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TGFBR2基因rs424578035突变对绵羊季节性繁殖的影响

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中国畜牧杂志 2024年

作者：刘辰晖张平香余婕钟朱夏向敏胡修忠王定发熊琪程蕾武汉市农业科学院湖北省农业科学院畜牧兽医研究所/动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室

为探究绵羊四季繁殖性状的关键调控基因及机制，本研究利用全基因组选择压力检验、蛋白结构和理化性质预测以及荧光定量PCR对绵羊四季繁殖性状的候选基因进行了筛选和初步验证。结果显示：TGFBR2基因的rs424578035突变位点在季节性繁殖... 详细信息

为探究绵羊四季繁殖性状的关键调控基因及机制，本研究利用全基因组选择压力检验、蛋白结构和理化性质预测以及荧光定量PCR对绵羊四季繁殖性状的候选基因进行了筛选和初步验证。结果显示：TGFBR2基因的rs424578035突变位点在季节性繁殖和四季繁殖蒙系绵羊群体间受选择，且该突变在2种绵羊群体中的分布存在显著差异；该突变将导致TGFβR2蛋白的第24个氨基酸由丙氨酸突变为缬氨酸，可能改变TGFβR2蛋白胞外结构的疏水性和稳定性；相较于rs424578035位点为TC/TT型湖羊，CC型个体下丘脑MMP2、MMP9基因的mRNA表达量显著提高，卵巢中TIMP2基因的mRNA表达量极显著提高。以上结果表明，TGFBR2基因的rs424578035突变是诱导绵羊四季繁殖性状形成的候选突变，并可能介导了TGF-β信号通路对下游MMPs基因表达量的调控，最终导致绵羊季节性繁殖性状的消失和繁殖性状形成。

关键词：绵羊季节性繁殖 TGFBR2基因下丘脑-垂体-卵巢轴 TGF-β信号通路

饲粮表观代谢能水平对1~28日龄三穗鸭生长性能、屠宰性能及血浆生化指标的影响

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中国畜牧兽医 2024年第3期51卷 1069-1076页

作者：韩雪李美娟代国滔王清峰冯宇隆贵州省农业科学院贵州省畜牧兽医研究所贵阳550005

【目的】探究饲粮表观代谢能(apparent metabolizable energy,AME)水平对1~28日龄三穗鸭生长性能、屠宰性能及血浆生化指标的影响,并根据回归模型估算AME需要量。【方法】试验选取336只健康1日龄三穗鸭公鸭,采用单因子完全随机设计将试... 详细信息

【目的】探究饲粮表观代谢能(apparent metabolizable energy,AME)水平对1~28日龄三穗鸭生长性能、屠宰性能及血浆生化指标的影响,并根据回归模型估算AME需要量。【方法】试验选取336只健康1日龄三穗鸭公鸭,采用单因子完全随机设计将试验鸭平分为6组,每组7个重复,每个重复8只鸭。试验鸭分别饲喂AME为10.92、11.38、11.80、12.26、12.68和13.14 MJ/kg的玉米-豆粕型饲粮,试验期28 d。试验结束后,统计生长性能、屠宰性能,并检测血浆生化指标。【结果】饲粮AME水平显著影响日增重、料重比和腹脂率(P0.05);饲粮AME水平显著影响血浆谷草转氨酶(AST)活性(P0.05)。基于直线-折线回归模型,以料重比、日增重和腹脂率为评价指标估测1~28日龄三穗鸭AME最低需要量分别为11.83、11.42和12.24 MJ/kg。【结论】饲喂11.38 MJ/kg AME饲粮可有效改善1~28日龄三穗鸭日增重和料重比,并降低腹脂率。综合考虑,1~28日龄三穗鸭AME最适需要量为11.42~12.24 MJ/kg。

关键词：三穗鸭表观代谢能(AME) 屠宰性能生长性能需要量

山东某规模化鸡场鸡毒支原体的分离鉴定、基因分型、耐药性和致病性分析

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微生物学通报 2024年第10期 4230-4244页

作者：周峰王晨燕侯博郭锦玥福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心佛山科学技术学院生命科学与工程学院

【背景】鸡毒支原体(Mycoplasma galliscepticum， MG)主要引起家禽慢性呼吸道疾病，不同地区MG菌株的耐药性和致病性差异大，给临床防控增加了难度。【目的】明确山东省烟台市某规模化鸡场MG分离株基因分型、耐药情况及致病力，为该地... 详细信息

【背景】鸡毒支原体(Mycoplasma galliscepticum， MG)主要引起家禽慢性呼吸道疾病，不同地区MG菌株的耐药性和致病性差异大，给临床防控增加了难度。【目的】明确山东省烟台市某规模化鸡场MG分离株基因分型、耐药情况及致病力，为该地区MG防控提供科学依据。【方法】本研究从MG阳性鸡群上腭裂拭子分离、纯化获得MG分离株，利用atpG、plsC、mraW、ugpA、DUF3196、lgT和dppC共7个管家基因进行多位点序列分型(multilocus sequence typing，MLST)，并构建系统发育树。测定分离株对金霉素、大观霉素、林可霉素、泰乐菌素、泰万菌素、泰妙菌素、沃尼妙林和多西环素的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration， MIC)，并对相关耐药基因23S rRNA基因V结构域、L4及L22蛋白基因测序并分析。通过点眼攻毒和气管攻毒两种方式感染28日龄SPF鸡，评价感染10、20和30 d后气囊炎的发病率、气管组织MG载量和病理损伤。【结果】分离纯化9株MG，其中菌株YTX2、YTX5.6、YTX11、YTX12、YTX13、YTX14和YTX15的管家基因plsC和mraW首次发现新的等位基因，ID号分别为33和31，这7株MG分离株属于ST97型，而菌株YTX9和YTX10属于ST16型。所有MG分离株对沃尼妙林和泰妙菌素敏感(MIC≤0.25 μg/mL)，对泰万菌素和多西环素次之(MIC≤4 μg/mL)，对金霉素和林可霉素有一定程度耐药(MIC≥16 μg/mL)；属于ST97的7个MG分离株对泰乐菌素存在中等程度耐药(MIC：4-8 μg/mL)；选取菌株YTX5.6、YTX2和YTX10对耐药性相关的23S rRNA基因V结构域、L4和L22蛋白基因测序分析，菌株YTX5.6和YTX2在23S rRNA基因V结构域发生A2069G突变；菌株YTX5.6和YTX2的L4蛋白基因出现G568T突变，在L22蛋白基因上出现T102C、T129C、T252C、C336T和G404A突变；对泰万菌素、泰乐菌素、泰妙菌素、沃尼妙林和多西环素敏感的YTX10株与对照菌株MG Rlow株序列一致，未发生突变。在感染后10、20和30 d，菌株YTX5.6气管攻毒组气囊炎发病率分别为80%、60%和80%；菌株YTX10气管攻毒组仅在感染后20 d和30 d出现气囊炎，发病率分别为40%和20%，其余组在整个实验过程中均未发现明显气囊炎。气管攻毒组的鸡在整个感染过程中气管黏膜增厚情况均比点眼攻毒组严重(P研究从山东烟台某规模化鸡群共分离9株MG菌株，分别属于ST97和ST16基因型，分离株对目前常用抗生素存在不同程度的耐药性，动物感染试验表明不同基因型菌株存在不同致病力。

关键词：鸡毒支原体耐药性多位点序列分型 MIC测定致病性

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发酵桑枝叶粉对蛋鸡生产性能、蛋品质、肠道组织形态的影响

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草地学报 2024年第4期32卷 1259-1266页

作者：黄静赵娜郭万正金枫陈芳朱伟樊启文杜恩存陶文静黄少文魏金涛湖北省农业科学院畜牧兽医研究所动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室湖北武汉430064 咸宁市农业科学院湖北咸宁437000

为探究发酵桑枝叶粉对蛋鸡生产性能、蛋品质、肠道组织形态的影响,试验选用36周龄蛋鸡360只,随机分为4组,对照组饲喂基础饲粮,试验组分别用3%,6%,9%发酵桑枝叶粉替代等量的基础饲粮。结果表明:与对照组相比,1—4周各试验组产蛋率显著降... 详细信息

为探究发酵桑枝叶粉对蛋鸡生产性能、蛋品质、肠道组织形态的影响,试验选用36周龄蛋鸡360只,随机分为4组,对照组饲喂基础饲粮,试验组分别用3%,6%,9%发酵桑枝叶粉替代等量的基础饲粮。结果表明:与对照组相比,1—4周各试验组产蛋率显著降低(P<0.05),5—8周各试验组不合格蛋率显著提高(P<0.05),9—12周3%发酵组不合格蛋率显著提高(P<0.05),6%和9%发酵组显著降低(P<0.05);第4周末各试验组鸡蛋蛋白高度、3%和9%发酵组哈氏单位、6%发酵组蛋壳厚度显著提高(P<0.05),第12周末各试验组蛋黄胆固醇含量显著降低(P<0.05);9%发酵组肝脏指数、各试验组肝脏甘油三酯含量显著降低(P<0.05);3%和6%发酵组空肠绒毛高度、6%和9%发酵组回肠绒隐比显著增加(P<0.05)。本试验条件下,在蛋鸡饲粮中使用6%发酵桑枝叶粉(桑枝叶粉含量50%)最为适宜。

关键词：发酵桑枝叶粉蛋鸡生产性能蛋品质肠道组织形态

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一种谷氨酸棒杆菌4-异丙基苯甲酸诱导型启动子的设计与应用

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生物技术通报 2024年第7期40卷 108-116页

作者：毋舒宁苏永平李冬雪柏映国刘波张志伟山西农业大学林学院太谷030801 中国农业科学院生物技术研究所北京100081 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京100193

【目的】谷氨酸棒杆菌是一种重要的工业微生物,挖掘可调控性元件可有效拓展谷氨酸棒杆菌研究和应用的广度和深度。【方法】在谷氨酸棒杆菌组成型强启动子P_(H10)上嵌入阻遏蛋白CymR结合的操纵序列CuO,构建了4-异丙基苯甲酸(Cumate)为诱... 详细信息

【目的】谷氨酸棒杆菌是一种重要的工业微生物,挖掘可调控性元件可有效拓展谷氨酸棒杆菌研究和应用的广度和深度。【方法】在谷氨酸棒杆菌组成型强启动子P_(H10)上嵌入阻遏蛋白CymR结合的操纵序列CuO,构建了4-异丙基苯甲酸(Cumate)为诱导剂的启动子P_(H10-CuO)。【结果】绿色荧光蛋白作为报告基因的实验结果显示,无诱导剂时,谷氨酸棒杆菌工程菌相对荧光强度较低;以25μg/mL 4-异丙基苯甲酸诱导12 h时,谷氨酸棒杆菌工程菌荧光强度达62000,证明P_(H10-CuO)具有很好的严谨性和诱导表达强度。构建了以启动子P_(H10-CuO)调控recET和Cas12a表达的谷氨酸棒杆菌基因编辑质粒,实现谷氨酸棒杆菌染色体上靶标基因的精准编辑和外源基因插入。【结论】诱导型启动子P_(H10-CuO)具有表达强度高且渗漏表达低的特点,可用于谷氨酸棒杆菌中被其调控基因的时序性表达。

关键词：谷氨酸棒杆菌诱导型启动子阻遏蛋白CymR 4-异丙基苯甲酸

紫花苜蓿SAUR基因家族的鉴定及其在非生物胁迫中的表达模式研究

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草业学报 2024年第4期33卷 135-153页

作者：刘昊李显炀何飞王雪李明娜龙瑞才康俊梅杨青川陈林中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京100193 青岛农业大学草业学院山东青岛266109

SAUR(small auxin-up RNA)是植物早期响应生长素的一类基因,参与植物生长发育与非生物胁迫响应等一系列生物过程。在拟南芥、水稻、棉花等物种中已经对SAUR基因家族进行了系统鉴定与分析,但是,在世界上最重要的豆科牧草紫花苜蓿中关于S... 详细信息

SAUR(small auxin-up RNA)是植物早期响应生长素的一类基因,参与植物生长发育与非生物胁迫响应等一系列生物过程。在拟南芥、水稻、棉花等物种中已经对SAUR基因家族进行了系统鉴定与分析,但是,在世界上最重要的豆科牧草紫花苜蓿中关于SAUR基因家族的研究尚未开展。本研究利用生物信息学的方法在紫花苜蓿参考基因组共鉴定到433个MsSAUR成员,并对其基因组位置、基因结构、启动子顺式作用元件以及不同组织中的表达模式进行了分析。同时,利用紫花苜蓿在不同非生物胁迫下的转录组数据,发现有5、11、19以及12个MsSAUR成员分别响应干旱、盐、冷以及碱胁迫,MsSAUR14/94/254可以同时响应干旱和盐胁迫,MsSAUR297可以同时响应干旱、盐以及碱胁迫,MsSAUR306可以同时响应干旱、盐以及冷胁迫。本研究结果可为后期通过基因工程技术创制高产抗逆新种质提供重要的候选基因。

关键词：紫花苜蓿 SAUR基因全基因组鉴定非生物胁迫表达模式

中华鳖源按蚊伊丽莎白菌的分离鉴定及药敏特性研究

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水生生物学报 2024年第4期48卷 683-693页

作者：王玉柱蒋巍巍刘文舒路晶晶唐艳强肖海红郭小泽李思明江西省农业科学院畜牧兽医研究所南昌330200 四川农业大学动物科技学院成都611130

研究对从江西省抚州市南丰县某中华鳖养殖基地患病中华鳖(Trionyx sinensis)组织中分离培养得到的一株按蚊伊丽莎白菌(Elizabethkingia anophelis)疑似菌株进行鉴定和药敏特性研究。在无菌环境中解剖患病中华鳖得到肝脏、脾脏组织,匀浆... 详细信息

研究对从江西省抚州市南丰县某中华鳖养殖基地患病中华鳖(Trionyx sinensis)组织中分离培养得到的一株按蚊伊丽莎白菌(Elizabethkingia anophelis)疑似菌株进行鉴定和药敏特性研究。在无菌环境中解剖患病中华鳖得到肝脏、脾脏组织,匀浆后接种在LB培养基上,分离得到优势菌株EJX2021。对该菌株进行形态学观察、16S RNA基因序列测定和生理生化鉴定以鉴定菌株种类;进行人工回归感染、组织病理学观察、毒力因子分析和抗生素药物敏感性试验研究其致病能力和药物敏感性特征。从患病中华鳖中分离出一株优势菌株EJX2021,结合其表型特征、16S RNA基因序列测定和生理生化鉴定,确定其为按蚊伊丽莎白菌。在人工回归感染后,该菌株对中华鳖15d的LD50为1.62×10^(8)CFU/mL,95%置信区间为(0.78—3.37)×10^(8)CFU/mL;组织病理学观察肠道、肺脏、脾脏、肝脏等组织出现不同程度病变。毒力因子分析显示该菌株包含246个潜在毒力基因。药物敏感性试验显示该菌株为多重耐药菌株,对多西环素、米诺环素、卡那霉素、哌拉西林、恩诺沙星、氟苯尼考敏感,对头孢曲松、头孢哌酮中度敏感,对新霉素等15种抗生素具有耐药性。研究证明了按蚊伊丽莎白菌是能够导致中华鳖病害的一种病原菌,为该细菌导致中华鳖病害的检测、鉴别和防治提供科学依据。

关键词：按蚊伊丽莎白菌分离鉴定药敏特性中华鳖

紫花苜蓿MsBBX20基因克隆及耐盐功能分析

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草业学报 2024年第10期33卷 55-73页

作者：周昕越蒋庆雪贾会丽马琳樊璐王学敏中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京100193 山西农业大学草业学院山西太原030032

BBX家族转录因子参与光形态建成、成花生理、避荫反应、种子生长发育、激素信号转导及对逆境胁迫的响应等植物重要生长发育过程。紫花苜蓿是耐盐性较强的牧草饲料作物,其品质优良,有“牧草之王”的美誉。发掘并探索紫花苜蓿MsBBX20基因... 详细信息

BBX家族转录因子参与光形态建成、成花生理、避荫反应、种子生长发育、激素信号转导及对逆境胁迫的响应等植物重要生长发育过程。紫花苜蓿是耐盐性较强的牧草饲料作物,其品质优良,有“牧草之王”的美誉。发掘并探索紫花苜蓿MsBBX20基因响应非生物胁迫的分子机理,有助于揭示紫花苜蓿抗逆生物学基础,为紫花苜蓿抗逆分子育种提供新的基因资源。通过RT-PCR、3'/5'RACE PCR技术克隆得到MsBBX20基因cDNA序列,生物信息学分析发现其CDS全长834 bp,编码278个氨基酸,该基因编码的蛋白质为锌指结构蛋白家族成员。利用qRTPCR技术分析MsBBX20在紫花苜蓿不同组织和不同非生物胁迫下的表达模式。通过基因枪轰击技术,在洋葱表皮瞬时表达MsBBX20进行亚细胞定位。克隆得到大小为1737 bp的MsBBX20启动子序列并分析了顺式作用元件,该启动子可驱动GUS报告基因在烟草的叶、茎和根中高效表达。将MsBBX20启动子序列与包含GUS基因的pCAMBIA-1301载体连接,瞬时转化烟草并通过组织化学染色对不同组织进行GUS活性分析。构建pCAMBIA3301-MsBBX20植物超表达载体,通过农杆菌介导的方法遗传转化野生型拟南芥,获得超表达MsBBX20的拟南芥株系。用不同浓度盐溶液(150、200和300 mmol·L^(-1)NaCl)处理拟南芥转基因株系并分析其MDA含量和抗氧化酶活性。进化分析表明紫花苜蓿MsBBX20蛋白与红三叶TpBBX20的亲缘关系最近。MsBBX20蛋白定位于细胞核。MsBBX20基因在花中表达量最高,且MsBBX20可以响应干旱、盐、冷、脱落酸、赤霉素、光照等多种非生物胁迫。遗传转化获得MsBBX20过表达拟南芥株系,并选择3个高表达阳性株系进行功能验证。在不同浓度NaCl处理条件下,过量表达MsBBX20的拟南芥株系的丙二醛(MDA)含量显著低于对照,而超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)活性均显著高于对照。克隆获得紫花苜蓿锌指蛋白转录因子基因MsBBX20,该基因在花中表达量最高,能够响应多种非生物逆境胁迫和外源激素处理,表明MsBBX20可能参与紫花苜蓿的多个逆境响应过程。进一步的研究证明MsBBX20可能通过调节植物的抗氧化酶系统,缓解逆境造成的植物细胞氧化损伤,提高转基因拟南芥对盐胁迫的抗性,进而增强植株的耐盐性。

关键词：紫花苜蓿 MsBBX20 基因克隆耐盐性功能分析

发酵酒糟对西威牛血液、分泌型免疫球蛋白A和肠道黏膜相关菌群的影响

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中国饲料 2024年第7期 121-125页

作者：禹光美郑如雯吴道义王彬黄涛贵州大学动物科学学院贵州贵阳550025 毕节市畜牧兽医科学研究所贵州毕节551700

为研究发酵酒糟对西威牛免疫指标、炎症指标以及十二指肠细菌群落的影响,试验将18头西威公牛随机分为3组,对照组饲喂基础饲粮,试验1、2组分别添加15%、30%发酵酒糟,预试期15 d,正试期90 d。结果表明:与对照组相比,试验1组免疫球蛋白G(I... 详细信息

为研究发酵酒糟对西威牛免疫指标、炎症指标以及十二指肠细菌群落的影响,试验将18头西威公牛随机分为3组,对照组饲喂基础饲粮,试验1、2组分别添加15%、30%发酵酒糟,预试期15 d,正试期90 d。结果表明:与对照组相比,试验1组免疫球蛋白G(IgG)、分泌型免疫球蛋白A(SIgA)、Muribaculaceae分别显著提高了18.83%、27.99%、25.77%(P<0.05),试验1组疣微菌科UCG-010极显著降低了10.43%(P<0.01),试验2组白介素2、白介素4、白介素6、CD8、免疫球蛋白A、变形菌门、放线菌门、纤维杆菌门、疣微菌门和Muribaculaceae分别显著提高了22.22%、17.43%、19.31%、11.91%、18.91%、31.64%、41.5%、50%、42.86%和25.41%(P<0.05),试验2组瘤胃菌科显著降低了27.17%(P<0.05),试验2组CD4分子、IgG、SIgA和毛螺菌科分别极显著提高了14.53%、24.89%、38.52%和50%(P<0.01),试验2组疣微菌科UCG-010极显著降低24.51%(P<0.01)。与试验1组相比,试验2组CD4分子、毛螺菌科分别显著提高了6.01%、21.36%(P<0.05),试验2组普雷沃氏菌科显著降低了29.20%(P<0.05),试验2组疣微菌科UCG-010极显著降低了12.75%(P<0.01)。由此可见,饲粮添加30%发酵酒糟可提高西威牛的免疫力、降低炎症反应、改善十二指肠菌群,效果优于添加15%发酵酒糟。

关键词：发酵酒糟西威牛免疫肠道菌群