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锥虫可变表面糖蛋白的表达调控、结构及免疫应答

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畜牧兽医学报 2024年

作者：曾晴勤李如松李瑞朱淳殷王欣乐何学东环嘉玲叶子雨王莹张璟夏天奇宋厚辉郑亚东杨永春浙江农林大学动物科技学院/动物医学院/浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室/动物健康互联网检测技术浙江省工程研究中心/浙江省动物医学与健康管理国际科技合作基地/中澳动物健康大数据分析联合实验室宁波海关技术中心/宁波市口岸生物与食品安全检测重点实验室福建农林大学动物科学学院(蜂学学院)/福建-台湾动物病原生物学重点实验室中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所(国家热带病研究中心)国家卫生健康委员会寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织热带病合作中心国家级热带病国际联合研究中心

锥虫是一类由媒介传播的血液原虫，可感染人和动物引起锥虫病，危害巨大。锥虫的体表为单一可变表面糖蛋白（variant surface glycoprotein，VSG）形成的致密“外套”，会在每个虫血症时期进行周期性更换，以逃避宿主免疫杀伤作用。锥... 详细信息

锥虫是一类由媒介传播的血液原虫，可感染人和动物引起锥虫病，危害巨大。锥虫的体表为单一可变表面糖蛋白（variant surface glycoprotein，VSG）形成的致密“外套”，会在每个虫血症时期进行周期性更换，以逃避宿主免疫杀伤作用。锥虫基因组含有成百上千个VSG基因和假基因，而虫体可通过精确的表达调控保证在特定感染阶段只表达一种VSG。VSG具有良好的抗原性，这主要由位于其N端结构域（N-terminal domain，NTD）顶叶（top lobe）的免疫显性表位、糖基化修饰和亚结构域及其构象共同决定。VSG特异的IgM反应在清除锥虫感染中发挥重要作用，但IgG介导的免疫裂解作用则十分有限。宿主特异IgG免疫反应变得固化，只会针对每个VSG中有限的免疫显性表位，降低了与不同VSG之间的交叉反应。本文综述了VSG在表达调控、蛋白质结构、免疫原性及免疫应答等方面的最新研究进展，为深入认识锥虫致病机理、研制有效锥虫病防控手段提供理论参考。

关键词：锥虫可变表面糖蛋白表达调控蛋白质结构免疫应答

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中缅边境地区中华按蚊杀虫剂抗药性调查研究

中国媒介生物学及控制杂志 2024年第2期35卷 244-248页

作者：曹自有田鹏戴雨琪尹建海夏志贵林祖锐中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所疟疾室国家热带病研究中心世界卫生组织热带病合作中心科技部国家级热带病国际联合研究中心国家卫生健康委寄生虫病原与媒介生物学重点实验室上海200025 云南省虫媒传染病防控研究重点实验室云南省热带传染病国际联合实验室云南省虫媒传染病防控关键技术创新团队云南省寄生虫病防治所云南普洱655000

目的了解中缅边境地区中华按蚊成蚊对杀虫剂的抗药性现状,为中国消除疟疾后该区域的媒介控制提供科学依据。方法2023年7月4-26日,在中缅边境地区选取腾冲市、沧源佤族自治县(沧源县)和盈江县作为监测县,在每个县选择1个适宜中华按蚊孳... 详细信息

目的了解中缅边境地区中华按蚊成蚊对杀虫剂的抗药性现状,为中国消除疟疾后该区域的媒介控制提供科学依据。方法2023年7月4-26日,在中缅边境地区选取腾冲市、沧源佤族自治县(沧源县)和盈江县作为监测县,在每个县选择1个适宜中华按蚊孳生的自然村作为调查点。每个调查点采集不少于800只雌性吸血中华按蚊带回实验室,次日采用世界卫生组织(WHO)推荐的成蚊接触筒诊断剂量法测定蚊虫对9种杀虫剂的抗性。设立空白对照组,每种剂量杀虫剂重复测定3次取均值,记录杀虫剂接触时间、首只蚊虫击倒时间、60 min蚊虫击倒数以及24 h蚊虫死亡数,计算首只蚊虫击倒时间均值、60 min击倒率、半数击倒时间(KT50)和24 h校正死亡率,χ2检验分别比较3个调查点试虫对每种杀虫剂的24 h校正死亡率差异。杀虫剂标准品和WHO推荐的成蚊接触筒均由中国疾病预防控制中心传染病预防控制所媒介生物控制室提供。结果3个监测县共完成2224只中华按蚊的测定,共测定0.05%溴氰菊酯、0.15%高效氯氟氰菊酯、0.15%高效氟氯氰菊酯、5%马拉硫磷、0.5%氯菊酯、1%杀螟硫磷、0.1%虫威、0.1%残杀威和0.06%氟虫腈9种杀虫剂。结果显示,沧源县调查点中华按蚊成蚊的24 h平均校正死亡率分别为25.68%、26.58%、46.67%、100%、39.19%、86.75%、55.29%、35.96%和25.40%;腾冲市调查点中华按蚊成蚊的24 h平均校正死亡率分别为40.40%、44.58%、34.74%、96.05%、5.00%、97.00%、44.19%、27.96%和63.41%;盈江县调查点中华按蚊成蚊的24 h平均校正死亡率分别为39.73%、49.41%、53.95%、100%、26.47%、100%、91.67%、100%和43.37%。3个调查点试虫对0.15%高效氯氟氰菊酯、0.15%高效氟氯氰菊酯、0.5%氯菊酯、1%杀螟硫磷、0.1%虫威、0.1%残杀威和0.06%氟虫腈7种杀虫剂的24 h平均校正死亡率之间差异均有统计学意义(均P控制疟疾媒介按蚊的同时延缓杀虫剂抗性的产生和发展。

关键词：中华按蚊杀虫剂抗药性中缅边境

基于Delphi法构建居民预防寄生虫病健康素养指标体系

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中国血吸虫病防治杂志 2022年第6期34卷 616-621页

作者：王依李成媛张嘉尧黄轶昕杨坤刘耀宝江苏省血吸虫病防治研究所、国家卫生健康委员会寄生虫病预防与控制技术重点实验室、江苏省寄生虫与媒介控制技术重点实验室江苏无锡214064

目的基于Delphi法构建居民预防寄生虫病健康素养指标体系。方法在文献回顾和专家访谈的基础上制定专家函询问卷,采用Delphi法进行两轮函询,根据指标删除标准和专家建议,构建居民预防寄生虫病健康素养指标体系。结果共14名专家完成了2轮... 详细信息

目的基于Delphi法构建居民预防寄生虫病健康素养指标体系。方法在文献回顾和专家访谈的基础上制定专家函询问卷,采用Delphi法进行两轮函询,根据指标删除标准和专家建议,构建居民预防寄生虫病健康素养指标体系。结果共14名专家完成了2轮函询,第二轮专家函询后,一、二、三级指标的权威系数分别为0.91~0.96、0.87~0.97和0.86~0.97。构建了以基本知识和意识、健康行为、健康技能为主要框架的包含3个一级指标、12个二级指标和48个三级指标的居民预防寄生虫病健康素养指标体系。3个一级指标中,基本知识和意识权重系数最高(0.3365),健康行为其次(0.3349),健康技能最低(0.3286)。组合权重居前3位的二级指标分别为对流行情况的了解(0.0882)、对传染源的了解(0.0858)和对寄生虫病的基本认识(0.0855)。结论初步构建了居民预防寄生虫病健康素养指标体系,为新时期预防寄生虫病健康素养评价工具的编制提供了参考依据。

关键词：寄生虫病健康素养指标体系 Delphi法

吡喹酮异构体对肝星状细胞系LX-2增殖及活化的作用

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中国血吸虫病防治杂志 2022年第1期34卷 75-80页

作者：袁轩张苏阳姚甲凯邢云天曲国立梁幼生戴建荣国家卫生健康委员会寄生虫病预防与控制技术重点实验室、江苏省寄生虫与媒介控制技术重点实验室、江苏省血吸虫病防治研究所江苏无锡214064

目的观察左旋吡喹酮(L-PZQ)和右旋吡喹酮(D-PZQ)体外对人肝星状LX-2细胞系增殖及活化作用差异。方法利用转化生长因子-β(TGF-β)刺激激活LX-2细胞;采用CCK-8法检测以0~50μg/mL梯度浓度吡喹酮刺激24 h后LX-2细胞增殖情况;采用实时荧光... 详细信息

目的观察左旋吡喹酮(L-PZQ)和右旋吡喹酮(D-PZQ)体外对人肝星状LX-2细胞系增殖及活化作用差异。方法利用转化生长因子-β(TGF-β)刺激激活LX-2细胞;采用CCK-8法检测以0~50μg/mL梯度浓度吡喹酮刺激24 h后LX-2细胞增殖情况;采用实时荧光定量PCR(qPCR)和免疫印迹试验检测15 mg/mL吡喹酮刺激LX-2细胞24 h后的Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)基因表达水平和48 h后蛋白表达水平,以分析LX-2细胞活化情况。结果 L-PZQ和D-PZQ两药物各浓度组LX-2细胞存活率差异均有统计学意义(F=6.119、79.180,P均 0.05);L-PZQ浓度> 50μg/mL和D-PZQ浓度> 40μg/mL时,均对激活型LX-2增殖能力产生抑制作用(P均 0.05);D-PZQ对激活型LX-2细胞中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和α-SMA基因和蛋白表达水平均有显著抑制作用(P均<0.05);D-PZQ对激活型LX-2细胞中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和α-SMA基因表达抑制作用强于L-PZQ(P均<0.05)。结论 L-PZQ和D-PZQ对LX-2细胞增殖及活化均有一定抑制作用,且D-PZQ的抑制作用强于L-PZQ。

关键词：吡喹酮异构体肝星状细胞增殖活化

《广州管圆线虫病诊断标准》(WS/T 321—2010)在福建省和云南省实施情况的跟踪评价

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热带病与寄生虫学 2024年第2期22卷 112-116页

作者：黄春燕刘榆华谢汉国俞铖航福建省疾病预防控制中心福建福州350012 大理州血吸虫病防治研究所中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所(国家热带病研究中心)

目的了解《广州管圆线虫病诊断标准》(WS/T 321—2010)(简称《标准》)的实施情况,为《标准》的推广和进一步修订、完善提供科学依据。方法通过分层抽样的方式抽取福建省和云南省的省、市、县和乡镇4级的疾病预防控制机构(简称疾控机构)... 详细信息

目的了解《广州管圆线虫病诊断标准》(WS/T 321—2010)(简称《标准》)的实施情况,为《标准》的推广和进一步修订、完善提供科学依据。方法通过分层抽样的方式抽取福建省和云南省的省、市、县和乡镇4级的疾病预防控制机构(简称疾控机构)和医疗机构的专业技术人员作为调查对象,采用调查对象自填问卷的方式开展《标准》实施情况调查。结果共调查工作人员308人,回收有效问卷308份。《标准》知晓率为71.10%(219/308),不同特征调查对象中,≥50岁(81.40%,35/43)、市级单位(79.76%,67/84)、疾控机构(88.24%,105/119)、从事寄生虫病防治工作(85.71%,114/133)、高级职称(82.86%,58/70)、本科文化程度(77.09%,138/179)、公共卫生专业(86.21%,75/87)等人群的《标准》知晓率较高,且随着年龄增加和职称升高,《标准》知晓率呈上升趋势(χ^(2)_(趋势)=8.272、8.258,P均实验室检查方法和诊断类型等知识的调查对象人数分别为292人(占94.81%)、102人(占33.12%)、130人(占42.21%)、117人(占37.99%)和152人(占49.35%)。绝大多数调查对象(占89.61%,276/308)认为标准的可操作性好或较好。宣贯力度对标准实施的影响最大(占80.84%,249/308)。91.88%(283/308)的调查对象认为现行标准不需要修订。结论《标准》仍适用于当前阶段的诊断需求,应继续加大对专业人员的宣贯力度,提高其认知和应用水平。

关键词：广州管圆线虫病诊断标准问卷调查跟踪评价

曼氏裂头蚴病动物模型的建立及诊治技术研究Ⅱ原尾蚴灌胃法建立曼氏裂头蚴病小鼠模型

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中国血吸虫病防治杂志 2022年第4期34卷 400-403,411页

作者：汤宪时许永良王强张英仝德胜国家卫生健康委员会寄生虫病预防和控制技术重点实验室、江苏省寄生虫与媒介控制技术重点实验室、江苏省血吸虫病防治研究所江苏无锡214064

目的探索通过感染原尾蚴的剑水蚤灌胃小鼠建立曼氏裂头蚴病小鼠动物模型的可行性。方法实验室条件下用曼氏裂头蚴感染家猫,收集当日新产猫粪,用去氯水淘洗后过滤获得曼氏迭宫绦虫虫卵,制成虫卵悬浊液。将20只C57BL/6j小鼠随机分为实验... 详细信息

目的探索通过感染原尾蚴的剑水蚤灌胃小鼠建立曼氏裂头蚴病小鼠动物模型的可行性。方法实验室条件下用曼氏裂头蚴感染家猫,收集当日新产猫粪,用去氯水淘洗后过滤获得曼氏迭宫绦虫虫卵,制成虫卵悬浊液。将20只C57BL/6j小鼠随机分为实验组和对照组,实验组15只、对照组5只。以曼氏迭宫绦虫钩球蚴感染野生剑水蚤,使每只剑水蚤体内含有3~5条原尾蚴;再将感染原尾蚴的剑水蚤灌胃实验组小鼠,每只小鼠灌入剑水蚤15只,对照组灌胃等体积去氯水。6个月后处死小鼠,分离疑似裂头蚴虫体,并用间接酶联免疫吸附试验检测小鼠血清中抗曼氏裂头蚴特异性IgG抗体水平。提取疑似虫体基因组DNA,以曼氏裂头蚴细胞色素C氧化酶1(CO1)基因片段为目的序列进行PCR扩增以鉴别疑似虫体。结果实验组15只小鼠中,6只小鼠血清抗曼氏裂头蚴特异性IgG抗体检测呈阳性;于其中4只小鼠皮下发现并分离出乳白色虫体。每只小鼠均仅检出1条虫体,虫体形态与曼氏裂头蚴相似。基于CO1基因的疑似虫体PCR扩增产物在毛细管电泳上于151 bp处显示特异性条带,测序结果与已知曼氏裂头蚴序列100%符合。结论本研究成功建立了一种曼氏裂头蚴病小鼠动物模型。

关键词：曼氏裂头蚴病曼氏裂头蚴原尾蚴动物模型

构建慢病毒介导缺氧诱导因子HIF-1α在宫颈癌细胞中的表达及其对裸鼠移植瘤的作用

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中国病原生物学杂志 2024年第7期19卷 756-760,767页

作者：阿孜尔古丽·阿布都克日木马红白冰阿瓦汗·吐尔迪古丽仙·吐尔逊于涛新疆医科大学基础医学院新疆乌鲁木齐830017 新疆地方病分子生物学重点实验室中亚高发疾病发病机制与防治国家重点实验乌鲁木齐市沙依巴克区妇幼保健服务中心新疆医科大学附属肿瘤医院山东省寄生虫病防治研究所山东第一医科大学(山东省医学科学院)

目的探讨使用慢病毒载体介导的HIF-1α对裸鼠宫颈癌移植瘤生长、增殖和转移的影响,并寻找宫颈癌新的基因治疗靶点。方法采用慢病毒介导技术,分别在SiHa和C33a细胞中提高C33a细胞的HIF-1α表达,同时敲减SiHa细胞的HIF-1α表达。通过qRT... 详细信息

目的探讨使用慢病毒载体介导的HIF-1α对裸鼠宫颈癌移植瘤生长、增殖和转移的影响,并寻找宫颈癌新的基因治疗靶点。方法采用慢病毒介导技术,分别在SiHa和C33a细胞中提高C33a细胞的HIF-1α表达,同时敲减SiHa细胞的HIF-1α表达。通过qRT-PCR和Western blot技术验证慢病毒转染后HIF-1α表达的效率,并构建裸鼠移植瘤模型。从而验证HIF-1α表达改变对裸鼠体内肿瘤形成、增殖速度、肿瘤体积和肿瘤重量的影响及HIF-1α表达改变对肿瘤发展过程的影响。结果敲减和过表达HIF-1α的SiHa和C33a细胞分别注射于裸鼠左侧腋窝皮下,1周后形成肿瘤,4周后测量移植瘤体积。干扰HIF-1α的裸鼠移植瘤体积较对照组较小,两者差异具有统计学意义(P<0.05),即干扰HIF-1α对裸鼠瘤体的生长具有抑制作用;而HIF-1α过表达后,裸鼠移植瘤体积较对照组较大,两者差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 HIF-1α的表达改变与宫颈癌细胞的增殖和恶化存在一定相关性,HIF-1α表达的改变可以调控肿瘤增殖过程。

关键词：宫颈癌缺氧诱导因子-1α 裸鼠皮下移植瘤模型稳定转染

黑色浅灰链霉菌次级代谢产物杀螺活性及其作用机制初步研究

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中国血吸虫病防治杂志 2022年第3期34卷 269-276页

作者：邢云天姚甲凯曲国立张苏阳戴建荣冯柏年江南大学药学院江苏无锡214122 国家卫生健康委员会寄生虫病预防和控制技术重点实验室、江苏省寄生虫与媒介控制技术重点实验室、江苏省血吸虫病防治研究所江苏无锡214064

目的评价放线菌黑色浅灰链霉菌(Streptomyces nigrogriseolus XD 2⁃7)代谢产物储存稳定性及其分离纯化产物实验室杀螺活性,并初步探讨其杀螺作用机制。方法制备黑色浅灰链霉菌发酵上清液,将其于-20、4℃和28℃无光照条件下放置10 d后,... 详细信息

目的评价放线菌黑色浅灰链霉菌(Streptomyces nigrogriseolus XD 2⁃7)代谢产物储存稳定性及其分离纯化产物实验室杀螺活性,并初步探讨其杀螺作用机制。方法制备黑色浅灰链霉菌发酵上清液,将其于-20、4℃和28℃无光照条件下放置10 d后,测定其72 h浸杀灭螺效果;将发酵上清液置于100℃水浴中煮沸30 min后恢复至室温,测定其72 h浸杀灭螺效果;用浓盐酸和氢氧化钠调节发酵上清液pH值为4.0、6.0和9.0,室温下静置12 h,再调节发酵上清液pH至7.0,测定其72 h浸杀灭螺效果。用大孔树脂、硅胶和十八烷基硅烷键合硅胶依次对黑色浅灰链霉菌发酵产物进行4次分离纯化,将最终分离纯化产物配置成10.00、5.00、2.50、1.25 mg/L和0.63 mg/L浓度药液,测定其72 h浸杀灭螺效果。各实验设立空白对照组以脱氯水处理,阳性对照组以0.10 mg/L氯硝柳胺处理。采用高效液相色谱法测定经纯化代谢产物浸泡后钉螺软体组织中三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)和二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)含量。结果黑色浅灰链霉菌发酵上清液在-20、4℃和28℃无光照条件下放置10 d后,原液及稀释10、50倍药液浸杀钉螺72 h,钉螺死亡率均为100.00%(30/30);经100℃煮沸30 min后,原液及稀释10、50倍药液浸杀钉螺72 h,钉螺死亡率均为100.00%(30/30)。发酵上清液在pH值为4.0、6.0条件下存储12 h后浸杀钉螺72 h,钉螺死亡率均为100.00%(30/30);在pH值为9.0条件下存储12 h后浸杀钉螺72 h,钉螺死亡率为33.33%(10/30,χ^(2)=30.000,P所需最低浓度为1.25 mg/L。以0.10 mg/L和1.00 mg/L浓度最终分离纯化产物处理钉螺后,钉螺软体组织中ATP水平较对照组显著降低(F=7.274,P0.05)。结论黑色浅灰链霉菌代谢产物中杀螺活性成分可在-20、4℃和28℃条件下稳定储存10 d,且耐热、耐酸而不耐碱,其杀螺机制可能是使钉螺能量代谢发生紊乱而死亡。

关键词：湖北钉螺黑色浅灰链霉菌次级代谢产物杀螺效果

2012—2020年江苏省输入性卵形疟流行病学特征

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中国血吸虫病防治杂志 2022年第1期34卷 66-71页

作者：王伟明曹园园杨蒙蒙卢艳顾亚萍徐岁周华云朱国鼎国家卫生健康委员会寄生虫病预防与控制技术重点实验室、江苏省寄生虫与媒介控制技术重点实验室、江苏省血吸虫病防治研究所江苏无锡214064 南京海关卫生检疫处江苏南京210001

目的分析2012—2020年江苏省输入性卵形疟病例流行病学特征,为该省制定输入性疟疾防控策略提供科学依据。方法在传染病报告信息管理系统和寄生虫病防治信息管理系统中,收集2012—2020年江苏省卵形疟确诊病例相关信息,包括出国、回国时间... 详细信息

目的分析2012—2020年江苏省输入性卵形疟病例流行病学特征,为该省制定输入性疟疾防控策略提供科学依据。方法在传染病报告信息管理系统和寄生虫病防治信息管理系统中,收集2012—2020年江苏省卵形疟确诊病例相关信息,包括出国、回国时间,在国外患病次数,发病、初诊和确诊时间,初诊和确诊单位等资料,进行描述性统计分析。结果 2012—2020年江苏省累计报告卵形疟病例347例,其中2015年报告例数最多(71例)。347例卵形疟病例均为实验室确诊的境外输入性病例,占该阶段江苏省报告疟疾病例总数的14.32%。全省卵形疟报告例数居前5位的地级市依次为连云港市(53例,占15.27%)、南通市(44例,占12.68%)、淮安市(44例,占12.68%)、泰州市(44例,占12.68%)和扬州市(36例,占10.37%)。报告病例数以10月最多,达39例(占11.24%);12月最少,为21例(占6.05%)。卵形疟病例境外感染来源地主要为赤道几内亚(97例,占37.95%)、安哥拉(60例,占17.29%)、尼日利亚(40例,占11.53%)。卵形疟病例从回国到发病中位时间为64(144)d,其中7.49%(26/347)的病例回国1年后发病。病例初诊单位主要集中在县级医疗机构(117例,占33.72%),确诊单位主要集中在地市级医疗机构(122例,占35.16%)。2012—2020年江苏省卵形疟病例初诊正确率从2012年的0提升到2020年的78.26%,呈逐年上升趋势(χ^(2)=50.90,P江苏省每年均有输入性卵形疟病例报告,感染来源地主要为非洲,初诊和确诊单位主要集中在地市级和县级等基层医疗机构。今后应重点开展基层镜检人员疟原虫检测能力培训,以提高卵形疟诊断能力、巩固消除疟疾成果。

关键词：卵形疟流行病学特征输入性病例江苏省