊时间影响因素。结果 2019年江苏省累计报告输入性疟疾病例244例,病例初诊时间在1~12 d,平均初诊时间(1.53±1.65)d、中位初诊时间1 d。出现首发症状当天就医的病例数最多(76例,31.1%),68例(27.9%)第2天就医、46例(18.9%)第3天就医、54例(22.1%)3 d后就医,其中3例初诊时间在1周以上。归国时间在1月(14例,5.7%)和12月(13例,5.3%)、年龄在41~50岁(32例,13.1%)的外出务工人员中初诊时间延误者比例较高。多因素logistic回归分析发现,归国时间在3月[比值比(OR)=0.16, P=0.03, 95%可信区间(CI):(0.03,0.85)]及有境外疟原虫感染史者[OR=0.36, P=0.001, 95%CI:(0.19,0.67)]的病例初诊时间相对较短。结论江苏省输入性疟疾患者主动就医及时性有待提高,有疟原虫感染史者就医更及时。

关键词：输入性疟疾初诊就医行为影响因素江苏省