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气道粘液、粘蛋白及其分泌调节

中国病理生理杂志 2003年第9期19卷 1267-1271页

作者：黄建民何韶衡赵卫华汕头大学医学院变态反应学和炎症学研究所广东汕头515031 深圳市第二人民医院广东深圳518035

Mucus secreted mainly by epithelial goblet cells and submucosal glands covering the respiratory tract plays an important role in the protection from external aggressions, such as solid particles, pathogens and chemical agents by mucociliary clearance. The viscoelastic properties of mucus are mainly determined by the presence of extensively-glycosylated high molecular weight mucins. A lot of factors influence the expression and secretion of mucins in airway, lead to mucus overproduction, which is a distinguishing feature of chronic obstructive pulmonary disease (COPD) and causes disruption of the mucociliary clearance function, resulting in airway block, chronic infection and death.

关键词：气道粘液粘蛋白类

NGAL基因在永生化食管上皮细胞恶性转化中过表达的研究

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生物化学与生物物理进展 2001年第6期28卷 839-843页

作者：许丽艳李恩民熊华淇蔡唯佳沈忠英汕头大学医学院肿瘤病理研究室汕头515031 汕头大学医学院生物化学与分子生物学教研室汕头515031

为研究NGAL (neutrophilgelatinase associatedlipocalin)基因在永生化食管上皮细胞恶性转化中的表达情况 ,以永生化食管上皮细胞系SHEE和食管癌细胞系SHEEC互为对照 ,用cDNA微列阵进行筛选 ,用RNA印迹和RT PCR进行鉴定 ,cDNA克隆测序后... 详细信息

为研究NGAL (neutrophilgelatinase associatedlipocalin)基因在永生化食管上皮细胞恶性转化中的表达情况 ,以永生化食管上皮细胞系SHEE和食管癌细胞系SHEEC互为对照 ,用cDNA微列阵进行筛选 ,用RNA印迹和RT PCR进行鉴定 ,cDNA克隆测序后与GenBank进行BLAST分析比较 .结果表明NGAL基因在SHEEC中出现显著差异过表达 ,其cDNA序列与小鼠 2 4p3、大鼠NRL (neu relatedlipocalin)、人中性粒细胞NGAL和卵巢癌NGAL具有较高的相似性 .这提示NGAL基因在永生化食管上皮细胞恶性转化中可能发挥着重要作用。

关键词： NGAL cDNA微列阵差异表达基因食管癌永生化食管上皮细胞恶性转化过表达

中国武汉地区葎草花粉变应原蛋白质组分的双向电泳分析

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武汉植物学研究 2006年第1期24卷 58-62页

作者：李东栋何韶衡陶爱林海南大学理工学院生物工程系海南海口570228 汕头大学医学院变态反应学与炎症学研究所广东汕头515031

应用蛋白质双向电泳的分析技术对武汉地区生长的主要过敏原———葎草(Humulus scandensLour.)花粉的蛋白质组分进行了分析。应用三氯乙酸法提取葎草花粉总蛋白质,通过等电聚焦和第二向SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析获得了完整的葎草花粉... 详细信息

应用蛋白质双向电泳的分析技术对武汉地区生长的主要过敏原———葎草(Humulus scandensLour.)花粉的蛋白质组分进行了分析。应用三氯乙酸法提取葎草花粉总蛋白质,通过等电聚焦和第二向SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析获得了完整的葎草花粉全蛋白质图谱。应用专业分析软件(Im ageM aster 2D)对电泳图谱分析表明:通过等电聚焦和第二向SDS-PAGE电泳,有122个不同的蛋白质组分被检测出来,并进一步确定每个蛋白质相应的分子量、等电点和相对含量。研究中获得的高分辨率的双向电泳图谱是我国葎草花粉变应原蛋白质第一张完整的蛋白质图谱,将为今后葎草花粉中致敏蛋白质的检测、分离、基因克隆和变应原的标准化奠定基础。

关键词：葎草花粉变应原蛋白质组分双向电泳

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蛋白酶激活受体在炎症中的作用

免疫学杂志 2004年第Z1期20卷 76-79页

作者：王浩洋郭志福何韶衡汕头大学医学院变态反应学与炎症学研究所广东汕头515031 上海第二军医大学长海医院呼吸内科上海200433

蛋白酶激活受体(Proteinase-activated receptors,PARs)是G蛋白偶联受体家族的一员,介导跨膜信号转导并调节细胞的功能。它被激活后参与许多疾病的发生和发展过程,尤其在炎症反应中所起的作用受到人们越来越多的关注。

关键词：蛋白酶激活受体炎症 G蛋白

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金属β-内酰胺酶分子生物学及酶学研究进展

中国抗生素杂志 2006年第8期31卷 453-457页

作者：林孟娴钱元恕汕头大学医学院汕头515031

金属β-内酰胺酶能水解碳青霉烯类抗生素,而获得性金属酶可以通过整合子上的移动性基因元件使耐药基因在细菌之间传播,使临床抗感染治疗面临更严峻的考验。通过对获得性金属酶分子及酶动力学特征进行阐述,更好地了解酶结构与功能的关系... 详细信息

金属β-内酰胺酶能水解碳青霉烯类抗生素,而获得性金属酶可以通过整合子上的移动性基因元件使耐药基因在细菌之间传播,使临床抗感染治疗面临更严峻的考验。通过对获得性金属酶分子及酶动力学特征进行阐述,更好地了解酶结构与功能的关系,为进一步研究耐药机制提供依据。

关键词：金属β-内酰胺酶晶体结构分子生物学酶动力学特征

一氧化氮诱导食管癌细胞线粒体DNA编码基因过表达

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生物化学与生物物理进展 2002年第3期29卷 378-384页

作者：李恩民许丽艳杨帆袁兰陈跃汕头大学医学院生物化学与分子生物学教研室汕头515031 汕头大学医学院肿瘤病理研究室汕头515031 北京大学医药卫生分析中心北京100083

以人食管癌细胞系EC10 9作为驱赶方 (driver) ,以被一氧化氮 (nitricoxid ,NO)诱导的EC10 9作为实验方 (tester) ,应用抑制消减杂交 (suppressionsubtractivehybridization ,SSH)、反向mRNA斑点印迹和RNA印迹等技术手段研究了NO诱导的... 详细信息

以人食管癌细胞系EC10 9作为驱赶方 (driver) ,以被一氧化氮 (nitricoxid ,NO)诱导的EC10 9作为实验方 (tester) ,应用抑制消减杂交 (suppressionsubtractivehybridization ,SSH)、反向mRNA斑点印迹和RNA印迹等技术手段研究了NO诱导的食管癌细胞中基因的过表达情况 .然后对过表达基因的表达序列标签 (expressedsequencetag ,EST)实施序列测定 ,并与GenBank进行BLAST同源性比较和序列突变分析 .结果先后两次从 6 9个SSH阳性克隆中共鉴定出 6个线粒体DNA (mitochondrialDNA ,mtDNA)编码的基因 ,即ND 4L、ND 4、COX 2、Lys tRNA、ATP 8和ATP 6 .表明NO可以诱导食管癌细胞mtDNA编码的基因过表达 .另外 ,在ND 4L/ND 4基因的片段 (10 736～ 114 4 9)上发现了三处同型单核苷酸置换 (10 872T→C ,110 0 1A→G ,11346A→G) ,在COX 2 /Lys tRNA/ATP 8/ATP 6基因片段 (80 11～ 85 89)上发现了一处单核苷酸缺失(8380A) .氨基酸序列分析表明 ,在NO诱导的EC10 9中可能存在着一种结构异常的ATP 8肽链 (一条在N端被截短的只有 11个氨基酸残基的肽链 ,而正常的ATP 8肽链为 6 8个氨基酸残基 ) .

关键词：一氧化氮诱导食管癌细胞线粒体DNA编码基因基因过表达抑制消减杂交

恙虫病东方体Karp株56kDa与47kDa外膜蛋白基因的嵌合和嵌合基因在大肠杆菌的表达

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中国人兽共患病学报 2004年第Z1期21卷 76-77页

作者：余跃飞温博海温博贵牛东升陈梅玲魏文进邱玲高宁军事医学科学院微生物流行病研究所北京100071汕头大学医学院变态反应学与炎症学研究所军事医学科学院微生物流行病研究所北京100071 汕头大学医学院变态反应学与炎症学研究所

目的将恙虫病东方体(Orientia tsutsugamushi,Ot)Karp株的56kDa和47kDa外膜蛋白基因嵌合,并使嵌合基因在大肠杆菌细胞内表达,产生双抗原融合蛋白.方法采用PCR方法,从Ot Karp株基因组DNA中扩增56kDa蛋白基因片段,将该片段分别与原核表达... 详细信息

目的将恙虫病东方体(Orientia tsutsugamushi,Ot)Karp株的56kDa和47kDa外膜蛋白基因嵌合,并使嵌合基因在大肠杆菌细胞内表达,产生双抗原融合蛋白.方法采用PCR方法,从Ot Karp株基因组DNA中扩增56kDa蛋白基因片段,将该片段分别与原核表达载体pQE30及47kD蛋白基因重组质粒 pQE30/47连接,构建pQE30/56及pQE30/56-47重组质粒;用IPTG诱导转入大肠杆菌内的重组质粒的目的基因表达.结果SDS-PAGE显示,pQE30/56转化的大肠杆菌产生一约45kDa的融合蛋白和pQE30/56-47转化大肠杆菌产生一约90kDa融合蛋白(56-47融合蛋白),免疫印迹分析显示两融合蛋白均与Ot Karp株感染鼠血清产生特异性反应,56-47融合蛋白分别与47kDa、56kDa重组蛋白免疫的小鼠血清产生特异性反应,以及56-47融合蛋白免疫血清与56kDa和47kDa重组蛋白反应.结论Ot Karp 株的56kDa与47kDa外膜蛋白基因嵌合后在大肠杆菌细胞内实现了表达,表达的融合蛋白具有56kDa和47kDa外膜蛋白的抗原特性.

关键词：恙虫病东方体外膜蛋白基因嵌合基因融合蛋白转化大肠杆菌重组质粒特异性反应重组蛋白蛋白免疫原核表达载体小鼠血清细胞内免疫印迹分析显示免疫血清抗原特性基因片段基因表达胞内表达

采用简并引物克隆葎草花粉过敏原全长同源cDNA

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细胞与分子免疫学杂志 2004年第1期20卷 99-103页

作者：陶爱林何韶衡张利达陈章权李东栋汕头大学医学院变态反应与炎症研究所广东汕头515031 上海交通大学复旦-交大-诺丁汉植物生物技术研究中心上海200030

目的 :建立一套稳定可靠的方法 ,对过敏原性物种中的过敏原同源基因进行快速克隆。方法 :在分析生物信息数据库中积累的大量过敏原序列同源性的基础上 ,设计简并引物 ,基于高质量草花粉RNA ,逆转录合成cDNA。采用Touch down方式在cDN... 详细信息

目的 :建立一套稳定可靠的方法 ,对过敏原性物种中的过敏原同源基因进行快速克隆。方法 :在分析生物信息数据库中积累的大量过敏原序列同源性的基础上 ,设计简并引物 ,基于高质量草花粉RNA ,逆转录合成cDNA。采用Touch down方式在cDNA池中进行选择性PCR扩增。同时借助梯度PCR程序 ,对引物扩增的简并性作进一步强化 ,并结合RACE技术获取全长cDNA ,进而对草花粉中的过敏原同源基因进行克隆。结果 :成功地获得 3个全长cDNA克隆。序列分析显示 ,这些基因与已知过敏原的基因序列相似性高达79%～ 85 % ,初步认定其为泛过敏原肌球蛋白抑制蛋白 (pro filin)的同源基因。对比RACE技术获得的相应基因的全长序列发现 ,这些序列在引物结合处与简并引物序列之间存在 4个碱基的差异 ,提示采用Touchdown方式的梯度PCR程序 ,可使引物的简并性得到进一步扩展。结论 :简并引物与Touch down梯度PCR相结合的方法。

关键词：简并引物梯度PCR 基因克隆过敏原同源基因

产时发热峰值及发热持续时间对母婴围产期不良结局的影响

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中华疾病控制杂志 2024年第8期28卷 903-908页

作者：张佩丽胡鹏郭静宜林华亮中山大学公共卫生学院流行病学系广州510080 汕头市中心医院妇产科汕头515031 广州市第一人民医院感染管理科广州510180

目的探讨母体产时发热体温峰值和发热持续时间对母婴围产期结局的影响。方法选取2020―2022年在汕头市中心医院妇产科分娩的足月单胎初产妇,以产时发热(母体体温≥37.5℃)为暴露因素,分别以发热峰值T_(max)(产时能记录到的最高体温)、... 详细信息

目的探讨母体产时发热体温峰值和发热持续时间对母婴围产期结局的影响。方法选取2020―2022年在汕头市中心医院妇产科分娩的足月单胎初产妇,以产时发热(母体体温≥37.5℃)为暴露因素,分别以发热峰值T_(max)(产时能记录到的最高体温)、发热持续时间t(从首次记录发热到首次记录正常体温或分娩为止的时间),发热复合变量v[v=Tmax−37℃/100×t]分组。比较新生儿围产期不良结局(包括新生儿窒息、新生儿感染、缺血缺氧性脑病、惊厥、颅内出血等)和孕产妇围产期不良结局(包括母体手术产、产后出血、手术切口感染、产褥期败血症)差异。采用多因素logistic回归分析模型分析母体产时发热峰值及发热持续时间与母婴围产期不良结局之间的关联。结果本研究共纳入2197例研究对象,其中307名(13.9%)产妇在分娩期间出现发热。与非发热组相比,发热组新生儿不良结局及母体手术产发生风险升高。在调整混杂因素后,发热峰值每增加1℃,新生儿不良结局发生风险增加1.204倍(OR=2.204,95%CI:1.691~2.423),母体手术产发生风险增加88.3%(OR=1.883,95%CI:1.581~2.242);发热持续时间每增加60 min,新生儿不良结局发生风险增加28.4%(OR=1.284,95%CI:1.178~1.400),母体手术产发生风险增加29.4%(OR=1.294,95%CI:1.183~1.414);发热复合变量每增加1个单位,新生儿不良结局发生风险增加55.4%(OR=1.554,95%CI:1.359~1.777),母体手术产发生风险增加49.4%(OR=1.494,95%CI:1.298~1.720)。结论随着发热峰值的升高,发热持续时间增加,发热复合变量增加,新生儿不良结局及母体手术产发生风险均增加。

关键词：产时发热发热峰值发热持续时间母体结局新生儿不良结局母体手术产