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间质干细胞和肿瘤干细胞的分离鉴定及临床意义

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临床检验杂志 2005年第5期23卷 390-392页

作者：朱伟许文荣江苏大学医学技术学院江苏镇江212001

干细胞(stem cell,SC)是一类具有自我更新和多向分化潜能的原始细胞,根据干细胞的来源及分化潜能一般将干细胞分为胚胎干细胞(embryonal stem cell)、生殖干细胞(germinal stem cell)和成体干细胞(adult stem cell).由于干细胞的可塑性... 详细信息

干细胞(stem cell,SC)是一类具有自我更新和多向分化潜能的原始细胞,根据干细胞的来源及分化潜能一般将干细胞分为胚胎干细胞(embryonal stem cell)、生殖干细胞(germinal stem cell)和成体干细胞(adult stem cell).由于干细胞的可塑性,使得干细胞在临床应用方面有着诱人的前景。

关键词：间质干细胞肿瘤干细胞

稳定表达PDCoV-S和RBD蛋白的293T细胞系构建与免疫原性评价

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中国兽医学报 2024年第5期44卷 959-965页

作者：肖丽赵淑庆袁雪松范丽原易鑫陈琢琦李彬李基棕主性贵州大学动物科学学院贵州贵阳550025 江苏省农业科学院兽医研究所农业农村部兽用生物制品工程技术重点实验室江苏南京210014 南京农业大学动物医学院江苏南京210095 江苏大学生命科学学院/食品与生物工程学院江苏镇江212013 南京工业大学药学院江苏南京210000

为构建稳定表达猪δ冠状病毒(PDCoV)S和RBD蛋白的293T细胞系,获得PDCoV S和RBD蛋白。本研究将优化合成的PDCoV S蛋白全长基因及其RBD的表达质粒进行双酶切鉴定,将重组质粒pLV-S-Puro、pLV-RBD-Puro、psPRX2、pMD2.G同时转染293T细胞中... 详细信息

为构建稳定表达猪δ冠状病毒(PDCoV)S和RBD蛋白的293T细胞系,获得PDCoV S和RBD蛋白。本研究将优化合成的PDCoV S蛋白全长基因及其RBD的表达质粒进行双酶切鉴定,将重组质粒pLV-S-Puro、pLV-RBD-Puro、psPRX2、pMD2.G同时转染293T细胞中进行慢病毒包装,收集上清感染293T细胞,经嘌呤霉素初筛得到的多细胞克隆,进一步通过终点稀释法筛选获得稳定表达PDCoV S和RBD蛋白的单克隆293T细胞系,通过Western blot检测蛋白表达,用纯化的PDCoV S和RBD蛋白分别免疫BALB/c小鼠,对重组蛋白进行免疫原性检测。结果表明,稳定表达PDCoV S和RBD蛋白的293T细胞系构建成功,获得了重组慢病毒,纯化PDCoV S和RBD重组蛋白均可以诱导小鼠产生较高的IgG抗体(S:1.2;RBD:0.9),中和抗体水平分别达1∶128和1∶64。本研究构建的293T细胞系能稳定表达PDCoV S和RBD蛋白,为进一步研制PDCoV亚单位疫苗奠定了基础。

关键词： 293T细胞系 PDCoV 慢病毒稳定表达

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实时定量PCR在干细胞及肿瘤研究中的应用

临床检验杂志 2005年第1期23卷 65-66,72页

作者：严永敏郝顺祖许文荣江苏大学医学技术学院江苏镇江212001

实时定量PCR(real-time quantitative PCR)技术实现了PCR从定性到定量的飞跃,而且与常规PCR相比具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点,已广泛用于生物医学及临床医学等多个领域.而在干细胞研究和肿瘤诊断的研究中,... 详细信息

实时定量PCR(real-time quantitative PCR)技术实现了PCR从定性到定量的飞跃,而且与常规PCR相比具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点,已广泛用于生物医学及临床医学等多个领域.而在干细胞研究和肿瘤诊断的研究中,国内外文献报道较少,本文就其中方法原理、研究进展及其在干细胞和肿瘤研究方面的应用作一简要综述.……

关键词：实时定量PCR 肿瘤研究干细胞研究 PCR污染临床医学肿瘤诊断生物医学 PCR) 特异性领域

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绦虫永久染色标本的制作技术

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2006年第B12期24卷 58-61页

作者：陈盛霞吴亮徐会娟帅连云傅行礼仇锦波江苏大学医学技术学院镇江212001

目的制作绦虫玻片染色标本用于教学和科研。方法用墨汁染色法制作绦虫妊娠节片玻片标本,卡红染色法制作绦虫成熟节片、头节和囊尾蚴玻片标本。结果妊娠节片、成熟节片、头节和囊尾蚴经染色制片后特征结构明显可见。如妊娠节片染色标本... 详细信息

目的制作绦虫玻片染色标本用于教学和科研。方法用墨汁染色法制作绦虫妊娠节片玻片标本,卡红染色法制作绦虫成熟节片、头节和囊尾蚴玻片标本。结果妊娠节片、成熟节片、头节和囊尾蚴经染色制片后特征结构明显可见。如妊娠节片染色标本清晰可见染成墨汁颜色的子宫主干和分支状的子宫侧支,节片一侧边缘中部可见突出的生殖腔;成熟节片染色标本均染成红色,内有着色更深的雌雄生殖系统各一套。结论墨汁染色和卡红染色制作带绦虫染色标本效果好,可永久保存。

关键词：绦虫染色标本

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可溶性Ⅱ型胶原蛋白提取纯化条件的研究

临床检验杂志 2006年第6期24卷 418-421页

作者：姜旭淦陈盛霞王卉放吴亮许化溪江苏大学医学技术学院江苏镇江212001

目的优化实验条件,建立提取纯化可溶性Ⅱ型胶原蛋白(solublecollagentypeⅡ,SCⅡ)的可靠方法。方法选择鸡胸箭突软骨为提取原料,用盐酸胍去除蛋白多糖,对胃蛋白酶的消化方式、氯化钠盐析浓度、DEAE阴离子树脂种类进行研究。采用SDS-PAG... 详细信息

目的优化实验条件,建立提取纯化可溶性Ⅱ型胶原蛋白(solublecollagentypeⅡ,SCⅡ)的可靠方法。方法选择鸡胸箭突软骨为提取原料,用盐酸胍去除蛋白多糖,对胃蛋白酶的消化方式、氯化钠盐析浓度、DEAE阴离子树脂种类进行研究。采用SDS-PAGE、吸收光谱分析、氨基酸成分分析对SCⅡ进行鉴定。结果4mol/L盐酸胍能有效去除蛋白多糖,分二步加入胃蛋白酶的消化结果满意,氯化钠盐析浓度为2.4mol/L时最佳。SDS-PAGE电泳结果显示提取纯化的SCⅡ与Sigma公司的产品一致,SCⅡ最大吸收峰为230nm,在检出的15种氨基酸中甘氨酸、脯氨酸和丙氨酸含量最高。结论改进后的方法具有材料广泛、实验条件简便、结果可靠等优点,适用于科研、临床各种规模SCⅡ的提取。所得产品纯度高、符合II型胶原的特征。

关键词： Ⅱ型胶原蛋白类风湿性关节炎软骨蛋白多糖

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尿液有形成分检查的难点与疑点

中华检验医学杂志 2009年第6期32卷 605-608页

作者：顾可梁江苏大学医学技术学院镇江212001

尿液有形成分检查是肾疾病诊断中重要的检查方法，显微镜检查或自动化仪器分析法均不够完善，干化学检查也并不可信，染色法是鉴别尿有形成分的有效方法，做好分析前、分析中、分析后质量控制是完成这一工作的有力保证。

关键词：尿分析显微镜检查自动分析染色与标记质量控制

APS IgG通过非Fc受体途径诱导血液单核细胞表达TF活性

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中国免疫学杂志 2003年第8期19卷 561-564,569页

作者：周红谷俊侠许文荣江苏大学医学技术学院镇江212001

目的 :探讨抗磷脂综合征 (AntiphospholipidSyndrome ,APS)患者血清IgG体外诱导血液单核细胞表达组织因子(TissueFactor,TF)活性的作用及其作用途径。方法 :利用纯化的APS血清IgG及其F(ab’) 2 片段 ,以及抗磷脂结合蛋白 (如 β2glucopr... 详细信息

目的 :探讨抗磷脂综合征 (AntiphospholipidSyndrome ,APS)患者血清IgG体外诱导血液单核细胞表达组织因子(TissueFactor,TF)活性的作用及其作用途径。方法 :利用纯化的APS血清IgG及其F(ab’) 2 片段 ,以及抗磷脂结合蛋白 (如 β2glucoproteinⅠ ,β2 GPI)单克隆抗体RP 1分别刺激新鲜分离的外周血单核细胞 ,通过因子Xa的生成量 ,判断单核细胞TF活性的表达。结果 :与健康人血清IgG比较 ,APS患者血清IgG以及RP 1显著增强单核细胞的TF活性 ;外源性 β2 GPI可加强APSIgG的这一诱导作用 ;从APSIgG中纯化出的F(ab)’2 片段具有与完整IgG分子相同的刺激效应。结论 :抗磷脂抗体 ,主要为抗β2 GPI,以与抗原特异结合方式 ,通过非Fc受体途径诱导血液单核细胞表达TF活性 ,成为APS患者血栓形成的机理之一。

关键词： APSIgG 非Fc受体诱导血液单核细胞表达TF 活性抗磷脂综合征自身抗体

心肌挽救指数对ST段抬高型心肌梗死患者再灌注预后的预测价值

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中国急救复苏与灾害医学杂志 2024年第5期19卷 561-564,582页

作者：徐源仲威叶斐夏源凡六章许康世蒋明张晓晖南京大学医学院附属盐城第一医院(盐城市第一人民医院)心内科江苏盐城224006 江苏大学附属医院心内科江苏镇江212001 江苏大学附属昆山医院(昆山市第一人民医院)心内科江苏昆山215300

目的研究心肌挽救指数(MSI)对ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者再灌注预后的预测价值。方法回顾性分析2021年7月-2022年6月期间在盐城市第一人民医院接受再灌注治疗的102例首次STEMI患者的临床资料,通过心血管磁共振技术测量STEMI患者的M... 详细信息

目的研究心肌挽救指数(MSI)对ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者再灌注预后的预测价值。方法回顾性分析2021年7月-2022年6月期间在盐城市第一人民医院接受再灌注治疗的102例首次STEMI患者的临床资料,通过心血管磁共振技术测量STEMI患者的MSI,根据MSI中位值将STEMI患者分为低MSI组和高MSI组,各51例。比较两组间主要不良心血管事件(MACE)临床资料、实验室指标、MACE发生率以及心功能和心室重构指标[左室射血分数(LVEF)、左心室舒张末内径(LVEDd)、左心室收缩末内径(LVESD)]。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析术后3~7 d时MSI预测STEMI患者再灌注治疗后MACE发生的效能。结果低MSI组患者血清肌钙蛋白I(cTnI)、氨基末端-脑钠肽前体(NT-proBNP)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)显著高于高值组患者,差异有统计学意义(P<0.05)。低MSI组患者LVEF显著低于高MSI组,LVFS、LVEDd和LVESD显著高于高MSI组患者(P<0.05)。102例STEMI患者PCI术后随访1年内有27例出现MACE,MSI低值组和高值组患者各发生25例(49.02%)和2例(3.92%)MACE,低值组患者MACE发生率显著高于高值组(P<0.05)。ROC曲线分析显示术后3~7 d时MSI预测STEMI患者发生不良预后的AUC分别为0.874(95%CI:0.805~0.943),最佳诊断cut-off值为61.65,此时的灵敏度、特异度、约登指数、阳性预测和阴性预测值分别为85.18%、85.33%、70.52%、67.65%和94.12%。结论术后3~7 d MSI能够有效评估行PCI治疗的STEMI患者的预后。

关键词： ST段抬高型心肌梗死心血管磁共振心肌挽救指数主要心血管不良事件预后

硅油介质中矩形电容式微机械超声换能器发射与接收声场特性研究

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应用声学 2024年第1期43卷 151-159页

作者：高碧珍张赛何常德王智豪王子渊张文栋中北大学仪器与电子学院动态测试省部共建实验室太原030051 江苏大学物理与电子工程学院镇江212013

与传统压电式超声换能器相比,基于微机电系统微加工技术制备的电容式微机械超声换能器(CMUT)具有频带宽、灵敏度高、一致性好、易于集成等优势,在医学超声成像中具有广阔的应用前景。该文针对研制的矩形CMUT器件,开展硅油介质中CMUT发... 详细信息

与传统压电式超声换能器相比,基于微机电系统微加工技术制备的电容式微机械超声换能器(CMUT)具有频带宽、灵敏度高、一致性好、易于集成等优势,在医学超声成像中具有广阔的应用前景。该文针对研制的矩形CMUT器件,开展硅油介质中CMUT发射、接收声场特性的理论分析及实验验证研究。首先,针对CMUT阵元结构特征和工作原理,根据指向性函数理论和Bridge乘积原理,建立了矩形CMUT阵元指向性函数分析模型。此基础上,分析微元数目以及谐振频率对CMUT指向性的影响规律。最后,针对7 mm×7 mm二维矩形CMUT在硅油介质中的发射和接收特性进行了实验验证,测试表明发射指向性曲线与仿真理论曲线基本吻合;此外,CMUT接收与发射指向性的测试表明,收发指向性具有一致性,从而验证了声场的互易性。该文的研究对CMUT器件的封装设计以及基于CMUT阵列的乳腺超声CT成像系统的研制具有重要参考价值。

关键词：电容式微机械超声换能器矩形阵元指向性声场互易