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NMDA受体参与电刺激坐骨神经诱导的大鼠海马CA1区长时程增强

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中国疼痛医学杂志 2015年第2期21卷 92-96页

作者：杨坦南阳医学高等专科学校生理教研室南阳473058

目的:观察NMDA受体拮抗剂MK801中枢应用对外周电刺激坐骨神经诱导海马CA1区LTP及NR2B表达的影响,探讨电刺激坐骨神经诱导的海马长时程增强的机制。方法:45只雄性SD大鼠随机分为单刺激组、强直刺激组、MK801组,单刺激坐骨神经在海马CA1... 详细信息

目的:观察NMDA受体拮抗剂MK801中枢应用对外周电刺激坐骨神经诱导海马CA1区LTP及NR2B表达的影响,探讨电刺激坐骨神经诱导的海马长时程增强的机制。方法:45只雄性SD大鼠随机分为单刺激组、强直刺激组、MK801组,单刺激坐骨神经在海马CA1区诱发场电位,30 min后,单刺激组和强直刺激组侧脑室各注射人工脑脊液(5μl),MK801组侧脑室注射MK801(500 ng/5μl),强直刺激组和MK801组给予强直刺激,然后持续给予单刺激2小时,单刺激组一直给予单刺激,观察各组场电位的幅度、潜伏期变化。记录结束后,Western blot的方法检测海马CA1区NR2B的表达。结果:电刺激坐骨神经诱发的海马CA1区LTP被NMDA受体非竞争性受体拮抗剂MK801所抑制。同单刺激组相比,强直刺激组海马NR2B表达升高,而MK801组同单刺激组相比无明显差异。结论:电刺激坐骨神经C类纤维诱导的海马CA1区LTP由NR2B介导。

关键词： MK801 海马CA1区长时程增强 NMDA受体痛觉调制

AMPA受体及其GluR2亚基在大鼠初级视皮层可塑性中的作用研究

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中国现代医学杂志 2013年第28期23卷 20-23页

作者：林玲刘国良漯河医学高等专科学校生理学教研室河南漯河462002 漯河医学高等专科学校预防医学教研室河南漯河462002

目的观察闪光刺激对大鼠初级视皮层诱发电位的影响,探讨AMPA受体及其GluR2亚基在大鼠初级视皮层可塑性中的作用。方法 24只成年SD大鼠随机分为3组:A组(空白对照组:不接受闪光刺激)、B组(光刺激组:接受紫光闪光刺激)、C组(阻断剂组:接受... 详细信息

目的观察闪光刺激对大鼠初级视皮层诱发电位的影响,探讨AMPA受体及其GluR2亚基在大鼠初级视皮层可塑性中的作用。方法 24只成年SD大鼠随机分为3组:A组(空白对照组:不接受闪光刺激)、B组(光刺激组:接受紫光闪光刺激)、C组(阻断剂组:接受紫光闪光刺激并注射AMPA受体阻断剂)。各组大鼠麻醉、固定后分别在初级视皮层(V1区)植入记录电极,在额叶植入参考电极,在V1区(与记录电极同侧)植入微细玻璃微电极做微量注射,B组和C组手术恢复后连续5 d每天于固定时间行紫光闪光刺激1 h,之后行微量注射生理盐水和AMPA受体阻断剂后,在相同闪光刺激条件下,给予一串高频刺激,记录高频刺激前后初级视皮层(V1区)的视觉诱发电位,分析两组视觉诱发电位的幅值和潜伏期的变化;western blot检测各组大鼠强直性闪光刺激前后初级视皮层GluR2蛋白含量的变化。结果 B组和C组在接受强直性闪光刺激后诱发电位幅值较之前明显升高,且潜伏期变短(均P<0.01),在强直性闪光刺激后,C组幅值显著高于B组、潜伏期显著短于B组(均P<0.01);在强直性闪光刺激之前,B组和C组的幅值和潜伏期均差异无显著性。western blot结果显示,B组大鼠GluR2含量在强直性闪光刺激前显著高于强直性闪光刺激后,但显著低于A组(均P<0.05),C组GluR2含量与B组在强直性闪光刺激前后均差异无显著性。结论强直性闪光刺激能使大鼠初级视皮层视觉诱发电位呈现LTP样反应,AMPA及其GluR2亚基参与了闪光刺激致大鼠初级视皮层的可塑性变化。

关键词：初级视皮层视觉诱发电位 AMPA受体 GluR2 LTP

闪光刺激对大鼠初级视皮层脑电波的影响及机制研究

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中国现代医学杂志 2011年第35期21卷 4383-4387页

作者：林玲刘国良漯河医学高等专科学校生理学教研室河南漯河462002 漯河医学高等专科学校预防医学教研室河南漯河462002

目的检测并验证闪光刺激对大鼠初级视皮层(V1区)脑电波的影响及可能机制。方法 10只成年SD大鼠在左侧(右)慢性植入电极,予术后第5、7、9天分别给予白、红、绿色闪光刺激并同时记录V1区皮层脑电波。利用免疫组织化学鉴定大鼠视网膜感光蛋... 详细信息

目的检测并验证闪光刺激对大鼠初级视皮层(V1区)脑电波的影响及可能机制。方法 10只成年SD大鼠在左侧(右)慢性植入电极,予术后第5、7、9天分别给予白、红、绿色闪光刺激并同时记录V1区皮层脑电波。利用免疫组织化学鉴定大鼠视网膜感光蛋白Rhod-opsin和S-opsin,以及大鼠V1区感光蛋白S-opsin。结果于术后第7、9天给予大鼠白、绿色闪光刺激,V1区脑电波的幅值和面积与刺激前相比有显著性增加(P0.01)。免疫组织化学鉴定显示大鼠视网膜感光蛋白Rhod-opsin和S-opsin均表达阳性,V1区感光蛋白S-opsin表达阳性。结论白、绿色闪光刺激能增强大鼠初级视皮层的电活动,并呈现出强直后增强现象。

关键词：闪光刺激初级视皮层脑电波强直后增强视蛋白

乙酰胆碱对离体大鼠缺血/复灌心脏的保护作用及其机制

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中国应用生理学杂志 2010年第1期26卷 23-27页

作者：孙国铨崔洁叶治国钱令波王会平夏强浙江医学高等专科学校生理教研室杭州310053 浙江大学医学院生理学系杭州310058

目的:探讨乙酰胆碱(ACh)预处理抗心肌缺血复灌(I/R)损伤作用及其与线粒体渗透性转换孔和/或线粒体ATP敏感性钾通道的关系。方法:采用离体大鼠心脏Langendorff灌流方法进行全心停灌30min,复灌120min复制I/R模型。测定心室力学指标和复灌... 详细信息

目的:探讨乙酰胆碱(ACh)预处理抗心肌缺血复灌(I/R)损伤作用及其与线粒体渗透性转换孔和/或线粒体ATP敏感性钾通道的关系。方法:采用离体大鼠心脏Langendorff灌流方法进行全心停灌30min,复灌120min复制I/R模型。测定心室力学指标和复灌各时间点冠脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)含量。实验结束测定心肌组织formazan含量的变化。结果:与单纯I/R组相比,ACh(0.1μmol/L,5min)预处理明显提高心肌细胞的formazan含量,降低复灌期间冠脉流出液中LDH含量,明显改善I/R所致的左室发展压、左心室内压最大上升和下降速率、心率与发展压乘积和左室舒张末压力的下降,缓解冠脉流量的减少。线粒体渗透性转换孔开放剂苍术苷(20μmol/L,复灌前给药20min)和线粒体ATP敏感性钾通道抑制剂5-羟基癸酸(100μmol/L,缺血前给药20min)能明显减弱ACh的保护作用。结论:在大鼠离体心脏灌流模型上,ACh预处理具有抗心脏缺血/复灌损伤的作用,这种保护作用可能与其抑制线粒体渗透性转换孔的开放和促进线粒体ATP敏感性钾通道的开放有关。

关键词：乙酰胆碱心脏缺血/复灌损伤线粒体渗透性转换孔线粒体ATP敏感性钾通道

AKT-mTOR信号通路在大鼠椎间盘软骨终板细胞自然退变中的意义

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中国老年学杂志 2016年第15期36卷 3651-3653页

作者：张丽勇白城医学高等专科学校生理教研室吉林白城137000

目的探讨AKT-雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路在大鼠椎间盘软骨终板细胞自然退变中的表达情况。方法取清洁级SD大鼠12只,分离并培养椎间盘软骨终板细胞,建立体外自然传代退变模型。随机分为空白对照组(自然传代第2代细胞),自然退变组(自... 详细信息

目的探讨AKT-雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路在大鼠椎间盘软骨终板细胞自然退变中的表达情况。方法取清洁级SD大鼠12只,分离并培养椎间盘软骨终板细胞,建立体外自然传代退变模型。随机分为空白对照组(自然传代第2代细胞),自然退变组(自然传代第5代细胞)、AKT-mTOR信号通路抑制组(含LY294002抑制剂培养基传代至第5代),AKT-mTOR信号通路激动组(含IGF-1激动剂培养基传代至第5代)。倒置显微镜下观察各组细胞形态;甲苯胺蓝染色检测细胞蛋白聚糖变化;RT-PCR检测细胞中Ⅱ型胶原、蛋白多糖、SOX9以及AKT-mTOR信号通路中关键基因mTOR的表达情况;Western印迹检测AKT、p-AKT蛋白表达情况。结果随着传代次数增加,大鼠软骨终板细胞的表现逐渐减少。自然退变组Ⅱ型胶原、蛋白多糖、SOX9、mTOR的表达水平均明显低于空白对照组(P0.05);抑制组p-AKT蛋白表达水平低于另外3组,而激动组p-AKT蛋白表达水平明显高于抑制组和自然退变组(P<0.05)。结论 AKT-mTOR信号通路在大鼠椎间盘软骨终板细胞自然退变中具有重要作用,添加AKT-mTOR信号通路抑制剂、激动剂能够加速、抑制细胞体外退变的发生。

关键词：椎间盘退行性改变软骨细胞 AKT/mTOR

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δ-阿片受体在缺血后处理心肌保护中的作用

中国应用生理学杂志 2008年第2期24卷 184-189页

作者：王珏高琴孙国铨周海鸥夏强浙江医学高等专科学校生理教研室浙江杭州310053 浙江大学医学院生理学系浙江杭州310058

目的:探讨δ-阿片受体是否参与缺血后处理对抗心肌缺血/复灌(I/R)损伤和心肌细胞低氧/复氧(H/R)损伤作用及其机制。方法:采用离体大鼠心脏Langendorff灌流模型,全心停灌30 min、复灌120 min复制I/R模型。测定心室力学指标和复灌时冠脉... 详细信息

目的:探讨δ-阿片受体是否参与缺血后处理对抗心肌缺血/复灌(I/R)损伤和心肌细胞低氧/复氧(H/R)损伤作用及其机制。方法:采用离体大鼠心脏Langendorff灌流模型,全心停灌30 min、复灌120 min复制I/R模型。测定心室力学指标和复灌时冠脉流出液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性,实验结束测定心肌组织formazan含量。酶解分离的心肌细胞采用低氧60min、复氧60min复制H/R模型,测定心肌细胞存活率。结果:在离体心脏模型上,与I/R组相比,缺血后处理组(停灌后复灌即刻立即给予6次全心停灌/复灌循环)心肌组织的formazan含量明显增高,复灌期间冠脉流出液中LDH明显降低,同时缺血后处理明显改善心室力学指标,缓解冠脉流量的减少;在分离心肌细胞模型上,低氧后处理明显提高心肌细胞存活率。δ-阿片受体阻断剂naltrindole(NTI)和线粒体钙激活钾通道(KCa)阻断剂paxilline(Pax)在离体大鼠心脏模型和分离心肌细胞模型上均能明显减弱缺血后处理的作用。在心肌细胞模型上,与H/R组相比,δ-阿片受体激动剂DADLE明显提高心肌细胞存活率,其作用可被paxilline所阻断。结论:缺血后处理具有抗心肌缺血/复灌损伤的作用,这种保护作用可能与其激活δ-阿片受体和开放KCa有关。

关键词：心脏缺血后处理阿片受体钙激活钾通道

延髓头端腹外侧区注入肾上腺素对血液流变学的影响

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生理学报 1997年第2期49卷 185-190页

作者：王石洪郭学勤上海医学高等专科学校生理学教研室上海200032 上海医科大学生理学教研室上海200032

实验用SD雄性大鼠78只，采用束缚方法引起应激性高血粘度和血压升高。结果：（1）清醒大鼠束缚2d可引起应激性高血粘度和血压升高。（2）双侧延髓头端腹外侧区（rVLM）微量注射肾上腺素（E，每侧0．5μg／0．5μl）可引起血粘度明显增... 详细信息

实验用SD雄性大鼠78只，采用束缚方法引起应激性高血粘度和血压升高。结果：（1）清醒大鼠束缚2d可引起应激性高血粘度和血压升高。（2）双侧延髓头端腹外侧区（rVLM）微量注射肾上腺素（E，每侧0．5μg／0．5μl）可引起血粘度明显增高，此作用可预先在双侧rVLM注入α肾上腺素能受体阻断剂酚妥拉明所阻断，不能被β-肾上腺能受体阻断剂心得安所阻断。用同样剂量E注入双侧延髓尾端腹外侧区（cVLM）或静脉内，无上述作用。（3）在双侧rVLM区内注入6-羟多巴胶（6－OHDA）可降低应激性高血粘度。（4）在双侧rVLM区内注入酚妥拉明可降低应激性高血粘度，而注入心得安无此作用。结果提示：rVLM内α一肾上腺素能受体激活可参与rVLM内注入E引起的血粘度升高或束缚诱发应激性高血粘度的产生。

关键词：肾上腺素延髓头端腹外侧区血液流变学

参苓白术散治疗大鼠脾虚湿困型溃疡性结肠炎的机制

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中国老年学杂志 2017年第3期37卷 547-549页

作者：周华张敏李华张晟张平姜文涛安徽医学高等专科学校生理教研室安徽合肥230601

目的探讨参苓白术散对脾虚湿困型溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠平滑肌细胞上钙池调控的钙离子通道(SOC)介导的Ca^(2+)内流变化的影响及可能机制。方法 64只Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、柳氮磺吡啶组、参苓白术散组,每组16只。首... 详细信息

目的探讨参苓白术散对脾虚湿困型溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠平滑肌细胞上钙池调控的钙离子通道(SOC)介导的Ca^(2+)内流变化的影响及可能机制。方法 64只Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、柳氮磺吡啶组、参苓白术散组,每组16只。首先复制脾虚湿困型UC大鼠模型;采用fura-2荧光测定各组细胞外Ca^(2+)内流的变化;用生物信号采集系统记录各组结肠平滑肌收缩张力的变化;用免疫组织化学的方法观察各组结肠平滑肌上瞬时受体电位阳离子通道(TRPC)1蛋白质表达情况。结果 1在无钙4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸(HEPES)缓冲液中,模型组〔Ca^(2+)〕i低于正常对照组(P<0.05)。在引入两种不同的含钙HEPES缓冲液后,模型组低于正常对照组(P<0.05),而柳氮磺吡啶组与参苓白术散组均高于模型组(P<0.05)。2模型组结肠平滑肌张力低于正常对照组(P<0.05),而柳氮磺吡啶组与参苓白术散组张力高于模型组(P<0.05)。3各组结肠平滑肌上均有TRPC1细胞表达,其中模型组结肠组织TRPC1表达的平均光密度低于正常对照组(P<0.05),而柳氮磺嘧啶组和参苓白术散组高于模型组(P<0.05)。结论参苓白术散通过促进SOC介导的Ca^(2+)内流治疗脾虚湿困型UC,其分子实质是上调TRPC1的表达。

关键词：参苓白术散钙通道脾虚湿困溃疡性结肠炎

二至丸对D-半乳糖所致衰老小鼠皮肤组织的抗氧化作用

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中国临床康复 2006年第19期10卷 141-143页

作者：丁玉琴马凤巧尚喜雨南阳医学高等专科学校生理教研室河南省南阳市473058 南阳医学高等专科学校生物校验室河南省南阳市473058

目的:观察具有养肝益肾,凉血止血功效的二至丸对D-半乳糖所致衰老小鼠皮肤的抗氧化作用。方法:实验于2004-04/2005-05在南阳医学高等专科学校综合实验中心完成。采用昆明种小白鼠50只,随机分为空白对照组、衰老模型组、二至丸组20,10,6g... 详细信息

目的:观察具有养肝益肾,凉血止血功效的二至丸对D-半乳糖所致衰老小鼠皮肤的抗氧化作用。方法:实验于2004-04/2005-05在南阳医学高等专科学校综合实验中心完成。采用昆明种小白鼠50只,随机分为空白对照组、衰老模型组、二至丸组20,10,6g/(kg·d)剂量组共5组,每组10只。二至丸由旱莲草、女贞子按一定比例组方,购于河南省南阳市医药公司,煎制、过滤、浓缩1kg/L的水煎剂穴以生药计雪。空白对照组每天颈背部注射生理盐水0.3mL,其余4组均给予50g/LD-半乳糖0.3mL颈背部皮下注射,连续给药42d建立亚急性衰老模型,同时二至丸组用二至丸煎剂灌胃治疗;其他组给予生理盐水(0.5mL/d)灌胃对照。6周后测定小鼠背部皮肤组织匀浆中氧化性指标丙二醛含量、抗氧化酶指标:超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化酶活性;羟脯氨酸含量及皮肤组织学切片检查。采用双盲评估。结果:实验小鼠50只均完成实验,全部进入结果分析。①衰老模型造模成功的一般状态和组织抗氧化指标的变化:从外观上看衰老模型组小鼠皮毛松散、无光泽;行动迟缓。衰老模型组皮肤组织中丙二醛与空白对照组比明显增高(P<0.01),超氧化物歧化酶活性、谷胱甘肽过氧化酶活性、羟脯氨酸含量均明显降低(P<0.01),提示本次造模成功。②二至丸对小鼠皮肤组织抗氧化指标的影响:二至丸20,10g/(kg·d)剂量组与衰老模型组比较,超氧化物歧化酶活性、谷胱甘肽过氧化物酶活性、羟脯氨酸含量显著升高(t=36.89～3.31,P<0.01),皮肤组织中丙二醛明显降低(t=37.49,33.93,P<0.01);二至丸6g/(kg·d)剂量组与衰老模型组比较,仅丙二醛水平降低,存在差别(t=3.04,P<0.01)。③衰老造模小鼠皮肤组织切片结果:衰老模型组镜下见,皮肤变薄,表皮角化上皮角缩短,真皮层成纤维细胞数目减少,汗腺、皮脂腺、毛囊萎缩、数目减少。二至丸20,10g/(kg·d)剂量组镜下见皮肤变厚,表皮角化上皮角延长,真皮成纤维细胞数目增多,汗腺、皮脂腺、毛囊数目增多;6g/(kg·d)组与衰老模型组镜下所见无明显不同。结论:二至丸有提高抗氧化酶活性,增强皮肤组织抗氧化的作用,减少皮肤中的脂质过氧化物,使表皮角化上皮角延长,真皮成纤维细胞数目增多对皮肤组织衰老有延缓作用,但剂量太小效果不明显。

关键词：二至丸复合混合物中草药医学,中国传统皮肤衰老过氧化物