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葛根素调控SIRT1-FOXO1信号通路介导的自噬对类固醇诱导的成骨细胞凋亡的影响

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中国骨质疏松杂志 2024年

作者：周凡高扬胡艳平向超万骐周茹武汉市中医医院骨科武汉市中医医院脑病科

目的探讨葛根素（PR）调节沉默信息调节因子1（SIRT1）-叉头状转录因子O1（FOXO1）信号通路对类固醇诱导的成骨细胞自噬和凋亡的影响。方法用浓度为0～50μmol/L的PR及10μmol/L的地塞米松（DEX）共同处理小鼠成骨细胞（MC3T3-E1），MT... 详细信息

目的探讨葛根素（PR）调节沉默信息调节因子1（SIRT1）-叉头状转录因子O1（FOXO1）信号通路对类固醇诱导的成骨细胞自噬和凋亡的影响。方法用浓度为0～50μmol/L的PR及10μmol/L的地塞米松（DEX）共同处理小鼠成骨细胞（MC3T3-E1），MTT法筛选最佳PR作用浓度；将MC3T3-E1细胞分为对照组（不进行任何干预）、DEX组（10μmol/LDEX）、PR+DEX组（10μmol/LDEX+40μmol/LPR）、DEX+EX527组（10μmol/LDEX+100nmol/L的SIRT1抑制剂EX527）、PR+DEX+EX527组（10μmol/LDEX+40μmol/LPR+100nmol/LEX527），MTT法、流式细胞术、MDC法测定各组细胞增殖活力、凋亡率及细胞自噬数量；WesternBlot检测SIRT1-FOXO1通路相关蛋白、自噬标志蛋白Beclin-1、LC3及凋亡蛋白Bax、Bcl-2表达水平。结果 0～40μmol/L的PR可促进DEX诱导的MC3T3-E1细胞增殖活力，40μmol/LPR处理后MC3T3-E1细胞增殖活力最高，选择40μmol/LPR进行后续实验。与对照组比较，DEX组MC3T3-E1细胞增殖活力、自噬阳性率、SIRT1、FOXO1、Beclin-1、LC3、Bax蛋白表达均降低，凋亡率及Bcl-2蛋白表达升高（P＜0.0.5）；与DEX组对比，PR+DEX组凋亡率及Bcl-2蛋白表达降低，上述其余指标均升高（P＜0.0.5），DEX+EX527组凋亡率及Bcl-2蛋白表达升高，上述其余指标均降低（P＜0.0.5）；与PR+DEX组对比，PR+DEX+EX527组凋亡率及Bcl-2蛋白表达升高，上述其余指标均降低（P＜0.0.5）。结论 PR可通过激活SIRT1-FOXO1信号通路增强MC3T3-E1细胞自噬进而抑制DEX诱导的细胞凋亡。

关键词：葛根素沉默信息调节因子1(SIRT1)-叉头状转录因子O1(FOXO1) 类固醇成骨细胞自噬

白藜芦醇通过调节SIRT1/AMPK信号通路介导自噬反应对膝关节骨性关节炎大鼠细胞凋亡的影响

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中国免疫学杂志 2024年第3期40卷 466-470,477页

作者：张磊赵敏武汉市中医医院骨科武汉430000

目的:从沉默信息调节因子1(SIRT1)/腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)信号通路介导自噬角度,探讨白藜芦醇对大鼠膝关节骨性关节炎(KOA)软骨细胞凋亡的影响。方法:50只健康Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、白藜芦醇组、白藜芦醇+SIRT1抑制剂... 详细信息

目的:从沉默信息调节因子1(SIRT1)/腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)信号通路介导自噬角度,探讨白藜芦醇对大鼠膝关节骨性关节炎(KOA)软骨细胞凋亡的影响。方法:50只健康Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、白藜芦醇组、白藜芦醇+SIRT1抑制剂组、自噬激活剂组,每组10只。除对照组外其余大鼠均通过注射弗氏完全佐剂造模法复制KOA大鼠模型,白藜芦醇组、白藜芦醇+AMPK抑制剂组、自噬激活剂组分别使用10μmol/kg白藜芦醇、10μmol/kg白藜芦醇+10 mg/kg EX527、2 mg/kg雷帕霉素进行干预,4周后,观察大鼠Lequesne MG膝关节级别;测定大鼠膝关节液中IL-6、肿瘤坏死因子β(TNF-β)水平;HE染色与TUNEL染色观测大鼠膝关节软骨组织形态及凋亡情况;透射电子显微镜观察大鼠软骨细胞自噬情况;Western blot法检测SIRT1、p-AMPK、AMPK、LC3、Beclin-1蛋白表达。结果:与对照组相比,模型组局部反应、步态反应、关节活动、关节肿胀程度加重(P<0.05);与模型组相比,白藜芦醇组、自噬激活剂组局部反应、步态反应、关节活动、关节肿胀程度减轻(P<0.05)。与对照组相比,模型组大鼠软骨组织细胞排列紊乱,粗糙,存在纤维化变性、边缘丘状隆起,细胞器减少,可见空泡变性,自噬小体数目增多,膝关节液IL-6、TNF-β水平、软骨细胞凋亡率、Beclin-1和LC3B/A升高(P<0.05),软骨组织SIRT1、p-AMPK/AMPK降低(P<0.05);与模型组相比,白藜芦醇组、自噬激活剂组大鼠软骨组织细胞排列紊乱、边缘丘状隆起等现象有改善,自噬小体数目增多,膝关节液IL-6、TNF-β水平、软骨细胞凋亡率降低(P<0.05),软骨组织SIRT1、p-AMPK/AMPK、Beclin-1和LC3B/A水平升高(P<0.05);SIRT1抑制剂可逆转白藜芦醇组对大鼠软骨细胞的保护作用。结论:白藜芦醇可能是通过激活SIRT1/AMPK通路介导自噬KOA大鼠软骨细胞凋亡,SIRT1抑制剂可逆转此过程。

关键词：膝关节骨性关节炎白藜芦醇自噬沉默信息调节因子1/腺苷酸活化蛋白激酶

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关节镜监视下复位经皮空心螺钉固定后踝骨折

中国矫形外科杂志 2024年第8期32卷 750-754页

作者：赵晶晶方真华谢鸣贺明娟武汉市第四医院(武汉市骨科医院骨科) 湖北武汉430033

[目的]介绍关节镜监视下复位经皮螺钉固定后踝移位骨折的手术技术及初步临床效果。[方法] 2019年9月—2022年9月采用后侧入路关节镜监视下复位后踝骨折块、经皮空心螺钉固定手术技术治疗31例踝关节骨折。于内踝尖水平,跟腱两侧旁开1.5 c... 详细信息

[目的]介绍关节镜监视下复位经皮螺钉固定后踝移位骨折的手术技术及初步临床效果。[方法] 2019年9月—2022年9月采用后侧入路关节镜监视下复位后踝骨折块、经皮空心螺钉固定手术技术治疗31例踝关节骨折。于内踝尖水平,跟腱两侧旁开1.5 cm作为关节镜入路,显露后踝骨折块向近端移位形成的胫骨远端关节软骨面台阶,关节镜监视下经皮撬拨复位后踝骨折块并置入空心螺钉固定。[结果] 31例患者均顺利完成手术,无血管神经损伤并发症,手术伤口均一期愈合,骨折愈合时间平均(9.4±2.3)周。与术前相比,末次随访时VAS评分[(6.1±1.9),(0.7±1.9), P<0.001]、AOFAS评分[(38.2±11.7),(97.4±5.8), P<0.001]、Maryland评分[(52.7±17.1),(95.5±6.3), P<0.001]均显著改善。术后影像显示28例关节弧面平整或台阶<1mm,3例关节内台阶<2 mm。[结论]此技术能够直视关节软骨面复位过程,准确复位,踝关节功能恢复良好,胫骨后侧软组织剥离范围减少,缩短骨愈合时间。

关键词：后踝骨折关节镜经皮空心钉固定

基于AMPK/PGC1α信号通路探究降脂逐瘀汤对动脉粥样硬化大鼠脂代谢的影响

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中国免疫学杂志 2024年第9期 1902-1907页

作者：张志勇田辉武汉市中医医院

目的：基于AMPK/PGC1α信号通路探究降脂逐瘀汤对动脉粥样硬化（AS）大鼠脂代谢的影响。方法：高脂饲料喂养及腹腔注射维生素D3诱导建立AS大鼠模型，随机分为模型组、降脂逐瘀汤（3.75 g/kg）低剂量组、降脂逐瘀汤（7.5 g/kg）中剂量组... 详细信息

目的：基于AMPK/PGC1α信号通路探究降脂逐瘀汤对动脉粥样硬化（AS）大鼠脂代谢的影响。方法：高脂饲料喂养及腹腔注射维生素D3诱导建立AS大鼠模型，随机分为模型组、降脂逐瘀汤（3.75 g/kg）低剂量组、降脂逐瘀汤（7.5 g/kg）中剂量组、降脂逐瘀汤（15 g/kg）高剂量组、降脂逐瘀汤（15 g/kg）高剂量+盐酸多索啡（AMPK抑制剂，0.2 mg/kg）组，每组12只，另取12只正常SD大鼠喂养普通饮食及腹腔注射生理盐水作为对照组。经降脂逐瘀汤和盐酸多索啡分组干预处理各组大鼠后，检测大鼠甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平；HE染色检测大鼠主动脉组织病理变化；油红O染色检测各组大鼠主动脉和肝脏脂质沉积；酶标仪测定大鼠血清炎症因子IL-8、IL-1β、IL-18水平；免疫印迹法检测大鼠主动脉组织AMPK/PGC1α通路蛋白表达。结果：与对照组相比，模型组大鼠主动脉组织发生严重病理损伤，主动脉和肝脏组织中有大量脂质沉积，肝脏脂肪变性严重，血清LDL-C、TC、TG、IL-8、IL-1β、IL-18水平显著升高（P<0.05），血清HDL-C水平、主动脉组织p-AMPK/AMPK与PGC1α蛋白表达显著降低（P<0.05）。与模型组相比，降脂逐瘀汤各剂量组大鼠主动脉组织病理损伤、主动脉脂质沉积和肝脏脂肪变性症状均减轻，血清LDL-C、TC、TG、IL-8、IL-1β、IL-18水平均降低（P<0.05），血清HDL-C水平、主动脉组织p-AMPK/AMPK与PGC1α蛋白表达均升高（P<0.05），且呈剂量依赖性（P<0.05）；与降脂逐瘀汤高剂量组相比，降脂逐瘀汤高剂量+盐酸多索啡组大鼠主动脉组织病理损伤、主动脉脂质沉积和肝脏脂肪变性症状加重，血清LDL-C、TC、TG、IL-8、IL-1β、IL-18水平升高（P<0.05），血清HDL-C水平、主动脉组织p-AMPK/AMPK与PGC1α蛋白表达降低（P<0.05）。结论：降脂逐瘀汤可通过激活AMPK/PGC1α信号抵抗炎症发生发展，减轻大鼠主动脉组织病理损伤、主动脉脂质沉积和肝脏脂肪变性症状，改善AS大鼠脂代谢。

关键词： AMPK/PGC1α 降脂逐瘀汤动脉粥样硬化脂代谢

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锁骨双极损伤的诊疗分析

中华手外科杂志 2024年第1期40卷 53-56页

作者：张明邢丹谋任东冯伟钱隆陈焱王欢吴其鹏肖济阳武汉市第四医院骨科武汉430030

目的探讨锁骨双极损伤的发生机制及其治疗效果。方法回顾性分析2013年1月至2023年1月在我院行锁骨双极损伤治疗的8例患者,均合并一处或多处其他部位损伤。根据锁骨损伤情况分为:双极脱位2例、肩锁关节脱位合并锁骨近端骨折2例、锁骨远... 详细信息

目的探讨锁骨双极损伤的发生机制及其治疗效果。方法回顾性分析2013年1月至2023年1月在我院行锁骨双极损伤治疗的8例患者,均合并一处或多处其他部位损伤。根据锁骨损伤情况分为:双极脱位2例、肩锁关节脱位合并锁骨近端骨折2例、锁骨远端骨折合并胸锁关节脱位1例、双极骨折3例。随访期间观察骨折愈合情况、术后并发症及患肢肩关节活动范围,采用Constant评分、ASES评分及DASH评分评估患肢功能恢复情况。结果本组8例患者术后随访时间为7~23个月,平均(14.1±6.1)个月。术后3~6个月复查X线片,显示骨折愈合,胸锁关节及肩锁关节无再脱位,无手术相关并发症发生。末次随访时,患者均已恢复正常生活;患肢肩关节平均前屈角度为(155.0±19.5)°,平均外展角度为(149.0±10.9)°;平均Constant评分为85.5±6.7,平均ASES评分为88.3±5.6,平均DASH评分为5.6±3.1。结论锁骨双极损伤非常少见,常伴有合并伤及多发伤。损伤机制及其治疗方案的选择仍存在争议。适当的治疗方案能够取得满意的临床疗效。

关键词：锁骨治疗结果双极损伤损伤机制

虎杖苷通过抑制TGF-β/Smad信号通路改善动脉粥样硬化大鼠动脉粥样硬化斑块和内皮炎症反应

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中国免疫学杂志 2024年第6期40卷 1228-1233页

作者：张志勇田辉武汉市中医医院武汉430014

目的:探讨虎杖苷通过抑制转化生长因子β(TGF-β)/Smad信号通路对动脉粥样硬化(AS)大鼠AS斑块和内皮炎症反应的改善作用。方法:将60只大鼠随机分成空白对照组、模型对照组、虎杖苷低、中、高剂量组和阳性对照组,每组10只。正常对照组大... 详细信息

目的:探讨虎杖苷通过抑制转化生长因子β(TGF-β)/Smad信号通路对动脉粥样硬化(AS)大鼠AS斑块和内皮炎症反应的改善作用。方法:将60只大鼠随机分成空白对照组、模型对照组、虎杖苷低、中、高剂量组和阳性对照组,每组10只。正常对照组大鼠用普通饲料喂养,其余各组大鼠采用高脂饲料喂养与维生素D3腹腔注射联合的方法制备AS大鼠模型。虎杖苷低、中、高剂量组大鼠每天灌胃虎杖苷40、80、160 mg/kg,阳性对照组大鼠每天灌胃辛伐他汀5 mg/kg,模型对照组和空白对照组大鼠每天灌胃等量生理盐水。给药结束后,油红O染色观察大鼠主动脉AS斑块形成情况;全自动生化分析仪检测大鼠三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平;酶联免疫吸附法检测大鼠血清中肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-6、IL-8、C反应蛋白(CRP)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、同型半胱氨酸(Hcy)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)、内皮素-1(ET-1)含量;蛋白免疫印迹法检测大鼠TGF-β1、Smad2/3、p-Smad2/3蛋白表达水平。结果:与空白对照组相比,模型对照组大鼠主动脉内壁出现大量AS斑块,血清中TG、TC、LDL-C水平及TNF-α、IL-6、IL-8、CRP、MCP-1、Hcy、ICAM、ET-1含量明显升高,HDL-C水平明显降低,主动脉组织中TGF-β1蛋白表达、p-Smad2/3/Smad2/3显著升高(P0.05),其余指标均比虎杖苷高剂量组更低(P<0.05)。结论:虎杖苷通过调节血脂、降低细胞炎症因子的表达,从而减少AS斑块的形成,改善AS大鼠体内的炎症反应,其机制与抑制TGF-β/Smad信号通路激活有关。

关键词：虎杖苷 TGF-β/Smad信号通路动脉粥样硬化动脉粥样硬化斑块内皮炎症

骨科手术机器人辅助下微创治疗可间接复位的SchatzkerⅡ、Ⅲ型胫骨平台骨折的疗效分析

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中华创伤骨科杂志 2024年第7期26卷 604-610页

作者：肖飞何文平王俊文焦竞陈明黄玉成程可可雷天润武汉市第四医院骨科武汉430033 湖北省浠水县人民医院骨科黄冈438000

目的探讨骨科手术机器人辅助下微创内固定治疗可间接复位的SchatzkerⅡ、Ⅲ型胫骨平台骨折的疗效。方法回顾性分析2019年12月至2021年12月武汉市第四医院骨科收治的18例SchatzkerⅡ、Ⅲ型胫骨平台骨折患者资料。男12例,女6例;年龄(45.2... 详细信息

目的探讨骨科手术机器人辅助下微创内固定治疗可间接复位的SchatzkerⅡ、Ⅲ型胫骨平台骨折的疗效。方法回顾性分析2019年12月至2021年12月武汉市第四医院骨科收治的18例SchatzkerⅡ、Ⅲ型胫骨平台骨折患者资料。男12例,女6例;年龄(45.2±9.6)岁。均为闭合性骨折,其中6例合并前交叉韧带止点撕脱骨折,1例合并内侧副韧带撕裂,8例合并外侧半月板撕裂。均采用骨科手术机器人辅助下间接复位后"栅栏"螺钉技术微创内固定治疗,合并前交叉韧带止点撕脱骨折和半月板撕裂的患者均一期行关节镜手术治疗,合并内侧副韧带撕裂的患者一期行切开修复。按Rasmussen放射学评分标准评价骨折复位情况,采用美国特种外科医院(HSS)评分评价膝关节功能。结果18例患者术后均获完整随访,时间(10.6±1.9)个月。术后即刻X线片均示骨折复位良好;骨折愈合时间为(11.3±1.2)周。术后6个月膝关节Rasmussen评分为(16.8±1.0)分,其中优5例,良13例。HSS评分为(93.2±3.0)分,其中优17例,良1例。末次随访时无一例患者发生腓总神经损伤、腘血管损伤、术后感染、内固定失效等严重并发症。结论骨科手术机器人辅助下微创内固定治疗SchatzkerⅡ、Ⅲ型胫骨平台骨折效果良好,可以推广应用。

关键词：胫骨骨折外科手术,计算机辅助骨折固定术,内机器人

IGF-1介导MAPKs通路在C3H10T1/2细胞成骨分化中的作用

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中国骨质疏松杂志 2024年第5期30卷 668-672页

作者：李冬董晓俊徐成栋武汉市中医医院骨科传统治疗室湖北武汉430014

目的探究胰岛素样生长因子1(IGF-1)介导丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)信号通路在C3H10T1/2细胞成骨分化中的调控作用及机制。方法不同浓度IGF-1(0、5、10、20 ng/mL)培养C3H10T1/2细胞,碱性磷酸酶(ALP)与茜素红(ARS)染色检测ALP活性、钙盐... 详细信息

目的探究胰岛素样生长因子1(IGF-1)介导丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)信号通路在C3H10T1/2细胞成骨分化中的调控作用及机制。方法不同浓度IGF-1(0、5、10、20 ng/mL)培养C3H10T1/2细胞,碱性磷酸酶(ALP)与茜素红(ARS)染色检测ALP活性、钙盐沉积情况,qRT-PCR法检测成骨特性因子核心结合因子α-1(RUNX2)、成骨分化特异性因子骨桥蛋白(OPN)、骨钙蛋白(OCN)mRNA表达水平,Western Blot法检测MAPK通路蛋白磷酸化表达水平。对数期细胞分为空白组、IGF-1组、ERK通路抑制剂(PD98059)组、PD+IGF-1组、p38通路抑制剂(SB202192)组、SB+IGF-1组,qRT-PCR法检测成骨特性因子RUNX2、成骨分化特异性因子骨桥蛋白(OPN)、骨钙蛋白(OCN)mRNA表达水平。结果不同浓度IGF-1组ALP显色加深,ALP活性升高,钙盐结节形成增多,RUNX2、OPN、OCN mRNA表达水平升高,磷酸化ERK、p38、JNK蛋白表达增加,具有剂量效应(P<0.05)。与空白组比较,PD组、SB组C3H10T1/2细胞RUNX2、OPN、OCN mRNA表达水平明显降低(P<0.05),PD+IGF-1组、SB+IGF-1组C3H10T1/2细胞RUNX2、OPN、OCN mRNA表达水平明显升高(P<0.05);但与IGF-1组比较,PD+IGF-1组、SB+IGF-1组C3H10T1/2细胞RUNX2、OPN、OCN mRNA表达水平明显降低(P<0.05)。结论IGF-1促进C3H10T1/2细胞成骨分化,其作用机制可能与激活ERK信号通路和p38 MAPK信号通路有关。

关键词：胰岛素样生长因子1 丝裂原活化蛋白激酶信号通路 C3H10T1/2细胞成骨分化

动静互补平衡论功能锻炼结合阶梯性康复训练利于全髋关节置换者术后髋关节功能恢复

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四川大学学报（医学版） 2024年第4期55卷 1014-1019页

作者：许德龙韩红左伟冯志勇武汉市第四医院康复医学科武汉430000 武汉市第四医院创伤骨科武汉430000

目的分析动静互补平衡论的功能锻炼结合阶梯性康复训练在全髋关节置换(total hip replacement, THR患者术后髋关节功能恢复的应用价值。方法回顾性收集2022年6月–2023年6月收治的118例THR患者临床资料,其中57例围术期给予阶梯性康复... 详细信息

目的分析动静互补平衡论的功能锻炼结合阶梯性康复训练在全髋关节置换(total hip replacement, THR患者术后髋关节功能恢复的应用价值。方法回顾性收集2022年6月–2023年6月收治的118例THR患者临床资料,其中57例围术期给予阶梯性康复训练(对照组),61例围术期行动静互补平衡论功能锻炼结合阶梯性康复训练(联合组)。记录两组术后恢复情况及术后并发症发生情况,在围术期评估两组患者疼痛[视觉模拟评分法(visual analogue scale, VAS)]及自我效能感[康复自我效能感量表(Self-Efficacy for Rehabilitation Outcome Scale, SER)],比较两组术后2周、4周、8周髋关节功能。结果主要结局指标:联合组术后住院时间为(7.63±1.36) d,低于对照组的(8.22±1.48) d,差异有统计学意义(t=2.257,P=0.026)。次要结局指标:两组术后并发症发生率比较(4.92%vs. 14.04%),差异无统计学意义(P>0.05)。两组围术期VAS评分经重复测量方差检验显示具有交互效应(P<0.05),两组术后VAS评分均较术前降低(P<0.05),且随术后时间的延长逐渐降低(P<0.05),联合组术后7 d及14 d VAS评分低于对照组(P<0.05)。术后14 d,两组应对及任务维度SER评分及其总分均较术后3 d升高(P<0.05),联合组高于对照组(P<0.05)。两组术后畸形、疼痛、功能、关节活动度维度Harris髋关节功能评分及其总分经重复测量方差检验显示具有交互效应(P<0.05),两组Harris髋关节功能各维度评分及其总分均随术后时间的延长逐渐升高(P<0.05),联合组术后4周及8周评分均高于对照组(P<0.05)。结论动静互补平衡论的功能锻炼结合阶梯性康复训练在提高THR患者自我效能感、缓解术后疼痛、减少住院时间和改善患者髋关节功能方面,比单纯进行阶梯性康复训练更具优势。

关键词：全髋关节置换术康复动静互补平衡论髋关节功能自我效能感