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Sal-miR-58通过HAX1介导胶质瘤细胞放射敏感性的作用及机制研究

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中华放射肿瘤学杂志 2024年第8期33卷 746-752页

作者：王国辉葛鸿瑶杜振宇杨高山天津市第一中心医院放疗科天津300000 河北中医药大学基础医学院生物化学与生物学教研室石家庄050200

目的探讨丹参来源的Sal-miR-58对人胶质瘤细胞U251放射敏感性的影响及其分子机制。方法分别采用体外合成的不同浓度的miR-Ctl和Sal-miR-58模拟物处理胶质瘤U251细胞,再给予X线照射。MTT检测Sal-miR-58对U251细胞活力的影响。Hoechst333... 详细信息

目的探讨丹参来源的Sal-miR-58对人胶质瘤细胞U251放射敏感性的影响及其分子机制。方法分别采用体外合成的不同浓度的miR-Ctl和Sal-miR-58模拟物处理胶质瘤U251细胞,再给予X线照射。MTT检测Sal-miR-58对U251细胞活力的影响。Hoechst33342/碘化丙啶(PI)双染检测Sal-miR-58对照射后胶质瘤U251细胞凋亡的影响。2'',7''-二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)探针检测Sal-miR-58联合照射对肿瘤细胞活性氧含量的影响。克隆形成实验检测Sal-miR-58联合照射对U251细胞放射敏感性的影响。蛋白质印迹法检测Sal-miR-58调控抗凋亡蛋白造血细胞特异性蛋白1-相关蛋白X-l(HAX1)及凋亡标志蛋白B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、活化的胱天蛋白酶(Cleaved-Caspase)9、Cleaved-Caspase 3的表达情况。多组间比较行单因素方差分析,两组间比较采用独立样本t检验。结果Sal-miR-58能加重照射后U251细胞增殖的抑制(P及Caspase 3的活化。结论Sal-miR-58具有增强U251细胞放射敏感性的作用,其可能机制是Sal-miR-58通过下调射线诱导的HAX1表达,促进肿瘤细胞的凋亡。

关键词：微RNAs,丹参来源 HAX1基因放射敏感性人胶质瘤

FT3/FT4和一碳单位代谢物与重度精神疾病代谢综合征相关性的研究

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中华预防医学杂志 2024年第3期58卷 298-305页

作者：王晓宇谭云龙潘淑娟北京回龙观医院医学检验中心北京大学回龙观临床医学院北京100096 北京回龙观医院院办公室北京大学回龙观临床医学院北京100096

目的:探讨游离三碘甲状腺原氨酸/游离甲状腺素(FT3/FT4)和一碳单位代谢物对重度精神疾病(SMI)患者代谢综合征(MetS)的影响。方法:采用回顾性病例对照研究,选取2022年1月至2023年8月在北京回龙观医院住院治疗的328例SMI患者作为研究对象... 详细信息

目的:探讨游离三碘甲状腺原氨酸/游离甲状腺素(FT3/FT4)和一碳单位代谢物对重度精神疾病(SMI)患者代谢综合征(MetS)的影响。方法:采用回顾性病例对照研究,选取2022年1月至2023年8月在北京回龙观医院住院治疗的328例SMI患者作为研究对象,包括精神分裂症(SZ)180例、双相情感障碍(BD)74例、重度抑郁症(MDD)74例,另选取同期74名健康体检者作为对照组,比较两组甲状腺激素和一碳单位代谢物[叶酸,维生素B12(VitB12)和同型半胱氨酸(HCY)]水平。同时收集SMI患者临床资料及MetS相关信息,分别采用偏相关分析、logistic回归分析研究FT3/FT4和一碳单位代谢物与SMI患者MetS危险因素及胰岛素抵抗的关系。结果:SMI患者中SZ、BD、MDD三组之间性别、年龄、病程、吸烟率、体重指数(BMI)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、甘油三酯(TG)/HDL-C、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、总胆固醇(TC)、抗精神病药物使用率、情绪稳定剂使用率、抗抑郁药物使用率、降糖治疗比较,差异具有统计学意义( P均及治疗提供参考依据。

关键词：甲状腺激素同型半胱氨酸精神障碍代谢综合征胰岛素抵抗

猪小肠内容物中苯甲酸和马尿酸高效液相色谱检测方法的建立

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饲料研究 2024年 128-133页

作者：张寒蒋永嘉刘为王志强肖霞扬州大学兽医学院兽医药理毒理教研室

试验为建立猪小肠内容物中苯甲酸及其代谢物马尿酸的高效液相色谱（HPLC）测定方法，采用乙酸乙酯为提取剂，亚铁氰化钾-乙酸锌为蛋白沉淀剂提取样品中的苯甲酸，流动相为甲醇∶0.02%磷酸水；水、亚铁氰化钾-乙酸锌共同提取样品中的马... 详细信息

试验为建立猪小肠内容物中苯甲酸及其代谢物马尿酸的高效液相色谱（HPLC）测定方法，采用乙酸乙酯为提取剂，亚铁氰化钾-乙酸锌为蛋白沉淀剂提取样品中的苯甲酸，流动相为甲醇∶0.02%磷酸水；水、亚铁氰化钾-乙酸锌共同提取样品中的马尿酸，流动相为甲醇∶20 mmol/L乙酸铵溶液，紫外检测波长230 nm。结果显示：在猪小肠内容物中苯甲酸添加浓度为0.10～10.00μg/g内线性关系良好（R2=0.999 4）；检测限为0.05μg/g，定量限为0.10μg/g；添加浓度在0.10、0.50、1.00、5.00、10.00μg/g时，回收率为（101.62±4.49）%，批内和批间变异系数分别低于4.80%和9.96%。猪小肠内容物中马尿酸添加浓度在0.30～10.00μg/g内线性关系良好（R2=1.000 0）；检测限和定量限分别为0.10μg/g和0.30μg/g；马尿酸添加浓度在0.50、1.00、5.00、20.00μg/g时，回收率为（90.3±4.00）%，批内和批间变异系数分别低于5.93%和5.26%。研究表明，此方法苯甲酸及马尿酸预处理方法简单省时，无须固相萃取及使用有毒有害溶剂，节约成本，为猪小肠内容物中苯甲酸及马尿酸的检测提供参考。

关键词：猪苯甲酸马尿酸 HPLC 小肠内容物

基于高通量测序对反常性痤疮中PPAR通路作用的初步探讨

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中华皮肤科杂志 2024年第4期57卷 309-315页

作者：何艳艳马骁惠云王雯竹王宝玺曾荣徐浩翔中国医学科学院、北京协和医学院皮肤病医院南京210042 江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室南京210042 解放军东部战区总医院皮肤科南京210002 中国医学科学院、北京协和医学院整形外科医院北京100144 云南中医药大学第一附属医院皮肤科昆明650021

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)信号通路在反常性痤疮发病机制中的功能。方法于2013—2019年收集中国医学科学院皮肤病医院8例反常性痤疮皮损和4例健康对照组皮肤组织进行高通量测序,获得反常性痤疮皮损特异性表达谱,进行基... 详细信息

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)信号通路在反常性痤疮发病机制中的功能。方法于2013—2019年收集中国医学科学院皮肤病医院8例反常性痤疮皮损和4例健康对照组皮肤组织进行高通量测序,获得反常性痤疮皮损特异性表达谱,进行基因本体论(GO)分析,京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析和基因集富集分析(GSEA)。实时荧光定量PCR(qPCR)和Western印迹法验证高通量测序结果。结果特异性表达谱显示,与健康对照组相比,反常性痤疮皮损组共筛选出2738条差异表达基因,其中1328条基因显著上调,1410条基因显著下调。GO分析显示,干扰素γ分泌的正向调控、T细胞受体复合体及C-X-C趋化因子受体活性等在反常性痤疮皮损中被显著富集;KEGG分析显示,原发性免疫缺陷、PPAR通路及趋化因子-趋化因子受体相互作用等通路在反常性痤疮皮损中被显著富集;GSEA显示,反常性痤疮皮损中PPAR信号通路被显著削弱。反常性痤疮皮损组PPARA、PPARG的转录水平(0.336±0.120、0.253±0.078)低于健康对照组(1.000±0.146、1.000±0.172,t=3.50、3.95,均P学意义(t=0.34,P=0.750)。反常性痤疮皮损组核激素受体9顺式维A酸受体α亚型(RXRA)、RXRG和脂肪酸结合蛋白4的转录水平均低于健康对照组(t=2.96、2.96、4.62,P<0.05)。结论反常性痤疮患者中PPAR信号通路被抑制,脂质代谢途径发生紊乱。

关键词：化脓性汗腺炎过氧化物酶体增殖物激活受体高通量核苷酸序列分析 PPARα PPARγ 脂肪代谢

诱导多能干细胞来源自然杀伤细胞的生物学特性

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黑龙江医药科学 2024年第4期47卷 9-12页

作者：杨碧云刘涛毕清华闫冬梅佳木斯大学基础医学院黑龙江佳木斯154007 陆军军医大学药学与检验医学系临床血液学教研室重庆400038

目的:利用诱导多能干细胞(iPSCs)建立体外扩增分化体系并进一步诱导分化为自然杀伤(NK)细胞。探讨iPSCs来源分化体系诱导分化来的NK细胞的生物学特性。方法:获取iPSCs,通过流式细胞术检测细胞分化功能的水平。结果:iPSCs经扩增和筛选,... 详细信息

目的:利用诱导多能干细胞(iPSCs)建立体外扩增分化体系并进一步诱导分化为自然杀伤(NK)细胞。探讨iPSCs来源分化体系诱导分化来的NK细胞的生物学特性。方法:获取iPSCs,通过流式细胞术检测细胞分化功能的水平。结果:iPSCs经扩增和筛选,最后获得了可稳定未分化增殖的iPSCs,利用iPSCs成功分化NK细胞。结论:利用iPSC源分化体系成功在体外诱导出NK细胞,可产生大于90%CD45^(+)CD56^(+)细胞,有统计学差异(P生物学特性。

关键词：诱导多能干细胞自然杀伤细胞生物学特性

MicroRNA在去势抵抗性前列腺癌中的作用

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生命的化学 2024年第1期44卷 21-27页

作者：廖妍琪张宏明连继勤杨明珍陆军军医大学药学与检验医学系临床生物化学教研室重庆400038 陆军军医大学基础医学院学员二十队重庆400038

去势抵抗性前列腺癌(castration-resistant prostate cancer,CRPC)是男性生殖系统最常见的恶性肿瘤之一,发生机制主要受雄激素受体(androgen receptor,AR)依赖性信号通路和AR非依赖性信号通路调控。MiRNA可靶向AR相关基因、AR剪接异构... 详细信息

去势抵抗性前列腺癌(castration-resistant prostate cancer,CRPC)是男性生殖系统最常见的恶性肿瘤之一,发生机制主要受雄激素受体(androgen receptor,AR)依赖性信号通路和AR非依赖性信号通路调控。MiRNA可靶向AR相关基因、AR剪接异构体从而调控AR信号,直接调控肿瘤细胞增殖分化、凋亡抵抗、端粒维持、DNA损伤修复、细胞自噬等相关信号通路,在CRPC中可能具有重要调节作用。本文主要针对miRNA调节AR依赖性和AR非依赖性信号通路在CRPC发生发展中的作用进行综述,为CRPC诊断、治疗、预后和预防靶点提供新的思路。

关键词：去势抵抗性前列腺癌 miRNA 雄激素受体

表面增强拉曼散射技术在生物医学检测中的研究及应用

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中华检验医学杂志 2024年第3期47卷 314-322页

作者：印晓静任传利韩崇旭杨潘周林府伟灵张阳扬州大学临床医学院/江苏省苏北人民医院医学检验科重庆大学附属肿瘤医院放射生物中心陆军军医大学第一附属医院检验科

拉曼光谱在检验医学领域的应用正在不断进步和发展, 基于拉曼光谱技术的生物传感平台为疾病精准分子诊断提供了一种新的手段, 特别是表面增强拉曼散射(SERS)技术作为一种快速无损的检测方法, 具有样品制备简单、受水的干扰小、实时检测... 详细信息

拉曼光谱在检验医学领域的应用正在不断进步和发展, 基于拉曼光谱技术的生物传感平台为疾病精准分子诊断提供了一种新的手段, 特别是表面增强拉曼散射(SERS)技术作为一种快速无损的检测方法, 具有样品制备简单、受水的干扰小、实时检测等优点, 在医学检验领域显示出巨大的应用潜力。同时, 随着SERS与其他技术包括电化学、纳米新材料、微流控、生物芯片、DNA纳米机器、人工智能和机器学习等技术的集成结合, 其在医学检验领域将发挥越来越重要的作用。相信随着对SERS研究的不断深入以及多个学科领域之间的交叉融合, 其在生物医学检测领域将得到广泛应用, 并有望成为下一代精准诊断的重要技术平台。

关键词：光谱分析, 拉曼肿瘤诊断病原体检测生物分子检测

1种罕见SERPINC1基因复合杂合突变及其机制研究

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中华检验医学杂志 2024年第3期47卷 301-307页

作者：张柯林双女谢海啸叶龙颖秦朗译潘景业杨丽红王明山温州医科大学附属第一医院医学检验中心浙江省检验诊断及转化研究重点实验室温州325015

目的对1个遗传性抗凝血酶(AT)缺陷症患者所携带的复合杂合突变进行分子机制研究。方法先证者因"突发晕厥并四肢抽搐一天"于2018年11月就诊于温州医科大学附属第一医院。采集先证者及其家系成员(共3代9人)外周静脉血并进行家系调查。采... 详细信息

目的对1个遗传性抗凝血酶(AT)缺陷症患者所携带的复合杂合突变进行分子机制研究。方法先证者因"突发晕厥并四肢抽搐一天"于2018年11月就诊于温州医科大学附属第一医院。采集先证者及其家系成员(共3代9人)外周静脉血并进行家系调查。采用发色底物法检测AT活性(AT:A),免疫比浊法检测AT抗原(AT:Ag)。对SERPINC1基因进行直接测序以确定突变位点。利用多种计算机工具预测突变的保守性和疏水性变化。构建重组质粒表达载体并瞬时转染HEK293T细胞以进行体外过表达研究。采用Western Blotting、ELISA和细胞免疫荧光实验对重组AT蛋白进行体外表征。结果先证者为一例21岁男性。AT:A为33%,AT:Ag同步下降,属于Ⅰ型AT缺陷症。基因分析显示先证者在第2和第5外显子分别携带c.318319insT(***107*)杂合插入突变和c.922G>T(***308Cys)杂合错义突变。该两个突变位点在同源物种中均完全保守;疏水性分析表明,***308Cys突变可能降低氨基酸残基307-313的亲水性。体外表达显示,重组蛋白AT-G308C在转染细胞裂解液和培养上清中的含量分别降低至46.98%±2.94%和41.35%±1.48%;经蛋白酶体抑制剂(MG132)处理后,Western Blotting分析显示在细胞质中的AT-G308C蛋白量恢复到与野生型相似的水平;在细胞裂解液和培养上清中均未检测到重组蛋白AT-N107*。结论***107*杂合插入突变和***308Cys杂合错义突变与该家系先证者AT水平降低有关。***107*杂合插入突变可能触发无义突变介导的mRNA降解,从而消除异常转录本;***308Cys杂合错义突变可能通过改变局部残基的疏水性导致AT蛋白在细胞质中发生蛋白酶体依赖性降解。

关键词：抗凝血酶类抗凝血酶缺陷症血栓形成复合杂合突变体外表达

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枸杞多糖促进HL-60细胞的吞噬功能

山西医科大学学报 2024年第1期55卷 44-49页

作者：庞洪源李帆华梦晴宋传旺蚌埠医学院检验医学院免疫教研室蚌埠233030 慢性疾病免疫学基础与临床安徽省重点实验室

目的探究枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharide,LBP)对人中性粒细胞株HL-60细胞吞噬功能的影响及其相关机制。方法采用不同浓度(0,1,10,100,200,500μg/mL)LBP刺激HL-60细胞24 h后,通过CCK-8和流式细胞术检测HL-60细胞的存活率和吞... 详细信息

目的探究枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharide,LBP)对人中性粒细胞株HL-60细胞吞噬功能的影响及其相关机制。方法采用不同浓度(0,1,10,100,200,500μg/mL)LBP刺激HL-60细胞24 h后,通过CCK-8和流式细胞术检测HL-60细胞的存活率和吞噬功能变化情况,通过免疫印迹法(Western blot)检测HL-60细胞磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)信号通路Akt磷酸化情况。阻断实验分为对照组、LBP组、LBP+PI3K抑制剂(Wortmannin)组。LBP组以200μg/mL LBP单独刺激HL-60细胞24 h;LBP+Wortmannin组先以1μmol/L Wortmannin预刺激HL-60细胞2 h,再加入200μg/mL LBP继续作用24 h后检测HL-60细胞吞噬功能情况。为了检测HL-60细胞表面受体的表达情况,实验分为对照组和LBP组(200μg/mL),采用流式细胞术检测CD36、CD204、CD209、胶原样结构巨噬细胞受体(macrophage receptor with collagenous structure,MARCO)和Dectin吞噬相关受体表达情况。结果不同剂量LBP处理后,HL-60细胞的存活率未发生明显变化(P>0.05);与0μg/mL LBP比较,1~200μg/mL LBP刺激HL-60细胞吞噬百分率明显增加(P0.05)。结论LBP通过PI3K-Akt信号通路促进HL-60细胞吞噬***,这种吞噬功能的提高可能与MARCO受体表达上调有关。

关键词：枸杞多糖 HL-60细胞吞噬作用 PI3K-Akt信号通路 MARCO受体