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新型冠状病毒肺炎流行期非湖北地区民众心理应激、抑郁、焦虑情绪和失眠的调查

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中华医学杂志 2020年第43期100卷 3419-3424页

作者：孙启蒙覃青松陈柏欣邵瑞帆张坚昇李韵汕头大学医学院睡眠医学中心汕头515041 汕头大学医学院人类病毒学与肿瘤学实验室汕头515041 汕头大学精神卫生中心睡眠医学科汕头515065

目的:调查新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疫情下非湖北地区民众的心理应激、焦虑、抑郁情绪和失眠状况。方法:2020年2月5—19日期间,通过问卷星网络平台对全国民众进行疫情前后心理及睡眠问卷调查,非湖北地区受试者纳入本研究。事件影响量... 详细信息

目的:调查新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疫情下非湖北地区民众的心理应激、焦虑、抑郁情绪和失眠状况。方法:2020年2月5—19日期间,通过问卷星网络平台对全国民众进行疫情前后心理及睡眠问卷调查,非湖北地区受试者纳入本研究。事件影响量表修订版、广泛性焦虑障碍量表-7、患者健康问卷抑郁量表-9及失眠严重程度指数量表,分别用于评估COVID-19事件相关的应激反应和疫情前后焦虑、抑郁情绪和失眠严重程度。结果:疫情发生后,在纳入的3134例受试者中,15.5%(487例)存在COVID-19相关的应激反应,24.9%(779例)存在焦虑症状,28.7%(899例)存在抑郁症状,30.9%(968例)存在失眠症状,检出比例均较疫情前增加(均P<0.01)。受试者对COVID-19疫情的应激反应是疫情后焦虑抑郁情绪及失眠加重的危险因素。结论:COVID-19疫情下,普通民众中出现疫情相关应激反应,焦虑、抑郁情绪和失眠发生率增加且严重程度加重,应激反应与情绪及失眠加重密切相关,需及时给予心理干预和睡眠卫生教育。

关键词：新型冠状病毒应激焦虑抑郁失眠

NUF2对泛癌的预后和免疫治疗效果的预测价值

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南方医科大学学报 2025年

作者：王耀彬陈柳燕罗伊凌申继清周素芳广西医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室//广西高校生物分子医学研究重点实验室

目的探讨NUF2表达水平与肿瘤预后的关系及在肿瘤微环境中的作用。方法综合利用人类蛋白质图谱（HPA）、癌症基因组图谱（TCGA）、基因型-组织表达计划（GTEx）、癌细胞系百科全书（CCLE）、TIMER的数据集，采用生物信息学方法挖掘NUF... 详细信息

目的探讨NUF2表达水平与肿瘤预后的关系及在肿瘤微环境中的作用。方法综合利用人类蛋白质图谱（HPA）、癌症基因组图谱（TCGA）、基因型-组织表达计划（GTEx）、癌细胞系百科全书（CCLE）、TIMER的数据集，采用生物信息学方法挖掘NUF2的潜在致癌作用，包括剖析NUF2在各种类型肿瘤组织中的表达水平、预后价值及免疫价值；采用RT-qPCR、Western blotting、免疫组化（IHC）等实验检测NUF2在肝癌细胞系和肝癌患者癌组织及血液中的表达情况。利用基因本体论（GO）、基因组百科全书（KEGG）和基因集富集分析（GSEA）探索NUF2及相关基因的分子机制并在肝癌中构建了NUF2的竞争性内源RNA（ceRNA）网络。结果与正常组织相比，NUF2表达在27种肿瘤中上调并与多种类型肿瘤的临床分期相关（P肿瘤中，NUF2的表达上调与肿瘤患者的不良预后（总体生存期、疾病特异性生存期、无病生存期和无进展生存期）相关（P肿瘤的肿瘤突变负荷、微卫星不稳定、浸润免疫细胞（B细胞、髓样树突状细胞、中性粒细胞、CD4+T细胞）、免疫细胞maker基因（CCR7、CD163、CD19、CD4、CD79A、CD8A、CD8B、IRF5、ITGAX和MS4A4A）以及免疫检查点基因（CTLA4、HAVCR2、LAG3、PDCD1和PDCD1LG2）呈正相关（P实验结果显示NUF2在肝癌细胞系、肝癌患者癌组织和血液中表达上调（P肿瘤中表达上调并与部分肿瘤的临床分期、不良预后有关。此外NUF2的表达与多种肿瘤的免疫细胞浸润密切相关，可能作为这些癌症免疫治疗效果的潜在预测因子。

关键词： NUF2 泛癌分析免疫浸润预后

反义封闭NGAL基因表达对SHEEC食管癌细胞微丝骨架的影响

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生物化学与生物物理进展 2004年第5期31卷 409-415页

作者：林珏龙许丽艳李恩民蔡唯佳牛永东方昆阳熊华淇沈忠英曾毅汕头大学医学院中心实验室汕头515031 汕头大学医学院肿瘤病理研究室汕头515031 汕头大学医学院生物化学与分子生物学教研室汕头515031 中国预防医学科学院病毒学研究所北京100052

为了研究反义封闭NGAL基因表达对SHEEC食管癌细胞微丝骨架以及肿瘤细胞生物学行为的影响 ,以不同长度NGAL基因片段反义表达载体和硫代修饰反义寡核苷酸单链片段转染SHEEC食管癌细胞 ,通过G4 18筛选 ,建立一系列旨在封闭SHEEC食管癌细胞N... 详细信息

为了研究反义封闭NGAL基因表达对SHEEC食管癌细胞微丝骨架以及肿瘤细胞生物学行为的影响 ,以不同长度NGAL基因片段反义表达载体和硫代修饰反义寡核苷酸单链片段转染SHEEC食管癌细胞 ,通过G4 18筛选 ,建立一系列旨在封闭SHEEC食管癌细胞NGAL基因表达的亚细胞克隆 .在细胞内F 肌动蛋白 (F actin)及DNA荧光双标记基础上 ,通过流式细胞术、激光共聚焦显微镜扫描术等技术手段检测封闭反义NGAL基因表达后 ,SHEEC食管癌细胞中F actin和DNA含量、F actin形态结构以及肿瘤细胞生物学行为的变化特征 .结果显示 ,反义封闭NGAL基因表达后 ,SHEEC食管癌细胞F actin的含量明显降低 ,与永生化食管上皮细胞SHEE相近 ,但细胞分裂增殖指数未见明显变化 .表明反义封闭NGAL基因表达对SHEEC食管癌细胞的微丝骨架有明显影响 ,而对SHEEC食管癌细胞的分裂增殖影响不明显 .激光共聚焦显微镜扫描观测显示 ,反义封闭NGAL基因表达可使SHEEC食管癌细胞F actin分布均匀 ,F actin小体减少 ,细胞间连接重新建立 ,结构较紧密 ,主要形态结构特征与SHEE细胞趋于一致 .提示反义封闭NGAL基因表达可对SHEEC食管癌细胞的微丝骨架F actin产生明显影响 ,推测癌细胞的微丝骨架F

关键词：微丝骨架 F-肌动蛋白 NGAL基因 SHEEC细胞细胞周期

人食管癌cDNA酵母杂交文库的构建与鉴定及其应用

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生物化学与生物物理进展 2003年第2期30卷 295-300页

作者：许丽艳李恩民牛永东蔡唯佳韩溟吴炳礼张灿沈忠英曾毅汕头大学医学院肿瘤病理研究室汕头515031 汕头大学医学院生物化学与分子生物学教研室汕头515031 中国预防医学科学院病毒学研究所北京100052

以往在研究由促癌物 12 o 十四烷酰佛波醇 13 乙酯 (12 o tetradecanoylphorbol 13 acetate,TPA)诱导的人永生化食管上皮细胞恶性变中基因的差异表达情况时 ,曾获得中性粒细胞明胶酶相关lipocalin (neutrophilgelatinase associatedli... 详细信息

以往在研究由促癌物 12 o 十四烷酰佛波醇 13 乙酯 (12 o tetradecanoylphorbol 13 acetate,TPA)诱导的人永生化食管上皮细胞恶性变中基因的差异表达情况时 ,曾获得中性粒细胞明胶酶相关lipocalin (neutrophilgelatinase associatedlipocalin ,NGAL)等新的食管癌癌变相关基因 .为深入研究这些癌变相关基因在食管癌中以蛋白质蛋白质或蛋白质 DNA相互作用为基础的功能网络调控关系 ,建立了一个食管癌cDNA酵母杂交文库 .采用Trizol试剂从一种新的人食管癌细胞 (SHEEC ,由人永生化食管上皮细胞转化而来 )中提取细胞总RNA ,采用OligotexmRNAKit从细胞总RNA中制备PolyA+ mRNA ,采用SuperScriptTM ChoiceSystemForcDNASynthesisKit合成cDNA ,以PolyA+ mRNA为探针 ,化学发光法监测cDNA合成的质量 ,以 pGADT7为载体构建了SHEEC细胞的cDNA酵母杂交文库 .文库的滴度为 1 19× 10 9cfu/ml,重组片段大小主要集中在 0 5～6 0kb ,重组率为 5 0 % .在此基础上 ,应用酵母单杂交技术手段对该文库中的NF κB元件结合因子进行了筛选 ,在SD/ his/ leu/[+15mmol/L 3 AT ]缺陷培养基平板上共获得了约 36 0个单克隆 .按照平板上酵母单克隆直径的大小 ,选择直径大于 2mm者 91个 ,提取质粒进行酶切鉴定和一对一酵母单杂交验?

关键词：人食管癌 cDNA文库构建鉴定应用酵母杂交

液液萃取-GFAAS法测定生物样品中的Cu(Ⅰ)

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光谱学与光谱分析 2020年第2期40卷 632-636页

作者：张源吴鹏李慧罗红军罗文鸿林哲绚汕头大学医学院生物分析实验室

建立液液萃取-石墨炉原子吸收法测定生物样品中Cu(Ⅰ)方法。200μL血清及细胞匀浆、细胞膜液等样本与200μL 30%三氯乙酸混匀后,离心去蛋白,取上清液400与1500μLpH为12.5的甘氨酸-NaOH-缓冲溶液混至pH约为9,加入含1000μL 0.05%2,2′-... 详细信息

建立液液萃取-石墨炉原子吸收法测定生物样品中Cu(Ⅰ)方法。200μL血清及细胞匀浆、细胞膜液等样本与200μL 30%三氯乙酸混匀后,离心去蛋白,取上清液400与1500μLpH为12.5的甘氨酸-NaOH-缓冲溶液混至pH约为9,加入含1000μL 0.05%2,2′-联喹啉的正戊醇溶液,旋涡振荡1 min,静置分层后取有机层500μL置于2 mL特氟隆消化管,于95℃烘箱烘6 h挥发有机溶剂,冷却至室温后分别加入200μL硝酸和双氧水,80℃水浴消化,室温加入600μL 1%硝酸后用石墨炉原子吸收法,测定的结果为Cu(Ⅰ)含量。另取100μL血清(200μL细胞匀浆、细胞膜液)置于2 mL特氟隆消化管,于80℃烘箱烘5 h至样品干燥,冷却至室温分别加入200μL硝酸和双氧水,80℃水浴消化后,室温用1%硝酸稀释成1000μL,用石墨炉原子吸收法测定总铜含量。方法检测限:0.04μg·L-1,相对偏差<5%。回收率:95%~102%。用此法检测了一些无机样品和生物样品。测定的结果表明,宫颈癌患者血清Cu(Ⅰ)比正常人要高,总铜含量差别不大。一些无机样品如自来水、农夫山泉水、尿液含Cu(Ⅱ)离子不含Cu(Ⅰ)离子,而生物样品如肝细胞及肝细胞膜含有Cu(Ⅰ)离子不含Cu(Ⅱ)离子。本法可以在混有Cu(Ⅱ)离子的情况下测定Cu(Ⅰ)离子,且10倍Cu(Ⅱ)离子浓度存在下测定痕量Cu(Ⅰ)离子无干扰。

关键词：亚铜石墨炉原子吸收法光谱甘氨酸 2,2′-联喹啉

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SHEEC食管癌细胞中NGAL基因的功能

生物化学与生物物理学报 2003年第3期35卷 247-254页

作者：李恩民许丽艳蔡唯佳熊华淇沈忠英曾毅汕头大学医学院生物化学与分子生物学教研室汕头大学医学院肿瘤病理研究室中国预防医学科学院病毒学研究所汕头515031 汕头515031 北京100052

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白 (neutrophilgelatinase associatedlipocalin ,NGAL)是脂质运载蛋白(lipocalin)家族的一个新成员 ,可能是人类的一种新的癌基因 ,但是在肿瘤中的功能不清楚。以往研究发现NGAL基因在SHEEC食管癌细胞... 详细信息

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白 (neutrophilgelatinase associatedlipocalin ,NGAL)是脂质运载蛋白(lipocalin)家族的一个新成员 ,可能是人类的一种新的癌基因 ,但是在肿瘤中的功能不清楚。以往研究发现NGAL基因在SHEEC食管癌细胞中显著过表达 ,表明该细胞是一种用来揭示NGAL基因在肿瘤中功能的良好模型。采用反义封闭技术 ,同时结合裸鼠成瘤实验等研究了反义封闭NGAL基因转录对SHEEC食管癌细胞的浸润和分裂增殖等行为的影响。结果发现 ,反义封闭NGAL基因转录不但可以有效地降低SHEEC细胞分泌的基质金属蛋白酶 9和基质金属蛋白酶 2的活性 ,而与此同时裸鼠成瘤细胞的浸润行为也相应地受到了明显抑制 ,然而SHEEC细胞端粒的长度、拓扑异构酶II的含量以及细胞增殖指数等未发生明显变化。表明NGAL基因在食管癌细胞SHEEC中的功能可能主要是通过明胶酶在促进肿瘤细胞的浸润中发挥作用 ,而可能与肿瘤细胞分裂增殖的相关性不明显

关键词： NGAL基因食管癌细胞肿瘤细胞浸润明胶酶裸鼠成瘤实验

浊点萃取-石墨炉原子吸收法测定水样中痕量钴的研究

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光谱学与光谱分析 2005年第4期25卷 576-578页

作者：张源罗文鸿李慧汕头大学医学院中心实验室广东汕头515041

在pH 5～7 5的柠檬酸磷酸氢二钠缓冲体系中,水样中的痕量钴与加入的络合剂1 (2 吡啶偶氮)2 荼酚形成稳定的配合物。通过水浴6 6℃加热2h ,钴配合物被萃取到TritonX -10 0表面活性剂相并与水相分开。分离后的表面活性剂相用0 .5 %硝酸... 详细信息

在pH 5～7 5的柠檬酸磷酸氢二钠缓冲体系中,水样中的痕量钴与加入的络合剂1 (2 吡啶偶氮)2 荼酚形成稳定的配合物。通过水浴6 6℃加热2h ,钴配合物被萃取到TritonX -10 0表面活性剂相并与水相分开。分离后的表面活性剂相用0 .5 %硝酸和0 .1%硝酸钯作基体改进剂,提高灰化温度,消除有机物的干扰,用氘(D)灯校正就可用石墨炉原子吸收法测定痕量钴。该方法萃取富集倍数可达10 0。样品检测下限(10σ)为0. 0 0 3μg·L-1。回收率为90 .5 %～10 6 %。用于矿泉水、河水、海水、饮用水中ng·L-1级的测定,结果令人满意。

关键词：石墨炉原子吸收法痕量钴测定浊点萃取水样表面活性剂 Triton 磷酸氢二钠 X-100 基体改进剂缓冲体系吡啶偶氮钴配合物灰化温度富集倍数检测下限柠檬酸络合剂硝酸钯有机物回收率矿泉水饮用水分开水相

石墨炉原子吸收光谱法测定血清中非蛋白结合铜和锌

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光谱学与光谱分析 2009年第10期29卷 2864-2866页

作者：张源林哲绚李伟秋张俏忻李慧罗红军罗文鸿汕头大学医学院中心实验室广东汕头515041

建立两步沉淀蛋白质-石墨炉原子吸收法测定血清中非蛋白结合铜和锌的方法。无水乙醇以2∶1与血清混合后,再经70℃温度变性处理,可将蛋白质完全沉降。用氘灯校正背景,石墨炉原子吸收法进行测定,方法检测限:Cu,1.2μg.L-1,Zn,0.098μg.L-... 详细信息

建立两步沉淀蛋白质-石墨炉原子吸收法测定血清中非蛋白结合铜和锌的方法。无水乙醇以2∶1与血清混合后,再经70℃温度变性处理,可将蛋白质完全沉降。用氘灯校正背景,石墨炉原子吸收法进行测定,方法检测限:Cu,1.2μg.L-1,Zn,0.098μg.L-1。回收率:Cu,92.3%～104%,Zn,为90%～107%。利用此方法测定了肿瘤患者血清中游离铜与锌,并与健康人作了对比。

关键词：铜锌 GFAAS 蛋白质沉淀

GFAAS测定乙醇-EDTA法分离血清中不同形态的铜和锌

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光谱学与光谱分析 2010年第3期30卷 816-819页

作者：张源林哲绚李慧彭琳罗红军李伟秋罗文鸿汕头大学医学院中心实验室广东汕头515041

血清中元素不同形态含量变化与人体营养和健康有着密切关系。文章利用两步沉淀蛋白质-石墨炉原子吸收法测定了血清中非蛋白结合的铜和锌。无水乙醇以2∶1与血清混合后,再经70℃温度变性处理,通过贝克曼离心机高速离心,可将蛋白质完全沉... 详细信息

血清中元素不同形态含量变化与人体营养和健康有着密切关系。文章利用两步沉淀蛋白质-石墨炉原子吸收法测定了血清中非蛋白结合的铜和锌。无水乙醇以2∶1与血清混合后,再经70℃温度变性处理,通过贝克曼离心机高速离心,可将蛋白质完全沉降。在血清中加入EDTA可将白蛋白结合的铜和锌脱落,转化为非蛋白结合铜和锌,从而可测得球蛋白和白蛋白分别结合的铜和锌含量。用氘灯校正背景,石墨炉原子吸收法进行测定,方法检测限：Cu,1.2μg.L-1 Zn,0.098μg.L-1。回收率：Cu,92.3%~104%,Zn,90%~107%。利用此方法测定了健康人及肿瘤患者血清和肝豆状核性患者中球蛋白、白蛋白及结合的铜与锌以及游离的铜和锌,并与健康人作了对比。

关键词：蛋白质铜锌 GFAAS