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海洋细菌Pseudoalteromonas ***9的筛选鉴定及产磷脂酶B性质

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食品科学 2022年第2期43卷 134-141页

作者：王藏马小艺田小鹏祖航天丁延帅吕明生王淑军江苏海洋大学海洋资源与环境重点实验室海洋生物技术重点实验室江苏连云港222005 江苏海洋大学江苏省海洋生物产业技术协同创新中心江苏连云港222005

从黄海海泥中筛选产磷脂酶菌株,其中酶活力最高的HL9鉴定为假交替单胞菌属(Pseudoalteromonas)。该菌株最佳生长培养基组成为米糠与酵母粉,最佳生长pH 8.0、NaCl质量浓度30 g/L、培养温度25℃。优化后产酶最高发酵条件:发酵培养基配方为... 详细信息

从黄海海泥中筛选产磷脂酶菌株,其中酶活力最高的HL9鉴定为假交替单胞菌属(Pseudoalteromonas)。该菌株最佳生长培养基组成为米糠与酵母粉,最佳生长pH 8.0、NaCl质量浓度30 g/L、培养温度25℃。优化后产酶最高发酵条件:发酵培养基配方为10 g/L麸皮和5 g/L鱼粉蛋白胨,NaCl 20 g/L,pH 8.5,接种量2%,30℃培养48 h。薄层层析和气相色谱分析表明,菌株HL9产磷脂酶B,且磷脂酶B水解sn-2酰基的产物占70%。该酶的最适反应温度和pH值分别为45℃和7.5。Ca^(2+)、Co^(2+)、Mn^(2+)等金属离子对酶活力有促进作用,Cu^(2+)对酶活力有抑制作用。磷脂酶B在有机溶剂中可以保持80%的酶活力。反应温度高和碱性条件等催化特性使该酶具有较好应用前景,研究结果也为进一步探索该酶的结构与功能奠定基础。

关键词：假交替单胞菌磷脂酶B 酶学性质

石莼类菌孢素氨基酸的提取工艺及对副溶血弧菌的抑菌机理

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食品工业科技 2024年第18期45卷 175-183页

作者：胡晓琪徐沈晨王思宇浦孟宣胥珍红马骁孙颖颖江苏海洋大学江苏省海洋生物资源与环境重点实验室江苏连云港222005 江苏海洋大学江苏省海洋生物产业技术协同创新中心江苏连云港222005

为探明石莼类菌孢素氨基酸(MAAs)的提取工艺及对副溶血弧菌的抑菌机理,本研究采用单因素实验和响应面优化试验,分析了液固比、提取温度和提取时间对石莼MAAs得率的影响,并对MAAs进行了硅胶柱层析分离以及HPLC和ESI-MS鉴定。通过扫描、... 详细信息

为探明石莼类菌孢素氨基酸(MAAs)的提取工艺及对副溶血弧菌的抑菌机理,本研究采用单因素实验和响应面优化试验,分析了液固比、提取温度和提取时间对石莼MAAs得率的影响,并对MAAs进行了硅胶柱层析分离以及HPLC和ESI-MS鉴定。通过扫描、荧光显微镜观察胞内核酸、蛋白质的泄露及DNA分解等分析MAAs对副溶血弧菌的抑菌机理。结果表明,石莼MAAs的最佳提取参数为液固比25:1 mL/g、提取温度40℃和提取时间118 min,制备到的MAAs得率为179.34±3.91 mg/g。石莼MAAs明显破坏了副溶血弧菌的细胞膜,导致了胞内核酸和蛋白质泄露,并促使菌体内DNA发生分解。MAAs经硅胶柱层析分离获得2个组分,经鉴定组分H2为shinorine,其在石莼干粉末中含量可达10.32 mg/g。本研究为石莼MAAs的制备和副溶血弧菌的生物防治提供了技术参考。

关键词：石莼类菌孢素氨基酸提取工艺副溶血弧菌抑菌机制

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单环刺螠的繁殖生物学

水产学报 2020年第8期44卷 1275-1285页

作者：许星鸿孟霄甘宏涛刘统昊丁子媛姚海洋徐国成丁姗傅子玥陈伟江苏海洋大学江苏省海洋生物技术重点实验室江苏海洋大学江苏省海洋生物资源与环境重点实验室江苏海洋大学江苏省海洋生物产业技术协同创新中心

运用实验生态学和组织学方法研究了单环刺螠的性比、性腺指数、繁殖力、胚胎与胚后发育等繁殖生物学特征,并采用正交实验法分析了单环刺螠受精率和孵化率的最佳环境条件,为单环刺螠的人工增养殖提供科学依据。结果显示,单环刺螠雌、雄... 详细信息

运用实验生态学和组织学方法研究了单环刺螠的性比、性腺指数、繁殖力、胚胎与胚后发育等繁殖生物学特征,并采用正交实验法分析了单环刺螠受精率和孵化率的最佳环境条件,为单环刺螠的人工增养殖提供科学依据。结果显示,单环刺螠雌、雄比例为1∶1.17,雄性略多于雌性。成熟卵径为(145.16±1.70)μm×(141.27±1.94)μm,处于第1次成熟分裂前期。绝对繁殖力为111 800～720 488(449 684±265 905)粒,相对繁殖力为2 214～12 702(6 849±4 854)粒,怀卵量与体质量呈显著正相关。生物学最小型体长约7 cm,体质量为11.21 g。精子密度为(5.88±0.52)×109个/mL,雄性个体平均精子数为(2.41±0.73)×1010个/只。雌性性腺指数在繁殖季节4—5月份呈现2个峰值,表明单环刺螠为分批产卵类型。在盐度25、水温15°C的条件下,胚胎发育经20～24 h孵化。组织学研究表明,单环刺螠为间黄卵,进行不等全裂,且有螺旋卵裂的特征,形成偏极囊胚,原肠作用方式为外包和内陷。胚后发育经担轮幼虫(孵化后1～10 d)、体节幼虫(11～20 d)、蠕虫状幼虫(21～30 d)发育为幼螠。正交实验结果表明,单环刺螠受精率的最佳环境条件为温度25°C、盐度35、pH 8～9;孵化率的最佳环境条件为温度15°C、盐度25、pH 8～9。

关键词：单环刺螠繁殖生物学环境条件

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鱼类趋化因子家族的研究进展

中国水产科学 2021年第9期28卷 1227-1237页

作者：丁祝进崔虎军谷昭天江苏海洋大学海洋科学与水产学院江苏海洋大学江苏省海洋生物资源与环境重点实验室江苏省海洋生物产业技术协同创新中心江苏海洋大学江苏省海洋生物技术重点实验室

趋化因子(chemokines)是一类分子量仅8～10 kD的小分子细胞因子,由巨噬细胞、成纤维细胞、T细胞和B细胞等表达分泌。按生理功能的差异可将趋化因子分为组成型和诱导型,前者通常参与淋巴细胞的迁移、定位以及免疫监视,而后者仅在感染或... 详细信息

趋化因子(chemokines)是一类分子量仅8～10 kD的小分子细胞因子,由巨噬细胞、成纤维细胞、T细胞和B细胞等表达分泌。按生理功能的差异可将趋化因子分为组成型和诱导型,前者通常参与淋巴细胞的迁移、定位以及免疫监视,而后者仅在感染或炎性刺激时分泌并诱导白细胞迁移至炎症部位。根据氨基酸序列中前两个半胱氨酸(Cys)的排列方式,可以将趋化因子分为4类:CXC亚族、CC亚族、C亚族和CX3C亚族。鱼类至今尚未发现有关CX3C亚族趋化因子的研究报道,但拥有一类特有的CX亚族。除了基本的募集和激活白细胞功能外,鱼类趋化因子在免疫应答、应激反应、胚胎发育及血管生成等方面也发挥着重要作用。本文从鱼类趋化因子及其受体的分类、鉴定、结构、表达以及功能等方面进行了综述。

关键词：鱼类趋化因子趋化因子受体鉴定功能

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青蛤不同壳色个体间的生长及营养差异

水产学报 2022年第8期46卷 1458-1465页

作者：魏敏吴雨晨陈东张明月王亦我仉佳文仇攀宋杰董志国江苏海洋大学江苏省海洋生物资源与生态环境重点实验室江苏省海洋生物技术重点实验室江苏海洋大学江苏省海洋生物产业技术协同创新中心

为了探究青蛤壳色性状与其生长和营养成分之间的关系，实验对青蛤不同壳色个体的生长指标及营养组分进行了测定分析。结果显示，青蛤紫壳个体(整体)的湿重、壳长、水管和鳃组织湿重占比显著高于白壳个体，青蛤紫壳个体(整体)的壳宽和外... 详细信息

为了探究青蛤壳色性状与其生长和营养成分之间的关系，实验对青蛤不同壳色个体的生长指标及营养组分进行了测定分析。结果显示，青蛤紫壳个体(整体)的湿重、壳长、水管和鳃组织湿重占比显著高于白壳个体，青蛤紫壳个体(整体)的壳宽和外套膜组织湿重占比极显著高于白壳个体。青蛤紫壳个体可食部分的粗脂肪和粗蛋白含量极显著高于白壳个体。紫/白壳个体的必需氨基酸与总氨基酸比值分别为37.46%和37.02%，且紫壳个体显著高于白壳个体；必需氨基酸与非必需氨基酸比值分别为67.72%和66.60%，且紫壳个体显著高于白壳个体，表明紫壳个体氨基酸平衡效果优于白壳个体，且均属于优质蛋白。紫壳个体和白壳个体中的单不饱和脂肪酸主要以棕榈酸为主，分别占可食部分脂肪酸总量的9.97%和9.85%，多不饱和脂肪酸主要以EPA和DHA为主，其中EPA分别占脂肪酸总量的6.64%和6.54%,DHA分别占脂肪酸总量的8.00%和8.51%。研究表明，紫/白壳个体间在生长和营养上均存在一定差异，且紫壳性状与其生长和营养存在一定正向关联关系，为利用紫壳性状作为遗传标记进行青蛤良种选育提供了理论依据。

关键词：青蛤壳色生长营养

利用核酸适配体封闭Tth DNA聚合酶突变体实现温启动一步法RT-qPCR

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中国生物工程杂志 2023年第4期43卷 51-58页

作者：张雅琪张建唐雨婷黄庆媛季璐卢辰罗志丹江苏海洋大学江苏省海洋生物资源与环境重点实验室江苏省海洋生物产业技术协同创新中心连云港222005

目的:Tth DNA聚合酶是一种同时具备DNA聚合酶和逆转录酶活性的耐热型工具酶。为消除其在一步法逆转录-实时荧光定量PCR(reverse transcription-quantitative real-time PCR,RT-qPCR)反应时的非特异性扩增,筛选可在较低温度下抑制其活性... 详细信息

目的:Tth DNA聚合酶是一种同时具备DNA聚合酶和逆转录酶活性的耐热型工具酶。为消除其在一步法逆转录-实时荧光定量PCR(reverse transcription-quantitative real-time PCR,RT-qPCR)反应时的非特异性扩增,筛选可在较低温度下抑制其活性的核酸适配体,从而实现温启动一步法RT-qPCR。方法:在前期获得不依赖Mn2+的Tth DNA聚合酶突变体的基础上,检验四种DNA适配体及其对应的RNA适配体对Tth DNA聚合酶突变体的DNA聚合酶活性和逆转录酶活性的封闭效果以及解离温度,并通过分子对接模拟适配体与聚合酶的结合模式。结果:TQ21-11和TQ21-11-RNA两种适配体在40℃可有效抑制Tth DNA聚合酶的DNA聚合酶活性和逆转录酶活性,抑制率达到97%以上;两种适配体在50℃可几乎完全解离。这两种适配体均可用于温启动一步法RT-qPCR,其中TQ21-11-RNA的非特异性扩增更低。结论:利用TQ21-11和TQ21-11-RNA两种适配体在室温下封闭Tth DNA聚合酶突变体活性,可以实现温启动一步法RT-qPCR。

关键词：核酸适配体 Tth DNA聚合酶突变体温启动一步法RT-qPCR

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浒苔抑菌成分的提取工艺优化及其活性研究

林产化学与工业 2023年第6期43卷 123-129页

作者：张中堂陈天乐柏亚萱盘赛昆江苏海洋大学海洋食品与生物工程学院江苏连云港222005 江苏海洋大学江苏省海洋生物技术重点实验室、江苏省海洋生物产业技术协同创新中心江苏连云港222005

在对条浒苔水提取物和乙醇提取物进行抑菌实验的基础上,通过单因素试验和响应面分析法优化乙醇提取工艺,并对乙醇提取物中的主要成分进行常规定性分析,进一步研究了不同溶剂萃取物的抑菌效果,最后采用GC-MS对乙酸乙酯萃取物进行分析。... 详细信息

在对条浒苔水提取物和乙醇提取物进行抑菌实验的基础上,通过单因素试验和响应面分析法优化乙醇提取工艺,并对乙醇提取物中的主要成分进行常规定性分析,进一步研究了不同溶剂萃取物的抑菌效果,最后采用GC-MS对乙酸乙酯萃取物进行分析。研究结果表明:与水提取物相比,条浒苔乙醇提取物的抑菌效果更好,对金黄色葡萄球菌有较好的抑制效果。响应面分析法优化得到的最佳工艺条件为:乙醇体积分数92%、液料比30∶1、提取温度83℃、提取时间4 h,此条件下,乙醇提取物对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径为(1.152±0.015)cm。常规定性分析发现条浒苔乙醇提取物中含有有机酸类、甾醇及萜类等成分,不含生物碱、蒽醌、酚类、皂苷、黄酮类等成分。乙酸乙酯萃取物的抑菌效果最好(抑菌圈直径2.82 cm),二氯甲烷和石油醚萃取物次之(抑菌圈直径分别为1.68和1.06 cm),正丁醇和水萃取物没有抑菌效果。GC-MS分析发现乙酸乙酯萃取物中含有12种挥发性成分,主要为酸类化合物、芳香类化合物。

关键词：条浒苔活性提取物优化工艺抑菌效果

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养殖海湾淤泥质海岸沉积物微塑料污染特征

环境科学 2024年第5期45卷 3078-3087页

作者：宋可心贺金成李昌文解思琦刘宝堃黄伟冯志华江苏海洋大学江苏省海洋生物资源与环境重点实验室江苏海洋大学江苏省海洋生物产业技术联合创新中心江苏海洋大学自然资源部滨海盐沼湿地生态与资源重点实验室自然资源部第二海洋研究所海洋生态系统与生物地球化学重点实验室

微塑料污染是当前环境领域广泛关注的前沿问题,海洋环境介质微塑料污染广为报道,但深层沉积物中微塑料污染特征如何却鲜见报道.基于此,在典型养殖海域海州湾附近淤泥质海岸设置3个采样点,分析沉积物柱状样中微塑料污染特征.结果表明,该... 详细信息

微塑料污染是当前环境领域广泛关注的前沿问题,海洋环境介质微塑料污染广为报道,但深层沉积物中微塑料污染特征如何却鲜见报道.基于此,在典型养殖海域海州湾附近淤泥质海岸设置3个采样点,分析沉积物柱状样中微塑料污染特征.结果表明,该研究区域沉积物中微塑料丰度为(0.12±0.07)n·g^(-1),处于中等污染水平.沉积物柱状样中微塑料总和是表层5 cm沉积物中微塑料丰度的3.43~6.00倍.沉积物柱状样中微塑料丰度展现区域差异性,不同深度的沉积物中微塑料丰度不存在显著性差异,但随深度增加呈指数减少.沉积物含水率、深度和微塑料之间的关系表明,沉积物中微塑料丰度与沉积物物理性质有关.透明和黑色微塑料在各站位占比均最高,纤维是沉积物中最常见的微塑料形态,粒径小的微塑料占主体,微塑料材质的密度均不妨碍其出现在沉积物中.微塑料污染特征在不同深度沉积物中变化较大.

关键词：微塑料(MPs) 沉积物柱状样淤泥质海岸海州湾养殖海湾

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岩藻多糖降解酶的研究进展

食品科学 2024年第9期45卷 306-313页

作者：魏真陈金玲杨杰江苏海洋大学江苏省海洋生物资源与环境重点实验室江苏连云港222005 江苏省海洋生物产业技术协同创新中心江苏连云港222005 江苏省海洋资源开发研究院江苏连云港222005

岩藻多糖降解酶是一类能够将大分子岩藻多糖水解为具有一定生物活性的低分子质量岩藻聚糖或其他产物的糖苷水解酶。岩藻多糖降解酶在活性岩藻低聚糖制备、生物制药和疾病诊断等领域具有重要的应用价值。本文从岩藻多糖降解酶的来源、性... 详细信息

岩藻多糖降解酶是一类能够将大分子岩藻多糖水解为具有一定生物活性的低分子质量岩藻聚糖或其他产物的糖苷水解酶。岩藻多糖降解酶在活性岩藻低聚糖制备、生物制药和疾病诊断等领域具有重要的应用价值。本文从岩藻多糖降解酶的来源、性质、作用方式、结构和应用等方面进行综述,发现岩藻多糖降解酶主要来源于海洋微生物及海洋无脊椎动物,且不同物种来源的岩藻多糖降解酶在酶学性质、底物特异性、分子结构与催化机制等方面均存在较大差异。不同类型的岩藻多糖降解酶负责催化复杂岩藻多糖的不同位点,生成具有抗氧化、抗肿瘤、抗血栓等多种特殊活性的岩藻低聚糖产物,因此,利用岩藻多糖降解酶进行功能性药品和食品的制备逐渐成为多糖资源应用领域的研究热点。本文可为后续岩藻多糖降解酶的研究提供理论支持,同时也可为有效开发特殊生物学功效的岩藻低聚糖提供参考。

关键词：岩藻多糖降解酶岩藻多糖岩藻糖苷酶结构与功能应用