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牛蒡低聚果糖的羧甲基化修饰及对RAW264.7细胞免疫活性提升

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精细化工 2024年第7期41卷 1542-1549,1624页

作者：赵志刚金丹黄慧丹李贵文单振伟皖南医学院药学院安徽芜湖241002 安徽省多糖药物工程技术研究中心安徽芜湖241002

采用水媒法对牛蒡低聚果糖(BFO)进行了羧甲基化修饰,制备了不同羧甲基化取代度(DS)的修饰产物(CM-BFO),通过单因素和响应面实验考察了反应条件对DS的影响,以及各因素的交互作用。采用GC、FTIR、^(1)HNMR、^(13)CNMR对BFO及CM-BFO的结构... 详细信息

采用水媒法对牛蒡低聚果糖(BFO)进行了羧甲基化修饰,制备了不同羧甲基化取代度(DS)的修饰产物(CM-BFO),通过单因素和响应面实验考察了反应条件对DS的影响,以及各因素的交互作用。采用GC、FTIR、^(1)HNMR、^(13)CNMR对BFO及CM-BFO的结构进行了表征,以RAW264.7细胞为模型测试了不同DS的CM-BFO体外细胞实验的免疫活性。结果表明,0.5 g BFO用30 mL质量分数为20%的Na OH水溶液碱化处理1h,以30 mL质量分数为2.5%的氯乙酸水溶液为羧甲基化试剂,在反应温度65℃、反应时间3.3 h的最佳条件下,BFO的DS最高,为1.06。BFO和CM-BFO均能提升RAW264.7细胞的免疫活性,3种DS为0.82、0.93和0.96的CM-BFO免疫活性较BFO明显提升,而低DS(0.73)和高DS(1.06)的CM-BFO则影响较小。CM-BFO的免疫活性在一定范围内随其DS的升高呈先增强后减弱的趋势。

关键词：牛蒡低聚果糖羧甲基化修饰取代度免疫活性中药现代化技术

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BiOI/g-C_(3)N_(4)修饰电极伏安法检测磺胺甲噁唑

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分析试验室 2024年第1期43卷 1-8页

作者：武天恒刘蕊韩雪刘日嘉孙源哈尔滨商业大学药学院药物工程技术研究中心哈尔滨150076

通过热聚合法高温煅烧尿素得到g-C_(3)N_(4)纳米片,再以溶剂热法得到Bi OI/g-C_(3)N_(4)复合材料,采用X射线衍射(XRD)、扫描电子显微镜(SEM)、透射电子显微镜(TEM)、红外光谱(FT-IR)等手段对Bi OI/g-C_(3)N_(4)纳米复合材料的微观结构... 详细信息

通过热聚合法高温煅烧尿素得到g-C_(3)N_(4)纳米片,再以溶剂热法得到Bi OI/g-C_(3)N_(4)复合材料,采用X射线衍射(XRD)、扫描电子显微镜(SEM)、透射电子显微镜(TEM)、红外光谱(FT-IR)等手段对Bi OI/g-C_(3)N_(4)纳米复合材料的微观结构和形貌进行了表征。通过滴涂法将Bi OI/g-C_(3)N_(4)复合材料修饰在玻碳电极(GCE)表面,构建了用于快速检测磺胺甲噁唑(SMX)的电化学传感平台,通过循环伏安(CV)和差分脉冲伏安(DPV)技术对SMX进行电化学分析,峰值电流随SMX浓度呈线性增加,线性范围为5~1000μmol/L,检出限为0.025μmol/L。采用加标回收法测定自来水样品中的SMX,加标回收率为90.0%~103.4%。

关键词： g-C_(3)N_(4)纳米片电化学传感器磺胺甲噁唑

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猪肺炎支原体通过抑制SPLUNC1功能破坏呼吸道炎性反应平衡

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中国农业科学 2024年第1期57卷 216-226页

作者：王海燕张珍珍倪博刘蓓蓓冯志新江苏省农业科学院兽医研究所/农业农村部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心兽用生物制品(泰州)国泰技术创新中心

【背景】猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)通过定植猪呼吸道黏膜层，破坏呼吸道炎性反应平衡，引起炎性损伤和持续性感染。短的上腭、肺及鼻咽上皮克隆1蛋白(short palate lung and nasal epithelial clone1,SPLUNC1)是呼吸... 详细信息

【背景】猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)通过定植猪呼吸道黏膜层，破坏呼吸道炎性反应平衡，引起炎性损伤和持续性感染。短的上腭、肺及鼻咽上皮克隆1蛋白(short palate lung and nasal epithelial clone1,SPLUNC1)是呼吸道黏膜分泌的具有重要抗菌和抗炎功能的蛋白，被认为是呼吸道黏膜面对危险信号时的“信号传感器”。【目的】从Mhp和SPLUNC1相互作用入手，分析Mhp感染对SPLUNC1表达的影响以及SPLUNC1对Mhp引起的炎性反应的调控作用，揭示Mhp引起炎性损伤的新机制，为解决Mhp持续性感染问题提供参考。【方法】利用猪肺炎支原体对猪支气管上皮细胞（porcine bronchial epithelial cells,PBECs）感染模型和猪体感染模型，通过荧光定量PCR、间接免疫荧光和Western-blotting等方法，分别检测Mhp感染后对肺脏中SPLUNC1以及体外PBECs中SPLUNC1转录和表达的影响。克隆并扩增猪源SPLUNC1基因通过酶切鉴定，构建成功SPLUNC1真核和原核表达重组质粒pCDNA3.1-SPLUNC1以及pET28a-SPLUNC1。与此同时，设计靶向SPLUNC1的siRNA干扰片段。利用体外SPLUNC1蛋白孵育、体内呼吸道黏膜SPLUNC1抗体封闭，通过Mhp CCU50检测明确SPLUNC1对Mhp体内外生长的影响。在猪支气管上皮细胞中，通过过表达或siRNA干扰SPLUNC1基因，后感染Mhp，利用Western-blotting、间接免疫荧光以及酶联免疫吸附方法，明确SPLUNC1对Mhp的黏附作用、诱导炎性因子表达以及MAPK信号通路活化的影响。【结果】Mhp感染猪后可引起肺脏实变，主要组织病理表现为肺脏炎性损伤，同时显著上调肺泡灌洗液中趋化因子CXCL8和炎性因子TNFα和IL-1β分泌。Mhp体内外感染后，体内肺脏和体外猪支气管上皮细胞中SPLUNC1的转录和表达均显著下调。以上研究表明，Mhp可诱导肺脏炎性反应，抑制SPLUNC1表达。另一方面，体外PBECs中过表达SPLUNC1后，Mhp感染引起的CXCL8表达显著减少；siRNA干扰SPLUNC1后，Mhp感染引起的CXCL8表达显著增加，表明SPLUNC1负调控Mhp感染引起的CXCL8表达。基于Mhp感染入侵呼吸道过程，本研究进一步解析SPLUNC1负调控CXCL8表达的机制。结果表明：无论是SPLUNC1和Mhp体外孵育，还是SPLUNC1抗体体内封闭，Mhp的体内外生长均未受影响；SPLUNC1的过表达或siRNA干扰对Mhp体外黏附PBECs的能力也无显著影响；过表达SPLUNC1可抑制pERK和IκBα的激活，相反SPLUNC1 siRNA干扰后，可促进pERK和IκBα的激活。以上研究证明SPLUNC1不是通过调控Mhp的生长和黏附，而是通过负调控MAPK-ERK通路的活化来调控CXCL8的表达。【结论】SPLUNC1可通过MAPK-ERK信号通路来调控炎性因子的过度表达，维护宿主炎性平衡；与此同时，Mhp感染后可通过抑制SPLUNC1的表达来破坏宿主炎性反应的平衡调控，进而引起炎性损伤。本研究为解析Mhp感染损伤机制提供依据。

关键词：猪肺炎支原体支原体-宿主相互作用炎性反应 SPLUNC1

扁蒴藤素通过活性氧调控PI3K/AKT通路增强顺铂诱导鼻咽癌细胞凋亡

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南方医科大学学报 2024年第5期44卷 904-912页

作者：王媛媛陈腾从小凡李依然陈蕊张配孙小锦赵素容蚌埠医科大学药学院//安徽省生化药物工程技术研究中心安徽蚌埠233030

目的观察扁蒴藤素和顺铂对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法CCK-8法检测不同浓度扁蒴藤素、顺铂处理24 h后HNE-1和CNE-2Z细胞的存活率,集落形成实验观察细胞集落形成能力,流式细胞术检测细胞凋亡和活性氧(ROS)水平,We... 详细信息

目的观察扁蒴藤素和顺铂对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法CCK-8法检测不同浓度扁蒴藤素、顺铂处理24 h后HNE-1和CNE-2Z细胞的存活率,集落形成实验观察细胞集落形成能力,流式细胞术检测细胞凋亡和活性氧(ROS)水平,Western blotting检测蛋白表达。N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理后,检测细胞增殖、凋亡及通路的影响。结果CCK-8结果显示,扁蒴藤素和顺铂均可抑制HNE-1和CNE-2Z细胞的存活率(P<0.05)。与单用扁蒴藤素或顺铂相比,联合使用明显抑制细胞存活率和细胞集落形成能力(P<0.05),升高细胞凋亡率(P<0.01)和细胞内ROS水平(P<0.01),上调Bax、Cleaved caspase-3和Cleaved PARP的表达(P<0.05),下调Bcl-2、Mcl-1和PARP的表达(P<0.05),同时,下调细胞中p-PI3K和p-AKT的表达(P<0.05)。而NAC可部分逆转扁蒴藤素联合顺铂对HNE-1和CNE-2Z细胞的增殖抑制(P<0.01)和凋亡诱导作用(P<0.05),部分恢复p-PI3K和p-AKT的下调作用(P<0.05)。结论扁蒴藤素能增强鼻咽癌细胞对顺铂的增殖抑制和凋亡诱导作用,其机制可能与ROS介导的PI3K/AKT信号通路失活有关。

关键词：鼻咽癌扁朔藤素顺铂活性氧 PI3K/AKT信号通路

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阿美替尼联合安罗替尼通过下调PI3K/AKT通路抑制非小细胞肺癌细胞的增殖

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南方医科大学学报 2024年第10期44卷 1965-1975页

作者：杨玉梅刘雪柔刘伟周星琦张振胡妍刘培培李娴刘浩李姗姗蚌埠医科大学药学院安徽省生化药物工程技术研究中心安徽蚌埠233030

目的探究阿美替尼联合安罗替尼抑制非小细胞肺癌的作用。方法CCK-8法、集落克隆法和流式细胞术检测不同浓度阿美替尼和安罗替尼对PC-9细胞和HCC827细胞增殖、细胞存活和细胞凋亡的影响;SynergyFinder模型评价阿美替尼与安罗替尼的协同作... 详细信息

目的探究阿美替尼联合安罗替尼抑制非小细胞肺癌的作用。方法CCK-8法、集落克隆法和流式细胞术检测不同浓度阿美替尼和安罗替尼对PC-9细胞和HCC827细胞增殖、细胞存活和细胞凋亡的影响;SynergyFinder模型评价阿美替尼与安罗替尼的协同作用;Transwell小室实验检测阿美替尼联合安罗替尼对PC-9细胞和HCC827细胞侵袭及迁移的作用;Western blotting实验检测阿美替尼联合安罗替尼对PC-9细胞和HCC827细胞凋亡和侵袭迁移相关蛋白Bax、Bcl-2、E-Cadherin、Vimentin、MMP2和MMP9及PI3K-Akt通路关键蛋白表达的影响。结果阿美替尼作用于PC-9细胞的IC_(50)为1.701μmol/L,安罗替尼作用于PC-9细胞的IC_(50)=4.979μmol/L,协同得分(ZIP)为19.112;阿美替尼对HCC827细胞IC_(50)=2.961μmol/L,安罗替尼对HCC827细胞IC_(50)=7.934μmol/L,协同得分(ZIP)为12.325,阿美替尼联合安罗替尼能够显著抑制PC-9细胞和HCC827细胞增殖(P<0.05)。相比于单药组,集落克隆结果表明阿美替尼联合安罗替尼能够显著抑制PC-9细胞和HCC827细胞存活(P<0.01);流式细胞术结果表明,阿美替尼联合安罗替尼能够促进PC-9细胞和HCC827细胞发生凋亡(P<0.05);Transwell实验结果表明,阿美替尼联合安罗替尼能够显著抑制PC-9细胞和HCC827细胞的侵袭迁移能力(P<0.01);Western blotting实验结果表明,阿美替尼联合安罗替尼能够显著促进PC-9细胞和HCC827细胞中E-Cadherin和Bax蛋白的表达,抑制Bcl-2、Vimentin、MMP2和MMP9蛋白的表达(P<0.01),同时显著降低了PI3K-Akt通路中关键蛋白PI3K、Akt的磷酸化蛋白水平(P<0.01)。结论阿美替尼联合安罗替尼通过下调PI3K-Akt通路抑制NSCLC肿瘤细胞,这种联合治疗方式可能成为临床上治疗NSCLC患者的一种潜在治疗策略。

关键词：非小细胞肺癌阿美替尼安罗替尼凋亡侵袭迁移 PI3K-Akt

基于中药制剂新技术的类风湿性关节炎穴位给药治疗研究进展

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中国中药杂志 2024年

作者：王狄鑫高远吴代敏吴英倩徐剑张永萍贵州中医药大学药学院国家苗药工程技术研究中心贵州中药炮制与制剂工程技术研究中心

传统的穴位给药治疗类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis，RA），多以散剂、膏剂、糊剂为给药剂型，但以上剂型存在明显弊端，如透皮吸收量少、皮肤刺激强、易脱离等缺点，创新一种高渗透、低毒、低刺激、给药方便的中药穴位疗法具有... 详细信息

传统的穴位给药治疗类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis，RA），多以散剂、膏剂、糊剂为给药剂型，但以上剂型存在明显弊端，如透皮吸收量少、皮肤刺激强、易脱离等缺点，创新一种高渗透、低毒、低刺激、给药方便的中药穴位疗法具有重要意义。随着中药现代制剂新技术的发展，将微乳、微粒、水凝胶、脂质体等现代剂型与穴位给药相结合，衍生的治疗方法有穴位贴敷给药、穴位注射给药、微针、纳米多孔针灸针等。中药制剂新技术与穴位给药相结合，起到药物高渗透、高滞留、形成药物“穴位贮库”优势，药物蓄积于穴位持续放大穴位效应的作用，以达到药物治疗与穴位治疗1＋1＞2的叠加效果。因此该文基于中药制剂新技术与穴位给药相结合治疗RA的相关研究、制剂改良作综述，为中药穴位治疗与现代制剂新技术的结合提供发展新思路。

关键词：穴位治疗类风湿性关节炎纳米载体促渗中药挥发油促渗中药制剂新技术

阿美替尼联合安罗替尼通过下调PI3K/AKT通路抑制非小细胞肺癌细胞的增殖

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南方医科大学学报 2024年

作者：杨玉梅刘雪柔刘伟周星琦张振胡妍刘培培李娴刘浩李姗姗蚌埠医科大学药学院安徽省生化药物工程技术研究中心

目的探究阿美替尼联合安罗替尼抑制非小细胞肺癌的作用。方法 CCK-8法、集落克隆法和流式细胞术检测不同浓度阿美替尼和安罗替尼对PC-9细胞和HCC827细胞增殖、细胞存活和细胞凋亡的影响；SynergyFinder模型评价阿美替尼与安罗替尼的协... 详细信息

目的探究阿美替尼联合安罗替尼抑制非小细胞肺癌的作用。方法 CCK-8法、集落克隆法和流式细胞术检测不同浓度阿美替尼和安罗替尼对PC-9细胞和HCC827细胞增殖、细胞存活和细胞凋亡的影响；SynergyFinder模型评价阿美替尼与安罗替尼的协同作用；Transwell小室实验检测阿美替尼联合安罗替尼对PC-9细胞和HCC827细胞侵袭及迁移的作用；Western blotting实验检测阿美替尼联合安罗替尼对PC-9细胞和HCC827细胞凋亡和侵袭迁移相关蛋白Bax、Bcl-2、E-Cadherin、Vimentin、MMP2和MMP9及PI3K-Akt通路关键蛋白表达的影响。结果阿美替尼作用于PC-9细胞的IC50为1.701μmol/L，安罗替尼作用于PC-9细胞的IC50为4.979μmol/L，协同得分（ZIP）为19.112；阿美替尼对HCC827细胞IC50=2.961μmol/L，安罗替尼对HCC827细胞IC50=7.934μmol/L，协同得分（ZIP）为12.325，阿美替尼联合安罗替尼能够显著抑制PC-9细胞和HCC827细胞增殖（P<0.05）。相比于单药组，集落克隆结果表明阿美替尼联合安罗替尼能够显著抑制PC-9细胞和HCC827细胞存活（P<0.01）；流式细胞术结果表明，阿美替尼联合安罗替尼能够促进PC-9细胞和HCC827细胞发生凋亡（P<0.05）;Transwell实验结果表明，阿美替尼联合安罗替尼能够显著抑制PC-9细胞和HCC827细胞的侵袭迁移能力（P<0.01）;Western blotting实验结果表明，阿美替尼联合安罗替尼能够显著促进PC-9细胞和HCC827细胞中E-Cadherin和Bax蛋白的表达，抑制Bcl-2、Vimentin、MMP2和MMP9蛋白的表达（P<0.01），同时显著降低了PI3K-Akt通路中关键蛋白PI3K、Akt的磷酸化蛋白水平（P<0.01）。结论阿美替尼联合安罗替尼通过下调PI3K-Akt通路抑制NSCLC肿瘤细胞，这种联合治疗方式可能成为临床上治疗NSCLC患者的一种潜在治疗策略。

关键词：非小细胞肺癌阿美替尼安罗替尼凋亡侵袭迁移 PI3K-Akt

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绿豆蛋白α-淀粉酶抑制肽的制备与鉴定

食品科学 2024年第1期45卷 58-64页

作者：李永富王雅茹黄金荣史锋江南大学食品学院粮食发酵与食品生物制造国家工程研究中心食品科学与技术国家重点实验室江苏无锡214122 江苏省生物活性制品加工工程技术研究中心江苏无锡214122

采用胃-胰蛋白酶水解绿豆蛋白及其分级蛋白,以水解物α-淀粉酶活性抑制率为主要指标,结合水解度、氨基酸组成及分子质量分析其抑制效果差异及原因。结果表明,绿豆蛋白肽对α-淀粉酶活性抑制率最高,为16.51%;与绿豆分级蛋白相比,绿豆蛋... 详细信息

采用胃-胰蛋白酶水解绿豆蛋白及其分级蛋白,以水解物α-淀粉酶活性抑制率为主要指标,结合水解度、氨基酸组成及分子质量分析其抑制效果差异及原因。结果表明,绿豆蛋白肽对α-淀粉酶活性抑制率最高,为16.51%;与绿豆分级蛋白相比,绿豆蛋白的疏水氨基酸含量和水解度最高,分别为32.68%和6.28%,水解物的肽分子质量最小,均小于20kDa,因此选用绿豆蛋白制备α-淀粉酶抑制肽。然后分离鉴定绿豆蛋白肽,新发现了17条有潜在α-淀粉酶抑制效果的肽。本研究表明绿豆蛋白较其分级蛋白具有更强的α-淀粉酶抑制效果,能够用于降血糖的功能性食品或药物中。

关键词：绿豆蛋白水解 α-淀粉酶抑制肽分离与鉴定

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基于微透析探究付罐对丹参“水-脂”二元组分的促渗作用

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中国现代应用药学 2024年

作者：谢欢周斌何金英徐剑刘耀曹国琼张永萍贵州中医药大学贵州省中药民族药炮制与制剂工程技术研究中心国家苗药工程技术研究中心

目的建立丹参“水-脂”二元组分的经皮微透析方法，研究不同付罐处理组的在体经皮促渗特征。方法考察灌流流速、温度和药物浓度对探针回收率的影响，采用增量法与减量法探究探针膜内外渗透性的一致性，考察探针体内外稳定性；以新西... 详细信息

目的建立丹参“水-脂”二元组分的经皮微透析方法，研究不同付罐处理组的在体经皮促渗特征。方法考察灌流流速、温度和药物浓度对探针回收率的影响，采用增量法与减量法探究探针膜内外渗透性的一致性，考察探针体内外稳定性；以新西兰兔为动物模型，测定不同付罐处理组对丹参水溶性成分与脂溶性成分的皮肤动力学行为。结果流速越大，回收率越高；温度越高，回收率越高，在不同药物浓度下，探针回收率与损失率近似相等；且探针回收率在10 h内稳定性良好。付罐高等组对水溶性成分具有显著促渗作用，付罐处理高等组与中等组对丹参脂溶性成分经皮促渗效果明显。结论付罐可作为一种新型的物理促渗技术。

关键词：付罐物理促渗微透析技术水溶性成分丹参脂溶性成分丹参