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亚低温后脑损伤组织提取液对体外脐带间充质干细胞的影响

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中华创伤杂志 2016年第1期32卷 80-84页

作者：陈以胜赵明亮梁海乾陈翀涂悦张赛孙洪涛武警部队脑创伤与神经疾病研究所武警后勤学院附属医院脑科医院天津市神经创伤修复重点实验室天津300162

目的模拟创伤性脑损伤（TBI）脑组织经亚低温治疗后的化学微环境，探讨该环境对体外脐带间充质干细胞（UCMSCs）的影响。方法选取18只SD大鼠按随机数字表法分为3组：假手术组大鼠仅开骨窗，不行冲击损伤；TBI组大鼠仅行冲击损伤；亚低... 详细信息

目的模拟创伤性脑损伤（TBI）脑组织经亚低温治疗后的化学微环境，探讨该环境对体外脐带间充质干细胞（UCMSCs）的影响。方法选取18只SD大鼠按随机数字表法分为3组：假手术组大鼠仅开骨窗，不行冲击损伤；TBI组大鼠仅行冲击损伤；亚低温组大鼠经TBI后行亚低温治疗，各组6只。采用电子脑皮质挫伤撞击仪制作大鼠TBI模型。给予全身亚低温（33％）治疗4h后，获取大鼠模型损伤区域脑组织的匀浆液。模拟脑组织弹性模量制备聚丙烯酰胺水凝胶。分离培养人UCMSCs，将其置于上述水凝胶上进行培养，分别加入各组大鼠的脑组织匀浆液，24h后检测各组细胞的凋亡水平，并更换为UCMSCs的正常培养基。动态观察细胞的生长情况和形态变化，于7d后对其行免疫荧光检测其向神经元分化水平。结果假手术组、TBI组、亚低温组的细胞凋亡率分别为10．42％、73．47％和28．57％，与假手术组比较，TBI组的凋亡细胞明显增多（P〈0．01），而亚低温组可显著逆转TBI组诱导的凋亡细胞增多（P〈0．01）；细胞免疫荧光结果显示，假手术组、TBI组、亚低温组细胞的神经元总体分化率分别为16．48％、2．59％和11．83％，与TBI组比较，亚低温组UCMSCs的神经元分化率明显增高（P〈0．05）。结论TBI后的化学微环境可导致UCMSCs大量凋亡，且向神经元分化的能力大大降低；而亚低温治疗可减少TBI所致UCMSCs的凋亡，并使其分化能力得到一定恢复。

关键词：亚低温脑损伤化学微环境间充质干细胞组织提取物

重视创伤性脑损伤后意识障碍患者的早期电生理评估

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中华创伤杂志 2016年第6期32卷 485-488页

作者：张赛董月青武警后勤学院附属医院脑科医院、武警部队脑创伤与神经疾病研究所、天津市神经创伤修复重点实验室天津300162

创伤性脑损伤（traumaticbraininjury，TBI）后意识状态的评估主要集中在患者的慢性康复期，而忽略了早期阶段意识障碍的研究或仅用临床检查及其一些简单的量表进行评估，这就导致了住院早期意识障碍评估和康复阶段评估之间的脱节，使... 详细信息

创伤性脑损伤（traumaticbraininjury，TBI）后意识状态的评估主要集中在患者的慢性康复期，而忽略了早期阶段意识障碍的研究或仅用临床检查及其一些简单的量表进行评估，这就导致了住院早期意识障碍评估和康复阶段评估之间的脱节，使得一些意识障碍患者被误诊。因此，很有必要优化对意识障碍患者的评估方案。虽然临床检查仍然被认为是对意识障碍进行诊断性评估的“金标准”，但是神经电生理的检查。

关键词：意识障碍患者创伤性脑损伤生理评估住院早期脑损伤后临床检查 “金标准” 神经电生理

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重型颅脑创伤的救治经验与思考

中华神经外科杂志 2015年第2期31卷 112-114页

作者：张赛陈旭义武警后勤学院附属医院中国武警脑科医院武警部队脑创伤与神经疾病研究所天津市神经创伤修复重点实验室天津300162

重型颅脑创伤（severe traumatic brain injury,sTBI）为发达及发展中国家青年人致死及致残的首要原因[1].虽然经过几代神经外科医生、基础研究等相关人员的不懈努力,其救治水平已大幅提升,但在我国由于存在地域、交通、理念及专业水平... 详细信息

重型颅脑创伤（severe traumatic brain injury,sTBI）为发达及发展中国家青年人致死及致残的首要原因[1].虽然经过几代神经外科医生、基础研究等相关人员的不懈努力,其救治水平已大幅提升,但在我国由于存在地域、交通、理念及专业水平等的限制,

关键词：重型颅脑创伤救治经验救治水平 brain 发展中国家外科医生青年人

应用细胞应力加载系统建立HT-22细胞损伤模型的实验研究

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中华神经外科杂志 2017年第4期33卷 398-402页

作者：于泽奇衣泰龙涂悦杨小飒徐忠伟张赛程世翔武警后勤学院附属医院脑科医院武警部队脑创伤与神经疾病研究所天津市神经创伤修复重点实验室天津300162 武警后勤学院中心实验室

目的应用细胞应力加载系统建立HT-22细胞损伤模型。方法采用Bioflex细胞培养板接种HT-22细胞，应用FX-5000TFL细胞应力加载系统进行牵张损伤（形变率为13．4％、频率为5．0Hz）。并按照时间的长短分为对照组和6、12、24h组。应用数字全... 详细信息

目的应用细胞应力加载系统建立HT-22细胞损伤模型。方法采用Bioflex细胞培养板接种HT-22细胞，应用FX-5000TFL细胞应力加载系统进行牵张损伤（形变率为13．4％、频率为5．0Hz）。并按照时间的长短分为对照组和6、12、24h组。应用数字全息显微镜（DHM）动态检测细胞平均面积和平均厚度值，采用锥虫蓝染色法和乳酸脱氢酶（LDH）试剂盒检测细胞存活率和LDH的释放情况，并通过流式细胞术检测细胞周期和Sub-G1期峰的变化。结果（1）DHM检测结果显示：与对照组比较，损伤6h后HT-22细胞面积由（603．9±28．5）μm2降至（182．9±4．5）μm2（t=21．93，P〈0．01），细胞厚度由（4．0±0．2）μm升至（8．3±0．3）μm（t=16．65，P〈0．01）。（2）细胞存活率结果显示：对照组细胞存活率为（95．0±1．6）％，而损伤后6h[（59．7±4．5）％]较对照组显著下降（t=10．44，P〈0．01）。损伤后12h和24h的细胞存活率[分别为（77．0±2．9）％、（85．0±3．3）％]虽较6h组上升（分别为t=4．56，P〈0．05；t=6．45，P〈0．01），但仍低于对照组（分别为t=7．56，P〈0．01；t=3．873，P〈0．05）。（3）LDH检测结果显示：细胞应力加载损伤后6h，LDH的释放水平[（273．9±4．6）ng／L]显著高于对照组[（51．7±5．8）ng／L，t=42．48，P〈0．01]，而12h组和24h组LDH的释放水平[分别为（255．2±4．4）ng／L、（240．2±6．0）ng／L]均低于6h组（分别为t=4．14，P〈0．05；t=6．28，P〈0．01）。（4）流式细胞术检测结果显示：与对照组[（0．6±0．3）％]相比，损伤6h组Sub—G1凋亡峰比例[（6．5±0．6）％]显著上升（t=14．90，P〈0．01），而细胞死亡比例随时间的延长而减少，尤以损伤24h后[（2．1±0．5）％]的峰值较6h组降低最为显著（t=9．61，P〈0．01）。结论应用细胞应力加载系统成功建立HT-22体外细胞损伤模型，该模型重复性好，操作简便，为进一步研究颅脑创伤的病理生理机制提供了一种精确、有效、可控的模型制作方法。

关键词：颅脑损伤模型动物应力加载系统 HT-22细胞细胞损伤模型

血必净注射液对重症肺炎患者血浆IL-6和TNF-α水平的影响

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中草药 2017年第6期48卷 1188-1191页

作者：刁云锋张士俊赵万勇孙洪涛张赛孙亮武警后勤学院附属医院脑科医院武警部队脑创伤与神经疾病研究所天津市神经创伤修复重点实验室天津300162 天津北辰医院神经外科天津300400 武警后勤学院附属医院呼吸与重症医学科天津300162

目的探讨血必净注射液对重症肺炎患者血浆中白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响。方法将100例重症肺炎患者按随机数字表法分为对照组(50例)和治疗组(50例)。两组均给予常规西医治疗,治疗组在常规西医治疗的基础上加用... 详细信息

目的探讨血必净注射液对重症肺炎患者血浆中白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响。方法将100例重症肺炎患者按随机数字表法分为对照组(50例)和治疗组(50例)。两组均给予常规西医治疗,治疗组在常规西医治疗的基础上加用血必净注射液治疗,连续用药7 d。取10名身体健康的人员作为正常对照组。比较对照组和治疗组患者治疗前后体温、白细胞计数(WBC)、C反应蛋白(CRP)、动脉血氧分压[pa(O_2)]和动脉血气分析氧合指数[pa(O_2)/Fi(O_2)]的变化。采用ELISA法测定并比较各组患者各时间点血浆中IL-6和TNF-α的水平。结果治疗7 d后,治疗组和对照组患者的体温、WBC、CRP、pa(O_2)和pa(O_2)/Fi(O_2)均较治疗前有明显改善,差异显著(P<0.01)。治疗组患者治疗后各项指标均较对照组治疗后有明显改善,差异显著(P<0.05、0.01);对照组和治疗组患者治疗前后血浆中IL-6和TNF-α均明显高于正常对照组。治疗前,对照组和治疗组患者血浆中IL-6、TNF-α的水平相比较,差异无统计学意义;两组患者治疗后3、7 d的IL-6和TNF-α水平均较治疗前降低,治疗组IL-6和TNF-α水平的下降程度较对照组同期更明显,差异显著(P<0.05、0.01)。结论血必净注射液可以降低重症肺炎患者血浆中IL-6和TNF-α水平,对重症肺炎患者有一定辅助治疗作用。

关键词：血必净注射液重症肺炎白细胞介素-6 肿瘤坏死因子-α 中西医结合疗法

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3D打印技术制备大鼠脊髓仿生支架的研究

中国修复重建外科杂志 2015年第3期29卷 364-367页

作者：陈以胜王景景陈旭义陈翀涂悦张赛李晓红武警部队脑创伤与神经疾病研究所武警后勤学院附属医院脑科医院脑研所天津300162

目的探讨3D打印技术制备大鼠脊髓仿生支架方法,为用生物材料制备脊髓支架并进行脊髓损伤修复研究奠定基础。方法取3只雌性SD大鼠,采用7.0T动物专用核磁共振仪进行扫描,获得T8~10节段脊髓截面位置和形状图像,结合脊髓各神经传导束的位置... 详细信息

目的探讨3D打印技术制备大鼠脊髓仿生支架方法,为用生物材料制备脊髓支架并进行脊髓损伤修复研究奠定基础。方法取3只雌性SD大鼠,采用7.0T动物专用核磁共振仪进行扫描,获得T8~10节段脊髓截面位置和形状图像,结合脊髓各神经传导束的位置和形状资料,应用Getdata数据获取软件获取相关数据。应用Solid Works三维制图软件进行支架三维模型设计,并将数据转换为立体平版印刷（stereolithography,STL）格式;最后以光敏树脂为材料,通过3D打印机制作脊髓仿生支架。结果 MRI扫描显示,T8~10节段脊髓截面呈纵轴较长、横轴相对较短的椭圆形,横径为（2.05±0.24）mm,纵径为（2.20±0.52）mm;其神经传导束在STL格式的三维模型中清晰显示,应用3D打印机制备了目标节段脊髓的仿生支架。该脊髓支架形态、截面与大鼠正常脊髓相似,其中各神经传导束孔隙位置模拟了大鼠脊髓正常神经传导束走行。结论 3D打印技术制备的大鼠脊髓支架与正常脊髓外形和尺寸接近,内部神经传导束通道也更仿生,且制作程序简便,有望用于脊髓损伤修复研究。

关键词： 3D打印脊髓损伤仿生支架 Solid Works三维制图软件大鼠

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努力推进我国重型颅脑创伤的规范化救治

中华神经外科杂志 2018年第2期34卷 109-112页

作者：张赛武警后勤学院附属医院神经外科武警部队脑创伤与神经疾病研究所天津市神经创伤修复重点实验室天津300162

在全球，降低重型颅脑创伤（severe traumatic braininjury，sTBI）的高致残率和高致死率一直是医学界努力攻克的方向。我国幅员辽阔，地域、经济、文化及理念的不同导致sTBI的临床救治差异很大，特别是对部分区县级以下的创伤中心，sTB... 详细信息

在全球，降低重型颅脑创伤（severe traumatic braininjury，sTBI）的高致残率和高致死率一直是医学界努力攻克的方向。我国幅员辽阔，地域、经济、文化及理念的不同导致sTBI的临床救治差异很大，特别是对部分区县级以下的创伤中心，sTBI的救治仍有很大的提升空间。

关键词：重型颅脑创伤临床救治创伤中心医学界致死率致残率

胶原/壳聚糖复合支架植入大鼠不同部位降解速率的变化

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中国组织工程研究 2017年第6期21卷 864-870页

作者：符锋秦喆李晓红陈翀王丽娜徐超涂悦张赛脑创伤与神经疾病研究所、式警后勤学院附属医院脑科中心、天津市神经创伤修复重点实验室天津市300162 武警后勤学院中心实验室天津市300162

背景:生物支架应随着新生组织的形成而逐渐降解,支架降解率是评价材料的一项重要指标。传统测试方法因存在一定限制而会影响对材料在不同部位降解率的评估。目的:评估胶原壳聚糖复合支架植入SD大鼠皮下、脊髓和脑组织的降解率,并初步探... 详细信息

背景:生物支架应随着新生组织的形成而逐渐降解,支架降解率是评价材料的一项重要指标。传统测试方法因存在一定限制而会影响对材料在不同部位降解率的评估。目的:评估胶原壳聚糖复合支架植入SD大鼠皮下、脊髓和脑组织的降解率,并初步探讨其机制。方法:制备3 mm×3 mm圆盘状胶原壳聚糖复合支架,通过扫描电子显微镜观测支架微观结构,对其主要的物理学特性进行测试;CCK-8法检测神经干细胞与支架共培养时的活力以评估支架生物相容性。将SD大鼠随机分为大脑组、脊髓组及皮下组,分别于脑皮质、脊髓T9处、背部T9皮下处植入胶原壳聚糖复合支架。于不同时间点灌注取材,每组3只大鼠取出支架称质量,评估支架体内降解率;组内其他大鼠用于制备组织切片,观察移植区支架与周围组织的组织学变化。结果与结论:1扫描电镜发现,胶原壳聚糖复合支架具有立体多孔结构,孔径大小能达到体内移植的生物学要求;2体内实验结果表明,植入胶原壳聚糖复合支架后未发生排斥反应,证明复合材料具有良好的生物相容性。皮下组降解速率最快,12 d即可降解完全,明显高于脊髓组和大脑组(P脑组(P脑组仍有部分残余;3皮下组的支架周围血管数量和巨噬细胞浸润定性评分大于同一时间点的其他2组(P脑组(P<0.05);4结果说明,胶原/壳聚糖支架具有良好的生物相容性,在3个组织内的降解速率存在明显差异。组织工程学领域中平衡生物支架的降解率与人体重建速度时,应考虑靶向组织复杂的微环境和支架移植后的宿主反应的具体机制。

关键词：组织工程生物相容性材料脊髓生物材料材料相容性可降解吸收材料胶原壳聚糖不同部位大脑皮下降解率大鼠国家自然科学基金

控制性脑皮质撞击致不同损伤程度颅脑创伤大鼠模型的建立

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中华行为医学与脑科学杂志 2014年第10期23卷 865-868页

作者：程世翔张海博陈旭义涂悦张赛武警部队脑创伤与神经疾病研究所武警后勤学院附属医院脑科医院天津市神经创伤修复重点实验室天津300162

目的应用控制性脑皮质撞击仪（CCI）建立不同损伤程度的颅脑创伤（TBI）大鼠模型,为探索TBI病理生理进程提供实验依据.方法 40只雄性Wistar大鼠按数字表随机分为4组（3组实验组、1组假手术组）,每组10只.应用电子控制性皮质撞击仪（eCC... 详细信息

目的应用控制性脑皮质撞击仪（CCI）建立不同损伤程度的颅脑创伤（TBI）大鼠模型,为探索TBI病理生理进程提供实验依据.方法 40只雄性Wistar大鼠按数字表随机分为4组（3组实验组、1组假手术组）,每组10只.应用电子控制性皮质撞击仪（eCCI-6.3）,设定不同打击参数,对大鼠顶叶大脑皮质区进行精确撞击.其中,实验组打击速率分别为4 m/s、5m/s、6m/s,打击时间均为200 ms,打击深度均为2 mm.假手术组仅开骨窗不行撞击.致伤24 h后采用神经功能缺陷评分（NSS）观察大鼠行为学改变,应用多普勒流量计测定大鼠脑损伤周围区域局部脑血流（rCBF）.致伤48 h后处死大鼠,取脑组织行甲苯胺蓝染色观察脑组织缺损程度,HE染色评估脑组织病理学改变,透射电镜观察神经细胞超微结构.结果大鼠脑损伤程度与打击强度相关,打击速率4m/s模拟轻度TBI、5m/s模拟中度TBI、6m/s模拟重度TBI.与假手术组比较,TBI各组大鼠神经功能受损,局部脑血流量降低（均P＜0.01）,脑组织神经元皱缩、细胞周围空泡、线粒体结构异常,而且损伤程度随打击速率增强而递增,组间差异有统计学意义（P＜0.05）.结论应用eCCI脑皮质撞击仪成功建立TBI大鼠模型,通过调整打击速率给予轻度、中度和重度TBI分级,为进一步研究TBI病理生理机制提供了一种精确有效的TBI动物模型制作方法.

关键词：颅脑创伤控制性脑皮质撞击动物模型大鼠