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灵芝孢子油的药效物质基础研究进展

菌物研究 2024年第1期22卷 79-87页

作者：林志彬北京大学基础医学院药理学系北京100191

灵芝孢子油是以灵芝孢子粉为原料,通过破壁技术提取出的一种油脂。药理学研究发现灵芝孢子油具有调节免疫功能、抗肿瘤、抗炎、抗氧化以及抗衰老等多种生物活性,但目前关于灵芝孢子油的药效物质基础研究尚少。文中在回顾文献的基础上,... 详细信息

灵芝孢子油是以灵芝孢子粉为原料,通过破壁技术提取出的一种油脂。药理学研究发现灵芝孢子油具有调节免疫功能、抗肿瘤、抗炎、抗氧化以及抗衰老等多种生物活性,但目前关于灵芝孢子油的药效物质基础研究尚少。文中在回顾文献的基础上,总结灵芝孢子油的提取方法,探讨灵芝孢子油药效的物质基础,以期为灵芝孢子油的研究、开发、产品质量控制和应用提供科学依据。

关键词：灵芝孢子油药理活性提取方法检测方法

UCHL1调控NF-κB信号通路在单核细胞驯化免疫中的作用

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中国药理学通报 2024年第4期40卷 637-645页

作者：王洪民马子涵潘雅颖高晓明龚方苑苏州大学基础医学与生物科学学院江苏苏州215123

目的探究去泛素化酶在单核细胞驯化免疫中的作用及机制。方法Q-PCR检测单核细胞驯化免疫中去泛素化酶相关基因的表达情况;ELISA法检测去泛素化酶对驯化的单核细胞分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的影响;双荧光素酶报告基因检测系统测... 详细信息

目的探究去泛素化酶在单核细胞驯化免疫中的作用及机制。方法Q-PCR检测单核细胞驯化免疫中去泛素化酶相关基因的表达情况;ELISA法检测去泛素化酶对驯化的单核细胞分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的影响;双荧光素酶报告基因检测系统测定去泛素化酶对NF-κB信号通路的影响。双荧光素酶报告基因检测系统测定:UCHL1对NF-κB信号通路的影响、UCHL1与NF-κB信号通路关键信号分子之间的作用及UCHL1影响NF-κB信号通路所依赖的酶活性;ELISA法检测UCHL1对单核细胞驯化作用中TNF-α分泌水平的影响。结果去泛素化酶USP2、UCHL1、OTUB2和OTUD4在单核细胞驯化免疫中的表达量明显升高;去泛素化酶抑制剂可明显抑制驯化单核细胞中TNF-α的分泌水平;USP2、UCHL1、OTUB2、PSMD14等可明显激活NF-κB信号通路,通过上述实验筛选出对NF-κB影响最为明显的UCHL1进行后续研究。UCHL1的表达明显影响NF-κB信号通路的激活;UCHL1的表达促进了由IκB-α、IKK-α或IKK-β介导的NF-κB的激活;UCHL1主要通过其泛素水解酶活性调控NF-κB信号通路;UCHL1抑制剂可明显减弱单核细胞的驯化作用。结论自身免疫病中免疫复合物可以驯化单核细胞增强其敏感性,这种作用可通过UCHL1调节NF-κB信号通路的激活实现。

关键词：去泛素化酶 UCHL1 单核细胞驯化免疫 NF-κB 自身免疫病

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细胞焦亡的作用机制及其在脓毒症中的研究进展

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江苏大学学报（医学版） 2024年第4期34卷 297-300页

作者：丁玉婷王荟赵杨静邵启祥江苏大学医学院江苏镇江212013 江苏护理职业学院医学技术学院江苏淮安223005

脓毒症是可导致机体严重器官功能障碍、危及生命的炎性综合反应,一般是由病原微生物侵入机体引发,近年来发生率和病死率居高不下,是重症监护病房患者死亡的重要原因。细胞焦亡是新发现的一种伴随炎症因子释放的细胞程序性死亡,可一定程... 详细信息

脓毒症是可导致机体严重器官功能障碍、危及生命的炎性综合反应,一般是由病原微生物侵入机体引发,近年来发生率和病死率居高不下,是重症监护病房患者死亡的重要原因。细胞焦亡是新发现的一种伴随炎症因子释放的细胞程序性死亡,可一定程度上抵御微生物的感染,但过度激活会诱导和加重脓毒症。目前有研究证明,细胞焦亡的许多相关分子都参与了脓毒症的发病进程,并在其中发挥重要作用。对脓毒症中细胞焦亡的研究不仅可深入阐明细胞焦亡的病理作用和机制,也有助于对脓毒症的发生发展和转归预判,尤其为发现治疗脓毒症的靶点拓展新思路。

关键词：细胞焦亡脓毒症含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶炎症小体 Gasdermin家族

基于PiggyBac转座子优化稳定表达细胞系的新型瞬时受体电位M2通道抑制剂筛选

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浙江大学学报(医学版) 2024年

作者：应凯悦华宁骆燕萍刘星宇刘敏杨巍浙江大学基础医学院生物物理学系

目的:使用PiggyBac(PB)转座系统建立稳定表达瞬时受体电位M2(TRPM2)通道的人胚胎肾细胞HEK293T，并进行TRPM2通道抑制剂筛选，为治疗脑缺血等疾病寻找潜在的药物。方法:根据PB转座原理，构建pPB-hTRPM2真核表达载体。将重组质粒和辅助... 详细信息

目的:使用PiggyBac(PB)转座系统建立稳定表达瞬时受体电位M2(TRPM2)通道的人胚胎肾细胞HEK293T，并进行TRPM2通道抑制剂筛选，为治疗脑缺血等疾病寻找潜在的药物。方法:根据PB转座原理，构建pPB-hTRPM2真核表达载体。将重组质粒和辅助质粒共同转染至HEK293T细胞中，利用系统携带的荧光与膜片钳鉴定TRPM2基因的表达，通过Z′因子评估细胞模型是否适用于钙成像法的高通量筛选。利用钙成像法和膜片钳对11个先导化合物分子进行初步活性评价，测定化合物分子对TRPM2通道的抑制活性。利用氧糖剥夺/再灌注（OGD/R）损伤模型和细胞计数试剂盒8(CCK-8)方法验证筛选得到的化合物分子对损伤细胞的保护作用。利用流式细胞术检测细胞活性氧水平。利用小鼠短暂性大脑中动脉栓塞（tMCAO）模型评价化合物的神经保护作用。结果:成功构建pPB-hTRPM2真核表达载体，构建出可高效表达TRPM2基因的HEK293T细胞系，并同时表达增强型绿色荧光蛋白（EGFP）。在筛选获得的嘌呤霉素抗性细胞中，所有细胞荧光明亮可见，诱导后细胞表现出经典的TRPM2通道电流特征，TRPM2通道电流值与瞬时转染对照组差异无统计学意义（P>0.05）。该筛选系统进行钙成像实验的Z′因子为0.5416(Z′>0.5)，表明其适用于高通量筛选。通过钙成像法结合膜片钳筛选出化合物6具有显著的TRPM2通道抑制作用，且1.0μmol/L的化合物6能够显著提高OGD/R后SH-SY5Y细胞的存活率（P技术成功构建了TRPM2基因稳定表达细胞系，利用钙成像法和膜片钳在候选化合物中成功筛选出一个高亲和力的新的TRPM2通道抑制剂。该抑制剂可以通过降低细胞活性氧水平缓解OGD/R后细胞损伤，并对小鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用。

关键词： PiggyBac转座系统瞬时受体电位M2型高通量筛选膜片钳氧糖剥夺/再灌注损伤短暂性大脑中动脉栓塞小鼠

高通量测序揭示系统性红斑狼疮B细胞异常的研究进展

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中华微生物学和免疫学杂志 2024年第7期44卷 641-645页

作者：夏彦祺赵晗段荦袁慧慧首都医科大学基础医学院免疫学系北京100069

系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)是一种以致病性自身抗体和免疫复合物形成并介导多器官损伤的急性或慢性自身免疫病,好发于育龄期女性,具有显著异质性。自身反应性B细胞过度活化产生自身抗体是SLE全身免疫病理损伤的... 详细信息

系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)是一种以致病性自身抗体和免疫复合物形成并介导多器官损伤的急性或慢性自身免疫病,好发于育龄期女性,具有显著异质性。自身反应性B细胞过度活化产生自身抗体是SLE全身免疫病理损伤的重要原因,靶向B细胞治疗SLE的显著疗效提示其在疾病发生和进展中的重要作用。由于自身反应性B细胞参与疾病进展的具体机制和标志分子尚不明确,目前,B细胞耗竭疗法均是针对总的B细胞群体,无法靶向清除自身反应性B细胞。随着科学技术手段的进步,高通量测序技术为研究SLE B细胞异常提供了新思路。本综述重点就高通量测序揭示B细胞受体新的异常、新的B细胞亚群和B细胞相关治疗靶点等在SLE中的作用进展进行总结和讨论,为深入了解SLE的发病机制和探讨治疗方法提供借鉴。

关键词：系统性红斑狼疮高通量测序 B细胞亚群 B细胞受体自身免疫

医学免疫学课程“B to B”循环模式的构建与实践

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中国免疫学杂志 2024年第7期40卷 1507-1509页

作者：闫东梅杨巍付海英李冬倪维华齐妍袁红艳吉林大学基础医学院免疫学系长春130021

医学免疫学的培养目标是使学生注重免疫学理论联系临床实际,熟悉专业英语,自觉关注前沿知识,具备自主学习与终身学习的能力。但已有的教学模式缺少临床疾病相关事件讲解,实验内容及项目安排与临床严重脱节,对解决临床问题方面的科学研... 详细信息

医学免疫学的培养目标是使学生注重免疫学理论联系临床实际,熟悉专业英语,自觉关注前沿知识,具备自主学习与终身学习的能力。但已有的教学模式缺少临床疾病相关事件讲解,实验内容及项目安排与临床严重脱节,对解决临床问题方面的科学研究明显不足。本教研团队从临床实际(Bedside)问题出发,回到基础研究(Bench),再去临床解决实际问题(Bedside),建立免疫学教学的“B to B”循环模式,全面培养具有临床胜任能力、科研思维能力以及创新精神、国际视野的高级医学专业人才。

关键词：免疫学临床基础循环结合评价

基于ERK/p38 MAPK信号通路探讨芍药苷对顺铂诱导大鼠心功能障碍及心肌细胞损伤的影响

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中国现代应用药学 2024年第11期41卷 1476-1483页

作者：张诗捷田瑞琦丁银川武琦王沂然刘磊孙红薛敏徐州医科大学基础医学院生理学教研室江苏徐州221004 徐州医科大学基础医学国家级实验教学示范中心江苏徐州221004

目的探究芍药苷(paeoniflorin,PF)对顺铂(cisplatin,CDDP)诱导大鼠心功能障碍及心肌细胞损伤的保护作用。方法SD雄性大鼠随机分为对照组、CDDP组、CDDP+PF低剂量组及CDDP+PF高剂量组,PowerLab多功能记录仪进行左心室插管检测心功能相关... 详细信息

目的探究芍药苷(paeoniflorin,PF)对顺铂(cisplatin,CDDP)诱导大鼠心功能障碍及心肌细胞损伤的保护作用。方法SD雄性大鼠随机分为对照组、CDDP组、CDDP+PF低剂量组及CDDP+PF高剂量组,PowerLab多功能记录仪进行左心室插管检测心功能相关指标[左室内压峰值(left ventricular peak pressure,LVSP)、左室舒张末压(left ventricular enddiastolic pressure,LVEDP)、左室内压变化速率(±dp/dt)]的数值变化;取各组大鼠血清,检测炎性因子TNF-α、IL-1β和IL-6水平;取心肌组织染色,观察组织结构变化。H9c2心肌细胞分为对照组、CDDP组、PF组及CDDP+PF组,CCK-8法测各组细胞活性;流式细胞术检测各组心肌细胞凋亡情况;Western blotting检测心肌细胞中MAPK信号通路相关蛋白p38、ERK、JNK及其磷酸化蛋白表达和凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Casp3、Cl-casp3的表达情况。结果与对照组相比,CDDP组LVSP、±dp/dt明显下降(P<0.01),LVEDP明显升高(P<0.01);与CDDP组比较,PF低、高剂量预处理均可升高LVSP及±dp/dt水平(P<0.05或P<0.01),降低LVEDP水平(P<0.01),降低大鼠血清中炎性因子TNF-α、IL-1β和IL-6含量(P<0.01)。细胞水平结果显示,与对照组相比,CDDP组细胞活性下降,凋亡相关蛋白Bax、Cl-casp3表达增加(P<0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低(P<0.01),MAPK通路p38及ERK磷酸化表达升高(P<0.01);与CDDP组相比,PF可恢复细胞活性,下调凋亡相关蛋白Bax、Cl-casp3表达(P<0.05或P<0.01),增加抗凋亡蛋白Bcl-2表达(P<0.01),抑制MAPK通路p38及ERK磷酸化表达(P<0.01)。结论PF可恢复CDDP诱导大鼠心功能障碍及心肌细胞损伤,其作用可能通过调控ERK/p38 MAPK信号抑制炎症反应和细胞凋亡。

关键词：心功能障碍芍药苷炎症凋亡 ERK/p38 MAPK

脓毒症患者中性粒细胞内钙水平下降影响细胞迁移研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2024年第3期44卷 212-216页

作者：齐妍王闰楠王贺元柳忠辉吉林大学基础医学院免疫学系长春130021 吉林大学基础医学院遗传学系长春130021 吉林大学第一临床医院内分泌代谢科长春130021

目的探究细胞内钙水平与脓毒症患者中性粒细胞迁移功能障碍的关系。方法纳入吉林大学第一医院2017年12月—2018年9月临床诊断为脓毒症的21例患者血样,另外选取20名健康人作为对照组。采用磁珠分选试剂盒分离健康对照及脓毒症患者外周血... 详细信息

目的探究细胞内钙水平与脓毒症患者中性粒细胞迁移功能障碍的关系。方法纳入吉林大学第一医院2017年12月—2018年9月临床诊断为脓毒症的21例患者血样,另外选取20名健康人作为对照组。采用磁珠分选试剂盒分离健康对照及脓毒症患者外周血中性粒细胞,多通道微流控芯片技术检测中性粒细胞的趋化迁移能力。利用钙指示剂Fluo-4,采用流式细胞术检测健康对照和脓毒症患者中性粒细胞内钙水平,以及钙螯合剂BAPTA-AM与EDTA共同孵育的健康对照中性粒细胞内的钙水平。结果与健康对照组相比,脓毒症患者中性粒细胞内钙水平显著下降(P技术发现细胞内钙下降后,中性粒细胞在微流控中的迁移速度、迁移距离以及间隙通过率均显著降低(P<0.01)。结论脓毒症患者中性粒细胞内钙水平降低可能是导致中性粒细胞迁移能力下降的重要原因。本研究为通过调节细胞内钙水平改善中性粒细胞迁移障碍提供了新的研究思路。

关键词：中性粒细胞脓毒症细胞迁移细胞内钙水平微流控技术

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当代社会技术统治下的生命教育探析

中国医学伦理学 2024年

作者：吕东方丁晓宇杜萍海军军医大学基础医学院

针对当前国内生命教育的主要内容以及研究重点的转移，即逐渐由“健康安全”的行为规范转变为对生命本质、生死问题的思考，借用生命政治哲学的理论资源指出，正是“生命”的内在化导致了“倦怠感”和抑郁症的流行，面对当代社会的技术... 详细信息

针对当前国内生命教育的主要内容以及研究重点的转移，即逐渐由“健康安全”的行为规范转变为对生命本质、生死问题的思考，借用生命政治哲学的理论资源指出，正是“生命”的内在化导致了“倦怠感”和抑郁症的流行，面对当代社会的技术统治，如何应对外在的技术规训才是生命真正需要解决的问题。对生命教育而言，即需要研究如何重新突出实践维度，将“健康安全”这一主题由简单的行为规范拓展为与现代社会打交道的方式以及生命形态的展现。

关键词：生命教育抑郁症死亡本能