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重组新城疫病毒rL-RVG抑制Nrf2-GCLC-GPX4通路诱导胃癌细胞铁死亡

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陆军军医大学学报 2024年第13期46卷 1485-1493页

作者：贡克文田仪督何瑛珏李洋步雪峰江苏大学附属人民医院普外科江苏镇江212000 江苏大学附属人民医院呼吸内科江苏镇江212000

目的探讨重组新城疫病毒(recombinant Newcastle disease virus,rL-RVG)是否通过Nrf2-GCLC-GPX4通路引发胃癌细胞铁死亡。方法培养人胃癌HGC-27细胞,分别用rL-RVG、新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)、PBS溶液(对照组)处理HGC-27细胞后,用CCK-8、Transwell侵袭、细胞划痕实验检测胃癌HGC-27细胞的增殖、侵袭、迁移能力。加入铁死亡促进剂(erastin)、核因子E2相关因子2(nuclear factor E2 related factor 2,Nrf2)促进剂(TBHQ)及抑制剂(ML385)作为干预组,脂质氧化试剂盒检测各组丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;DCFH-DA荧光探针及流式细胞仪检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)的含量;Western blot、免疫荧光法检测Nrf2-GCLC-GPX4通路相关蛋白表达情况。结果与对照组比较,rL-RVG和NDV处理后,细胞的存活率均下降,呈剂量、时间依赖性,且rL-RVG处理组较为显著(P<0.05);NDV和rL-RVG处理组胃癌HGC-27细胞迁移、侵袭能力均受到抑制,后者较前者抑制更明显(P<0.05);与对照组比较,病毒组Nrf2、GCLC、SLC7A11、GPX4蛋白表达下降(P<0.05),MDA水平、ROS相对表达量上升(P<0.05),rL-RVG组上升或下降的趋势较NDV组明显,且erastin组SLC7A11、GPX4蛋白表达下降(P<0.05);与对照组比较,TBHQ组、ML385组Nrf2、GCLC、SLC7A11、GPX4蛋白表达分别上升、下降(P<0.05),MDA水平、ROS相对表达量分别下降、上升(P<0.05);与rL-RVG组比较,rL-RVG+TBHQ组、rL-RVG+ML385组Nrf2、GCLC、SLC7A11、GPX4蛋白表达分别上升、下降(P<0.05),MDA水平、ROS相对表达量分别下降、上升(P<0.05)。结论重组新城疫病毒(rL-RVG)可通过Nrf2-GCLC-GPX4通路诱导胃癌细胞铁死亡的发生,抑制肿瘤细胞的生长。

关键词：重组新城疫病毒胃癌细胞铁死亡核因子E2相关因子2 谷胱甘肽过氧化物酶4

透明质酸钠修饰过氧化钙纳米粒子诱导胃癌细胞焦亡

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陆军军医大学学报 2024年第13期46卷 1535-1544页

作者：田仪督高生宝贡克文何瑛珏李洋步雪峰江苏大学附属人民医院普外科江苏镇江212000 江苏大学附属人民医院呼吸内科江苏镇江212000

目的探讨透明质酸钠修饰过氧化钙纳米粒子(sodium-hyaluronate-modified calcium oxide nanoparticles,SH-CaO_(2)NPs)诱导人胃癌细胞焦亡的作用及其可能机制。方法运用透射电镜(transmission electron microscope,TEM)、X射线衍射(X-ray diffraction,XRD)、红外光谱及Zeta电位观测SH-CaO_(2)NPs的合成情况;细胞划痕实验验证SH-CaO_(2)NPs对人胃癌细胞迁移能力的影响;CCK-8法检测SH-CaO_(2)NPs对胃癌细胞增殖活性的影响以及使用Nod样受体蛋白3(NOD-like receptor protein 3,NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(cysteinyl aspartate specific proteinase,Caspase-1)抑制剂预处理后胃癌细胞的增殖活性;DCFH-DA荧光探针及流式细胞仪检测细胞内活性氧的表达量;免疫荧光法及Western blot检测各组细胞NLRP3、Caspase-1、GSDMD蛋白表达水平。结果TEM、XRD、红外光谱及Zeta电位观测结果提示SH-CaO_(2)NPs成功制备。CCK-8法及细胞划痕实验显示,SH-CaO_(2)NPs作用于人胃癌细胞24 h后,胃癌细胞生长明显受到抑制(P<0.001)。ROS荧光及流式细胞仪结果显示,SH-CaO_(2)NPs作用于人胃癌细胞24 h后肿瘤细胞内ROS含量升高(P<0.001),予以ROS抑制剂(NAC)后细胞内NLRP3蛋白含量升高,Caspase-1、GSDMD剪切体即活性片段表达量上升(P<0.001),予以NLRP3、Caspase-1抑制剂可逆转此过程。结论SH-CaO_(2)NPs可抑制人胃癌细胞活力,可能通过激活ROS/NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路介导炎症反应和细胞焦亡。

关键词：胃癌纳米粒子焦亡 Nod样受体蛋白3 Caspase-1

半乳甘露聚糖化学发光法与酶联免疫法检测对侵袭性肺曲霉病诊断价值的比较

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中国真菌学杂志 2024年第3期19卷 268-272页

作者：张蕾赵钊沈彦李曦刘蕴萍浙江省人民医院检验中心杭州医学院附属人民医院杭州310014 江苏省东台市人民医院东台224200

目的比较半乳甘露聚糖化学发光法与传统的酶联免疫法检测对侵袭性肺曲霉病(invasive pulmonary aspergillosis,IPA)诊断的临床价值。方法选取2022年7月至2022年10月期间浙江省人民医院收治的145例疑似IPA患者作为研究对象,分别采用化学... 详细信息

目的比较半乳甘露聚糖化学发光法与传统的酶联免疫法检测对侵袭性肺曲霉病(invasive pulmonary aspergillosis,IPA)诊断的临床价值。方法选取2022年7月至2022年10月期间浙江省人民医院收治的145例疑似IPA患者作为研究对象,分别采用化学发光法和酶联免疫法对患者血清样本中半乳甘露聚糖进行检测,比较血清中半乳甘露聚糖在两种免疫分析法中的测定结果,进而分析其对IPA的诊断价值。结果根据IPA的诊断标准,145例疑似患者中有31例(21.4%)临床诊断为IPA,IPA患者中有11例(35.5%)下呼吸道标本检出曲霉属,其中烟曲霉占63.6%。病例组血液恶性肿瘤患者比对照组多,差异有统计学意义(P<0.05);在胸部影像学特征上,病例组晕轮征、空气新月征/空洞的发生率较对照组显著增加(P<0.05)。此外,对上述两种方法的样本半乳甘露聚糖检测结果进行分析,其中142例(97.9%)患者两种检测方法结果判读一致,经Kappa组内相关系数(r)检验分析,两种方法的一致性为r=0.948。化学发光法和ELISA法的敏感性分别为71.0%和67.7%,特异性分别为83.3%和85.1%,ROC曲线下面积分别为0.774和0.779。结论对于半乳甘露聚糖的检测,化学发光法与酶联免疫法一致性好,在诊断性能上二者无显著性差异;而化学发光法比酶联免疫法在稳定性和重复性上具有优势。此外,化学发光法实现了样本处理、检测、结果分析的自动化操作,大大缩短了检测耗时,同时适用于单个样本的检测,具有较高的临床应用价值。

关键词：化学发光法酶联免疫法半乳甘露聚糖侵袭性肺曲霉病

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胃肠道柿石的CT诊断

临床消化病杂志 2024年第1期36卷 62-64页

作者：常燕翔陈进王勇杨小进吴钢江苏省东台市人民医院影像科江苏东台224200 江苏省东台市人民医院普外科江苏东台224200 江苏省东台市人民医院消化内科江苏东台224200

[目的]探讨胃肠道柿石的CT表现及诊断价值。[方法]回顾性分析15例经胃镜或手术证实的胃、小肠柿石的临床资料及CT表现。[结果]胃柿石11例,小肠柿石4例;单发10例,多发5例;CT表现为类圆形、卵圆形、长条状稍高密度、混杂密度团块影,境界清... 详细信息

[目的]探讨胃肠道柿石的CT表现及诊断价值。[方法]回顾性分析15例经胃镜或手术证实的胃、小肠柿石的临床资料及CT表现。[结果]胃柿石11例,小肠柿石4例;单发10例,多发5例;CT表现为类圆形、卵圆形、长条状稍高密度、混杂密度团块影,境界清;病灶内见气泡呈蜂窝状;增强后柿石无强化;胃柿石位置随体位变化,小肠柿石易引起肠梗阻。[结论]胃肠道柿石的CT征象有一定的特征性,正确认识胃肠道柿石的CT征象有助于提高该病的诊断率。

关键词：胃肠道柿石体层摄影术 X线计算机

Notch1干扰调控肺血管内皮细胞凋亡作用机制研究

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中国基层医药 2024年第3期31卷 399-404页

作者：徐佳丁凌王海燕杭州市第三人民医院呼吸内科杭州310009

目的探讨缺口受体1(Notch1)干扰调控肺血管内皮细胞凋亡的作用机制。方法2022年1-12月利用Notch1干扰siRNA转染人肺微血管内皮细胞(HPMEC);利用Cell Counting Kit-8(CCK8)检测各组细胞活力;采用流式细胞术测定活性氧(ROS)水平;采用流式... 详细信息

目的探讨缺口受体1(Notch1)干扰调控肺血管内皮细胞凋亡的作用机制。方法2022年1-12月利用Notch1干扰siRNA转染人肺微血管内皮细胞(HPMEC);利用Cell Counting Kit-8(CCK8)检测各组细胞活力;采用流式细胞术测定活性氧(ROS)水平;采用流式细胞术测定细胞凋亡情况;采用Western blot检测Notch1 siRNA对HPMEC细胞中Notch1、B细胞淋巴瘤-2基因(Bcl-2)、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达。结果与空白对照组、siNC组比较,si-Notch1组HPMEC细胞中Notch1 mRNA的表达水平均显著降低,差异均有统计学意义(t=11.25、9.47,均P<0.05)。脂多糖(LPS)+Notch1 siRNA组HPMEC细胞OD值和Bcl-2蛋白表达水平显著高于LPS组和LPS+siRNA对照组(t=11.26、11.68,均P<0.05),而ROS生成量、细胞的凋亡率(t=11.68、11.87,均P<0.05),Notch1、Caspase-3蛋白表达水平显著低于LPS组和LPS+siRNA对照组,差异均有统计学意义(t=5.08、6.60、3.84、5.83,均P<0.05)。结论Notch1干扰可能通过调控ROS水平干预肺血管内皮细胞的凋亡及下调Notch1、Caspase-3蛋白表达和上调Bcl-2蛋白表达,从而干预慢性阻塞性肺疾病(COPD)疾病。

关键词：受体,Notch1 肺血管内皮细胞细胞凋亡活性氧 bcl-2相关X蛋白质半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3

老年慢性支气管炎合并肺部感染病原菌及血清IL-6水平对临床转归的影响

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中华医院感染学杂志 2024年 3211-3215页

作者：金斌顾娟仙叶书佳李晓霞李琳赵春辉海宁市人民医院重症医学科海宁市人民医院呼吸内科

目的探讨老年慢性支气管炎合并肺部感染病原菌及血清白细胞介素-6(IL-6)水平对临床转归的影响。方法回顾性分析2020年1月-2023年12月海宁市人民医院收治的140例老年慢性支气管炎合并肺部感染患者临床资料,进行病原菌鉴定,根据患者住... 详细信息

目的探讨老年慢性支气管炎合并肺部感染病原菌及血清白细胞介素-6(IL-6)水平对临床转归的影响。方法回顾性分析2020年1月-2023年12月海宁市人民医院收治的140例老年慢性支气管炎合并肺部感染患者临床资料,进行病原菌鉴定,根据患者住院期间死亡情况,分为生存组(n=116)与死亡组(n=24),对比两组感染发生时血清IL-6水平及肺功能[用力肺活量(FVC)、1秒钟用力呼气量(FEV1)、FEV1/FVC]差异,通过受试者工作特征(ROC)曲线评估血清IL-6对患者预后的预测价值。结果 140例患者包括单一菌种感染94例,占67.14%;多个菌种感染患者46例,占32.86%;分离出的190株病原菌中,以革兰阴性菌占比最高为52.63%;死亡组患者感染发生后血清IL-6水平高于生存组(P<0.05);死亡组感染发生后FVC、FEV1、FEV1/FVC水平低于生存组(P<0.05);血清IL-6水平评估患者不良预后ROC曲线下面积0.929,灵敏度91.67%、特异度85.34%。结论老年慢性支气管炎合并肺部感染患者以革兰阴性菌感染占比较高,部分患者可合并多个菌种感染,患者血清IL-6水平高表达状态可在一定程度上预示患者不良预后。

关键词：慢性支气管炎肺部感染老年病原学白细胞介素-6

整体临床思维能力培养在风湿免疫科教学中的运用分析

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中国卫生产业 2024年第8期21卷 194-197页

作者：邓琳许春香朱静和沈维维东台市人民医院风湿免疫科江苏东台224200 东台市人民医院神经内科江苏东台224200 东台市人民医院肾内科江苏东台224200

目的探究整体临床思维能力培养在风湿免疫科教学中的运用效果。方法选取2023年1—12月东台市人民医院风湿免疫科实习的40名医学生研究对象,按照随机数字表法分为对照组与研究组,每组20名。对照组给予传统教学模式,研究组给予基于整体临... 详细信息

目的探究整体临床思维能力培养在风湿免疫科教学中的运用效果。方法选取2023年1—12月东台市人民医院风湿免疫科实习的40名医学生研究对象,按照随机数字表法分为对照组与研究组,每组20名。对照组给予传统教学模式,研究组给予基于整体临床思维能力培养的教学模式,对比两组的考核成绩、整体临床思维能力、教学满意度。结果研究组理论知识、操作技能评分明显高于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05)。研究组整体临床思维能力评分明显高于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05)。研究组教学满意度为100.00%(20/20),明显高于对照组的70.00%(14/20),差异有统计学意义(χ^(2)=4.902,P<0.05)。结论在风湿免疫科教学中应用基于整体临床思维能力培养的教学模式后,可有效培养医学生的整体临床思维能力,提高医学生的教学满意度。

关键词：风湿免疫科整体临床思维能力理论知识操作技能教学满意度

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宏基因组学二代测序技术在海南省三亚市45例疑似肺部感染患者病原体检测中的应用

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疾病监测 2024年

作者：何吕芬赵光强林于金王彬李沙王立程钟山朱雄海南省三亚市人民医院检验科/中心实验室海南省三亚市人民医院呼吸内科

目的应用宏基因组学二代测序（mNGS）技术检测疑似肺部感染患者的病原体，评估mNGS筛查病原体的应用价值，提高临床对于肺部感染患者病原学特征的认识。方法收集2023年2月至2023年9月海南省三亚市人民医院收治的45例疑似肺部感染患者... 详细信息

目的应用宏基因组学二代测序（mNGS）技术检测疑似肺部感染患者的病原体，评估mNGS筛查病原体的应用价值，提高临床对于肺部感染患者病原学特征的认识。方法收集2023年2月至2023年9月海南省三亚市人民医院收治的45例疑似肺部感染患者的肺泡灌洗液，采用mNGS与常规微生物综合试验（CMT）方法筛选病原体，回顾性分析患者的下呼吸道微生物特征。利用Spearman，分析病原体每百万序列数（RPM）与炎症因子的相关性。结果在45例患者中，利用mNGS技术，检出41例阳性，单一感染7例，混合感染34例，包括37例细菌、19例真菌、26例病毒、1例肺炎支原体和1例鹦鹉热衣原体；检出46种病原体，包括26种细菌、8种真菌、10种病毒、2种其他病原体。CMT检出23例阳性，单一感染13例，混合感染10例，包括14例细菌、16例真菌、3例病毒。采用mNGS技术分离出的病原体中，细菌检出率居前5位的分别是铜绿假单胞菌（20.00%）、纹带棒杆菌（17.78%）、鲍曼不动杆菌（15.56%）、肺炎链球菌（13.33%）、肺炎克雷伯菌（11.11%），真菌和病毒检出率最高的分别是白色念珠菌（24.44%）和人类γ疱疹病毒4型(22.22%）。病原体RPM与炎症因子呈一定的相关性。结论mNGS可以初步筛选肺泡灌洗液的病原体，能提高病原体检出率，炎症因子可为评估病原体感染提供参考，但需进一步验证。

关键词：宏基因组二代测序技术支气管肺泡灌洗液肺部感染诊断价值

circDDX17靶向miR-223-3p/RIP3调控非小细胞肺癌细胞增殖及凋亡

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中华肿瘤杂志 2024年第3期46卷 239-248页

作者：丁成智王国磊姜功前王洪涛刘源渊张浩亮孙芳魏立河南省人民医院、郑州大学人民医院胸外科郑州450003 河南省胸科医院胸外科郑州450008 河南省胸科医院呼吸内科郑州450008

目的探讨circDDX17通过靶向miR-223-3p/RIP3分子轴调控非小细胞肺癌细胞增殖及凋亡的分子机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测人正常肺上皮细胞株BEAS-2B和非小细胞肺癌H1299、A549、H446细胞中circDDX17、miR-223-3p... 详细信息

目的探讨circDDX17通过靶向miR-223-3p/RIP3分子轴调控非小细胞肺癌细胞增殖及凋亡的分子机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测人正常肺上皮细胞株BEAS-2B和非小细胞肺癌H1299、A549、H446细胞中circDDX17、miR-223-3p、受体相互作用蛋白3(RIP3)的表达水平。分别将pcDNA、pcDNA-circDDX17、anti-miR-con、anti-miR-223-3p、pcDNA-circDDX17与miR-con、pcDNA-circDDX17与miR-223-3p mimics转染至H1299细胞。采用四甲基偶氮唑蓝法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡情况,平板克隆实验检测细胞增殖能力,双荧光素酶报告实验验证circDDX17与miR-223-3p、miR-223-3p与RIP3的靶向关系,Western blot法检测CyclinD1、CDK2、Cleaved caspase-3、Bax蛋白的表达水平。结果与BEAS-2B比较,H1299、A549、H446细胞中circDDX17 mRNA表达水平降低,miR-223-3p mRNA表达水平升高,RIP3 mRNA的表达水平降低(均P<0.05)。pcDNA-circDDX17组细胞活力[(69.46±4.68)%]、细胞克隆数[(83.49±7.86)个]、S期细胞比例[(22.52±1.41)%]、CyclinD1、CDK2蛋白表达水平均低于pcDNA组[分别为(97.54±7.72)%、(205.03±13.37)个、(28.69±1.49)%,均P<0.05],pcDNA-circDDX17组细胞G0/G1期细胞比例[(64.45±3.56)%]、细胞凋亡率[(18.36±1.63)%]、Cleaved caspase-3、Bax蛋白表达水平均高于pcDNA组[分别为(51.33±2.76)%和(5.21±0.54)%,均P<0.05];anti-miR-223-3p组细胞活力[(72.64±5.44)%]、细胞克隆数[(78.16±8.23)个]、S期细胞比例[(21.34±1.59)%]、CyclinD1、CDK2蛋白表达水平均低于anti-miR-con组[分别为103.47±6.25、(169.32±14.53)个、(28.43±1.26)%,均P<0.05],anti-miR-223-3p组细胞G0/G1期细胞比例[(62.86±3.28)%]、细胞凋亡率[(14.64±1.67)%]、Cleaved caspase-3、Bax蛋白表达水平均高于anti-miR-con组[分别为(51.33±2.71)%和(4.83±0.39)%,均P<0.05]。circDDX17与miR-223-3p存在结合位点,miR-223-3p与RIP3存在结合位点。pcDNA-circDDX17+miR-223-3p组细胞活力[(135.45±9.28)%]、细胞克隆数[(174.64±10.68)个]、S期细胞比例[(26.39±2.25)%]、CyclinD1、CDK2蛋白表达水平均高于pcDNA-circDDX17+miR-con组[分别为(101.56±6.68)%、(107.65±7.62)个、(21.64±1.72)%,均P<0.05],pcDNA-circDDX17+miR-223-3p组细胞G_(0)/G_(1)期细胞比例[(56.64±2.76)%]、细胞凋亡率[(8.34±0.76)%]、Cleaved caspase-3、Bax蛋白表达水平均低于pcDNA-circDDX17+miR-con组[分别为(64.03±3.48)%和(15.21±1.18)%,均P<0.05]。结论circDDX17可靶向调控miR-223-3p/RIP3分子轴从而抑制非小细胞肺癌细胞增殖及诱导细胞凋亡。

关键词：肺肿瘤 circDDX17 miR-223-3p 受体相互作用蛋白3 增殖凋亡