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BALB/c小鼠免疫重组蓖麻毒素B链蛋白的免疫机制研究

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中国免疫学杂志 2016年第12期32卷 1758-1760页

作者：王俊虹吴绘魏茂提武警后勤学院天津300309 天津市职业与环境危害防制重点实验室天津300309

目的：探讨重组蓖麻毒素B链蛋白（rRTB）免疫雌性BALB/c小鼠的免疫机制。方法：雌性BALB/c小鼠分为rRTB组和PBS组,间隔14 d皮下多点注射,共4次。间接ELISA分析小鼠血清抗体效价和抗体分型,采用流式细胞仪检测脾细胞因子IFN-γ和IL-4。... 详细信息

目的：探讨重组蓖麻毒素B链蛋白（rRTB）免疫雌性BALB/c小鼠的免疫机制。方法：雌性BALB/c小鼠分为rRTB组和PBS组,间隔14 d皮下多点注射,共4次。间接ELISA分析小鼠血清抗体效价和抗体分型,采用流式细胞仪检测脾细胞因子IFN-γ和IL-4。结果：血清IgG效价达到1∶10-7以上,且攻毒后产生二次免疫应答,与PBS对照组差别有统计学意义（P〈0.05）;IgG1达到1∶10-5以上,与PBS对照组差别有统计学意义（P〈0.05）;Ig G2a未发生明显变化。细胞因子检测结果表明IFN-γ的表达量与PBS组差异无统计学意义,而IL-4的表达量显著提高（P〈0.05）。结论：rRTB蛋白免疫可刺激小鼠产生高水平的特异性抗体和细胞因子,诱导以IgG1为主的抗体和Th2优势应答,为候选疫苗的研制奠定基础。

关键词：蓖麻毒素 B链蛋白免疫应答生物恐怖

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主动免疫:预防蓖麻毒素、相思子毒素中毒

中国免疫学杂志 2016年第10期32卷 1547-1550页

作者：王俊虹徐忠伟魏茂提天津市职业与环境危害防制重点实验室天津300309 武警后勤学院天津300309

蓖麻毒素（Ricin toxin,RT）和相思子毒素（Abrin toxin,AT）都属于大分子植物来源的蛋白毒素,属于Ⅱ型核糖体失活蛋白（Ribosome-inactivating proteins,RIP）,能够抑制细胞蛋白合成而具有极强的细胞毒性。由于来源广、毒性强等特点,... 详细信息

蓖麻毒素（Ricin toxin,RT）和相思子毒素（Abrin toxin,AT）都属于大分子植物来源的蛋白毒素,属于Ⅱ型核糖体失活蛋白（Ribosome-inactivating proteins,RIP）,能够抑制细胞蛋白合成而具有极强的细胞毒性。由于来源广、毒性强等特点,二者均被认为是重要的致死性生物毒素战剂,美国疾病控制中心（CDC）定义为B级生物威胁。因此,开展对RT和AT的生防疫苗的研究,对提高军队和国家应对生物战和生物恐怖的能力和水平,

关键词：相思子毒素中毒蓖麻毒素主动免疫美国疾病控制中心核糖体失活蛋白预防生物恐怖细胞毒性

α,β-不饱和羰基化合物的不对称Diels-Alder反应研究进展

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有机化学 2016年第7期36卷 1501-1512页

作者：刘文香吴宇强李灵芝李霞天津医科大学药学院天津300070 武警后勤学院药物化学教研室天津300309 天津市职业与环境危害防制重点实验室天津300309

Diels-Alder反应是典型的[4+2]环合反应,自被发现以来备受化学家们的重视.不对称Diels-Alder反应是合成手性中间体的有效手段,在手性药物和天然产物全合成中得到广泛应用.α,β-不饱和羰基化合物是有机合成反应的关键中间体,根据其结构... 详细信息

Diels-Alder反应是典型的[4+2]环合反应,自被发现以来备受化学家们的重视.不对称Diels-Alder反应是合成手性中间体的有效手段,在手性药物和天然产物全合成中得到广泛应用.α,β-不饱和羰基化合物是有机合成反应的关键中间体,根据其结构特点和催化体系类型,分类阐述了α,β-不饱和羰基化合物为亲双烯体的不对称正电子需求Diels-Alder反应的研究进展.

关键词：不对称Diels—Alder反应天然产物有机合成反应 α,β-不饱和羰基化合物

大黄酸-雌酮对去卵巢大鼠子宫及骨组织ERα和ERβmRNA表达的影响

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中国骨质疏松杂志 2013年第12期19卷 1241-1245页

作者：李灵芝金鑫唐存贵张永亮武警后勤学院天津300162 天津市职业与环境危害防制重点实验室天津300162

目的研究骨靶向雌激素大黄酸-雌酮(LC)对去卵巢大鼠骨组织中的ERα和ERβmRNA表达的影响。方法 72只6月龄雌性未孕Wistar大鼠,分为6组:假手术组(Sham)、去卵巢模型组(OVX)、雌酚酮组(E,OVX+雌酚酮1.0 mg/kg·d)、大黄酸-雌酮高(H-LC,OVX... 详细信息

目的研究骨靶向雌激素大黄酸-雌酮(LC)对去卵巢大鼠骨组织中的ERα和ERβmRNA表达的影响。方法 72只6月龄雌性未孕Wistar大鼠,分为6组:假手术组(Sham)、去卵巢模型组(OVX)、雌酚酮组(E,OVX+雌酚酮1.0 mg/kg·d)、大黄酸-雌酮高(H-LC,OVX+LC 1.0 mg/kg·d)、中(M-LC,OVX+LC 0.5 mg/kg·d)、低(L-LC,OVX+LC 0.25 mg/kg·d)剂量组,除假手术组外其余各组均行双侧卵巢切除。给药24周后,采用放射免疫方法测定血中雌二醇水平,采用RT-PCR法测定子宫及骨组织ERα和ERβmRNA水平。结果与Sham组比较,OVX组雌二醇水平明显降低,与OVX组比较,E组和H-LC、M-LC组大鼠血清雌二醇明显升高,L-LC组与OVX组无明显差别。Sham组胫骨近端ERαmRNA和ERβmRNA均有表达,OVX组ERβmRNA表达水平与Sham组相比降低,未检出ERαmRNA。E组ERαmRNA和ERβmRNA水平均与Sham组无差异,大黄酸-雌酮各组均未检出ERαmRNA,ERβmRNA相对表达量高于OVX组,大黄酸-雌酮各剂量组之间ERβmRNA无明显差异。Sham组大鼠子宫组织有ERαmRNA和ERβmRNA表达,OVX组ERαmRNA表达量明显降低,未检出ERβmRNA。E组大鼠子宫组织ERαmRNA和ERβmRNA均较OVX组上调。大黄酸-雌酮各剂量组之间ERαmRNA无明显差异,但均低于E和Sham组。结论大黄酸-雌酮在骨及子宫均能选择性上调ERβmRNA表达,而对ERαmRNA无影响,雌酚酮对两种亚型无选择性,这可能是大黄酸-雌酮对骨具有保护作用而对子宫并无雌激素样刺激作用的原因之一。

关键词：大黄酸雌激素去卵巢骨质疏松雌激素受体α 雌激素受体β

蕨麻乙醇提取物抑制大鼠急性心肌缺血再灌注损伤导致的心肌细胞凋亡

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中国中药杂志 2012年第9期37卷 1279-1284页

作者：秦晓静吕琪张新宁陈福泉李灵芝张永亮武警后勤学院附属医院病理科天津300162 武警后勤学院天津300162 天津市职业与环境危害生物标志物重点实验室天津300162

目的:观察蕨麻乙醇提取物对大鼠结扎冠状动脉所致急性心肌缺血再灌注损伤导致的心肌细胞凋亡的保护作用,以及对心肌细胞凋亡信号通路中天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶9、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-9,Caspase-3)表达的影响... 详细信息

目的:观察蕨麻乙醇提取物对大鼠结扎冠状动脉所致急性心肌缺血再灌注损伤导致的心肌细胞凋亡的保护作用,以及对心肌细胞凋亡信号通路中天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶9、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-9,Caspase-3)表达的影响。方法:选取雄性SD大鼠96只随机分为手术对照组,模型组,蕨麻乙醇提取物0.9,1.8,3.6 ***-1干预组,阳性药物恬尔心组(盐酸地尔硫卓,diltiazem,30 ***-1)。通过结扎大鼠冠状动脉左前降支建立急性心肌缺血再灌注模型。采用原位末端标记法检测心肌细胞凋亡;RT-PCR检测心肌组织Caspase-3,Caspase-9 mRNA水平;免疫组化染色半定量检测Caspase-3,Caspase-9蛋白水平。结果:TUNEL结果提示心肌缺血再灌注损伤后,心肌细胞出现大量凋亡,模型组凋亡指数为(31.5±3.6)%;各组蕨麻乙醇提取物均明显抑制缺血再灌注损伤所致的心肌细胞凋亡。模型组细胞凋亡导致Caspase-3,Caspase-9 mRNA及蛋白大量表达,而给予蕨麻乙醇提取物后,1.8,3.6 ***-1剂量组缺氧损伤心肌Caspase-9mRNA水平显著降低(P<0.05),0.9 ***-1剂量组与模型组相比未见明显差异。各剂量组蕨麻乙醇提取物均可显著降低心肌组织Caspase-3 mRNA水平(P<0.05)。免疫组化分析提示各干预组蕨麻乙醇提取物均可显著抑制Caspase-3,Caspase-9蛋白的表达(P<0.05)。结论:蕨麻乙醇提取物能够显著抑制急性心肌缺血再灌注所致心肌细胞凋亡,并抑制Caspase-3,Caspase-9 mRNA水平及蛋白水平的表达。

关键词：蕨麻心肌缺血再灌注细胞凋亡 TUNEL Caspase

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污染胁迫下的蚯蚓蛋白质组学研究进展

生态学报 2016年第1期36卷 44-50页

作者：李德金高宏生张丽胡骁杨震李华英郭锦赵化冰中国人民武装警察部队后勤学院天津市职业与环境危害防制重点实验室天津300309

随着蛋白质组学的发展和每年有大量环境污染物进入土壤环境中,污染胁迫模式动物的相关生物标志物受到日益关注。蚯蚓,作为土壤中最大的无脊椎动物,是研究和评价土壤生态污染良好的模式动物。研究蚯蚓的蛋白质组学,对于寻找环境生态污染... 详细信息

随着蛋白质组学的发展和每年有大量环境污染物进入土壤环境中,污染胁迫模式动物的相关生物标志物受到日益关注。蚯蚓,作为土壤中最大的无脊椎动物,是研究和评价土壤生态污染良好的模式动物。研究蚯蚓的蛋白质组学,对于寻找环境生态污染相关生物标志物和阐明生态毒理学机制有着十分重要的现实意义。目前已知的污染胁迫下蚯蚓蛋白质组学研究,提供了几个特定污染物胁迫蚯蚓的蛋白表达谱。这些蛋白涉及许多生物学过程,例如信号传导、糖酵解、能量代谢、分子伴侣和转录调节,提示了相关污染物可能的生态毒理学机制,有望成为潜在的生物标志物,用于有毒污染物的监测,但其特异性需要进一步试验的验证。对蚯蚓受污染胁迫的蛋白质组表达谱及潜在生物标志物进行简要综述。

关键词：蚯蚓蛋白质组学双向电泳

五味子提取物对苯并[a]芘诱导的早孕期大鼠胚胎损伤的保护作用及凋亡机制研究

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中国药理学通报 2015年第3期31卷 381-387页

作者：梁婧王华侯海燕孙旸陈亚琼武警后勤学院附属医院妇产科天津300162 天津中医药大学天津300193 天津市职业与环境危害防制重点实验室天津300162

目的观察五味子提取物对妊娠前苯并[a]芘(Ba P)暴露致早孕期大鼠胚胎损伤的防治作用,并探讨其内在机制。方法将75只♀SD大鼠随机分为5组:正常对照组、Ba P模型组、五味子低、中、高剂量组,每组15只。给药15 d后制备孕鼠模型,于妊娠d 9... 详细信息

目的观察五味子提取物对妊娠前苯并[a]芘(Ba P)暴露致早孕期大鼠胚胎损伤的防治作用,并探讨其内在机制。方法将75只♀SD大鼠随机分为5组:正常对照组、Ba P模型组、五味子低、中、高剂量组,每组15只。给药15 d后制备孕鼠模型,于妊娠d 9处死孕鼠,记录孕鼠各期体质量、子宫连胚总质量,并计算脏器系数;ELISA试剂盒检测大鼠血清β-CG及PROG水平;荧光定量PCR检测孕鼠胚胎中Bax、Bcl-2和caspase-3 mRNA表达水平;Western blot检测孕鼠胚胎中Bax、Bcl-2和caspase-3蛋白表达水平。结果 1与对照组相比,模型组大鼠体质量、子宫连胚总系数、大鼠血清β-CG及PROG水平均下降,Bax及caspase-3 mRNA水平及蛋白表达上调,Bcl-2 mRNA水平及蛋白表达下调;2五味子提取物治疗后,孕鼠体质量、子宫连胚总系数、大鼠血清β-CG及PROG水平较模型组上升,Bax及caspase-3 mRNA水平及蛋白表达下调,Bcl-2 mRNA水平及蛋白表达上调。结论妊娠前苯并[a]芘暴露可对早孕期大鼠产生胚胎毒性,而五味子提取物可以抑制Ba P造成的生殖损伤,这一保护作用可能是通过调节凋亡相关因子来实现的。

关键词：五味子提取物苯并[a]芘早孕期胚胎毒性凋亡 Bax Bcl-2 caspase-3

青蒿琥酯对变应性接触性皮炎的免疫调节作用及其机制探讨

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药学学报 2012年第7期47卷 884-889页

作者：李覃陈虹刘晓光周雅逊白淑芳天津武警后勤学院免疫学教研室天津300162 天津武警后勤学院天津市职业与环境危害生物标志物重点实验室天津300162 天津武警后勤学院生药学教研室天津300162

青蒿琥酯(AST)的免疫调节效应已被认可,但其具体作用的机制尚不明确。本研究通过变应性接触性皮炎(ACD)小鼠模型,初步探讨AST对ACD的免疫调节作用及可能的分子机制。采用药效学分析以及HE染色、半定量RT-PCR、Western blotting等方法分... 详细信息

青蒿琥酯(AST)的免疫调节效应已被认可,但其具体作用的机制尚不明确。本研究通过变应性接触性皮炎(ACD)小鼠模型,初步探讨AST对ACD的免疫调节作用及可能的分子机制。采用药效学分析以及HE染色、半定量RT-PCR、Western blotting等方法分别检测AST对ACD相关细胞因子、转录因子及信号分子表达的影响。结果显示,局部应用AST能够抑制ACD小鼠耳肿胀度、脾指数、炎症细胞浸润以及IFN-γ、T-bet的表达,同时减弱NF-κB p65的表达。结果表明,AST能够通过抑制炎症反应和ACD小鼠免疫功能,调节机体的Th1/Th2失衡发挥作用,NF-κB可能是其作用靶点之一。

关键词：变应性接触性皮炎青蒿琥酯免疫平衡 NF-κB

补充硒蛋氨酸促进低氧/复氧损伤神经元存活作用的体外研究

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营养学报 2013年第4期35卷 369-373页

作者：窦贺荣李贤慧张新昌李积胜何冰武警后勤学院实验动物中心武警后勤学院生化与分生教研室武警后勤学院天津市职业与环境危害生物标志重点实验室天津300162

目的研究低氧/复氧损伤时补充硒蛋氨酸(selenomethionine,SeMet)对神经元存活的影响及可能机制分析。方法原代培养大鼠脑皮质神经元低氧1h复氧6h,低氧/复氧同时加入SeMet。实验分为正常对照组、单纯低氧/复氧组、低氧/复氧补充SeMet 1、... 详细信息

目的研究低氧/复氧损伤时补充硒蛋氨酸(selenomethionine,SeMet)对神经元存活的影响及可能机制分析。方法原代培养大鼠脑皮质神经元低氧1h复氧6h,低氧/复氧同时加入SeMet。实验分为正常对照组、单纯低氧/复氧组、低氧/复氧补充SeMet 1、1.5、2μmol/L组。用CCK-8试剂检测细胞活力,Annexin V-FITC/PI双标记检测细胞凋亡,细胞总谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活力用试剂盒分析,Western–Blotting进一步分析谷胱甘肽过氧化物酶-1(GPx-1)和磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶(GPx-4)表达。结果低氧1h/复氧6h后神经元损伤明显,与对照组相比细胞活力降低至46%,凋亡率达到70.5%。补充SeMet可使神经元细胞活力下降减轻、神经元凋亡减少。GPx活力分析和Western–Blotting结果表明低氧/复氧时补充SeMet可使细胞总GPx活力增加,GPx-1和GPx-4,特别是GPx-4蛋白量明显增加。结论神经元低氧/复氧损伤时补充SeMet可增加GPx-1和GPx-4的表达进而促进神经元存活。

关键词：硒蛋氨酸神经元低氧复氧谷胱甘肽过氧化物酶体外