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食管鳞癌组织中淋巴管生成2种检测方法比较

郑州大学学报（医学版） 2007年第1期42卷 4-6页

作者：赵阿红宋一民张红新高冬玲张岚张云汉陈奎生郑州大学基础医学院病理学教研室

目的:探讨人食管鳞癌组织中淋巴管生成灵敏的检测方法。方法:分别采用免疫组化SP法(以血管内皮生长因子受体-3为淋巴管特异性标记物)和酶组织化学法检测49例食管鳞癌组织和癌旁组织中淋巴管密度(分别记为LVDi与LVDe)。结果:癌组织中LVD... 详细信息

目的:探讨人食管鳞癌组织中淋巴管生成灵敏的检测方法。方法:分别采用免疫组化SP法(以血管内皮生长因子受体-3为淋巴管特异性标记物)和酶组织化学法检测49例食管鳞癌组织和癌旁组织中淋巴管密度(分别记为LVDi与LVDe)。结果:癌组织中LVDe的表达和癌旁组织中LVDi、LVDe的表达在有、无淋巴结转移时差异均有统计学意义(P<0.01)。有淋巴结转移癌组织中LVDi与LVDe之间差异有统计学意义(P<0.01)。结论:酶组织化学法可较好地显示食管鳞癌组织中的淋巴管。

关键词：食管肿瘤鳞状细胞癌血管内皮生长因子受体-3 淋巴管生成免疫组织化学酶组织化学

大鼠气管损伤修复过程中ABCG2转运蛋白的表达

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解剖学报 2006年第2期37卷 163-167页

作者：王琳琳贾兰玲贾心善中国医科大学基础医学院病理学教研室沈阳110001

目的观察离体大鼠气管上皮损伤修复过程中气管干细胞的动态变化.方法用氟脲嘧啶（5-FU）造成离体大鼠气管上皮损伤,应用间接免疫荧光法和Western blotting动态观测了修复过程中各时间点气管上皮ABCG2的表达.结果 1.5-FU作用12 h后大部... 详细信息

目的观察离体大鼠气管上皮损伤修复过程中气管干细胞的动态变化.方法用氟脲嘧啶（5-FU）造成离体大鼠气管上皮损伤,应用间接免疫荧光法和Western blotting动态观测了修复过程中各时间点气管上皮ABCG2的表达.结果 1.5-FU作用12 h后大部分气管上皮脱落,残留的G0期细胞中部分可见ABCG2表达阳性.去除5-FU后3 h细胞数目增多,为扁平状,ABCG2阳性细胞数也随之增多;6～9 h上皮细胞由扁平变为立方,ABCG2阳性细胞数继续增多;24 h上皮细胞呈立方状,并连接成片,ABCG2阳性细胞较前明显减少;48 h气管上皮接近恢复假复层结构,此时仅见极少量ABCG2阳性细胞.正常气管上皮未检测到ABCG2表达.*** blotting分析表明,ABCG2表达量的变化趋势与免疫荧光结果一致.结论 ABCG2的表达与干细胞的数量呈正相关,可作为气管干细胞的标志物.

关键词： ABCG2 气管干细胞氟脲嘧啶间接免疫荧光法免疫印迹法大鼠

结直肠癌中错配修复功能缺陷／微卫星不稳定状态与免疫检查点抑制剂治疗的研究进展

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中华病理学杂志 2018年第11期47卷 884-886页

作者：王丽袁会军钱震李甜甜刘斌包强伟解放军兰州总医院病理科 730050 兰州大学基础医学院病理学教研室甘肃中医药大学病理学教研室

错配修复（mismatch repair，MMR）系统广泛存在于生物体中，是细胞复制后的一种修复机制，可以矫正DNA重组和复制过程中产生的碱基错配而保持基因组的稳定性。MMR基因除了检验和矫正发生在复制期间的微卫星样重复DNA序列之外，还与之... 详细信息

错配修复（mismatch repair，MMR）系统广泛存在于生物体中，是细胞复制后的一种修复机制，可以矫正DNA重组和复制过程中产生的碱基错配而保持基因组的稳定性。MMR基因除了检验和矫正发生在复制期间的微卫星样重复DNA序列之外，还与之重新结合，一旦MMR基因发生异常改变可导致正常修复功能缺失，造成MMR蛋白（MLH1、MSH2、MSH6、PMS2）中的一种或几种的功能丧失，将这种状态称为细胞错配修复功能缺陷（MMR deficiency，dMMR），dMMR可导致其他基因DNA配对发生错误，这种错误常发生于核酸重复序列，引起移码突变，该小灶性重复区域称作微卫星，微卫星的错配称作微卫星不稳定（microstatellites instability，MSI），反之，无异常改变具有正常修复功能时称为MMR正常（MMR proficient，pMMR）。

关键词：微卫星不稳定错配修复功能缺陷结直肠癌状态抑制剂检查点 MMR基因

用显微切割-PCR检测石蜡标本微小病灶DNA异常

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武汉大学学报（医学版） 2003年第1期24卷 57-60页

作者：邹祖玉刘绚李娜李红钢刘铭球武汉大学医学院病理学教研室武汉430071

目的 :探讨在石蜡切片中行显微切割 PCR检测微小病灶基因突变和微卫星不稳定的方法及意义。方法 :选取本室实验性大鼠肺鳞癌浸润癌伴有支气管粘膜上皮增生、鳞状化生和或不典型增生的蜡块标本 19例 ,分别切割各病变阶段组织并提取DN... 详细信息

目的 :探讨在石蜡切片中行显微切割 PCR检测微小病灶基因突变和微卫星不稳定的方法及意义。方法 :选取本室实验性大鼠肺鳞癌浸润癌伴有支气管粘膜上皮增生、鳞状化生和或不典型增生的蜡块标本 19例 ,分别切割各病变阶段组织并提取DNA用作PCR模板 ;SSCP检测P5 3基因第 5～ 8外显子突变及变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测微卫星点ADRB2 的不稳定现象。结果 :7例支气管粘膜上皮增生 ,1例鳞状化生 ,12例不典型增生 ,19例浸润癌组织都分别成功地显微切割并提取DNA。除 1例上皮增生及 2例不典型增生组织PCR扩增失败外 ,其余切割组织P5 3外显子及微卫星点PCR扩增均获成功。 19例浸润癌组织 10例有P5 3基因突变 ,增生及鳞状化生组织未发现P5 3基因突变 ,10例不典型增生组织有 3例P5 3基因突变 ,这 3例标本中的浸润癌组织也都有相同外显子的突变。所有扩增成功微卫星点均未发现不稳定现象。结论 :在石蜡标本中进行显微切割 PCR检测DNA异常可获得较满意结果。联合应用连续切片 HE染色显微切割 PCR 银染技术使定点对位分析肿瘤发生发展各阶段微小病灶中基因异常得以实现 ,对于研究癌前病变。

关键词：显微切割 PCR 检测石蜡标本微小病灶 DNA异常肺癌

β-榄香烯对大鼠胃癌及癌前病变DNA含量、增殖细胞核抗原表达及端粒酶活性的影响

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复旦学报（医学版） 2001年第5期28卷 378-381页

作者：范钰林庚金钱立平许祖德李华复旦大学附属华山医院消化科上海200040 复旦大学基础医学院病理学教研室上海200032

目的　研究β 榄香烯对癌变大鼠胃黏膜端粒酶活性、增殖细胞核抗原表达及DNA含量的影响。方法　采用MNNG、10 %NaCl混合液及酒精灌胃建立大鼠胃癌模型 ,设立正常空白组、模型组及 β 榄香烯组 ,分别采用免疫组化、Feulgen染色及端粒重... 详细信息

目的　研究β 榄香烯对癌变大鼠胃黏膜端粒酶活性、增殖细胞核抗原表达及DNA含量的影响。方法　采用MNNG、10 %NaCl混合液及酒精灌胃建立大鼠胃癌模型 ,设立正常空白组、模型组及 β 榄香烯组 ,分别采用免疫组化、Feulgen染色及端粒重复扩增微孔板杂交法检测大鼠胃黏膜增殖细胞核抗原表达、DNA含量及端粒酶活性。结果　β 榄香烯组癌变发生率、DNA含量、增殖细胞核抗原表达及端粒酶活性均低于模型组。在大鼠癌变过程中 ,随着胃黏膜癌变的发展 ,DNA含量、增殖细胞核抗原表达及端粒酶活性均呈递增趋势 ,且两者与端粒酶活性具有重要的相关性。结论　β 榄香烯抗癌 ,抑制端粒酶活性是其重要机制之一。

关键词： β-榄香烯胃癌动物实验 DNA 增殖细胞核抗原端粒酶大鼠癌前病变

所谓肺硬化性血管瘤组织中两种主要细胞的雄激素受体、磷酸甘油酸酯激酶基因多态性分析

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中华病理学杂志 2006年第5期35卷 267-271页

作者：齐凤杰张秀伟张永兴戴顺东王恩华中国医科大学基础医学院病理学教研室沈阳110001

目的探讨所谓肺硬化性血管瘤(PSH)组织内的多角形细胞和表面立方细胞的克隆性组成及意义。方法选PSH患者手术切除标本19例,其中女性17例。石蜡切片HE染色,应用激光捕获显微切割技术获取PSH组织中多角形细胞和表面立方细胞,分别提取基因... 详细信息

目的探讨所谓肺硬化性血管瘤(PSH)组织内的多角形细胞和表面立方细胞的克隆性组成及意义。方法选PSH患者手术切除标本19例,其中女性17例。石蜡切片HE染色,应用激光捕获显微切割技术获取PSH组织中多角形细胞和表面立方细胞,分别提取基因组DNA,用甲基化敏感的限制性内切酶HhaⅠ或HpaⅡ消化,巢式聚合酶链反应扩增X染色体连锁的雄激素受体(AR)基因及磷酸甘油酸酯激酶(PGK)基因。AR基因产物经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染显示其长度多态性;PGK基因产物经BstⅪ消化后,琼脂糖电泳显示其酶切位点的多态性。结果17例女性PSH组织,扩增成功AR基因及PGK基因的多态性分别为53%(8/15)和27%(4/15)。对适合于检测的10例标本分别进行AR、PGK位点克隆性分析,所有标本均表现为相同的一条等位基因带完全消失(克隆率=0)或不均衡的甲基化模式(克隆率<0·25)。结论PSH组织中的多角形细胞和表面立方细胞具有相同的单克隆增生模式,提示二者可能均为肿瘤的实质细胞。

关键词：肺肿瘤血管瘤硬化性受体雄激素磷酸甘油酸酯激酶

大鼠胃黏膜癌变发生发展过程中bcl-2基因与端粒酶的动态表达

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复旦学报（医学版） 2001年第6期28卷 479-482页

作者：范钰林庚金钱立平许祖德李华复旦大学附属华山医院消化科上海200040 复旦大学基础医学院病理学教研室上海200032

目的　探讨大鼠胃黏膜癌变发生发展过程中bcl 2基因表达及其与端粒酶活性的关系。方法　采用MNNG、10 %NaCl及 4 0 %乙醇灌胃建立了大鼠胃黏膜癌变模型 ,分别采用原位杂交技术及免疫组织化学方法检测大鼠胃黏膜bcl 2mRNA、蛋白表达 ,采... 详细信息

目的　探讨大鼠胃黏膜癌变发生发展过程中bcl 2基因表达及其与端粒酶活性的关系。方法　采用MNNG、10 %NaCl及 4 0 %乙醇灌胃建立了大鼠胃黏膜癌变模型 ,分别采用原位杂交技术及免疫组织化学方法检测大鼠胃黏膜bcl 2mRNA、蛋白表达 ,采用端粒微孔板杂交法检测胃黏膜端粒酶活性。结果　本造模方法在大鼠胃黏膜诱发出浅表性胃炎 (chronicsuperficialgastritis,CSG)、萎缩性胃炎 (chronicatrophicgastritis,CAG)、肠化生 (intestinalmetaplasia,IM )、异型增生 (dysplasia ,Dys)、胃腺癌 (gastricadenocarcinoma ,GC)等病变。大鼠从正常胃黏膜发展到胃癌 ,bcl 2基因表达及端粒酶活性均逐渐增高 ,并且两者有高度的一致性 (P <0 .0 5 )。结论　大鼠胃黏膜癌变发生发展过程中 ,癌基因bcl

关键词：胃肿瘤 bcl-2 端粒酶肿瘤发生

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肿瘤表观遗传学

基础医学与临床 2011年第2期31卷 204-206页

作者：金铁峰张美花林贞花延边大学基础医学院病理学教研室吉林延吉133000

表观遗传学(epigenetics)是指不涉及核苷酸序列的改变、但以通过有丝分裂和减数分裂进行遗传的生物现象为内容的生命学科。表观遗传修饰异常广泛存在于肿瘤的发生、发展过程中,所以近年来备受研究者们的关注。

关键词：表观遗传学 DNA甲基化组蛋白修饰染色质重塑非编码RNA调控

泛素蛋白酶系统通过稳定PPARγ调节脂肪细胞分化

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中国病理生理杂志 2015年第5期31卷 888-893页

作者：唐照张叶敏李明欣汪长华武汉大学基础医学院病理生理学教研室湖北武汉430071

目的:探讨泛素蛋白酶系统(ubiquitin-proteasome system,UPS)在体外脂肪细胞分化中的作用。方法:常规方法诱导前脂肪细胞分化为脂肪细胞,Western blot检测蛋白质表达,免疫共沉淀检查蛋白质间结合,油红O染色检测脂肪细胞中的脂质,RT-PCR... 详细信息

目的:探讨泛素蛋白酶系统(ubiquitin-proteasome system,UPS)在体外脂肪细胞分化中的作用。方法:常规方法诱导前脂肪细胞分化为脂肪细胞,Western blot检测蛋白质表达,免疫共沉淀检查蛋白质间结合,油红O染色检测脂肪细胞中的脂质,RT-PCR检测mRNA表达。结果:UPS抑制剂硼替佐米可抑制3T3-L1前脂肪细胞分化为脂肪细胞,表现为细胞内脂质含量降低以及脂肪细胞标志蛋白mRNA表达的降低。蛋白激酶G激动剂西地那非可激活UPS,并增强脂肪细胞的分化。抑制UPS可降低热休克蛋白90(HSP90)和过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)间的结合;同时降低细胞可溶性组分中HSP90和PPARγ的表达,增强其在不可溶性组分中的表达。HSP90特异性的N末端抑制剂格尔德霉素可抑制西地那非促进的PPARγ表达和脂肪细胞的分化。结论:泛素蛋白酶系统通过HSP90调节PPARγ的表达,从而影响脂肪细胞的分化。

关键词：泛素蛋白酶系统过氧化物酶体增殖物活化受体γ 热休克蛋白90 脂肪细胞细胞分化