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基于半胱氨酸-Fe(Ⅲ)-邻菲啰啉体系的共振光散射光谱法测定半胱氨酸的含量

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理化检验（化学分册） 2024年第2期60卷 234-237页

作者：刘毅袁莉袁嘉怡储文马卫兴江苏海洋大学药学院连云港222005 江苏省海洋药物筛选重点实验室连云港222005

半胱氨酸是一种含有巯基的非必需氨基酸,参与体内多种氧化还原反应,在人体生理过程中发挥着至关重要的作用,它在人体内的浓度水平与多种疾病相关[1-2]。半胱氨酸在食品、制药、化妆品中的应用十分广泛[3],因此建立省时、高效的检测半胱... 详细信息

半胱氨酸是一种含有巯基的非必需氨基酸,参与体内多种氧化还原反应,在人体生理过程中发挥着至关重要的作用,它在人体内的浓度水平与多种疾病相关[1-2]。半胱氨酸在食品、制药、化妆品中的应用十分广泛[3],因此建立省时、高效的检测半胱氨酸的方法对于相关产品的质量控制具有重要意义。

关键词：氧化还原反应 Fe(Ⅲ) 共振光散射光谱法半胱氨酸邻菲啰啉非必需氨基酸人体生理浓度水平

新型吡唑乙酰胺类琥珀酸脱氢酶抑制剂的设计、合成及抑菌活性

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高等学校化学学报 2024年第2期45卷 54-62页

作者：王晓斌董雪王瑞颖张娟王濛琪张宗群杨婷玉许梦寒江苏海洋大学药学院江苏省海洋药物活性分子筛选重点实验室连云港222005 江苏海洋大学海洋工程学院海洋工程技术研究中心连云港222005 南京农业大学理学院江苏省农药学重点实验室南京210095

为开发出新型杀菌剂候选分子,通过柔性改造吡唑甲酰胺杀菌剂结构中的二元酰胺键得到了一系列潜在靶向真菌琥珀酸脱氢酶(SDH)的新型吡唑乙酰胺分子.借助菌丝生长速率法发现了其中具有广谱抑菌特性的二苯醚联吡唑乙酰胺分子(6l),其在药剂... 详细信息

为开发出新型杀菌剂候选分子,通过柔性改造吡唑甲酰胺杀菌剂结构中的二元酰胺键得到了一系列潜在靶向真菌琥珀酸脱氢酶(SDH)的新型吡唑乙酰胺分子.借助菌丝生长速率法发现了其中具有广谱抑菌特性的二苯醚联吡唑乙酰胺分子(6l),其在药剂质量浓度为50μg/mL时对水稻纹枯病菌、小麦赤霉病菌和草莓灰霉病菌的抑制效果均优于对照药剂噁霉灵.化合物6l对水稻纹枯病菌的半最大效应浓度(EC_(50)值)为19.92μg/mL,抑菌活性明显优于对照药剂噁霉灵和氟吡菌酰胺(EC_(50)分别为76.74和40.36μg/mL).SDH酶活力测试结果表明,真菌体内的SDH是化合物6l抑制水稻纹枯病菌生长的潜在作用靶标.分子对接研究结果显示,化合物6l分子结构中的二苯醚单元能以多种方式与靶标口袋的关键残基结合,对分子发挥抑菌活性起到了关键作用.研究结果表明,二苯醚联吡唑乙酰胺分子对植物病原真菌具有较显著的抑制作用,在其结构基础上进行深度的优化和改造有望得到可有效防控植物病原真菌的新型杀菌剂候选分子.

关键词：抑菌先导发现吡唑乙酰胺植物病原真菌琥珀酸脱氢酶抑制剂

红树林来源链霉菌中2-羟基苯基噻唑啉衍生物及其生物合成基因簇分析

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热带海洋学报 2024年

作者：刘思妮白猛朱义广罗小卫高程海刘永宏徐新亚蒋晓东广西中医药大学海洋药物研究院广西海洋药物重点实验室广东省海洋药物重点实验室(中国科学院南海海洋研究所)

为了探讨和分析海南红树林沉积物来源链霉菌Streptomyces ardesiacus GXIMD 03502的次级代谢产物及相应生物合成基因簇。通过比对16S rDNA序列信息对菌株进行初步鉴定;综合运用多种色谱分离技术分离其次级代谢产物,结合波谱数据分析与... 详细信息

为了探讨和分析海南红树林沉积物来源链霉菌Streptomyces ardesiacus GXIMD 03502的次级代谢产物及相应生物合成基因簇。通过比对16S rDNA序列信息对菌株进行初步鉴定;综合运用多种色谱分离技术分离其次级代谢产物,结合波谱数据分析与文献数据比对确定化合物的结构。从该链霉菌中获得5个化合物,鉴定为(+)-(S)-pulicatin G (1)、pulicatin A (2)、aerugine (3)、pulicatin F (4)和(+)-(S)-dihydraeruginoic acid (5)。采用Illumina novaseq 6000技术对菌株进行基因组测序,利用生物信息学技术分析、定位及注释负责合成相应化合物的基因簇,并推导其生物合成途径。该菌株基因组分析结果表明其包含31个次级代谢生物合成基因簇,其中基因簇11可能负责2-羟基苯基噻唑啉衍生物的生物合成,并推导了其生物合成途径。本研究为2-羟基苯基噻唑啉类活性天然产物的开发提供了新菌株资源,为挖掘其蕴藏的次级代谢产物奠定了基础。

关键词：红树林放线菌链霉菌 2-羟基苯基噻唑啉生物合成基因簇

基于转录组测序的苦瓜皂苷合成相关基因的鉴定和分析

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中国农业科学 2024年第9期57卷 1779-1793页

作者：戚仁洁宁宇刘静刘之洋徐海罗志丹陈龙正江苏海洋大学药学院/江苏省海洋生物资源与环境重点实验室/江苏省海洋药物化合物筛选重点实验室江苏海洋大学/江苏海洋生物产业技术协同创新中心江苏省农业科学院蔬菜研究所/江苏省高效园艺作物遗传改良重点实验室

【目的】皂苷是苦瓜果实苦味的主要来源，具有降血糖、抗癌等多种药用价值。鉴定和挖掘参与调控苦瓜皂苷生物合成的代谢通路及基因，为进一步深入解析苦瓜皂苷形成的分子机制提供参考。【方法】以苦瓜高代自交系GK24为试验材料，分别在... 详细信息

【目的】皂苷是苦瓜果实苦味的主要来源，具有降血糖、抗癌等多种药用价值。鉴定和挖掘参与调控苦瓜皂苷生物合成的代谢通路及基因，为进一步深入解析苦瓜皂苷形成的分子机制提供参考。【方法】以苦瓜高代自交系GK24为试验材料，分别在子房期（T1）、幼果期（T2）、商品果期（T3）和完全成熟期（T4）取果实组织，通过香草醛-冰醋酸法测定不同时期的苦瓜皂苷含量，利用转录组测序的方法鉴定差异表达基因。【结果】从T1到T4，苦瓜内源皂苷含量随着果实发育而呈现显著下降的趋势。转录组测序共鉴定到17 504个基因，在T1-vs-T2、T2-vs-T3和T3-vs-T4三组比较中，下调表达基因数量均高于上调表达基因数量。GO富集分析表明含磷复合物代谢过程、驱动蛋白复合体和2-琥珀酰-6-羟基-环己二烯-1-羧酸合成酶活性分别是生物过程、细胞组分及分子功能模块最显著富集的条目。KEGG分析显示全局与概述图谱、碳水化合物代谢和氨基酸代谢是3组比较中共同的最显著富集的代谢通路。根据表达模式可将基因划分为20个模块，其中profile 0中基因的表达量从T1到T4逐渐降低，与苦瓜果实发育过程中皂苷含量变化规律一致。从profile 0中鉴定出与苦瓜皂苷生物合成相关的基因14个，包括萜类骨架生物合成通路上的基因AAT1、HMG1、MVK、PMK、MVD2和FPS1，倍半萜与三萜生物合成途径中的基因SS12、SQE1和CPQ及后修饰酶基因CYP97A3、CYP71AN24、UGT94E5及UGT73C6。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)结果与RNA-seq结果一致。【结论】苦瓜果实中皂苷含量随着果实不断成熟而逐渐降低。苦瓜皂苷生物合成首先通过上游的萜类骨架生物合成（ko00900）代谢途径完成萜类皂苷骨架的积累，随后通过倍半萜与三萜生物合成（ko00909）代谢途径以及下游的氧化还原酶、糖基转移酶的修饰最终生成皂苷，本研究通过转录组测序共鉴定到14个与苦瓜皂苷生物合成相关的基因。

关键词：苦瓜转录组差异表达基因皂苷合成调控

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一种非奈利酮消旋体的制备方法

精细化工 2024年

作者：曹阳崔文慧李前吴庆昆高辉江苏德源药业股份有限公司南京大学化学化工学院江苏海洋大学江苏省海洋药物活性分子筛选重点实验室

以4-氰基-2-甲氧基苯甲醛和乙酰乙酸叔丁酯为原料，通过缩合、关环、氧烷基化、水解以及氨解反应，得到了非奈利酮消旋体。考察了多种取代基酯在碱性条件下的水解，发现常规酯在NaOH等多种碱性条件下均未水解，而在酸性条件下则可发生... 详细信息

以4-氰基-2-甲氧基苯甲醛和乙酰乙酸叔丁酯为原料，通过缩合、关环、氧烷基化、水解以及氨解反应，得到了非奈利酮消旋体。考察了多种取代基酯在碱性条件下的水解，发现常规酯在NaOH等多种碱性条件下均未水解，而在酸性条件下则可发生水解，在三氟乙酸(TFA)的作用下，二氯甲烷(CH2Cl2)作溶剂，室温条件下可实现叔丁基4-(4-氰基-2-甲氧基苯基)-5-乙氧基-2，8-二甲基-1，4-二氢-1，6-萘啶-3-羧酸酯(Ⅶ)的水解，重点优化了中间体Ⅶ的水解条件。结果表明，在n(Ⅶ)∶n(TFA)=1∶10、V(Ⅶ)∶V(CH2Cl2)=1∶10、室温(25 ℃)条件下反应3 h，即可得到收率为68%的4-(4-氰基-2-甲氧基苯基)-5-乙氧基-2，8-二甲基-1，4-二氢-1，6-萘啶-3-羧酸(Ⅷ)(HPLC纯度98%)。本方法突破了常规酯在碱性条件下难以水解的困难，反应放大到百克级，最终以34%的总收率得到非奈利酮消旋体(HPLC纯度99%)。产物经1HNMR、13CNMR和HRMS确定结构。

关键词：非奈利酮路线优化原料药水解反应精细化工中间体

共振光散射光谱法和可见分光光度法测定酒石酸泰乐菌素的含量

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理化检验（化学分册） 2024年第4期60卷 358-364页

作者：袁莉刘毅储文袁嘉怡马卫兴江苏海洋大学药学院连云港222005 江苏海洋大学生物医药产业学院连云港222005 江苏省海洋药物筛选重点实验室连云港222005

将注射用酒石酸泰乐菌素样品稀释一定倍数后,分取1.20 mL样品稀释液、1.25 mL pH 3.0 Clark-Lubs(克拉克-鲁布斯)缓冲溶液和1.25 mL 1×10^(-4)mol·L^(-1)虎红溶液,室温反应20 min,用水稀释至10 mL。在315 nm处分别测量空白溶液(I_(0)... 详细信息

将注射用酒石酸泰乐菌素样品稀释一定倍数后,分取1.20 mL样品稀释液、1.25 mL pH 3.0 Clark-Lubs(克拉克-鲁布斯)缓冲溶液和1.25 mL 1×10^(-4)mol·L^(-1)虎红溶液,室温反应20 min,用水稀释至10 mL。在315 nm处分别测量空白溶液(I_(0))及样品溶液(I)的共振光散射强度,计算共振光散射强度差值ΔI=I-I_(0)。分取1.00 mL样品稀释液、0.75 mL pH 3.4 Clark-Lubs缓冲溶液和2.50 mL 5×10^(-4)mol·L^(-1)虎红溶液,室温反应30 min,用水稀释至10 mL。以水为参比,在564 nm处测量空白溶液(A_(0))和样品溶液(A)的吸光度,计算吸光度差值ΔA=A-A_(0)。结果显示:酒石酸泰乐菌素的质量浓度分别在0.3~1.2 mg·L^(-1)内和ΔI呈线性关系,在4.0~48.0 mg·L^(-1)内和ΔA呈线性关系。2种方法的检出限分别为0.022 mg·L^(-1)和0.107 mg·L^(-1),回收率分别为99.0%~101%和98.2%~101%,测定值的RSD均小于1.0%。推断了2种方法的反应机理,ΔI和ΔA随酒石酸泰乐菌素质量浓度增加而增大的现象均和形成了离子缔合型超分子聚集体有关,形成的离子缔合型超分子聚集体中酒石酸泰乐菌素和虎红的物质的量比分别为1:6和1:24。

关键词：酒石酸泰乐菌素虎红离子缔合型超分子聚集体共振光散射光谱法可见分光光度法

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微生物次级代谢产物多样性发掘方法

中国抗生素杂志 2024年第4期49卷 415-426页

作者：方岫琴王文璟李华东张晓婷朱天骄车茜李德海张国建中国海洋大学海洋药物教育部重点实验室医药学院青岛266003 崂山实验室海洋药物和生物制品功能实验室青岛266237 青岛海洋生物医药研究院青岛266100

微生物次级代谢产物是微生物在生长过程中产生的非必需性代谢产物,其往往具有独特的生物活性。随着对微生物次级代谢产物多样性研究的不断深入开展,研究者逐渐发现在实验室的常规培养条件下微生物的代谢潜能不能完全被激发,从中可获得... 详细信息

微生物次级代谢产物是微生物在生长过程中产生的非必需性代谢产物,其往往具有独特的生物活性。随着对微生物次级代谢产物多样性研究的不断深入开展,研究者逐渐发现在实验室的常规培养条件下微生物的代谢潜能不能完全被激发,从中可获得的天然产物结构类型远远少于其代谢潜能所决定的数量。近年来,随着基因组技术、分子生物学技术特别是合成生物学相关技术的发展,研究人员开发了如OSMAC、表观遗传、异源表达等多种方法,从多个角度多层次地发掘次级代谢产物多样性。这些方法有效激活潜在的生物合成基因簇、提高了微生物次级代谢产物多样性,加之与高通量筛选方法联合应用,能够显著改善了微生物活性天然产物的发现效率。本文综述了微生物次级代谢潜能的激活以及代谢产物高效筛选的方法和技术,为提高微生物次级代谢产物多样性发掘,加快先导化合物的发现提供参考。

关键词：微生物次级代谢产物沉默基因簇代谢潜能激活结构多样性

离子缔合褪色反应分光光度法测定甜味剂甘草酸的含量

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中国调味品 2024年第2期49卷 147-151页

作者：储文田美黄佃宇马卫兴江苏海洋大学药学院江苏连云港222005 江苏海洋大学生物医药产业学院江苏连云港222005 江苏省海洋药物筛选重点实验室江苏连云港222005

基于甘草酸二铵与三苯甲烷类阳离子染料乙基紫发生离子缔合反应,首次提出离子缔合褪色反应分光光度法间接测定甜味剂甘草酸含量的新方法。在pH 8.6的Clark-Lubs缓冲溶液中,甘草酸二铵与乙基紫发生离子缔合反应,生成的离子缔合物使溶液... 详细信息

基于甘草酸二铵与三苯甲烷类阳离子染料乙基紫发生离子缔合反应,首次提出离子缔合褪色反应分光光度法间接测定甜味剂甘草酸含量的新方法。在pH 8.6的Clark-Lubs缓冲溶液中,甘草酸二铵与乙基紫发生离子缔合反应,生成的离子缔合物使溶液显著褪色,褪色的最大吸收波长在594 nm处,据此建立了间接测定甘草酸的分析方法。结果显示,甘草酸二铵的浓度在3.00~12.00 mg/L之间与吸光度差值ΔA呈良好的线性关系,相关系数为0.9995,检出限为0.46 mg/L,表观摩尔吸光系数为3.20×10^(4)L/(mol·cm)。方法成功用于市售凉茶样品的含量测定,加标平均回收率为97.11%~101.0%,测定值的相对标准偏差RSD为0.59%~3.23%(n=5)。该法灵敏度高、专属性强、省时简便,可用于实际样品分析。

关键词：甘草酸乙基紫褪色分光光度法含量测定离子缔合反应

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基于特征脂肪酸的中药海藻鉴别研究

中国药学杂志 2024年第10期59卷 887-895页

作者：耿玺承马善鹏陈嘉鹏陈璐晶林立东刘红兵中国海洋大学海洋药物教育部重点实验室山东青岛266003 海洋药物与生物制品功能实验室青岛海洋科学与技术试点国家实验室山东青岛266237 温州市洞头区海洋与渔业发展研究中心浙江温州325700 国家药品监督管理局海洋中药质量研究与评价重点实验室山东青岛266000

目的利用植物脂质组学和化学分类学开展羊栖菜与其同属易混马尾藻的鉴别研究。方法收集27批羊栖菜,靶向建立了脂肪酸气相色谱-质谱(GC-MS)指纹图谱;运用主成分分析、正交偏最小二乘判别分析等化学模式识别方法,比较了羊栖菜与同属其他8... 详细信息

目的利用植物脂质组学和化学分类学开展羊栖菜与其同属易混马尾藻的鉴别研究。方法收集27批羊栖菜,靶向建立了脂肪酸气相色谱-质谱(GC-MS)指纹图谱;运用主成分分析、正交偏最小二乘判别分析等化学模式识别方法,比较了羊栖菜与同属其他8种22批马尾藻,建立了海藻饮片判别模型;基于羊栖菜与其他马尾藻的差异脂肪酸,结合脂肪酸生合成途径分析,筛选质量标志物。结果指纹图谱共标定29个共有脂肪酸,相似度均大于0.96。化学模式识别法能够很好区分羊栖菜与同属其他8种22批马尾藻,以此建立的判别模型能够准确验证15批市售海藻饮片。结合差异脂肪酸与脂肪酸生合成途径分析,发现单不饱和脂肪酸在化学分类中的重要作用,提出比值C20∶1 n-9/C16∶1 n-7可作为羊栖菜鉴别的候选质量标志物,14批市售海藻饮片可被准确验证。结论本研究建立了羊栖菜与同属易混马尾藻的判别模型,发现了脂肪酸质量标志物,为中药海藻真伪鉴别方法的制定提供参考。

关键词：中药海藻羊栖菜脂肪酸化学分类学质量标志物