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微小RNA-320在缺氧诱导的大鼠神经细胞中的表达和功能研究

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中华老年心脑血管病杂志 2018年第10期20卷 1088-1091页

作者：罗旺胜黄荣宋郁喜旃培艳武汉市中心医院新洲院区武汉市新洲区人民医院神经内科 430400

目的研究微小RNA-320(microRNA-320,miR-320)在缺氧诱导的大鼠PC12细胞的表达特征,并探讨其对PC12细胞增殖和凋亡的影响。方法采用荧光定量PCR检测常氧组和缺氧诱导组PC12细胞中miR-320表达情况;转染miR-320 mimics(实验组)和mimics con... 详细信息

目的研究微小RNA-320(microRNA-320,miR-320)在缺氧诱导的大鼠PC12细胞的表达特征,并探讨其对PC12细胞增殖和凋亡的影响。方法采用荧光定量PCR检测常氧组和缺氧诱导组PC12细胞中miR-320表达情况;转染miR-320 mimics(实验组)和mimics control(对照组)至缺氧诱导的PC12细胞,采用细胞增殖实验和ELISA法观察细胞增殖和凋亡情况。结果缺氧诱导组PC12细胞中miR-320表达显著低于常氧组(0.27±0.14vs 1.01±0.21,P<0.05)。实验组细胞内源性miR-320表达显著高于对照组(6.57±0.92 vs 1.54±0.21,P<0.05)。对照组PC12细胞24、48和72h增殖率分别为(11.57±3.21)%、(14.39±3.57)%和(17.28±4.49)%,实验组分别为(19.15±4.02)%、(24.20±5.12)%和(29.36±5.78)%。对照组PC12细胞中Bcl-2、Bax和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3的表达量分别为(1.67±0.52)μg/L、(2.15±0.24)μg/L和(4.66±0.79)μg/L,实验组分别为(3.01±0.77)μg/L、(0.33±0.04)μg/L和(1.59±0.46)μg/L,2组比较有显著差异(P<0.05)。结论 miR-320在缺氧诱导大鼠PC12细胞呈现低表达,体外升高其表达具有促进缺氧诱导PC12细胞增殖并抑制凋亡的功能。

关键词：微RNAs 缺氧 PC12细胞细胞增殖细胞凋亡

基于DNA酶催化反应建立适配体比色法检测鸡蛋中氯霉素

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食品与机械 2021年第11期37卷 61-66,104页

作者：程慧刘顺黎波黄玉兰周涛黄梅县公共检验检测中心湖北黄冈435501 荆州职业技术学院湖北荆州434000 石首市公共检验检测中心湖北石首434400

目的:通过制备适配体—磁珠复合体,利用氯霉素的特异性结合可解离适配体与DNA酶的结合,并解除对该酶与血红素结合催化显色反应活性抑制的机理,建立用于快速检测鸡蛋中氯霉素的方法。方法:通过适配体与DNA酶碱基互补配对后,再将该结合体... 详细信息

目的:通过制备适配体—磁珠复合体,利用氯霉素的特异性结合可解离适配体与DNA酶的结合,并解除对该酶与血红素结合催化显色反应活性抑制的机理,建立用于快速检测鸡蛋中氯霉素的方法。方法:通过适配体与DNA酶碱基互补配对后,再将该结合体通过羧基和氨基的缩合反应,制备适配体—磁珠复合体。再通过加入不同浓度的氯霉素溶液以实现与其适配体的结合,使得DNA酶与氯霉素核酸适配体发生解离,被解离出的DNA酶与血红素结合催化显色反应。结果:该方法检测氯霉素的线性范围为0.001~100.000 mg/kg,其吸光度值与氯霉素浓度呈线性相关,在5,10,25 mg/kg 3种添加水平下该比色法的回收率为98.4%~101.1%,相对标准偏差均小于10%。结论:该方法通过引入DNA酶和磁性纳米粒子有效克服了传统快速检测方法的非特异性吸附引起的假阳性结果,适用于快速检测鸡蛋中氯霉素的残留量。

关键词： DNA酶催化活性适配体磁珠鸡蛋氯霉素

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药品中沙门菌荧光PCR法的建立

药物生物技术 2019年第5期26卷 402-404页

作者：申应德王家芳张新姜庆临沂市检验检测中心

建立药品中沙门菌检查的荧光PCR检测方法。梯度稀释沙门菌悬液确定该方法的灵敏度,设置沙门菌液组、大肠埃希菌菌液组、沙门菌及大肠埃希菌混合菌液组、空白对照组共4个试验组,考察该方法的专属性,选取5批样品分别设置供试品组和阳性对... 详细信息

建立药品中沙门菌检查的荧光PCR检测方法。梯度稀释沙门菌悬液确定该方法的灵敏度,设置沙门菌液组、大肠埃希菌菌液组、沙门菌及大肠埃希菌混合菌液组、空白对照组共4个试验组,考察该方法的专属性,选取5批样品分别设置供试品组和阳性对照组,考察该方法的重现性及耐用性。该方法检测灵敏度为103cfu/m L,4组试验中,沙门菌液组、沙门菌及大肠埃希菌混合菌液组均检出沙门菌,大肠埃希菌组及空白对照均未检出。5组样品中,采用PCR法和药典标准方法,两种方法检查结果符合率为100%。该方法灵敏度高,不受大肠埃希菌干扰,具有良好的专属性、重现性及耐用性,可以用于药品中沙门菌的检查。

关键词：微生物限度检查控制菌沙门菌定性检验 PCR 方法验证

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阿昔洛韦片中杂质的色谱-质谱结构分析

中国现代应用药学 2024年第1期41卷 62-70页

作者：王丽陈国清无锡市药品安全检验检测中心江苏无锡214028

目的建立高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱(HPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS)联用法对阿昔洛韦片及其强制降解试验样品中的杂质进行结构分析。方法采用Waters Xbridge BEH Shield RP18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以10 mmol... 详细信息

目的建立高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱(HPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS)联用法对阿昔洛韦片及其强制降解试验样品中的杂质进行结构分析。方法采用Waters Xbridge BEH Shield RP18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以10 mmol·L^(–1)甲酸铵溶液(含0.15%甲酸)为流动相A,以10 mmol·L^(–1)甲酸铵溶液(含0.15%甲酸)-乙腈(50∶50)为流动相B,进行梯度洗脱,检测波长为254 nm,对阿昔洛韦片及其强制降解试验样品中的杂质进行分离,再采用QExactive Orbitrap-MS测定各杂质一级精确分子量及二级碎片离子,并进行结构鉴定。结果阿昔洛韦及其杂质均分离良好,检测并鉴定出阿昔洛韦片及其强制降解试验样品中8个含量>0.1%的主要杂质,其中4个为欧洲药典10.0规定的已知杂质,而其他杂质均未见报道。结论建立的液质联用技术能有效鉴定阿昔洛韦片的杂质,能够为其生产工艺的优化和质量控制提供参考。

关键词：阿昔洛韦四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱杂质降解产物结构鉴定

高效液相色谱-二极管阵列检测器法测定马铃薯及其制品中的α-茄碱和α-卡茄碱

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食品与发酵工业 2020年第12期46卷 277-282页

作者：任兴权刘盼苏菊王蓉曾文锦周丽史蓉李婷婷段亭酒泉市食品检验检测中心甘肃酒泉735000

该文建立了高效液相色谱-二极管阵列检测器法测定马铃薯及其制品中的α-茄碱和α-卡茄碱的方法。样品经酸化甲醇提取后,用无水硫酸钠和无水乙酸镁吸收多余的水分后离心,用高效液相色谱-二极管阵列检测器法进行检测。检测条件:用Hubble ... 详细信息

该文建立了高效液相色谱-二极管阵列检测器法测定马铃薯及其制品中的α-茄碱和α-卡茄碱的方法。样品经酸化甲醇提取后,用无水硫酸钠和无水乙酸镁吸收多余的水分后离心,用高效液相色谱-二极管阵列检测器法进行检测。检测条件:用Hubble C18液相色谱柱(250 mm×4. 6 mm,5μm),以乙腈和0. 02 mol/L磷酸二氢钾溶液为流动相,流速为0. 2 mL/min,柱温为30℃,进样量为10μL,二级管阵列检测器检测范围190~810 nm,检测波长为195 nm。α-茄碱和α-卡茄碱在0. 2~200μg/mL时线性相关系数R2为0. 999 3~0. 999 8,方法检出限均为0. 5 mg/kg,定量限均为1. 7 mg/kg,4、6、10μg/mL三个浓度加标水平的回收率为98%~107%,相对标准偏差为0. 05%~0. 44%。该方法前处理简单、灵敏度高、重现性和回收率好,有良好的精密度、准确度,可用于马铃薯及其制品中α-茄碱和α-卡茄碱分析检测。

关键词：高效液相色谱二极管阵列检测器马铃薯 α-茄碱 α-卡茄碱

熔融制样-X射线荧光光谱法测定镁钙铁质振动料中主量成分

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冶金分析 2024年第9期44卷 66-71页

作者：王志彪李向威阳泉市综合检验检测中心国家硅铝质耐火材料质量检验检测中心(山西)

为保证镁钙铁质振动料有良好的抗渣性和耐火度以及施工强度，需要严格控制其化学成分。采用Li2B4O7-LiBO2混合熔剂（m∶m=67∶33）熔融制样，以300 g/L NH4I溶液为脱模剂，在1 050℃下熔融15 min制得玻璃片，实现了X射线荧光光谱法（XR... 详细信息

为保证镁钙铁质振动料有良好的抗渣性和耐火度以及施工强度，需要严格控制其化学成分。采用Li2B4O7-LiBO2混合熔剂（m∶m=67∶33）熔融制样，以300 g/L NH4I溶液为脱模剂，在1 050℃下熔融15 min制得玻璃片，实现了X射线荧光光谱法（XRF）对镁钙铁质振动料中主量成分SiO2、Al2O3、Fe2O3、CaO、MgO的测定。参照镁钙铁质振动料的成分，用镁质耐火材料、石灰石、铝矾土等标准样品混合配制各主量成分含量具有一定梯度且能覆盖其含量跨度的校准样品系列绘制校准曲线，克服了镁钙铁质振动料没有标准样品的难题；以理论α系数法进行基体校正，消除了元素间的吸收和增强效应。以样品中各成分的含量为横坐标，其对应的荧光强度为纵坐标绘制校准曲线，各成分校准曲线精密度品质因子K检测结果与标准方法的误差在标准方法GB/T 5069—2015规定的允许差范围之内。

关键词：镁钙铁质振动料 X射线荧光光谱法(XRF) 熔融制样主量成分

HPLC-DAD同时测定益心通胶囊中6种活性成分的含量

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中国现代应用药学 2019年第14期36卷 1792-1796页

作者：刘斌泰安市食品药品检验检测中心

目的建立HPLC同时测定益心通胶囊中葛根素、龙胆苦苷、阿魏酸、毛蕊花糖苷、丹酚酸B和丹皮酚6种活性成分含量的方法。方法采用XSELECTTM HSS C18色谱柱,流动相为乙腈(A)-0.2%磷酸水溶液(B),梯度洗脱;柱温:30℃;流速:1.0 mL·min-1;检测... 详细信息

目的建立HPLC同时测定益心通胶囊中葛根素、龙胆苦苷、阿魏酸、毛蕊花糖苷、丹酚酸B和丹皮酚6种活性成分含量的方法。方法采用XSELECTTM HSS C18色谱柱,流动相为乙腈(A)-0.2%磷酸水溶液(B),梯度洗脱;柱温:30℃;流速:1.0 mL·min-1;检测波长:阿魏酸、毛蕊花糖苷和丹酚酸B为220 nm,葛根素为250 nm,龙胆苦苷和丹皮酚为275 nm。结果葛根素、龙胆苦苷、阿魏酸、毛蕊花糖苷、丹酚酸B和丹皮酚的线性范围分别为7.56~113.4μg·mL-1(r=0.999 8),4.36~65.4μg·mL-1(r=0.999 7),1.18~17.7μg·mL-1(r=0.999 3), 1.90~28.5μg·mL-1(r=0.999 4), 4.48~67.2μg·mL-1(r=0.999 3)和11.7~175.5μg·mL-1(r=0.9997),平均加样回收率分别为98.7%,97.8%,97.6%,98.6%,99.0%,98.7%,RSD分别为1.0%,1.3%,1.4%,1.1%,1.2%,1.3%。结论本法专属性强,结果准确,重现性好,可用于益心通胶囊的质量控制。

关键词：高效液相色谱-二极管阵列检测器益心通胶囊葛根素龙胆苦苷阿魏酸毛蕊花糖苷丹酚酸B 丹皮酚含量

高效液相色谱-二极管阵列检测器法测定洋葱中的硫化丙烯和烯丙基硫醚

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食品与发酵工业 2024年第6期50卷 241-246页

作者：任兴权赵俊刘盼霍文清酒泉市食品检验检测中心甘肃酒泉735000

该研究建立了高效液相色谱-二极管阵列检测器法测定洋葱中的硫化丙烯和烯丙基硫醚方法。样品中加入丁硫醇后经乙腈提取,用无水硫酸钠吸收多余的水分后离心,用Thermo Hypersil GOLD液相色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈和水为流动相,... 详细信息

该研究建立了高效液相色谱-二极管阵列检测器法测定洋葱中的硫化丙烯和烯丙基硫醚方法。样品中加入丁硫醇后经乙腈提取,用无水硫酸钠吸收多余的水分后离心,用Thermo Hypersil GOLD液相色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈和水为流动相,流速为1.0 mL/min,柱温为35℃,进样量为10μL,高效液相色谱-二极管阵列检测器检测范围为190~400 nm,检测波长为200 nm。硫化丙烯和烯丙基硫醚在1~100μg/mL质量浓度内线性相关系数R为0.99997~0.99998,方法检出限为0.5 mg/kg,定量限为1.5 mg/kg,5、10、15μg/mL 3个浓度加标水平的回收率为96%~103%,相对标准偏差分别为0.28%~0.49%。该方法前处理简单,科学性、准确性、重现性、精密性好,适用于洋葱中硫化丙烯和烯丙基硫醚分析检测。

关键词：高效液相色谱二极管阵列检测器洋葱硫化丙烯烯丙基硫醚

水生蔬菜答农民问(53-2):我国菱角有哪些传统利用特点?现代贮藏保鲜及加工利用情况如何?

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长江蔬菜 2022年第7期 48-51页

作者：刘义满魏玉翔黄剑河万元香刘倩武汉市农业科学院武汉市430065 武汉市新洲区公共检验检测中心武汉市农业技术推广中心

多年来,笔者经常接到莲藕等水生蔬菜种植户的咨询,他们大多是农民,也有企业家。笔者也经常到全国各产区进行现场调研及技术咨询和讲座,到各级广播电台农业节目中进行咨询和讲座。在与种植户的交流中,接触到了大量从种植者角度提出来的... 详细信息

多年来,笔者经常接到莲藕等水生蔬菜种植户的咨询,他们大多是农民,也有企业家。笔者也经常到全国各产区进行现场调研及技术咨询和讲座,到各级广播电台农业节目中进行咨询和讲座。在与种植户的交流中,接触到了大量从种植者角度提出来的问题。最近几年,更是通过电话、彩信、微信、QQ及电子邮件等方式,接触到大量从事莲藕等水生蔬菜种植的年轻人提出的问题。为此,笔者对种植者特别是青年种植者提出的部分问题进行整理,并力求进行较为全面的回答。

关键词：水生蔬菜技术咨询贮藏保鲜电子邮件蔬菜种植户农业节目