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不同寡糖体外透皮吸收荧光定量分析方法的建立与应用

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中国海洋药物 2024年第2期43卷 1-10页

作者：杨荣荣王力李鑫杨程王世欣李春霞中国海洋大学海洋药物教育部重点实验室山东省糖科学与糖工程重点实验室医药学院山东青岛266003 青岛海洋生物医药研究院山东青岛266071 青岛海洋科学与技术国家实验室海洋药物与生物制品功能实验室山东青岛266237

目的建立乳膏中不同寡糖透皮吸收的异硫氰酸荧光素(FITC)荧光定量分析方法,并考察寡糖体外透皮性能。方法采用Franz扩散池,以巴马香猪皮为载体,参照《中国药典》(2020年版四部9012通则)中生物样品定量分析方法验证指导原则,建立不同寡糖... 详细信息

目的建立乳膏中不同寡糖透皮吸收的异硫氰酸荧光素(FITC)荧光定量分析方法,并考察寡糖体外透皮性能。方法采用Franz扩散池,以巴马香猪皮为载体,参照《中国药典》(2020年版四部9012通则)中生物样品定量分析方法验证指导原则,建立不同寡糖的FITC荧光定量分析方法,并测定乳膏中不同寡糖体外透皮含量。结果本文建立了乳膏中壳寡糖(COS)、褐藻寡糖(AOS)、葡寡糖(GOS)的体外透皮吸收的FITC荧光定量分析方法。结果显示,皮中及皮下FITC-寡糖的质量浓度与荧光强度呈良好的线性关系,其中FITC-COS为0.92~45.83μg/mL,FITC-GOS为0.71~42.44μg/mL,FITC-AOS为0.28~27.85μg/mL(皮中)、0.28~16.71μg/mL(皮下),且R^(2)>0.99。该方法准确度、精密度和稳定性考察结果符合指导原则要求。结论建立了乳膏中不同寡糖透皮吸收的FITC荧光定量分析方法,且发现皮中及皮下的寡糖含量均为壳寡糖>褐藻寡糖>葡寡糖,其中壳寡糖的皮中滞留量为(35.81±2.09)μg/cm^(2),皮下透过量为(118.72±6.91)μg/cm^(2)。

关键词： FITC-寡糖体外透皮吸收定量分析方法学验证

长牡蛎壳橙快速生长品系基因与环境(G×E)互作效应分析

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中国水产科学 2024年第2期31卷 177-184页

作者：杜利杰胡益鸣马新航郭浪徐成勋李琪中国海洋大学海水养殖教育部重点实验室青岛海洋科学与技术试点国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室

为了分析长牡蛎(Crassostrea gigas)壳橙快速生长品系生长存活性状的基因型与环境(G×E)互作效应,本研究构建28个全同胞家系并将每个家系均分成3组,分别在乳山、荣成和黄岛海域进行养殖。利用双性状动物模型和REML法估计12月龄橙快长牡... 详细信息

为了分析长牡蛎(Crassostrea gigas)壳橙快速生长品系生长存活性状的基因型与环境(G×E)互作效应,本研究构建28个全同胞家系并将每个家系均分成3组,分别在乳山、荣成和黄岛海域进行养殖。利用双性状动物模型和REML法估计12月龄橙快长牡蛎生长和存活性状的遗传力及G×E效应,采用BLUP育种值估计法将壳高、体重和存活性状3个指标的育种值综合加权,以期筛选出普适性育种材料。结果显示,乳山和黄岛海区的表型显著优于荣成海区,更适合作为养殖海区。乳山、荣成和黄岛3个海区生长存活性状的遗传力分别为0.09～0.75、0.02～0.94和0.03～0.75,存在尺度效应,但除了存活性状的遗传力外,都属于中高遗传力,具有良好的遗传潜力,通过育种值估计法选育效果更佳;存活性状则主要受环境因素影响,可通过表型直接选育。以不同海区为固定效应,综合3个环境计算出的生长和存活性状的遗传力为0.02～0.44,综合遗传力下降说明环境差异影响遗传力评估。此外,选育的目标性状在两两海区间的遗传相关均小于0.8,存在显著的G×E效应,在选育过程中应综合考虑环境因素。通过比较综合育种值发现存在明显的基因重排效应,家系G25对乳山海区表现出特殊的适应性,家系G16对荣成海区具有特适性,而家系G23对乳山和黄岛表现出适应性,且筛选出了对3个海区具有普适性的家系G2。研究结果为橙快长牡蛎品系的良种选育提供了重要的参考资料。

关键词：长牡蛎壳橙家系选育遗传参数基因与环境(G×E)互作效应育种值

72种单方中草药对乌鳢源维氏气单胞菌的体外抑菌效果

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江苏农业科学 2024年第8期52卷 157-165页

作者：孙云贵李泽昱强璐高迎莉江苏海洋大学海洋科学与水产学院江苏连云港222005 江苏省海洋生物技术重点实验室江苏连云港222005

为筛选出抑制乌鳢源维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)的单方中草药,结合了前人研究结果及《水产养殖用药明白纸2022年2号》中规定使用的中草药,挑选了73种中草药,通过煎煮法制备中草药提取液,筛选抑菌圈>10 mm的中草药;进而测定中草药... 详细信息

为筛选出抑制乌鳢源维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)的单方中草药,结合了前人研究结果及《水产养殖用药明白纸2022年2号》中规定使用的中草药,挑选了73种中草药,通过煎煮法制备中草药提取液,筛选抑菌圈>10 mm的中草药;进而测定中草药的最小抑菌质量浓度(MIC)和最小杀菌质量浓度(MBC)。研究结果表明,诃子(Chebulae Fructus)、五倍子(Galla chinensis)、五味子(Schisandrae chinensis)、乌梅(Mume Fructus)、地锦草(Euphorbiae humifusa Herba)和酒萸肉(Corn:Fructus)的抑菌效果最好,对10株维氏气单胞菌的抑菌圈直径均在10 mm以上,高度敏感率为55%;MIC≤62.5 mg/mL,在所有MIC中的占比为85%;MBC≤125 mg/mL,在所有MBC中的占比为90%。地榆(Sanguisorba Radix)和丁香(Caryophylli Flos)等25种中草药对维氏气单胞菌有抑菌作用;使君子(Quispualis Fructus)和雷丸(Omphalia)等47种中草药无抑菌作用。以上结果显示,诃子等6种中草药对乌鳢源维氏气单胞菌具有明显抑菌和杀菌活性,可作为防控维氏气单胞菌的用药参考。

关键词：维氏气单胞菌中草药抑菌最小杀菌质量浓度

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高河菜脂肪族类化学成分及其抗疟活性研究

中药材 2024年 902-907页

作者：唐颖佳刘博超苟亮孙河刘蓉肖朝江姜北大理大学药学院&药物研究所云南省滇西抗病原植物资源筛选研究重点实验室

目的:研究高河菜Megacarpaea delavayi Franch.脂肪族类化学成分及其抗疟原虫活性。方法:采用硅胶、Sephadex LH-20、MCI以及RP18对高河菜95%乙醇提取物进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定化合物的结构。采用基于SYBR-GreenⅠ荧... 详细信息

目的:研究高河菜Megacarpaea delavayi Franch.脂肪族类化学成分及其抗疟原虫活性。方法:采用硅胶、Sephadex LH-20、MCI以及RP18对高河菜95%乙醇提取物进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定化合物的结构。采用基于SYBR-GreenⅠ荧光染料的体外抗疟筛选方法测定其抗恶性疟原虫活性。结果:从高河菜中共分离得到20个脂肪族类化合物,分别鉴定为:豆甾-4-烯-3-酮(1)、 β-谷甾醇(2)、7α-甲氧基豆甾-5-烯-3β-醇(3)、7β-甲氧基豆甾-5-烯-3β-醇(4)、5,28-豆甾二烯-3β,14-二醇(5)、saringosterd(6)、7α-羟基谷甾醇(7)、7β-羟基谷甾醇(8)、乌苏酸(9)、α-香树脂醇(10)、 β-香树脂醇(11)、12-烯-3β-羟基-乌苏-11-酮(12)、反式植醇(13)、ajudecunoid E(14)、黑麦草内酯(15)、去氢催吐萝芙木醇(16)、3β-羟基-紫罗兰酮(17)、6-羟基-9,13-环大柱烷-4,9(13)-二烯-3-酮(18)、α-亚麻酸(19)、7(Z),10(Z),13(Z)-十六碳三烯酸甲酯(20)。抗疟活性结果显示化合物12和13表现出较好的抗疟活性,对恶性疟原虫抑制率分别为72.98%、101.98%。结论:化合物1～20均为首次从该植物中分离得到,化合物13具有较高的体外抗疟活性,化合物12具有中等的体外抗疟活性。

关键词：高河菜脂肪族类化合物分离鉴定抗疟活性

三维高通量肝细胞芯片模型的构建及其在中药肝毒性评价中的应用

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药学学报 2024年第6期59卷 1787-1793页

作者：侯宇吕恬高照屠鹏飞艾晓妮姜勇北京大学天然药物及仿生药物全国重点实验室北京100191

本研究构建了一种高通量三维肝细胞模型,可模拟细胞在体内的三维生长空间,具有通量高、精密度好、成本低、操作简便的优势,可用于中药肝毒性的快速评价。首先,采用胶原水凝胶构建了三维高通量肝细胞芯片模型,以对乙酰氨基酚、昆明山海... 详细信息

本研究构建了一种高通量三维肝细胞模型,可模拟细胞在体内的三维生长空间,具有通量高、精密度好、成本低、操作简便的优势,可用于中药肝毒性的快速评价。首先,采用胶原水凝胶构建了三维高通量肝细胞芯片模型,以对乙酰氨基酚、昆明山海棠提取物和中药复方七厘散提取物为参照,对模型的精密度及与二维孔板模型的差异进行了考察,并对四个批次的昆明山海棠和复方七厘散提取物的肝毒性进行了评价,考察了方法的适用性。方法学考察结果显示,该模型的精密度和适用性良好,优于传统的二维孔板。接着,在三维肝细胞芯片模型上对不同样品给药3或7天的肝毒性进行了比较,发现中药成分的肝毒性随着给药时间的延长而增强。最后,对等生药量的单味中药昆明山海棠和复方中成药昆仙胶囊进行了肝毒性比较,发现中药配伍可以显著降低昆明山海棠的肝毒性。综上,本研究建立了一种高通量、稳定可靠的三维肝细胞芯片模型,可用于中药肝毒性的快速评价。

关键词：肝脏芯片三维肝细胞模型中药肝毒性高通量筛选配伍减毒

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红色诺卡氏菌细胞壁骨架药膜的制备与含量测定

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药物分析杂志 2024年第1期44卷 51-57页

作者：杨煌建王娟陈洲琴程贤严凌斌林仙菊张祝兰连云阳福建省微生物研究所福建省新药(微生物)筛选重点实验室福州350007

目的:制备红色诺卡氏菌细胞壁骨架(N-CWS)药膜并考察其含量测定方法。方法:以N-CWS为模型药物,壳聚糖、聚乙烯醇为成膜材料,通过溶液浇铸法制备N-CWS药膜;使用扫描电子显微镜(SEM)、红外光谱仪、万能试验机对药膜性能进行表征;采用柱前... 详细信息

目的:制备红色诺卡氏菌细胞壁骨架(N-CWS)药膜并考察其含量测定方法。方法:以N-CWS为模型药物,壳聚糖、聚乙烯醇为成膜材料,通过溶液浇铸法制备N-CWS药膜;使用扫描电子显微镜(SEM)、红外光谱仪、万能试验机对药膜性能进行表征;采用柱前衍生化高效液相色谱法测定药膜中D-阿拉伯糖的含量,采用Kromasil C_(18)(150 mm×4.6 mm, 5μm)色谱柱,以50 mmol·L^(-1)(pH 7.0)磷酸盐缓冲液-乙腈(80∶20,v/v)为流动相,流速1.0 mL·min^(-1),检测波长254 nm,柱温40℃。结果:当壳聚糖与聚乙烯醇质量比为3∶2,膜材与甘油质量比为1∶2时,断裂拉伸应变为136.67%,拉伸应力为2.47 mPa。扫描电镜观察到N-CWS主要分布在膜的底面,呈不对称分布;制备的药膜中D-阿拉伯糖在1.1~220μg·mL^(-1)范围内线性关系良好,平均加样回收率为99.5%,测得3批次药膜中D-阿拉伯糖分别为(0.988±0.041)mg·g^(-1)、(1.035±0.049)mg·g^(-1)、(1.088±0.046) mg·g^(-1)。结论:N-CWS药膜制备工艺简单易行,含量测定方法准确快速,本研究可为N-CWS的新剂型开发提供参考依据。

关键词：红色诺卡氏菌细胞壁骨架壳聚糖聚乙烯醇药膜柱前衍生化含量测定 D-阿拉伯糖

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丙烯酰胺诱导神经毒性分子机制研究进展

分析试验室 2024年第2期43卷 238-249页

作者：郑彬茹商佳陶倩倩韦源青刘睿韩疏影南京中医药大学药学院南京210023 江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室南京210023 南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心南京210023

丙烯酰胺(ACR)是一种常见的环境毒物,在食品加工过程中,由还原糖和天冬酰胺在高温下发生美拉德(Maillard)反应产生。近10年中,ACR的神经毒性等受到了越来越多的关注,是环境科学等领域的研究热点之一。本文围绕ACR的形成、食品中的分布... 详细信息

丙烯酰胺(ACR)是一种常见的环境毒物,在食品加工过程中,由还原糖和天冬酰胺在高温下发生美拉德(Maillard)反应产生。近10年中,ACR的神经毒性等受到了越来越多的关注,是环境科学等领域的研究热点之一。本文围绕ACR的形成、食品中的分布及含量、实验及生活环境中ACR污染及暴露情况,总结近年来的相关文献并进行综述。基于共价结合的化学生物学视角,讨论了ACR诱导的神经毒性及其机制;提出用蛋白质组学、化学生物学等方法对ACR作用靶标进行筛选与鉴定;总结了对ACR诱导神经毒性的分子机制进一步研究的策略,并对研究方向进行了展望。

关键词：丙烯酰胺神经毒性共价结合分子机制

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南极潮间带来源真菌Pseudeurotium ***17-894的次级代谢产物研究

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中国海洋药物 2024年第2期43卷 67-72页

作者：任姿霖张运动王文雪李辰车茜李德海朱天骄中国海洋大学海洋药物教育部重点实验室医药学院山东青岛266003

目的研究南极潮间带来源真菌Pseudeurotium ***17-894的次级代谢产物及其抑菌活性。方法对目标菌株进行大量发酵获取粗提物,综合利用正相、反相柱层析、半制备高效液相色谱(HPLC)以及Sephadex LH-20凝胶柱层析等分离手段对粗浸膏进行分... 详细信息

目的研究南极潮间带来源真菌Pseudeurotium ***17-894的次级代谢产物及其抑菌活性。方法对目标菌株进行大量发酵获取粗提物,综合利用正相、反相柱层析、半制备高效液相色谱(HPLC)以及Sephadex LH-20凝胶柱层析等分离手段对粗浸膏进行分离纯化,通过核磁共振波谱(NMR)、质谱(MS)以及单晶衍射等现代波谱学方法,同时对照相关文献数据,确定化合物的结构,并筛选得到具有抑菌活性的化合物。结果从菌株HDN17-894中分离得到1对新的吲哚-3-酮螺环外消旋体化合物(±)-pseudeurdole(1),其为首次从天然产物中发现的含吲哚-3-酮螺环己二烯酮骨架的化合物;以及2个硫赭曲菌素类化合物(2~3),3个二苯醚类化合物(4~6)和1个聚酮类化合物(7)。对化合物进行抑菌活性测试,结果显示化合物3、7对不同致病菌展现出一定的抑菌活性,其中化合物3对蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)的最小抑菌浓度(MIC)为16μg/mL。

关键词：南极真菌次级代谢产物吲哚-3-酮潮间带抑菌活性

GI.5和GII.4诺如病毒P蛋白的克隆表达及与长牡蛎类HBGAs的结合特性

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食品科学 2024年第2期45卷 113-119页

作者：佟利惠杨敏王珊珊王大军王明丽周德庆中国水产科学研究院黄海水产研究所青岛海洋科学与技术试点国家实验室海洋药物与生物制品功能实验室山东青岛266071 青岛滨海学院山东青岛266555 烟台海裕食品有限公司山东烟台264000 蓬莱汇洋食品有限公司山东烟台264000

为明确人诺如病毒(human norovirus,HuNoV)与长牡蛎类组织血型抗原(histo-blood group antigens,HBGAs)的结合特性,本实验运用大肠杆菌表达系统,克隆表达了基因簇I.5(genogroup I.5,GI.5)和GII.4 HuNoV P蛋白,采用酶联免疫吸附测定研究HuNoV P蛋白与唾液HBGAs和长牡蛎类HBGAs的结合特性。结果表明,GII.4 HuNoV与唾液A型、B型、AB型和O型HBGAs均有较好的结合,而GI.5 HuNoV与B型HBGAs结合较弱,与O型HBGAs具有明显的结合优势。GI.5和GII.4 HuNoV在长牡蛎鳃、消化腺和外套膜中均可富集,其中在消化腺中富集最多,二者主要与类A型和H1型HBGAs结合,GII.4HuNoV与类Lea型、Leb型、Lex型和Ley型HBGAs有不同程度的结合,而GI.5 HuNoV与类Leb型HBGAs仅微弱结合,与类H1型HBGAs具有明显结合优势。综上,不同型别HuNoV与HBGAs的结合特性不尽相同,GII.4HuNoV具有广谱结合特性,GI.5HuNoV具有选择结合特性。

关键词：人诺如病毒 P蛋白长牡蛎组织血型抗原结合特性