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卵形鲳鲹促性腺激素β亚基的克隆鉴定及其受雌二醇的调控

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中山大学学报（自然科学版）（中英文） 2025年第1期64卷 172-181页

作者：黄春艳陈华谱郭煜文王岩杨浩李广丽广东省名特优鱼类生殖调控与繁育工程技术研究中心/广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室/广东省海水养殖生物育种工程实验室/广东海洋大学水产学院广东湛江524088

促性腺激素(GtH,gonadotropin hormone)是垂体合成和分泌的一类重要糖蛋白激素,包括促卵泡生成素(Fsh,follicle stimulating hormone)和促黄体生成素(Lh,luteinizing hormone),在促进性腺发育和成熟过程中发挥重要作用。本研究成功克隆... 详细信息

促性腺激素(GtH,gonadotropin hormone)是垂体合成和分泌的一类重要糖蛋白激素,包括促卵泡生成素(Fsh,follicle stimulating hormone)和促黄体生成素(Lh,luteinizing hormone),在促进性腺发育和成熟过程中发挥重要作用。本研究成功克隆了卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)fshβ和lhβ基因的开放阅读框(ORF,open reading frame)序列,fshβORF长度为363 bp,lhβORF长度为447 bp。通过荧光定量PCR技术(qPCR,quantitative realtime PCR)检测,发现fshβ和lhβ基因在卵形鲳鲹的下丘脑-垂体-性腺轴(HPG,hypothalamus-pituitary-gonadal axis)显著表达,在垂体中的表达水平最高,其次是下丘脑和性腺。此外,通过体外实验评估17β-雌二醇(E2,17β-estradiol)对卵形鲳鲹垂体组织中fshβ和lhβ基因表达的影响。结果显示,10μmol/L E2处理6 h后,GtHβ亚基基因的表达被极显著抑制。最后,使用雌激素受体(ER,estrogen receptor)拮抗剂体外孵育卵形鲳鲹垂体组织,发现广谱性拮抗剂Fulvestrant、ERβ拮抗剂Cyclofenil和ERα拮抗剂MPP(MPP dihydrochloride)均能够消除E2对GtHβ亚基基因表达的抑制作用。综上所述,研究结果表明E2对卵形鲳鲹GtH的分泌具有负反馈调节作用,为卵形鲳鲹生殖调控机制提供了有价值的见解。

关键词：卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus) 促性腺激素(GtH) 雌激素受体(ER) 17β-雌二醇(E2)

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不同乳酸菌制剂组合对油菜秸秆发酵品质和体外瘤胃发酵特性的影响

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草业学报 2025年第1期 203-214页

作者：马永霞代程程吴建平张康林史海涛黄艳玲西南民族大学畜牧兽医学院青藏高原动物遗传资源保护与利用教育部重点实验室动物科学国家民委重点实验室四川省甘孜藏族自治州畜牧科学研究所

本试验旨在探究植物乳酸杆菌和布氏乳酸杆菌对油菜秸秆的常规营养成分、康奈尔净碳水化合物蛋白质体系组分（CNCPS）和牦牛体外瘤胃发酵参数的影响。以油菜秸秆为发酵底物，共设置4个处理组，分别为对照组（CON组，不添加任何菌制剂）... 详细信息

本试验旨在探究植物乳酸杆菌和布氏乳酸杆菌对油菜秸秆的常规营养成分、康奈尔净碳水化合物蛋白质体系组分（CNCPS）和牦牛体外瘤胃发酵参数的影响。以油菜秸秆为发酵底物，共设置4个处理组，分别为对照组（CON组，不添加任何菌制剂）、LP组(添加1.0 g·kg-1植物乳酸杆菌)、LB组(添加1.0 g·kg-1布氏乳酸杆菌)和LPB组(1.0 g·kg-1植物乳酸杆菌+1.0 g·kg-1布氏乳酸杆菌)，每个处理5个重复。油菜秸秆切短至2 cm并与菌制剂混合均匀后，室温厌氧发酵45 d后取样。测定油菜秸秆营养成分、CNCPS和牦牛体外瘤胃发酵参数。结果表明：1)与CON组相比，LP、LB和LPB组pH值均降低（P0.05）,LPB组的非蛋白氮（PA1）含量升高（P0.05），各组NH3-N含量均低于CON组（P营养价值，且不同种类菌制剂对油菜秸秆营养价值的改善作用不同，经综合比较，植物乳杆菌+布氏乳杆菌>植物乳杆菌>布氏乳杆菌。

关键词：油菜秸秆康奈尔净碳水化合物蛋白质体系组分菌制剂体外发酵

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胆碱对高脂胁迫的团头鲂肝脏抗氧化、组织结构和免疫力的影响

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水产学报 2017年第3期41卷 438-447页

作者：张定东李俊怡王冰柯李向飞蒋广震李鹏飞蔡万存刘文斌南京农业大学动物科技学院江苏省水产动物营养重点实验室

以初始体质量(42.20±0.34)g团头鲂为研究对象,研究饲料中添加胆碱对高脂胁迫团头鲂肝脏抗氧化、组织结构和免疫力的影响。实验采用2×2因子设计方法,共配置2个脂肪水平(5%和15%)和2个胆碱水平(1200和2200 mg/kg)的等氮饲料4组。养殖实... 详细信息

以初始体质量(42.20±0.34)g团头鲂为研究对象,研究饲料中添加胆碱对高脂胁迫团头鲂肝脏抗氧化、组织结构和免疫力的影响。实验采用2×2因子设计方法,共配置2个脂肪水平(5%和15%)和2个胆碱水平(1200和2200 mg/kg)的等氮饲料4组。养殖实验在室内循环水系统中进行,养殖周期为8周。养殖实验结束后进行血液和肝脏生化指标、肝脏抗氧化指标和非特异性免疫指标等的检测分析,以及观察肝细胞的超微结构变化。结果显示,当饲料中添加1200 mg/kg胆碱时,随着脂肪水平的升高,团头鲂肝脏脂肪含量和甘油三酯浓度显著增加,而血浆中谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)活性则显著上升;肝脏中丙二醛(MDA)含量、总超氧化物歧化酶(t-SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)活性等显著升高;血液中白细胞数、溶菌酶活性、总蛋白和球蛋白水平以及还原型谷胱甘肽(GSH)活性显著降低;超微结构观察到肝细胞中存在大量脂滴,伴随着细胞核变性、核膜残缺、线粒体水肿等异常现象。这些结果表明高脂日粮不仅导致肝细胞的结构和功能的损伤,而且造成肝脏氧化应激和机体免疫力的下降。在高脂饲料(15%脂肪)中添加2200 mg/kg胆碱,可显著降低肝脏脂肪含量、血浆谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)活性,显著降低肝脏丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性,并显著提高白细胞数和球蛋白水平以及还原型谷胱甘肽(GSH)活性,同时肝细胞形态及细胞器结构也趋于正常。研究表明,添加适量胆碱能够减少肝脏脂肪沉积,维持肝脏结构和功能的正常,并增强团头鲂抗氧化能力和机体免疫力,继而保持鱼体的健康。

关键词：团头鲂胆碱高脂抗氧化免疫超微结构

软骨藻酸对海湾扇贝(Argopecten irradians)血淋巴免疫力和抗氧化力的影响研究

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中国水产科学 2020年第11期27卷 1371-1378页

作者：迟骋张彩艳刘佳岱叶明文于夏玮南京农业大学动物科技学院江苏省水产动物营养重点实验室

软骨藻酸是一种神经性贝类毒素,大多数研究只报道了对陆生动物神经系统的毒性和在贝类组织内累计的软骨藻酸的浓度,而对软骨藻酸对贝类自身的免疫及抗氧化系统的毒性作用相关的研究不足。扇贝作为无脊椎动物,缺乏适应性免疫,主要依靠先... 详细信息

软骨藻酸是一种神经性贝类毒素,大多数研究只报道了对陆生动物神经系统的毒性和在贝类组织内累计的软骨藻酸的浓度,而对软骨藻酸对贝类自身的免疫及抗氧化系统的毒性作用相关的研究不足。扇贝作为无脊椎动物,缺乏适应性免疫,主要依靠先天免疫系统进行防御。因此,本研究以海湾扇贝(Argopecten irradian)为研究对象,在0、10 ng/mL、50 ng/mL和100 ng/mL软骨藻酸浸泡6 h、12 h和24 h后通过测定扇贝血淋巴中超氧化物歧化酶(SOD)、溶菌酶(LZM)活性和谷胱甘肽(GSH)含量以及免疫、抗氧化相关基因(Cu/ZnSOD、MnSOD、GST和ACP)相对表达量来研究其对扇贝免疫力及抗氧化系统的影响。结果发现,LZM活性在10ng/mL和50ng/mL软骨藻酸处理后显著提高; ACP基因表达量在6 h和12 h内表达量受到上调,而在24 h表达量显著下调; 10 ng/mL、50 ng/mL和100 ng/mL软骨藻酸浸泡扇贝6～24 h后SOD活性受到抑制,并且Cu/ZnSOD和MnSOD基因表达受到调控; GSH含量显著提高,并且GST基因表达量显著上调。以上结果表明软骨藻酸处理虽然会抑制抗氧化酶SOD活性,并且高浓度长时间处理会造成免疫疲劳现象,但机体可通过提高血淋巴GSH水平和GST基因的表达量来抵抗软骨藻酸的毒性。因此,本研究初步揭示了软骨藻酸对扇贝等双壳类免疫力、抗氧化力和解毒力的影响。

关键词：软骨藻酸免疫力抗氧化力海湾扇贝

两种水温条件下团头鲂对7种蛋白源饲料表观消化率的比较

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中国水产科学 2018年第1期25卷 86-96页

作者：薛云飞蒋广震蔡万存钱妤刘文斌南京农业大学动物科技学院江苏省水产动物营养重点实验室

采用由30%待测蛋白源饲料原料和70%基础饲料组成的试验饲料,以三氧化二钇(YO)作外源指示剂,添加量为0.05%,以平均体重(34.38±1.06)g的团头鲂(Megalobrama amblycephala)幼鱼作研究对象,在30℃和25℃两种水温条件下比较研究其对鱼粉(FM... 详细信息

采用由30%待测蛋白源饲料原料和70%基础饲料组成的试验饲料,以三氧化二钇(YO)作外源指示剂,添加量为0.05%,以平均体重(34.38±1.06)g的团头鲂(Megalobrama amblycephala)幼鱼作研究对象,在30℃和25℃两种水温条件下比较研究其对鱼粉(FM)、豆粕(SBM)、菜粕(RSM)、棉粕(CSM)、酵母浸粉(YEF)、肉骨粉(MBM)和花生粕(PNM)7种蛋白源饲料原料的干物质(DM)、粗蛋白(CP)、总能(GE)、总氨基酸(TAA)及必需氨基酸(EAA)的表观消化率。结果显示:水温30℃时,酵母浸粉的干物质、总能、粗蛋白和必需氨基酸的表观消化率最高;水温25℃时,原料干物质和总能的表观消化率最高的为鱼粉,粗蛋白、必需氨基酸和总氨基酸的表观消化率最高的为豆粕。在两个水温下,原料干物质、粗蛋白、总氨基酸和必需氨基酸的表观消化率最低的均是肉骨粉,总能的表观消化率最低的是棉粕。在30℃时团头鲂对蛋白源饲料原料各营养成分的表观消化率高于25℃时,且酵母浸粉在两个水温下各营养成分的消化率差异显著(P<0.05)。在30℃时,酵母浸粉的各养分表观消化率较高,但其氨基酸平衡性较差,需适量添加蛋氨酸,满足团头鲂对氨基酸的需求;在25℃时,豆粕和鱼粉各养分表观消化率较高,可作为团头鲂饲料的优质蛋白源饲料原料。肉骨粉在两个水温下均表现出最低表观消化率,需搭配其他饲料适量使用。

关键词：团头鲂蛋白源饲料原料水温表观消化率

甘草次酸对斑点叉尾鮰免疫应激下血浆抗氧化酶和免疫指标的影响

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水产学报 2016年第9期40卷 1368-1375页

作者：蒋广震周嫚李向飞张定东刘文斌南京农业大学动物科技学院江苏省水产动物营养重点实验室

为探讨斑点叉尾鮰免疫应激状态下血浆抗氧化酶和免疫指标的变化,并研究甘草次酸对斑点叉尾鮰免疫应激的调控机制,实验设计两组,每组6个重复:1)对照组,饲喂基础饲料;2)GA组,饲喂含0.15 g/kg甘草次酸饲料,养殖8周后,腹腔注射大肠杆菌脂多... 详细信息

为探讨斑点叉尾鮰免疫应激状态下血浆抗氧化酶和免疫指标的变化,并研究甘草次酸对斑点叉尾鮰免疫应激的调控机制,实验设计两组,每组6个重复:1)对照组,饲喂基础饲料;2)GA组,饲喂含0.15 g/kg甘草次酸饲料,养殖8周后,腹腔注射大肠杆菌脂多糖(LPS),分别在注射后0、3、6、12、24、48 h采集血液和肝脏组织,进行红细胞、白细胞计数,分离血浆后检测血浆史质醇、溶菌酶、ACH50、谷草转氨酶、谷丙转氨酶、碱性磷酸酶活性,肝脏匀浆液检测SOD、MDA和CAT抗氧化酶活性。结果显示,在腹腔注射LPS后,血浆溶菌酶、史质醇、谷草转氨酶、谷丙转氨酶、ACH50、SOD均呈现先升高后下降的趋势,白细胞计数、血浆CAT呈现先下降后升高的趋势;饲料中添加0.15 g/kg甘草次酸显著抑制了各指标变化,缩短了由LPS诱导产生各指标变化的恢复时间。研究表明,腹腔注射LPS使斑点叉尾鮰产生免疫应激,并在注射后6~12 h达到顶峰;饲料中添加0.15 g/kg甘草次酸可以有效抑制由LPS诱导的免疫应激反应。

关键词：斑点叉尾鮰甘草次酸脂多糖免疫应激抗氧化酶活性

不同饲料料型及投喂频率对斑点叉尾鮰幼鱼生长及肌肉品质的影响

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中国水产科学 2018年第6期25卷 1260-1270页

作者：李卓钦刘文斌田红艳徐超蒋广震南京农业大学动物科技学院江苏省水产动物营养重点实验室

本研究旨在探究不同饲料料型及投喂频率对斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatus)生长及肌肉品质的影响。研究采用双因素试验设计,以饲料料型(膨化饲料,EF;颗粒饲料,PF)和投喂频率(2次/日,F2;3次/日,F3)为影响因素,共4个组,分别命名为EFF2、P... 详细信息

本研究旨在探究不同饲料料型及投喂频率对斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatus)生长及肌肉品质的影响。研究采用双因素试验设计,以饲料料型(膨化饲料,EF;颗粒饲料,PF)和投喂频率(2次/日,F2;3次/日,F3)为影响因素,共4个组,分别命名为EFF2、PFF2、EFF3和PFF3,每组3个平行,投喂8周,每天定时投喂两次(7:30和16:30)或3次(7:30, 12:00, 16:30)。结果显示,斑点叉尾鮰的末重和增重率受到投喂频率的影响,F2组显著高于F3组(P0.05)。颗粒饲料组的肌肉粗脂肪含量和内聚性、回复性显著低于膨化饲料组(P<0.05),而硬度显著高于膨化饲料组(P<0.05)。F3组的肌肉硬度、胶着性和咀嚼性则显著高于F2组(P<0.05)。颗粒饲料组生肌调节因子5 (myogenic factor 5, Myf5)和肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)基因的相对表达量显著低于膨化饲料组(P<0.05)。F3组肌肉中MSTN基因相对表达量显著高于F2组,而肌细胞生成素(myogenin,MyoG)基因相对表达量则呈现相反趋势。综上,投喂同种配方的膨化饲料和颗粒饲料对斑点叉尾鮰的生长效果相似,但是投喂颗粒饲料的斑点叉尾鮰硬度更大,而投喂膨化饲料则肌肉脂肪含量更高;斑点叉尾鮰的最佳投喂频率是每天2次。

关键词：膨化饲料颗粒饲料投喂频率斑点叉尾鮰生长性能肌肉品质

中草药提取物黄连素对草鱼肝细胞氧化应激和细胞凋亡的影响

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中国水产科学 2018年第6期25卷 1281-1288页

作者：陈丹红陈青青田红艳施华娟刘文斌南京农业大学动物科技学院江苏省水产动物营养重点实验室

本研究运用细胞生物学研究方法,探讨中草药提取物黄连素对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肝细胞(L8824)活力、氧化应激和细胞凋亡的影响。用不同浓度黄连素(0μmol/L、5μmol/L、25μmol/L、50μmol/L和100μmol/L)分别处理体外培养的... 详细信息

本研究运用细胞生物学研究方法,探讨中草药提取物黄连素对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肝细胞(L8824)活力、氧化应激和细胞凋亡的影响。用不同浓度黄连素(0μmol/L、5μmol/L、25μmol/L、50μmol/L和100μmol/L)分别处理体外培养的草鱼肝细胞Oh、6 h、12 h和24 h,采用CCK-8法检测细胞活力。结果显示,黄连素浓度和时间对细胞活力有显著交互作用(P<0.05),且黄连素浓度对其活力影响差异显著(P<0.05),草鱼肝细胞活力随着黄连素的浓度增加先升高后降低(P<0.05)。在此基础上,设置了黄连素梯度浓度(0μmol/L、5μmol/L、25μmol/L、50μmol/L和100μmol/L)培养草鱼肝细胞12 h后,收集细胞,测定细胞谷丙转氨酶(GPT)及谷草转氨酶(GOT)活性,丙二醛(MDA)及活性氧(ROS)含量、细胞凋亡水平和相关基因mRNA表达量。结果表明,与不添加黄连素组相比,当黄连素浓度为100μmol/L时,细胞GOT和GPT活性、ROS和MDA含量显著(P<0.05)增加。当黄连素的浓度为25μmol/L和50μmol/L时,细胞凋亡水平显著(P<0.05)升高;当黄连素的浓度增加到100μmol/L时,细胞凋亡水平显著(P<0.05)降低。当黄连素的浓度为50μmol/L和100μmol/L时,细胞半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)mRNA表达量显著(P<0.05)升高。综上所述,当黄连素浓度超过50μmol/L会抑制细胞的生长,引发氧化应激,影响细胞功能。因此,黄连素在草鱼肝细胞培养液中添加的适宜浓度为25～50μmol/L。

关键词：草鱼肝细胞黄连素细胞活力氧化应激细胞凋亡

不同投饵率对团头鲂幼鱼血脂水平及脂肪代谢相关基因表达的影响

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水产学报 2016年第11期40卷 1732-1741页

作者：徐超李向飞田红艳周嫚蔡万存刘文斌南京农业大学动物科技学院江苏省水产动物营养重点实验室

为了探究不同投饵率对团头鲂幼鱼脂肪代谢机能的影响,选取840尾平均体质量为（23.74±0.09）g的团头鲂幼鱼,随机分为6组,每组4重复,每重复35尾鱼,分别对应6种投饵率:2%、3%、4%、5%、6%和7%（日投喂量占鱼体质量的比例）,饲养60 d后,测... 详细信息

为了探究不同投饵率对团头鲂幼鱼脂肪代谢机能的影响,选取840尾平均体质量为（23.74±0.09）g的团头鲂幼鱼,随机分为6组,每组4重复,每重复35尾鱼,分别对应6种投饵率:2%、3%、4%、5%、6%和7%（日投喂量占鱼体质量的比例）,饲养60 d后,测定其血脂水平及脂肪代谢相关基因表达的指标。结果发现,随着投饵率的升高,血浆甘油三酯和总胆固醇含量先升高后降低,且各组间差异显著;6%投饵率组的血浆高密度脂蛋白和5%投饵率组的低密度脂蛋白含量显著高于2%组,但与其他组无显著差异;而血浆极低密度脂蛋白含量在投饵率为4%时最高。此外,不同投饵率对脂肪代谢相关基因的表达量也有显著影响。当投饵率由2%升高至4%时,肝脏酰基肉碱转移酶I和II、脂酰辅酶A氧化酶、载脂蛋白B、脂肪酸结合蛋白、过氧化物酶体增殖物激活受体等的m RNA表达量显著升高;当投饵率进一步升高时,载脂蛋白B、脂酰辅酶A氧化酶、脂肪酸结合蛋白和过氧化物酶体增殖物激活受体β呈现下降趋势,但差异不显著;投饵率3%和6%组的脂蛋白酯酶的mRNA表达量显著高于其他组,而肝X受体和脂肪酸转运蛋白的表达量则随着投饵率的升高呈先上升后下降的趋势,并分别在投饵率为3%和5%时达到最高值。研究表明,不同投饵率显著影响了团头鲂幼鱼的血脂含量和肝脏脂质代谢相关基因的表达水平;投饵率为2%;%时,脂肪酸转运和氧化的程度较低;投饵率为5%;%时,将导致血脂含量和脂肪沉积相关基因的表达量降低;投饵率为4%;%时能够维持团头鲂幼鱼脂肪代谢的平衡。

关键词：团头鲂投饵率血脂水平脂质代谢基因表达