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泛素连接酶Cullin3对三阴性乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制探讨

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中华医学杂志 2024年第20期104卷 1868-1878页

作者：何志贤李晶王沁凡程乾倪苏婕南通大学附属医院甲乳外科南通南通大学附属医院心电图室南通南通大学附属医院肿瘤化疗科南通

目的探讨泛素化连接酶E3蛋白(Cullin3, CUL3)对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及其作用机制。方法基于生物信息学方法获取TNBC组织中CUL3基因和蛋白的表达数据, 评估CUL3在TNBC患者肿瘤组织(n=160)中和正常乳腺组织(... 详细信息

目的探讨泛素化连接酶E3蛋白(Cullin3, CUL3)对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及其作用机制。方法基于生物信息学方法获取TNBC组织中CUL3基因和蛋白的表达数据, 评估CUL3在TNBC患者肿瘤组织(n=160)中和正常乳腺组织(NC)(n=572)中的表达及其与临床预后的关系。通过CCK8细胞增殖实验、划痕实验、Transwell实验检测过表达CUL3对TNBC细胞体外增殖、迁移及侵袭能力的影响;通过免疫共沉淀(IP)联合质谱分析筛选出可能与CUL3相互作用的蛋白质, 确定CUL3调控的底物蛋白为谷胱甘肽S-转移酶P1(GSTP1);通过划痕实验、Transwell实验检测过表达GSTP1对TNBC细胞迁移及侵袭能力的影响, 探索过表达CUL3是否可以逆转GSTP1对细胞迁移及侵袭能力的影响;通过Western 印迹和IP检测CUL3对GSTP1蛋白泛素化修饰的影响, 验证CUL3调控GSTP1表达影响TNBC迁移和侵袭的分子机制。结果 CUL3在TNBC中表达量显著增高(P<0.000 1), CUL3高表达与TNBC患者预后不良相关, 高表达CUL3的TNBC患者总生存期(OS)、无病生存期(RFS)均更短(OS, P=0.018;RFS, P=0.008);过表达CUL3可显著增加TNBC细胞增殖(231细胞组F=11.97, P=0.002;468细胞组F=51.92, P<0.001)、迁移[231细胞系和468细胞系过表达组穿膜细胞数分别为(74.7±4.0)、(128.0±6.1)个, 而空白对照(NC)组分别为(21.0±2.7)、(70.0±6.6)个, 231和468细胞组t分别为-19.24和-11.23, P均<0.001]和侵袭能力(231细胞系和468细胞系过表达组48 h细胞增殖率分别为56.6%±4.4%、51.6%±3.7%, 而NC组分别为40.5%±2.9%、32.9%±4.8%, 231细胞组t=-5.26, P=0.006 3;468细胞组t=-5.38, P=0.005 8);GSTP1在TNBC表达中降低, 上调GSTP1可抑制TNBC细胞迁移[231细胞系和468细胞系过表达组穿膜细胞数分别为(16.3±6.5)、(33.0±6.2)个, 而NC组分别为(34.3±2.5)、(77.3±5.0)个, 231细胞组t=5.44, P=0.006;468细胞组t=7.20, P=0.002]和侵袭(231细胞系和468细胞系过表达组48 h细胞增殖率分别为49.6%±1.7%、36.2%±1.4%, 而NC组分别为59.4%±4.7%、53.0%±1.7%, 231细胞组t=3.42, P=0.027;468细胞组t=13.18, P<0.001), 而上调CUL3可逆转GSTP1对细胞迁移[231细胞系和468细胞系过表达组穿膜细胞数分别为(37.0±1.0)、(67.0±5.3)个, 231细胞组t=-3.97, P=0.017;468细胞组t=-6.12, P=0.004]、侵袭(231细胞系和468细胞系过表达组48 h细胞增殖率分别为71.9%±3.6%、59.4%±2.1%, 231和468细胞组t值分别为-9.61和-16.01, P均<0.001)的抑制作用;CUL3通过增加GSTP1泛素化修饰, 促进泛素-蛋白酶体系统降解GSTP1蛋白, 从而降低GSTP1蛋白的稳定性。结论过表达CUL3通过促进GSTP1泛素化降解诱导细胞迁移和侵袭, 从而促进TNBC发生发展。

关键词：乳腺肿瘤 Cullin蛋白质类谷胱甘肽S-转移酶P1 泛素化

可溶性生长刺激表达基因2蛋白对脓毒症相关急性肾损伤的预测价值

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实用医学杂志 2024年第16期40卷 2291-2297页

作者：蒋伟王辉黄中伟黄新忠南通大学附属医院急诊内科江苏南通226001 南通大学附属医院肾内科江苏南通226001

目的研究可溶性生长刺激表达基因2蛋白(soluble growth-stimulated expressed gene 2 protein,sST2)对脓毒症相关急性肾损伤(sepsis-associated acute kidney injury,SA-AKI)的预测价值。方法采用回顾性观察性研究,纳入2020年1月至2023年12月在南通大学附属医院急诊科接受sST2检测的395例脓毒症患者。根据是否发生急性肾损伤(AKI),分为非AKI组(281例)和AKI组(114例)。收集患者入院24 h内的基础临床数据和实验室检查结果,通过受试者工作特征(ROC)曲线分析sST2对SA-AKI的诊断能力,logistic回归评估sST2是否为SA-AKI发生的独立危险因素,通过构建两预测模型,使用ROC曲线下面积(AUC)、净重新分类指数(NRI)、综合判别改善指数(IDI)评估sST2的加入对模型预测能力的提升效果。结果AKI组患者sST2水平高于非AKI组(P85 ng/mL是SA-AKI的独立危险因素(OR=14.315,95%CI:5.867~34.926,P<0.001)。增加sST2显著改善了预测模型的AUC(0.954 vs.0.909,P<0.0001)、NRI(21.48%,95%CI:11.48%~31.49%,P<0.0001)及IDI(8.62%,95%CI:5.75%~11.49%,P<0.0001)。结论血清sST2可能成为潜在的预测脓毒症AKI发生的生物标志物。

关键词：脓毒症急性肾损伤可溶性生长刺激表达基因2蛋白危险因素预测价值

下调PDCD4抑制MAP2K3和p38 MAPK的表达减轻LPS诱导的肾小管上皮细胞炎症和凋亡

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中国急救医学 2024年第4期44卷 305-313页

作者：蒋伟张益楠张健锋黄中伟南通大学附属医院急诊内科江苏南通226001 南通大学附属医院皮肤科江苏南通226001 南通大学附属医院消化内科江苏南通226001

目的研究程序性细胞死亡蛋白4(programmed cell death protein 4,PDCD4)在脓毒症诱导的急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)中的作用机制,以及调控PDCD4表达通过丝裂原活化蛋白激酶3(mitogen-activated protein kinase 3,MAP2K3)和p38蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)对脓毒症AKI起到潜在治疗作用。方法用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激人肾小管上皮细胞(HK-2)构建脓毒症AKI细胞模型。进一步用腺病毒介导siRNA和过表达载体抑制和上调AKI细胞模型中PDCD4的表达;CCK-8法检测细胞增殖;用DCFH-DA及激光共聚焦显微镜检测细胞中ROS水平,用总SOD活性检测试剂和MDA检测试剂盒检测细胞中SOD和MDA水平;免疫共沉淀验证PDCD4和MAP2K3之间的蛋白相互作用;TUNEL染色法检测细胞凋亡;RT-qPCR和Western blot检测PDCD4及相关基因的mRNA和蛋白表达水平;ELISA法检测患者血清中炎症相关因子水平。结果LPS诱导可以促进HK-2细胞中PDCD4表达,下调PDCD4可抑制LPS诱导的HK-2细胞的炎症、氧化应激及细胞凋亡。数据库预测及免疫共沉淀证实PDCD4可以与MAP2K3相互作用,且在LPS诱导的HK-2细胞中,MAP2K3表达水平显著增强。MAP2K3过表达和p38 MAPK激动剂可以减轻PDCD4下调对LPS诱导的细胞炎症和氧化应激的影响并抑制细胞凋亡。结论下调PDCD4可以通过抑制MAP2K3和p38 MAPK从而抑制LPS诱导的肾小管上皮细胞的炎症和凋亡。

关键词：急性肾损伤脓毒症程序性细胞死亡蛋白4 丝裂原活化蛋白激酶3 p38蛋白激酶活性氧超氧化物歧化酶丙二醛

前臂桡侧皮瓣和股前外侧皮瓣修复口腔癌切除后软组织缺损临床效果比较

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中华整形外科杂志 2024年第9期40卷 992-1001页

作者：朱江须无双马子涵项毓铖石婉莹吴森斌宋冬惠南通大学附属医院口腔科南通226000

目的比较前臂桡侧皮瓣与股前外侧皮瓣在口腔癌术后软组织缺损中的修复效果, 并探讨其适应证。方法回顾性分析南通大学附属医院口腔科2019年5月至2023年2月收治的口腔癌患者临床资料, 根据修复方法分为前臂桡侧皮瓣组和股前外侧皮瓣组。... 详细信息

目的比较前臂桡侧皮瓣与股前外侧皮瓣在口腔癌术后软组织缺损中的修复效果, 并探讨其适应证。方法回顾性分析南通大学附属医院口腔科2019年5月至2023年2月收治的口腔癌患者临床资料, 根据修复方法分为前臂桡侧皮瓣组和股前外侧皮瓣组。从以下几个方面对2组进行比较:(1)手术情况(包括口腔癌切除后缺损面积、皮瓣面积、皮瓣制备时间、手术时间)及住院时间。(2)术前1 d和术后1 d炎性指标, 包括白细胞介素6和C反应蛋白含量。(3)皮瓣成活情况。(4)术后6个月内皮瓣供区并发症和口腔受区感染发生率。(5)术后6个月, 由1位参与治疗的主治医生参考华盛顿大学生存质量问卷(UW-QOL)评估患者口腔功能, 包括口腔开颌、言语、饮食功能。每一项总分均为0~10分, 评分越高表明口腔功能恢复越好。(6)术后2、4、6个月, 由1位参与治疗的主治医生通过简明健康状况调查问卷(SF-36)评估患者生活质量, 从生理、心理、社会功能3个方面综合评估, 满分100分, 得分越高表明术后患者生活质量越高。(7)术后6个月, 调查患者满意度, 包括满意、基本满意、不满意3个等级, 计算满意率[(满意+基本满意)例数/各组总例数×100%]。采用SPSS 22.0软件对数据进行统计分析。计量资料以±s表示, 组间比较采用t检验;计数资料采用例和(或)百分比表示, 组间比较采用χ^(2)检验。P0.05)。前臂桡侧皮瓣组口腔癌切除后缺损面积为(39.0±1.3) cm^(2), 小于股前外侧皮瓣组的(40.3±2.2) cm^(2)(t=3.32, P=0.001);2组皮瓣面积、皮瓣制备作时间、住院时间比较, 差异均无统计学意义(P均>0.05);前臂桡侧皮瓣组手术时间为(5.1±1.1) h, 少于股前外侧皮瓣组的(6.8±2.8) h(t=0.26, P0.05)。前臂桡侧皮瓣组和股前外侧皮瓣组术后皮瓣成活例数分别为47例(97.9%)和30例(93.8%), 2组比较差异无统计学意义(P>0.05)。术后供区并发症主要为感染、色素沉着、瘙痒等, 前臂桡侧皮瓣组供区总体并发症发生率[33.3%(16/48)]高于股前外侧皮瓣组[12.5%(4/32)], 差异有统计学意义(χ^(2)=4.44, P=0.035)。2组口腔受区感染发生率差异无统计学意义(P>0.05)。术后6个月, 2组患者口腔开颌、言语、饮食功能平均分均大于7分, 2组比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。术后2、4、6个月, 2组患者生活质量随着时间延长均得到提高, 术后6个月时2组生活质量平均分均大于90分, 2组各时间点评分比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。术后6个月, 前臂桡侧皮瓣组患者满意率为91.7%(44/48), 股前外侧皮瓣组为90.6%(29/32), 差异无统计学意义(P>0.05)。结论前臂桡侧皮瓣和股前外侧皮瓣修复口腔癌切除后软组织缺损均能获得较好的临床效果, 显著提升了患者口腔功能。股前外侧皮瓣能提供充足的组织量, 适用于缺损面积较大的患者;而前臂桡侧皮瓣适用于口腔癌切除后缺损面积较小的患者, 其手术操作难度相对较低, 在缩短手术时间上更具优势, 但其供区并发症高于股前外侧皮瓣。

关键词：口腔肿瘤前臂桡侧皮瓣股前外侧皮瓣软组织缺损治疗结果并发症

LINC00475在多发性骨髓瘤中的表达与临床意义

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中国实验血液学杂志 2024年第3期32卷 789-793页

作者：卢玲郭丹洪乐旻蒋钰雯范洪明黄春群卢金凤陈洁徐宏慧黄红铭南通大学附属医院血液内科江苏南通226001

目的:探讨LINC00475在多发性骨髓瘤(MM)患者血清中的相对表达水平及临床意义。方法:用实时荧光定量PCR技术检测108例MM患者血清及RPMI 8226、NCI-H929、U266、OPM2、CAG这5个MM细胞系中LINC00475的表达情况,受试者工作特征曲线评估其对M... 详细信息

目的:探讨LINC00475在多发性骨髓瘤(MM)患者血清中的相对表达水平及临床意义。方法:用实时荧光定量PCR技术检测108例MM患者血清及RPMI 8226、NCI-H929、U266、OPM2、CAG这5个MM细胞系中LINC00475的表达情况,受试者工作特征曲线评估其对MM的诊断价值,并结合患者的临床资料分析LINC00475与患者临床特征的关系。结果:与健康对照组相比,MM患者血清及MM细胞系中LINC00475的表达明显上调(均P<0.05)。受试者工作特征曲线分析显示,LINC00475的最佳截断值为262.4,曲线下面积为0.924(95%CI:0.884-0.964),灵敏度83.3%,特异度91.7%,表明LINC00475在MM患者中具有良好的评估价值。与LINC00475低表达组的MM患者相比,高表达组的患者具有较高水平的β2-微球蛋白和胱抑素C(均P<0.05),但白蛋白水平较低(P<0.05)。与ISS分期Ⅰ期的MM患者相比,Ⅱ期和Ⅲ期患者LINC00475的表达水平均明显增高(均P<0.05)。结论:检测LINC00475的相对表达水平有助于区分MM患者和正常人群,其相对表达水平与MM患者的β2-微球蛋白、白蛋白、ISS分期等预后指标相关。

关键词：多发性骨髓瘤 LINC00475 长链非编码RNA

地塞米松对LPS诱导急性肺损伤小鼠早期肺部炎症及VEGF的影响

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中国药理学通报 2024年第10期40卷 1997-1998页

作者：谢彤昕徐扬薛群高永涛南通大学附属医院麻醉科南通大学医学院江苏南通226001 南通大学药学院江苏南通226001 南通大学附属医院心胸外科江苏南通226001

急性肺损伤(acute lung injury,ALI)是由多种因素引起的肺泡上皮细胞和毛细血管内皮细胞损伤,表现为弥漫性肺间质和肺泡水肿,重症患者病死率高[1-2]。血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)具有促血管生成活性,对... 详细信息

急性肺损伤(acute lung injury,ALI)是由多种因素引起的肺泡上皮细胞和毛细血管内皮细胞损伤,表现为弥漫性肺间质和肺泡水肿,重症患者病死率高[1-2]。血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)具有促血管生成活性,对血管内皮细胞具有促有丝分裂和抗凋亡作用[3-5]。地塞米松作为抗炎糖皮质激素用于治疗ALI,能降低COVID-19重症患者死亡率[6-8]。

关键词：急性肺损伤血管内皮生长因子地塞米松

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伴单克隆免疫球蛋白的惰性B细胞非霍奇金淋巴瘤临床特征及预后

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中国临床研究 2024年第6期37卷 925-928,954页

作者：范洪明郭丹洪乐旻黄春群卢金凤徐宏慧陈洁黄红铭杨熙南通大学附属医院血液科江苏南通226001

目的探讨伴单克隆免疫球蛋白(McIg)惰性B细胞非霍奇金淋巴瘤(iB-NHL)患者临床特征及预后。方法回顾性分析2013年11月至2021年10月南通大学附属医院的82例初诊iB-NHL患者的临床与病理资料,根据血清免疫固定电泳(SIFE)结果分为阳性组(30例... 详细信息

目的探讨伴单克隆免疫球蛋白(McIg)惰性B细胞非霍奇金淋巴瘤(iB-NHL)患者临床特征及预后。方法回顾性分析2013年11月至2021年10月南通大学附属医院的82例初诊iB-NHL患者的临床与病理资料,根据血清免疫固定电泳(SIFE)结果分为阳性组(30例)和阴性组(52例),对其临床特征、实验室检查结果、总生存期(OS)进行分析。结果伴McIg的iB-NHL好发于男性,以IgM-κ最为多见,临床分期多为Ⅲ~Ⅳ期,以边缘区淋巴瘤(MZL)为主。与阴性组患者相比,阳性组患者更易出现骨髓浸润、国际预后指数(IPI)评分≥3分、白细胞计数减少、贫血、低白蛋白血症、球蛋白升高和胱抑素C升高(P<0.05)。Cox单因素分析显示,IPI≥3分、McIg阳性与患者较差的OS相关,多因素分析显示McIg阳性是患者OS独立预后不良因素(HR=0.074,95%CI:0.009~0.609,P=0.015)。随访截止于2021年10月31日,阳性组的中位OS为52个月,不伴McIg的患者中位OS未达到,差异有统计学意义(P<0.01)。结论在初诊iB-NHL患者中,伴有McIg患者的预后相对较差,需要在临床诊治中重点关注。

关键词：惰性B细胞非霍奇金淋巴瘤边缘区淋巴瘤单克隆免疫球蛋白血清免疫固定电泳骨髓浸润国际预后指数

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双重引导技术在1例无牙颌种植修复中的应用

山东大学学报（医学版） 2024年第6期62卷 116-121页

作者：李磊徐克周桥卢军南通大学附属医院口腔科江苏南通226001

随着人均预期寿命的增长和老龄化加剧,无牙颌症状的发生率和患者呈上升趋势,全口义齿修复的需求也逐年攀升[1-2]。传统的可摘全口义齿因固定性和稳定性有限,常常难以满足患者的期望和需求。种植修复技术的发展使全口固定式种植义齿凭借... 详细信息

随着人均预期寿命的增长和老龄化加剧,无牙颌症状的发生率和患者呈上升趋势,全口义齿修复的需求也逐年攀升[1-2]。传统的可摘全口义齿因固定性和稳定性有限,常常难以满足患者的期望和需求。种植修复技术的发展使全口固定式种植义齿凭借其固位效果、稳定性和美学优势,成为广泛采纳的治疗方式[3-4]。为确保软硬组织的长期稳定及最佳修复效果,采用以修复为导向的种植体放置方式被认为是最理想的策略[5-6]。

关键词：无牙颌双重引导技术种植固定修复数字化

基于监督机器学习算法构建脓毒性休克患者死亡风险的预测模型

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中华危重病急救医学 2024年第4期36卷 345-352页

作者：谢政金晶刘东松陆圣译俞慧韩冬孙炜黄铭江南大学附属医院急诊科江苏无锡214000 江南大学附属医院神经内科江苏无锡214000

目的基于不同监督机器学习算法,构建并验证适用于脓毒性休克患者28 d死亡风险的最佳预测模型。方法从美国重症监护医学信息数据库Ⅳv2.0(MIMIC-Ⅳv2.0)中筛选出符合脓毒症3.0的脓毒性休克患者,随机抽取病例,其中70%作为训练集,30%作为... 详细信息

目的基于不同监督机器学习算法,构建并验证适用于脓毒性休克患者28 d死亡风险的最佳预测模型。方法从美国重症监护医学信息数据库Ⅳv2.0(MIMIC-Ⅳv2.0)中筛选出符合脓毒症3.0的脓毒性休克患者,随机抽取病例,其中70%作为训练集,30%作为验证集。从人口学特征及基础生命体征、入重症监护病房(ICU)24 h内血清学指标及可能影响指标的合并症、功能评分及高级生命支持3个层面提取相关预测变量。比较基于决策树分类回归树(CART)、随机森林(RF)、支持向量机(SVM)、线性回归(LR)及超级学习器〔SL,综合了CART、RF和极端梯度提升(XGBoost)〕5种主流机器学习算法构建的模型对脓毒性休克患者28 d死亡的预测效能,筛选最佳算法模型。利用LASSO回归、RF和XGBoost算法,通过取交集确定最佳预测变量,构建预测模型。采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)验证模型的预测效能;采用校准曲线评估模型的准确性;采用决策曲线分析(DCA)验证模型的实用性。结果最终共纳入3295例脓毒性休克患者,28 d存活2164例,死亡1131例,病死率为34.32%;其中,训练集2307例(28 d死亡792例,病死率为34.33%),验证集988例(28 d死亡339例,病死率为34.31%)。基于训练集数据分别建立5种机器学习模型;在纳入3个层面的变量后,RF、SVM、LR 3种机器学习模型在验证集预测脓毒性休克患者28 d死亡的ROC曲线下面积(AUC)依次为0.823〔95%可信区间(95%CI)为0.795~0.849〕、0.823(95%CI为0.796~0.849)、0.810(95%CI为0.782~0.838),高于CART算法模型(AUC=0.750,95%CI为0.717~0.782)和SL算法模型(AUC=0.756,95%CI为0.724~0.789),故将以上3种算法模型确定为最佳算法模型。综合3个层面变量后,通过LASSO回归、RF和XGBoost算法筛选并取交集,得出16个最佳预测变量,依次为入ICU 24 h内pH最大值、白蛋白(Alb)最大值、体温最大值、血乳酸(Lac)最小值、Lac最大值、血肌酐(SCr)最大值、Ca^(2+)最大值、血红蛋白(Hb)最小值、白细胞计数(WBC)最小值、年龄、简化急性生理学评分Ⅲ(SAPSⅢ)、WBC最大值、急性生理学评分Ⅲ(APSⅢ)、Na^(+)最小值、体质量指数(BMI)及活化部分凝血活酶时间(APTT)最小值。ROC曲线分析显示,以上述16个最佳预测变量构建的Logistic回归模型为最佳预测模型,在验证集中的AUC为0.806(95%CI为0.778~0.835);校准曲线及DCA曲线显示,该模型的精准度较高,且净收益最高可达0.3,其预测效能明显优于传统以单一功能评分〔APSⅢ评分、SAPSⅢ评分、序贯器官衰竭评分(SOFA)〕建立的模型〔AUC(95%CI)分别为0.746(0.715~0.778)、0.765(0.734~0.796)、0.625(0.589~0.661)〕。结论以pH值、Alb、体温、Lac、SCr、Ca^(2+)、Hb、WBC、SAPSⅢ评分、APSⅢ评分、Na^(+)、BMI、APTT等16个最佳变量构建的Logistic回归模型为脓毒性休克患者28 d死亡风险的最佳预测模型,其效能稳定,区分度及精准度均较高。

关键词：监督机器学习脓毒性休克预测模型