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基于间充质干细胞的小鼠急性移植物抗宿主病骨髓微环境损伤体外细胞模型的建立与评价策略研究

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中国实验血液学杂志 2024年第2期32卷 617-624页

作者：田家仪李佩霖汤杰许润香尹博丰王飞燕李晓彤宁红梅朱恒丁丽河北北方学院研究生院河北张家口075000 空军特色医学中心血液科北京100142 军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所北京100850 空军军医大学研究生院陕西西安710032 安徽医科大学基础医学院安徽合肥230032 解放军总医院血液学部/解放军总医院第五医学中心南院区北京100071

目的:建立小鼠急性移植物抗宿主病(aGVHD)骨髓微环境损伤的体外细胞模型并进行评价。方法:以6-8周龄雌性C57BL/6N小鼠作为骨髓和淋巴细胞的供体,6-8周龄雌性BALB/c小鼠作为aGVHD模型的受鼠。受鼠接受致死剂量(8.0 Gy,72.76 cGy/min)γ... 详细信息

目的:建立小鼠急性移植物抗宿主病(aGVHD)骨髓微环境损伤的体外细胞模型并进行评价。方法:以6-8周龄雌性C57BL/6N小鼠作为骨髓和淋巴细胞的供体,6-8周龄雌性BALB/c小鼠作为aGVHD模型的受鼠。受鼠接受致死剂量(8.0 Gy,72.76 cGy/min)γ射线全身照射后6-8 h内,尾静脉输注供鼠来源骨髓细胞(1×10^(7)/只),建立骨髓移植(BMT)组小鼠模型(n=20);尾静脉输注供鼠来源骨髓细胞(1×10^(7)/只)及脾脏淋巴细胞(2×10^(6)/只),建立小鼠aGVHD模型(n=20)。造模后d 7麻醉小鼠,摘取眼球取血,静置离心后吸取血清。分离小鼠间充质干细胞(MSC),分别用添加了2%、5%和10%的BMT组血清和相同浓度的aGVHD组血清的培养基进行培养。通过成纤维细胞集落形成实验(CFU-F)评价两组血清对MSC集落形成能力的影响;通过CD29和CD105免疫荧光染色评价两组MSC表面分子表达的差异;通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测MSC自我更新相关基因Oct-4、Sox-2和Nanog的表达情况。结果:成功建立起可以模拟小鼠aGVHD骨髓微环境损伤的体外细胞模型。CFU-F实验表明,在培养后d 7,与BMT组相比,aGVHD血清浓度为2%和5%时,MSC集落形成能力显著降低(P研究提供了新的工具。

关键词：辐射造血干细胞移植急性移植物抗宿主病骨髓微环境间充质干细胞自我更新

关节腔内注射配合微波治疗军事训练膝关节创伤性滑膜炎的疗效观察

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医学研究与战创伤救治 2024年第4期37卷 392-396页

作者：熊川陈李伟龚柯僖武警四川省总队医院军事医学与特种学科乐山614000

目的探究关节腔内注射配合微波治疗军事训练膝关节创伤性滑膜炎的疗效。方法选取2020年3月至2022年5月于武警四川总队医院住院治疗的因军事训练致膝关节急性创伤性滑膜炎患者60例,用随机数表法分为对照组(30例)和观察组(30例);对照组关... 详细信息

目的探究关节腔内注射配合微波治疗军事训练膝关节创伤性滑膜炎的疗效。方法选取2020年3月至2022年5月于武警四川总队医院住院治疗的因军事训练致膝关节急性创伤性滑膜炎患者60例,用随机数表法分为对照组(30例)和观察组(30例);对照组关节腔内注射玻璃酸钠配合微波治疗,观察组关节腔内注射富血小板血浆(PRP)配合微波治疗。比较2组短期疗效,采用麦克马特斯大学骨关节炎指数(WOMAC)评估膝关节功能,疼痛视觉模拟评分(VAS)评估疼痛程度,彩超测量膝关节滑膜厚度和腔内积液深度,酶联免疫法检测血清骨保护素(OPG)、软骨寡聚基质蛋白(COMP)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、骨形态发生蛋白4(BMP4)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)。结果观察组和对照组治疗总有效率为96.67%(29/30)、83.33%(25/30),差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后观察组WOMAC评分、VAS评分、膝关节滑膜厚度、腔内积液深度、血清COMP、IL-6和TNF-α低于对照组,OPG、TGF-β1和BMP4高于对照组(均P0.05)。结论关节腔内注射PRP配合微波治疗可有效提升军事训练膝关节创伤性滑膜炎患者膝关节功能,减轻疼痛,可能与改善骨代谢、促创伤修复及减轻炎症有关。

关键词：军事训练膝关节创伤性滑膜炎富血小板血浆关节腔内注射微波治疗疗效

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贝氏柯克斯体耐受渗透脱水研究模型的建立

中国人兽共患病学报 2024年第5期40卷 415-420页

作者：王涛孙静尹白露于永慧何卫平段学章解放军总医院第五医学中心肿瘤医学部放射治疗科北京100039 解放军总医院第五医学中心感染病医学部国家感染临床医学研究中心北京100039 军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的基于无生命培养体系,探索建立贝氏柯克斯体耐受脱水的实验室研究模型。方法梯度调整贝氏柯克斯体无生命培养体系中的渗透压条件,利用qPCR定量测定不同渗透压下贝氏柯克斯体在培养周期内基因组拷贝数变化并描记生长曲线,进一步利用... 详细信息

目的基于无生命培养体系,探索建立贝氏柯克斯体耐受脱水的实验室研究模型。方法梯度调整贝氏柯克斯体无生命培养体系中的渗透压条件,利用qPCR定量测定不同渗透压下贝氏柯克斯体在培养周期内基因组拷贝数变化并描记生长曲线,进一步利用相差显微镜、透射电子显微镜对真核细胞以及无细胞培养方法所得贝氏柯克斯体进行形态学分析,并感染BGMK细胞测定不同渗透压培养所得贝氏柯克斯体的感染性VFU。结果贝氏柯克斯体可在高渗透压条件的无生命培养基中适应性生存7 d以上,经高渗透压培养后的菌体脱水收缩且大小类似于小贝氏体,同时感染后24 h的VFU较对照组降低。结论成功建立了贝氏柯克斯体耐受高渗压脱水的研究模型,为下一步用蛋白质组学等方法研究贝氏柯克斯体在自然环境中耐受干燥脱水的遗传学机制奠定了基础。

关键词：贝氏柯克斯体 Q热渗透压脱水无生命培养

三维培养间充质干细胞来源的分泌组物对海水浸泡合并创伤小鼠海马神经元的保护作用

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解放军医学杂志 2024年

作者：兰晓娟谢胜强王秉贤马文静陈巧汨程岗吕文英张剑宁安徽医科大学第五临床医学院海军临床学院解放军总医院第六医学中心神经外科解放军总医院第一医学中心神经外科医学部军事科学院军事医学研究院军事认知与脑科学研究所南华大学衡阳医学院安徽医科大学基础医学院

目的探究三维培养的间充质干细胞(MSCs)释放的分泌组物对海水浸泡(SW)合并拉伸损伤(SI)神经元的作用，为SW合并创伤性脑损伤(TBI)后的神经元修复提供新思路。方法采用悬滴法培养MSCs，收集含有MSCs释放的分泌组物的条件培养基(CM)。... 详细信息

目的探究三维培养的间充质干细胞(MSCs)释放的分泌组物对海水浸泡(SW)合并拉伸损伤(SI)神经元的作用，为SW合并创伤性脑损伤(TBI)后的神经元修复提供新思路。方法采用悬滴法培养MSCs，收集含有MSCs释放的分泌组物的条件培养基(CM)。采用小鼠海马神经元(HT22细胞)建立SW合并SI细胞模型。将HT22细胞随机分为对照组、SI组、SI+SW组、SI+CM组和SI+SW+CM组。采用CCK-8法检测各组细胞活力，流式细胞术检测细胞凋亡率，细胞划痕实验观察细胞迁移能力，Western blotting检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bcl-2关联X蛋白(Bax)和铁死亡相关蛋白长链酰基辅酶A合酶4(ACSL4)、环氧化酶-2(Cox-2)的表达水平。结果 15%浓度海水浸泡12 h后，HT22细胞活力明显下降(P<0.05)。CCK-8法检测结果显示，处理12 h后，与对照组比较，SI组和SI+SW组HT22细胞活力均明显下降(P<0.05)；经MSCs分泌组物处理后，SI+CM组细胞活力明显高于SI组(P<0.0001),SW+SI+CM组细胞活力明显高于SI+SW组(P<0.001)。流式细胞术检测结果显示，SI组和SI+SW组细胞凋亡率明显高于对照组，而SI+CM组细胞凋亡率明显低于SI组，SI+SW+CM组细胞凋亡率明显低于SI+SW组，差异均有统计学意义(P<0.05)。Westernblotting检测结果显示，与对照组比较，SI组和SI+SW组Bcl-2表达水平降低(P<0.01或P<0.0001),Bax、ACSL4和Cox-2表达水平升高(P<0.01或P<0.0001)；与SI组比较，SI+CM组细胞Bcl-2蛋白表达水平增高(P<0.05)，而Bax、ACSL4和Cox-2蛋白表达水平降低(P<0.05)；与SI+SW组比较，SI+SW+CM组细胞Bcl-2表达水平升高(P<0.01),Bax、ACSL4和Cox-2蛋白表达水平降低(P<0.01或P<0.001)。细胞划痕实验结果显示，12h和24h时，SI组和SI+SW组细胞迁移率低于对照组(P<0.01或P<0.0001)，而SI+CM组细胞迁移率高于SI组(P<0.01),SI+SW+CM组细胞迁移率高于SI+SW组(P<0.0001)。结论悬滴法培养的MSCs分泌组物可减轻SW合并TBI神经元的损伤，有望成为SW合并TBI的潜在治疗措施。

关键词：间充质干细胞分泌组物海水浸泡创伤性脑损伤

Keap1-Nrf2和NF-κB信号通路介导脂多糖诱导的脑损伤效应研究

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军事医学 2024年第7期48卷 481-486页

作者：刘一沉闫栋斐李志新毛迎春李志慧董国福王长振军事科学院军事医学研究院北京100850 联勤保障部队第九九〇医院儿科河南驻马店463000

目的探讨Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1⁃红系衍生的核因子2相关因子2(Keap1⁃Nrf2)和核因子κB(NF⁃κB)信号通路在脓毒症相关脑病(SAE)中的作用。方法40只雄性SPF级C57BL/6J小鼠,随机分为4组(n=10):对照组和脂多糖(LPS)处理6、24、48 h组... 详细信息

目的探讨Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1⁃红系衍生的核因子2相关因子2(Keap1⁃Nrf2)和核因子κB(NF⁃κB)信号通路在脓毒症相关脑病(SAE)中的作用。方法40只雄性SPF级C57BL/6J小鼠,随机分为4组(n=10):对照组和脂多糖(LPS)处理6、24、48 h组。根据小鼠一般状况和旷场实验评价小鼠的行为学变化。采用酶联免疫吸附法(ELISA)试剂盒检测小鼠外周血促炎性因子含量,采用抗氧化检测试剂盒检测脑组织抗氧化活性。实时定量PCR(qPCR)检测小鼠海马组织中Toll样受体4(Tlr4)、NF⁃κB、Keap1、Nrf2 mRNA含量,Western印迹分析NF⁃κB、Nrf2、Keap1和Tlr4蛋白的表达。结果与对照组相比,LPS 6 h组白细胞介素6(IL⁃6)血清浓度呈上升趋势,但差异无统计学意义,24、48 h达高峰(P<0.01);LPS 6 h和24 h组白细胞介素18(IL⁃18)血清浓度增加(P<0.01),但48 h组差异无统计学意义;脑组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)活性增加(P<0.05);除了LPS 24 h组旷场内中央区域时间差异无统计学意义,其他LPS组小鼠旷场内中央区域活动时间、活动路程及活动总路程均显著减少(P<0.01)。与对照组相比,LPS组小鼠海马区Tlr4、LPS 6 h、48 h组NF⁃κB和LPS 6 h组Keap1及Nrf2 mRNA表达增加(P<0.05);LPS组NF⁃κB、Keap1、Tlr4蛋白和LPS 24 h、48 h组Nrf2蛋白水平上升(P<0.05)。结论Keap1⁃Nrf2和NF⁃κB信号途径在脓毒症脑病中发挥一定作用。

关键词：脓毒症脓毒症相关脑病脂多糖 Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1 核因子κB 红系衍生的核因子2相关因子2

携氧/释氧分析仪氧分压和血氧饱和度计量校准方法

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化学分析计量 2024年第3期33卷 105-109,128页

作者：王瑛秦东陈玉芝尤国兴李伟丹杨凤莉周虹程环赵莲军事科学院军事医学研究院卫生勤务与血液研究所北京100850 联勤保障部队第940医院兰州730050 军事科学院军事医学研究院科研保障中心北京100850

为实现半氧饱和度分压的计量溯源性,评价携氧/释氧分析仪的性能,分别建立氧分压和血氧饱和度的计量校准方法。根据国际临床化学和实验室医学联盟文件标准,以去离子水为样品,国家一级标准物质气体为气源建立氧分压参考测量方法。根据美... 详细信息

为实现半氧饱和度分压的计量溯源性,评价携氧/释氧分析仪的性能,分别建立氧分压和血氧饱和度的计量校准方法。根据国际临床化学和实验室医学联盟文件标准,以去离子水为样品,国家一级标准物质气体为气源建立氧分压参考测量方法。根据美国临床实验室标准协会C46-A2相关文件以及多功能血气分析仪中血氧饱和度示值的计量校准方法,以牛血红蛋白溶液为样品,使用高精度酶标仪建立血氧饱和度测量方法。氧分压相对示值误差分别为-2.82%和-1.35%,变异系数(CV)分别为0.31%和0.74%;血氧饱和度测量数据为(96.83±0.85)%,变异系数为0.88%,携氧/释氧分析仪测量结果为(96.68±0.67)%,变异系数为0.69%。该方法可分别实现氧分压和血氧饱和度的量值溯源,确保测得的P50值的计量溯源性。

关键词：校准携氧/释氧分析仪氧分压血氧饱和度溯源性

基于核受体辅激活因子4介导的铁自噬探讨补肾活血颗粒对帕金森病模型小鼠脑黑质神经元铁死亡的影响

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中华中医药杂志 2024年第2期39卷 926-931页

作者：谌盈帆郝斐然汤响林齐小荣李绍旦杨明会解放军总医院第六医学中心中医学部北京100048 解放军医学院北京100853 军事医学研究院北京100850

目的:探讨补肾活血颗粒(BSHXG)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的帕金森病(PD)模型小鼠铁自噬-铁死亡的影响。方法:将72只小鼠随机分为正常组、模型组、美多芭组和BSHXG低、中、高剂量组,每组12只,采用MPTP腹腔注射的方法诱... 详细信息

目的:探讨补肾活血颗粒(BSHXG)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的帕金森病(PD)模型小鼠铁自噬-铁死亡的影响。方法:将72只小鼠随机分为正常组、模型组、美多芭组和BSHXG低、中、高剂量组,每组12只,采用MPTP腹腔注射的方法诱导PD小鼠模型。各组小鼠采用爬杆和转棒疲劳试验进行行为学评价;透射电镜检测脑黑质细胞线粒体形态;免疫组化检测脑黑质酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞表达;免疫印迹法检测脑黑质核受体辅激活因子4(NCOA4)、铁蛋白重链1(FTH1)、长链脂酰辅酶A合成酶4(ACSL4)、溶血卵磷脂酰基转移酶3(LPCAT3)蛋白的表达;比色法检测脑黑质Fe^(2+)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽(GSH)含量。结果:与模型组比较,美多芭、BSHXG各剂量组小鼠爬杆转向时间及总时间显著缩短(P<0.01),转棒停留时间显著增加(P<0.01),脑黑质神经元细胞TH阳性表达增加,线粒体结构形态明显改善,BSHXG各剂量组NCOA4、Fe^(2+)、ACSL4、LPCAT3表达显著降低(P<0.05,P<0.01),BSHXG中、高剂量组FTH1蛋白表达显著升高(P<0.05,P<0.01),美多芭、BSHXG各剂量组T-SOD、GSH表达显著增加(P<0.01,P<0.05)。结论:BSHXG可通过调节NCOA4介导的铁自噬,抑制脑黑质神经元细胞铁死亡,从而改善多巴胺能神经元损伤。

关键词：补肾活血颗粒帕金森病铁死亡铁自噬核受体辅激活因子4 1-甲基-4-苯基-1 2 3 6-四氢吡啶机制

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杏林漫话——村里人的旧话之我的名字

癌症康复 2024年第1期 39-40页

作者：纪小龙《癌症康复》杂志北京武警总医院肿瘤生物治疗科北京武警总医院病理科北京武警总医院纳米医学研究所

医学专家们的睿智之光不仅限于疾病诊治和医患交流,还映照在生活的方方面面。纪小龙教授忆起童年趣事,娓娓道来,让我们如同看到了长江南岸的青砖白墙和一簇簇黄色艳丽的小花,见到了淳朴可爱的乡亲和活泼好动的小伙伴,听到了那声声的乡... 详细信息

医学专家们的睿智之光不仅限于疾病诊治和医患交流,还映照在生活的方方面面。纪小龙教授忆起童年趣事,娓娓道来,让我们如同看到了长江南岸的青砖白墙和一簇簇黄色艳丽的小花,见到了淳朴可爱的乡亲和活泼好动的小伙伴,听到了那声声的乡音……

关键词：童年趣事医患交流长江南岸小伙伴疾病诊治医学专家

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星形胶质细胞在放射性脑损伤中的研究进展

军事医学 2024年第3期48卷 236-240页

作者：韩思缦陈怡霏沈东来王以政南华大学衡阳医学院军事科学院军事医学研究院研究生协作培养基地湖南衡阳421001 复旦大学附属华山医院老年临床疾病医学研究中心上海200040

放射性脑损伤是正常脑组织接受电离辐射后出现的严重颅脑损伤,表现为认知功能障碍、学习和记忆能力下降,严重者可导致痴呆。目前,现有药物对于放射性脑损伤的治疗效果有限,且预后较差。电离辐射诱导星形胶质细胞发生病理性激活,进而通... 详细信息

放射性脑损伤是正常脑组织接受电离辐射后出现的严重颅脑损伤,表现为认知功能障碍、学习和记忆能力下降,严重者可导致痴呆。目前,现有药物对于放射性脑损伤的治疗效果有限,且预后较差。电离辐射诱导星形胶质细胞发生病理性激活,进而通过诱导神经炎症和破坏血脑屏障促进了放射性脑损伤的进程。该文主要综述了星形胶质细胞的生理病理功能及其在放射性脑损伤中的病理变化和细胞机制。同时,对靶向星形胶质细胞的治疗潜力进行展望,为扩展放射性脑损伤的治疗手段,探索新的治疗靶点和方法提供参考。

关键词：放射性脑损伤认知障碍星形胶质细胞神经炎症血脑屏障