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脑梗死患者外周血淋巴细胞DNA损伤与凋亡相关基因的研究

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临床荟萃 2009年第22期24卷 1941-1943,F0003页

作者：范德义卢俊武汉科技大学附属天佑医院神经内科湖北武汉430064 江汉大学卫生职业技术学院病理教研室湖北武汉430015

目的通过检测外周血淋巴细胞DNA损伤与凋亡相关基因的研究,判断脑梗死患者DNA损伤水平与凋亡的关系,为防治缺血性脑血管病提供实验依据。方法采用淋巴细胞分离液分离单个核细胞,再行单细胞琼脂糖凝胶电泳。应用流式细胞仪检测淋巴细胞... 详细信息

目的通过检测外周血淋巴细胞DNA损伤与凋亡相关基因的研究,判断脑梗死患者DNA损伤水平与凋亡的关系,为防治缺血性脑血管病提供实验依据。方法采用淋巴细胞分离液分离单个核细胞,再行单细胞琼脂糖凝胶电泳。应用流式细胞仪检测淋巴细胞凋亡。应用实时荧光定量聚合酶链反应法,检测Bcl-2 mRNA和BaxmRNA表达。结果脑梗死组和对照组DNA损伤积分分别为(65.8±16.5)分vs(24.6±8.9)分;凋亡细胞率分别为(14.3±4.5)%vs(6.9±1.5)%,坏死细胞率分别为(6.1±2.3)%vs(2.1±0.8)%;Bcl-2 mRNA表达分别为0.50±0.03 vs 2.50±0.30,Bax mRNA表达分别为1.53±0.14 vs 0.68±0.09。3项检测结果差异均有统计学意义(P<0.01)。结论脑梗死时外周血淋巴细胞DNA损伤和凋亡相关基因表达均显著增高,提示与该病的发生发展有关。

关键词：脑梗塞淋巴细胞 DNA损伤凋亡基因

血浆心肌脂肪酸结合蛋白在急性胸痛患者诊断中的意义

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中国急救医学 2006年第4期26卷 241-243页

作者：陈莉莉谢红艳郭小梅华中科技大学同济医学院附属同济医院综合内科湖北武汉430030

目的探讨血浆心肌脂肪酸结合蛋白(H-FABP)在急性胸痛患者中的诊断价值。方法对93例胸痛发作6 h内的患者,采用夹心ELISA法检测血浆H-FABP水平,其中急性心肌梗死(AMI)32例、不稳定型心绞痛(UAP)24例、稳定型心绞痛(SAP)22例,非心源性胸痛(... 详细信息

目的探讨血浆心肌脂肪酸结合蛋白(H-FABP)在急性胸痛患者中的诊断价值。方法对93例胸痛发作6 h内的患者,采用夹心ELISA法检测血浆H-FABP水平,其中急性心肌梗死(AMI)32例、不稳定型心绞痛(UAP)24例、稳定型心绞痛(SAP)22例,非心源性胸痛(NCCP)15例,并选69例健康体检者为对照组。结果AMI组的H-FABP水平(78.58±52.2 ng/mL)最高,UAP组(12.57±5.80 ng/mL)次之,差异有统计学意义(P0.05)。以16.8 ng/mL作为H-FABP诊断AMI的最佳临界值,其诊断AMI敏感性为84.4%,特异性为91.8%。结论血浆H-FABP水平可作为心肌坏死或损伤的早期判断指标,可为急性胸痛患者的诊断提供依据。

关键词：心肌脂肪酸结合蛋白胸痛急性心肌梗死

大鼠局灶-局灶缺血预处理后脑组织c-fos的表达及神经细胞凋亡测定

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郑州大学学报（医学版） 2006年第6期41卷 1126-1128页

作者：赵建华孙圣钢王岚陈小武华中科技大学同济医学院附属协和医院神经内科武汉430022

目的探讨脑缺血预处理后脑组织原癌基因c-fos的表达及其对神经细胞凋亡的影响。方法90只大鼠随机等分为假手术组(A组)、假预处理缺血组(B组)和预处理缺血组(C组)3组。采用Longa法建立局灶脑缺血(MCAO)模型,短暂性脑缺血20min作为预处理(... 详细信息

目的探讨脑缺血预处理后脑组织原癌基因c-fos的表达及其对神经细胞凋亡的影响。方法90只大鼠随机等分为假手术组(A组)、假预处理缺血组(B组)和预处理缺血组(C组)3组。采用Longa法建立局灶脑缺血(MCAO)模型,短暂性脑缺血20min作为预处理(PC),PC后24h给予永久性MCAO(PMCAO)。各组大鼠均于第2次手术12h(n=25)或24h(n=5)后用红四氯氮唑(TTC)染色观察脑梗死的体积,采用流式细胞仪检测大鼠前脑皮质细胞凋亡率,采用原位杂交和免疫组织化学方法对脑缺血再灌注后前脑皮质c-fosmRNA和蛋白进行检测。结果C组PMCAO后12h、24h脑梗死体积较B组减小(P<0.05);C组前脑皮质c-fosmRNA的表达高于A、B组(P<0.05或0.01),c-fos蛋白的表达高于A组(P<0.01)、低于B组(P<0.05),而凋亡细胞百分率较B组下降(P<0.01)。结论脑缺血预处理可诱导c-fosmRNA和蛋白的表达,并抑制缺血诱导的神经细胞凋亡。

关键词：大鼠缺血预处理脑梗死 c—fos 凋亡

神经生长因子干预大鼠脊髓损伤模型白质轴突计数和运动功能恢复的变化(英文)

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中国组织工程研究与临床康复 2007年第6期11卷 1192-1194页

作者：张磊梅元武华中科技大学同济医学院附属协和医院神经内科湖北省武汉市430022

背景:有实验已证实多种神经营养因子具有促进损伤神经元存活、分化和轴突再生的作用,使损伤后的脊髓组织结构完整性能得到最大的保存。目的:观察神经生长因子对大鼠脊髓损伤后神经再生和运动功能的影响。设计:随机对照观察。单位:华中... 详细信息

背景:有实验已证实多种神经营养因子具有促进损伤神经元存活、分化和轴突再生的作用,使损伤后的脊髓组织结构完整性能得到最大的保存。目的:观察神经生长因子对大鼠脊髓损伤后神经再生和运动功能的影响。设计:随机对照观察。单位:华中科技大学同济医学院附属协和医院神经内科。材料:选用30只成年健康雄性Wistar大鼠(同济医学院动物实验中心)。方法:实验于2004-01/2005-01在华中科技大学同济医学院附属协和医院神经内科完成。采用随机抽签法将大鼠分为治疗组和对照组,每组15只。①造模:应用改良Allen’s打击法致伤脊髓。②干预措施:造模后,治疗组大鼠给予蛛网膜下腔注射含1μg神经生长因子的生理盐水0.05mL,1次/d,共3周;对照组大鼠注射等体积的生理盐水,1次/d,共3W。③斜板试验:在造模前和治疗后3d和1,2,3周分别应用改良Rivlin法(斜板试验)测定大鼠运动功能值。④形态学观察:造模后2天和3周,分别取7只治疗组大鼠和8只对照组大鼠进行NF200免疫组织化学检测与轴突计数。主要观察指标:大鼠造模前、治疗后3d及1,2,3周斜板试验结果以及大鼠造模后2d和3周白质区轴突计数。结果:①治疗组大鼠脊髓损伤后斜板试验结果在术后1,2,3周时分别为(45.2±3.2),(51.2±3.8),(53.4±4.6)°,明显高于对照组(37.2±2.8),(42.6±3.5),(44.5±5.6)°,差异有显著性(P<0.05)。②治疗后3周,对照组白质内可见少量、散在不均匀的NF200着色点。治疗组白质内可见大量均匀的NF200着色点。治疗组大鼠脊髓损伤后3W白质内轴突计数明显高于对照组(363.6±34.2,187.5±32.1,P<0.05)。结论:神经生长因子对脊髓损伤后的神经再生有一定的促进作用,并有助于功能恢复。

关键词：神经生长因子脊髓损伤神经再生运动功能

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水交换结肠镜与注气式结肠镜检查的对比研究

中华消化内镜杂志 2015年第10期32卷 659-662页

作者：陈小林刘俊任宏宇华中科技大学同济医学院附属协和医院消化内科武汉430022

目的探讨水交换结肠镜检查在国内的临床应用前景。方法将300例门诊非麻醉肠镜患者随机分配到水交换结肠镜（WEC）和注气式结肠镜（AIC）组各150例，在结肠镜检查过程中及结束时，由助手记录患者腹痛最大评分、进镜时间、盲肠到达及息肉... 详细信息

目的探讨水交换结肠镜检查在国内的临床应用前景。方法将300例门诊非麻醉肠镜患者随机分配到水交换结肠镜（WEC）和注气式结肠镜（AIC）组各150例，在结肠镜检查过程中及结束时，由助手记录患者腹痛最大评分、进镜时间、盲肠到达及息肉检出的结果。结果WEE组最大腹痛评分（1．77±1．29）与AIC组（2．844-1．55）比较，差异有统计学意义（P=0．000）。WEC组进镜时间（11．91±3．58）长于AIC组（8．03±3．19）（P=0．000）。2组盲肠到达率差异无统计学意义（97．3％比94．0％，P=0．157），息肉检出率差异亦无统计学意义（16．7％比10．0％，P=0．089）。有腹部盆腔手术史者，WEC组有较高的盲肠到达率，最大腹痛评分（2．25±1．63）低于AIC组（3．48±1．45）。结论WEC能明显缓解患者检查中腹痛症状，但进镜时间略长，其盲肠到达率、息肉检出率均与AIC差异无统计学意义。对于困难结肠镜检查，WEC方法有助于提高结肠镜检查的完成率。

关键词：结肠镜检查息肉检出率水交换结肠镜注气式结肠镜

阻断整合素α4对大鼠心肌梗死后心功能的影响

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中华老年心脑血管病杂志 2011年第9期13卷 835-837页

作者：常智堂程龙献杨颖张文才余平华中科技大学同济医学院附属协和医院心内科武汉430022

目的探讨阻断整合素α4对大鼠心肌梗死后心功能的影响。方法 28只雌性SD大鼠,通过结扎冠状动脉左前降支,建立心肌梗死模型后,随机分为实验组和对照组,每组14只。实验组腹腔内注射整合素α4抗体,对照组注射同种型对照抗体IgG。造模2和4周... 详细信息

目的探讨阻断整合素α4对大鼠心肌梗死后心功能的影响。方法 28只雌性SD大鼠,通过结扎冠状动脉左前降支,建立心肌梗死模型后,随机分为实验组和对照组,每组14只。实验组腹腔内注射整合素α4抗体,对照组注射同种型对照抗体IgG。造模2和4周后,心脏超声测量大鼠心功能,Western blot检测心肌梗死区血小板生长因子(PDGF)、血管生长因子(VEGF)和血管生长因子受体2(FLK-1)蛋白表达,并测量心肌梗死面积。结果与对照组比较,实验组大鼠心功能明显升高;心肌梗死区PDGF、VEGF和FLK-1蛋白表达明显升高;心肌梗死面积明显降低(P<0.05)。结论阻断整合素α4可以降低大鼠心肌梗死面积,提高心功能。

关键词：心肌梗死整合素α4 血管内皮生长因子类超声心动描记术血流动力学

淋巴细胞转输对线粒体腺苷酸转位酶诱导的自身免疫性心肌病小鼠细胞因子的抑制作用

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临床心血管病杂志 2008年第8期24卷 609-612页

作者：汪朝晖廖玉华袁璟王敏张景辉田元董继华王金平华中科技大学协和医院心内科华中科技大学同济医学院心血管病研究所武汉430022 华中科技大学协和医院普外科实验室华中科技大学协和医院病毒学实验室

目的:研究淋巴细胞转输对线粒体腺苷酸转位酶(ANT)合成肽诱导的自身免疫性心肌病传染性耐受的小鼠Th1/Th2亚群及血清和心肌组织细胞因子的影响。方法:用ANT多肽多次免疫Balb/C小鼠得到心肌病组,单抗组小鼠在给予ADP/ATP肽免疫的第0、1和... 详细信息

目的:研究淋巴细胞转输对线粒体腺苷酸转位酶(ANT)合成肽诱导的自身免疫性心肌病传染性耐受的小鼠Th1/Th2亚群及血清和心肌组织细胞因子的影响。方法:用ANT多肽多次免疫Balb/C小鼠得到心肌病组,单抗组小鼠在给予ADP/ATP肽免疫的第0、1和2天,同时接受尾静脉注射400μg抗L3T4单抗;第6个月末时,将单抗组小鼠的脾细胞取出转输到正常小鼠体内(转输组),此小鼠亦同时给予多肽免疫,方法同心肌病组。对照组以不含ANT的相同免疫进行假性免疫,时间和剂量同心肌病组。采用流式细胞术检测脾T细胞内细胞因子IFN-γ/IL-4的含量;以ELISA法检测其血清中IFN-γ、白细胞介素-2(IL-2)、IL-4、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF-α)水平;实时荧光定量PCR法检测其心肌细胞因子mRNA表达。结果:转输组Th细胞IFN-γ、IL-4含量与对照组和单抗组接近且明显低于心肌病组;转输组小鼠血清IFN-γ和IL-2水平明显高于心肌病组而低于单抗组,IL-4和IL-6水平显著低于心肌病组;TNF-α水平在转输组则最高;心肌细胞因子mRNA的表达则转输组显著低于心肌病组,与对照组和单抗组相近。结论:淋巴细胞转输能够阻断心肌病诱导过程中绝大部分细胞因子的生成,与单抗早期干预的结果类似。

关键词：心肌疾病单克隆抗体转输 T细胞细胞因子 CD4

14-3-3蛋白各亚型在大鼠黑质和PC12细胞中的分布

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神经解剖学杂志 2006年第5期22卷 530-534页

作者：陈小武孙圣刚田有勇程道宾何静华中科技大学同济医学院附属协和医院神经内科武汉430022

本实验采用免疫组织化学、免疫荧光组织化学和免疫印迹技术对14-3-3蛋白各亚型在大鼠黑质(SN)和PC12细胞中的分布情况进行了研究。在大鼠黑质内,免疫组化和免疫荧光结果显示14-3-3蛋白的γ、ε、θ、ζ四个亚型呈阳性反应,而β和η亚型... 详细信息

本实验采用免疫组织化学、免疫荧光组织化学和免疫印迹技术对14-3-3蛋白各亚型在大鼠黑质(SN)和PC12细胞中的分布情况进行了研究。在大鼠黑质内,免疫组化和免疫荧光结果显示14-3-3蛋白的γ、ε、θ、ζ四个亚型呈阳性反应,而β和η亚型未见明显阳性反应;在PC12细胞中,6个亚型均呈免疫荧光阳性反应;在黑质中,Westernblot结果显示14-3-3各亚型蛋白表达的相对水平为ε>γ>ζ>θ;而在PC12细胞中各亚型的表达水平为γ>ε>β>ζ>η>θ。本实验的结果提示ε、γ、ζ和θ亚型可能在黑质中发挥主要作用。本研究的结果为研究14-3-3蛋白在Parkinson病中的作用提供了形态学依据。

关键词： 14—3—3蛋白黑质 PC12细胞大鼠

空载树突状细胞注射对荷瘤鼠肿瘤的免疫作用研究

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中国新药杂志 2007年第20期16卷 1685-1688页

作者：刘红菊陶晓南辛建保尚丹熊先智周琼华中科技大学同济医学院附属协和医院呼吸内科武汉430022

目的:研究树突状细胞(DC)不负载肿瘤抗原时对肺部肿瘤的免疫抑制作用。方法:黑色素瘤细胞(MO5)静脉注射诱导同源C57BL/6小鼠肺部转移瘤,鼠趾间分别皮下注射磷酸盐缓冲液、载与未载肿瘤抗原(SI- INFEKEL)的GM-CSF DC,观察对肺肿瘤的免疫... 详细信息

目的:研究树突状细胞(DC)不负载肿瘤抗原时对肺部肿瘤的免疫抑制作用。方法:黑色素瘤细胞(MO5)静脉注射诱导同源C57BL/6小鼠肺部转移瘤,鼠趾间分别皮下注射磷酸盐缓冲液、载与未载肿瘤抗原(SI- INFEKEL)的GM-CSF DC,观察对肺肿瘤的免疫抑制作用;并分析其相应的效应细胞。结果:同载有肿瘤抗原的GM-CSF DC一样,未载抗原的GM-CSF DC注射同样对小鼠肺内转移瘤产生了抑制作用[(89.1±6.2)vs(1573.5±23.5),P<0.01]。但作用于用缺乏唾液酸基的单唾液酸四己糖神经节苷脂的抗体(anti-asialo-GM1)治疗后的小鼠则此保护作用消失,而应用anti-CD_8治疗的小鼠则不影响保护作用。结论:空DCs对C57BL/6小鼠肺部转移癌具有很好的保护作用,此保护作用需有NK细胞存在介导。

关键词：树突状细胞自然杀伤细胞肿瘤抑制