检索结果-南通市图书馆

同方期刊数据库

重组胰蛋白酶在原代地鼠肾细胞组织分离中的应用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

生物技术进展 2025年第1期15卷 152-157页

作者：乔建曾帅张杨徐葛林武汉生物制品研究所有限责任公司生产技术部武汉430207 武汉生物制品研究所有限责任公司乙脑疫苗室武汉430207 武汉生物制品研究所有限责任公司轮状病毒疫苗室武汉430207

为探究重组胰蛋白酶替代猪源性胰蛋白酶在乙型脑炎减毒活疫苗制备中的可行性,在相同的酶活力条件(总酶活力均为315200 U)下,利用猪源性胰蛋白酶、源于大肠杆菌BL21(DE3)表达系统的重组胰蛋白酶,以及源于毕赤酵母(X-33)表达系统的重组胰... 详细信息

为探究重组胰蛋白酶替代猪源性胰蛋白酶在乙型脑炎减毒活疫苗制备中的可行性,在相同的酶活力条件(总酶活力均为315200 U)下,利用猪源性胰蛋白酶、源于大肠杆菌BL21(DE3)表达系统的重组胰蛋白酶,以及源于毕赤酵母(X-33)表达系统的重组胰蛋白酶,分别消化原代地鼠肾块,各组实验均保持相同的消化温度和消化时间。结果发现,经上述3种胰酶消化后,细胞的分散效果及细胞生长状态均表现良好,且在培养第3天的细胞铺展率上,各组间并未显示出明显差异(P>0.05)。进一步在病毒培养阶段观察,3个组别病毒上清液的病毒滴度亦无明显差异(P>0.05)。结果表明,源于大肠杆菌BL21(DE3)表达系统和毕赤酵母(X-33)表达系统的重组胰蛋白酶,均可替代猪源性胰蛋白酶,用于乙型脑炎减毒活疫苗的制备。

关键词：乙脑疫苗猪源胰酶重组胰蛋白酶细胞消化

维普期刊数据库

同方期刊数据库

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

肺炎克雷伯菌核酸检测试剂国家参考品的研制

分子诊断与治疗杂志 2025年第01期 5-8+12页

作者：刘茹凤李江姣石继春李康黄洋王斌王春娥叶强中国食品药品检定研究院生物制品检定所细菌多糖和结合疫苗室

目的研制肺炎克雷伯菌（KP）核酸检测国家参考品。方法通过对10株肺炎克雷伯菌和9株非肺炎克雷伯菌的菌种检定、培养、灭活及分装，建立肺炎克雷伯菌核酸检测试剂国家参考品。对参考品进行均匀性以及稳定性评估验证，组织8家实验室... 详细信息

目的研制肺炎克雷伯菌（KP）核酸检测国家参考品。方法通过对10株肺炎克雷伯菌和9株非肺炎克雷伯菌的菌种检定、培养、灭活及分装，建立肺炎克雷伯菌核酸检测试剂国家参考品。对参考品进行均匀性以及稳定性评估验证，组织8家实验室进行协作标定。结果参考品由10份阳性、9份阴性、3份精密性以及1份最低检出限样品组成，均匀性和稳定性良好。协作标定结果显示：10份阳性参考品检测结果均为阳性；9份阴性参考品：除一家企业的N7不符合要求其余均为阴性；最低检出量参考品的检出量不高于1.0×10～3个菌/mL；重复性参考品检测结果一致（n=10,CV≤5%）。结论建立的肺炎克雷伯菌核酸检测试剂国家参考品填补了相关领域的空白，能够用于肺炎克雷伯菌核酸检测试剂的质量控制。

关键词：肺炎克雷伯菌核酸检测验证国家参考品

鼠伤寒沙门菌ompW基因缺失株与回补株的构建及其生物学特性

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

畜牧兽医学报 2025年

作者：葛雷仇汝龙范志宇胡波魏后军陈萌萌宋艳华李一鸣徐为中王芳江苏省农业科学院兽医研究所农业农村部兽用生物制品工程重点实验室兽用生物制品(泰州)国泰技术创新中心

鼠伤寒沙门菌（Salmonella Typhimurium）是最为常见的沙门菌血清型，严重危害畜牧业发展及公共卫生安全。外膜蛋白OmpW是由ompW基因编码的营养物质特异性运输通道，发挥特殊的铁离子外排功能，与细菌耐药性、致病性等密切相关。但其在... 详细信息

鼠伤寒沙门菌（Salmonella Typhimurium）是最为常见的沙门菌血清型，严重危害畜牧业发展及公共卫生安全。外膜蛋白OmpW是由ompW基因编码的营养物质特异性运输通道，发挥特殊的铁离子外排功能，与细菌耐药性、致病性等密切相关。但其在沙门菌中的功能尚未见研究。为探究外膜蛋白OmpW对鼠伤寒沙门菌的影响，本试验以鼠伤寒沙门菌ATCC 14028为野生株（WT14028），利用λ-Red同源重组技术构建ompW基因缺失株（14028ΔompW），同时构建回补株（14028ΔompW::ompW），通过检测生长特性、生物被膜形成能力、环境耐受性、耐药性等方面探究鼠伤寒沙门菌ompW基因的生物学特性，并通过小鼠感染试验探究该基因对沙门菌致病性的影响。结果表明，缺失株与野生株菌落形态无显著差异；缺失株在对数生长期显著慢于野生株，但到达稳定期无显著差异；缺失株生物被膜形成能力下降31.73%± 6.43%；在酸性（pH=3）、碱性（pH=10）及高盐(1 mol·L-1NaCl)环境下，缺失株存活率显著低于野生株；但在高铁(> 0.625 g·L-1FeCl3)环境下，缺失株存活率更高；缺失株对氨基糖苷类抗生素庆大霉素、卡那霉素的敏感性显著增强，对其他如氨苄西林、四环素等抗生素敏感性无显著变化；小鼠感染试验表明，与野生株相比，缺失株感染诱发的腹泻率更低、脾脏肿大及肠道损伤更轻微，且细菌移位能力也显著下降。综上，本研究成功构建了鼠伤寒沙门菌ompW基因缺失株及回补株，试验表明该基因与菌株生长、环境耐受性、耐药性、致病性等方面密切相关。本研究为进一步开展沙门菌的致病与耐药机制的研究奠定了基础。

关键词：鼠伤寒沙门菌 ompW基因缺失株生物学特性致病性

水包油乳剂中聚山梨酯80含量高效液相色谱检测方法的建立、验证及与其他方法的比较

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国生物制品学杂志 2025年第2期 172-178+184页

作者：贾兰馨年悬悬马宁郑嘉昊聂希霖张哲罡张家友武汉生物制品研究所有限责任公司病毒性疫苗研究二室国家联合疫苗工程技术研究中心

目的建立及验证水包油乳剂中聚山梨酯80含量的高效液相色谱（high-performance liquid chromatography,HPLC）检测方法，并与改良硫氰酸钴铵比色法进行比较，以期用于水包油乳剂中聚山梨酯80含量的检测。方法采用Eclipse Plus C8、TSK... 详细信息

目的建立及验证水包油乳剂中聚山梨酯80含量的高效液相色谱（high-performance liquid chromatography,HPLC）检测方法，并与改良硫氰酸钴铵比色法进行比较，以期用于水包油乳剂中聚山梨酯80含量的检测。方法采用Eclipse Plus C8、TSKgel G2000SWXL、ChromCore SAA色谱柱检测聚山梨酯80标准品或供试品，确定最佳色谱柱，并优化色谱条件中的流动相B洗脱梯度（以50%、75%、90%作为流动相B第2阶段的洗脱梯度，检测聚山梨酯80标准品溶液；以90%、75%作为流动相B第2阶段的洗脱梯度，检测供试品溶液）及流速（0.8、1.0、1.2 mL/min），验证方法的专属性、线性范围、重复性、准确性、耐用性，并比较该方法与改良硫氰酸钴铵比色法的线性范围、重复性和准确性。结果确定采用ChromCore SAA色谱柱；流动相A为0.1%（v/v）乙酸水溶液，流动相B为0.1%（v/v）乙酸异丙醇溶液；柱温为25℃；上样量为10μL；梯度洗脱，最佳流动相B第2阶段洗脱梯度为75%；流速为1.2 mL/min。聚山梨酯80标准品溶液及供试品溶液均于3.1 min可见聚山梨酯80色谱峰，供试品溶液在6 min可见其他色谱峰；聚山梨酯80标准品溶液浓度在300～1 000μg/mL范围内，与峰面积呈良好的线性关系，回归方程为：y=1.44 x+4.91,r=0.999 8;6份供试品溶液聚山梨酯80含量RSD为1.13%；低、中、高含量样品的加标回收率为96.51%～104.82%；供试品溶液于室温放置0、2、4、6、8 h，聚山梨酯80含量RSD为2.38%。两种方法的线性关系均良好；HPLC法的重复性及准确性均优于改良硫氰酸钴铵比色法。结论建立的HPLC法优于改良硫氰酸钴铵比色法，具有良好的专属性、精密性、准确性、耐用性，为含有多种表面活性剂的生物制品中聚山梨酯80含量的检测提供了可靠方法。

关键词：水包油乳剂聚山梨酯80 高效液相色谱法硫氰酸钴铵比色法

脑膜炎奈瑟菌血清抗体多重体外杀菌试验方法的建立

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

微生物学免疫学进展 2025年第1期 28-34页

作者：乔瑞洁杨田瑶周宇晨王艺璇任浩锋蔡晓楠魏开琦刘方蕾罗树权兰州生物制品研究所有限责任公司第一研究室甘肃省疫苗技术创新中心

目的建立脑膜炎奈瑟菌(简称脑膜炎球菌)多重体外杀菌试验(serum bactericidal assay, SBA),用于ACW135Y群四价脑膜炎球菌疫苗免疫血清SBA滴度的高通量检测。方法筛选A、C、W135、Y群脑膜炎球菌对8种抗生素的抗性；对筛选得到的抗性菌... 详细信息

目的建立脑膜炎奈瑟菌(简称脑膜炎球菌)多重体外杀菌试验(serum bactericidal assay, SBA),用于ACW135Y群四价脑膜炎球菌疫苗免疫血清SBA滴度的高通量检测。方法筛选A、C、W135、Y群脑膜炎球菌对8种抗生素的抗性；对筛选得到的抗性菌株进行抗性诱导，使其对某种抗生素抗性逐渐提高；然后对筛选得到的抗性菌株进行抗性范围的确认；最后根据实际需求确定各抗生素工作浓度范围。比较使用正常菌株和抗性菌株时质控血清的杀菌滴度。结果初筛后确认了A群对红霉素的抗性、C群对硫酸链霉素的抗性、W135群对甲氧苄氨嘧啶的抗性以及Y群对壮观霉素的抗性，并分别命名为AH、CD、WC和YB;抗性诱导过程中，AH在抗生素质量浓度为0.16μg/mL时，不再继续生长，所以终止诱导；其余3株均在抗生素质量浓度为60.00μg/mL时达到所需抗性，终止诱导。AH的抗性质量浓度范围为0.08～0.40μg/mL;CD抗性质量浓度范围为60.00～240.00μg/mL;WC抗性质量浓度范围为8.00～240.00μg/mL;YB抗性质量浓度范围为32.00～480.00μg/mL。最终确定抗生素H、D、C、B的工作质量浓度分别为0.18μg/mL、100.00μg/mL、30.00μg/mL和120.00μg/mL。分析质控血清检测结果显示，靶细菌在抗性诱导以后，对A、C、W135、Y群杀菌滴度的差异均无统计学意义(P=0.408 9、0.432 6、0.203 0、0.431 0)。结论获得了含抗生素抗性的SBA用靶细菌，建立了脑膜炎球菌多重SBA。

关键词：脑膜炎奈瑟菌体外杀菌试验抗性菌株抗性诱导

同方期刊数据库

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

抗蛇毒血清细菌内毒素检查质量控制研究

海峡药学 2025年第1期 29-31页

作者：钟玉玲张寒冬邓大义曾庆萍江西生物制品研究所股份有限公司

目的为全面提升抗蛇毒血清产品安全性质量控制标准，对抗蛇毒血清细菌内毒素的检查方法进行探索性研究，为增加抗蛇毒血清细菌内毒素控制项目提供依据。方法参考《中国药典》三部2020年版通则1143细菌内毒素检查法，首先确定内毒素限... 详细信息

目的为全面提升抗蛇毒血清产品安全性质量控制标准，对抗蛇毒血清细菌内毒素的检查方法进行探索性研究，为增加抗蛇毒血清细菌内毒素控制项目提供依据。方法参考《中国药典》三部2020年版通则1143细菌内毒素检查法，首先确定内毒素限值及最大有效稀释倍数，然后进行干扰试验及细菌内毒素检查。结果细菌内毒素限度值为7.5 EU·mL-1,对10批次抗蛇毒血清进行细菌内毒素检查，结果均符合规定。结论采用不同生产厂家的鲎试剂，证明建立的细菌内毒素检查法可用于抗蛇毒血清的质量控制，每mL抗蛇毒血清中内毒素限值不高于7.5 EU。

关键词：抗蛇毒血清安全性细菌内毒素凝胶法内毒素限值

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

氢氧化铝佐剂的过敏性反应

中国生物制品学杂志 2011年第10期24卷 1171-1173页

作者：孙营陈静陈少华曹璟熊薇陈鄂湘薛红刚李新国项美娟武汉生物制品研究所细菌类疫苗室武汉430060

目的研究氢氧化铝佐剂的过敏性反应。方法取豚鼠42只,随机分为7组:A(lOH)31.5 mg/ml组、A(lOH)34 mg/ml组、A(lOH)3 7 mg/ml组、A(lOH)3 10 mg/ml组、A(lOH)3 13 mg/ml组、阴性对照(生理盐水)组和阳性对照(1%BSA)组,致敏,12 d后,分别经... 详细信息

目的研究氢氧化铝佐剂的过敏性反应。方法取豚鼠42只,随机分为7组:A(lOH)31.5 mg/ml组、A(lOH)34 mg/ml组、A(lOH)3 7 mg/ml组、A(lOH)3 10 mg/ml组、A(lOH)3 13 mg/ml组、阴性对照(生理盐水)组和阳性对照(1%BSA)组,致敏,12 d后,分别经豚鼠静脉注射各浓度的A(lOH)3、生理盐水和1%BSA,观察各组豚鼠的反应及相关症状出现和消失的时间。另取豚鼠24只,随机分为4组:A(lOH)3 1.5 mg/ml组、A(lOH)3 4 mg/ml组、阴性对照(生理盐水)组和阳性对照(1%BSA)组,经豚鼠背部皮肤分别皮内注射抗血清,48 h后,各组分别静脉注射1.5 mg/ml、4 mg/ml的A(lOH)3、生理盐水和1%BSA+1%伊文思蓝染料(v/v=1∶1),进行激发;30 min后,测量豚鼠皮肤内层的蓝色斑点大小。结果全身主动过敏试验中,氢氧化铝浓度在4 mg/ml以下,豚鼠无过敏反应,7和10 mg/ml时为过敏反应强阳性,13 mg/ml时为过敏反应极强阳性。皮肤被动过敏试验中,A(lOH)3 1.5和4 mg/ml组豚鼠均未出现过敏反应。结论氢氧化铝浓度在4 mg/ml以下无过敏反应,较安全可靠。

关键词：氢氧化铝佐剂,免疫过敏反应

维普期刊数据库

吸附无细胞百白破-重组乙型肝炎(CHO细胞)联合疫苗的中试工艺

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国生物制品学杂志 2009年第10期22卷 990-992,1001页

作者：陈静蒋强华卢宏波项美娟吴季南曾令冰武汉生物制品研究所细菌类疫苗室武汉430060

目的探讨吸附无细胞百白破-重组乙型肝炎(CHO细胞)联合疫苗(DTaP-HBV)的中试工艺。方法通过不同的配比条件,探索DTaP-HBV联合疫苗的最佳中试工艺。以此工艺制备3批DTaP-HBV,进行各项指标的检定及稳定性试验。结果配方以无细胞百日咳疫... 详细信息

目的探讨吸附无细胞百白破-重组乙型肝炎(CHO细胞)联合疫苗(DTaP-HBV)的中试工艺。方法通过不同的配比条件,探索DTaP-HBV联合疫苗的最佳中试工艺。以此工艺制备3批DTaP-HBV,进行各项指标的检定及稳定性试验。结果配方以无细胞百日咳疫苗原液18μgPN/ml,精制白喉类毒素25Lf/ml,精制破伤风类毒素7Lf/ml,重组乙肝疫苗原液20μg/ml为宜;DTaP-HBV的稀释液选用0.85%NaCl溶液吸附效果较好,各抗原间无干扰作用;不同配合方式对四联疫苗的效力影响不大。3批DTaP-HBV的各项检定指标均符合《中国药典》三部(2005版)要求,且稳定性良好。结论已筛选出DTaP-HBV联合疫苗的最佳中试工艺,以此工艺制备的疫苗安全、稳定、有效。

关键词：无细胞百白破三联疫苗乙肝疫苗联合疫苗中试

维普期刊数据库

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

百日咳毒素S1亚基的基因脱毒

中国生物制品学杂志 2025年第2期 143-148+154页

作者：刘宏博朱德武蔡梦瑶马林王芬胡源陈雯付烈段凯武汉生物制品研究所有限责任公司国家联合疫苗工程技术研究中心湖北省疫苗技术创新中心新突发传染病新型疫苗研发全国重点实验室

目的对百日咳毒素（pertussis toxin,PT）-S1亚基进行基因编辑，以完成百日咳杆菌CS株的基因脱毒。方法制备百日咳杆菌CS株电转感受态细胞，电转导入携带Kana抗性基因的线性DNA重组片段，以两侧同源臂的重组与PT-S1亚基交换。用Kana... 详细信息

目的对百日咳毒素（pertussis toxin,PT）-S1亚基进行基因编辑，以完成百日咳杆菌CS株的基因脱毒。方法制备百日咳杆菌CS株电转感受态细胞，电转导入携带Kana抗性基因的线性DNA重组片段，以两侧同源臂的重组与PT-S1亚基交换。用Kana抗生素筛选重组菌株，通过基因测序确定重组序列，并从重组菌株培养上清中获取PT蛋白，对其进行ELISA、Western blot及体外毒性分析。结果抗性筛选得到的重组菌株经基因组及mRNA测序，获得S1-R9K/E129G双突变菌株FE3和S1-R9K单突变菌株FE16。FE3和FE16株生长速率均略有降低，但最大菌浓度均上升，其摇瓶培养上清中PT蛋白含量分别可达796.8和185.9 ng/mL,PT蛋白可被S1亚基单克隆抗体1B7识别；FE3和FE16株PT蛋白体外毒性相比于PT标准品分别降低至0.001 6%和0.008 1%。结论采用电转线性DNA片段及Kana抗生素筛选的方法可对百日咳杆菌CS株进行基因编辑，获得PT蛋白毒性显著降低的基因脱毒菌株，为百日咳疫苗的进一步研究奠定了基础。

关键词：百日咳杆菌CS株基因脱毒百日咳毒素 1B7 CHO细胞凝集试验