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B4GALNT1表达下调抑制骨肉瘤细胞增殖和转移

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中南大学学报(医学版) 2024年第06期 870-877页

作者：李帅王冰陈夏涂超彭丹戴瑜亮中南大学湘雅二医院脊柱外科湖南省数字化脊柱外科临床研究中心中南大学湘雅二医院骨科

目的：骨肉瘤是儿童和青少年最常见的骨恶性肿瘤，具有极强的增殖和转移潜能。伴有远处转移的骨肉瘤患者的生存预后极差，且骨肉瘤患者在治疗过程中易出现病灶切除不彻底、化学治疗耐药等难题，目前尚缺乏有效的根治手段。近年来，越来... 详细信息

目的：骨肉瘤是儿童和青少年最常见的骨恶性肿瘤，具有极强的增殖和转移潜能。伴有远处转移的骨肉瘤患者的生存预后极差，且骨肉瘤患者在治疗过程中易出现病灶切除不彻底、化学治疗耐药等难题，目前尚缺乏有效的根治手段。近年来，越来越多的证据表明β-1, 4-N-乙酰半乳糖氨基转移酶1(β-1, 4-N-acetylgalactosaminyltransferase 1,B4GALNT1)能够影响多种恶性肿瘤的进展。然而，B4GALNT1在骨肉瘤细胞中的功能却未见报道。本研究拟探讨骨肉瘤组织与正常组织中B4GALNT1的表达以及B4GALNT1对骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响，以期为骨肉瘤患者的治疗提供新的理论依据和方向。方法：收集在中南大学湘雅二医院行骨肉瘤瘤段切除的16例患者的肿瘤组织及相对应的正常组织样本，骨肉瘤患者的年龄为8～17(中位数12)岁。利用实时反转录聚合酶链反应(real-time reverse transcription PCR,real-time RT-PCR)检测B4GALNT1 mRNA在骨肉瘤组织、相对应的正常组织、3种骨肉瘤细胞系(MG63、Saos-2、U2OS)及人成骨细胞(human fetal osteoblastic,hFOB)中的表达情况；通过细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)及克隆形成实验分析敲减B4GALNT1对骨肉瘤细胞Saos-2及U2OS增殖能力的影响；利用Transwell迁移和侵袭实验分析敲减B4GALNT1对骨肉瘤细胞Saos-2及U2OS迁移和侵袭能力的影响；使用蛋白质印迹法分析敲减B4GALNT1对Saos-2及U2OS细胞上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)及侵袭相关蛋白质表达的影响。结果：Real-time RT-PCR结果表明：与正常组织及h FOB相比，骨肉瘤组织和3种骨肉瘤细胞系中B4GALNT1 mRNA的表达水平较高(均P实验结果表明：与对照组相比，敲减B4GALNT1降低了骨肉瘤细胞的增殖速率(均P实验结果表明：与对照组相比，敲减B4GALNT1减少了骨肉瘤细胞的迁移和侵袭细胞数(均P<0.01)。蛋白质印迹结果表明：与对照组相比，敲减B4GALNT1抑制了N-cadherin、Snail、Vimentin和基质金属蛋白酶9(matrix metallopreteinase 9,MMP9)的表达(均P<0.01)。结论：B4GALNT1在骨肉瘤组织及细胞系中表达上调；敲减B4GALNT1抑制了骨肉瘤的恶性表型；B4GALNT1可能作为一个癌基因在骨肉瘤细胞增殖和转移中发挥重要作用。

关键词： β-1,4-N-乙酰半乳糖氨基转移酶1 骨肉瘤增殖上皮-间充质转化

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原发性肥大性骨关节病1例患儿的遗传学分析

中华医学遗传学杂志 2024年第9期41卷 1100-1104页

作者：王陈邱雪平程亚婷李博宇张元珍马建鸿郑芳武汉大学中南医院基因诊断中心&检验科武汉430071 湖北省产前诊断与优生临床医学研究中心武汉430071 武汉大学中南医院生殖医学中心武汉430071

目的探讨1例原发性肥大性骨关节(PHO)病患儿的遗传学病因。方法选取2021年7月27日于武汉大学中南医院就诊的1例患儿为研究对象。采集患儿及其父母的外周血样,提取基因组DNA,进行全外显子组测序,对疑似的剪接变异进行Sanger测序家系验证... 详细信息

目的探讨1例原发性肥大性骨关节(PHO)病患儿的遗传学病因。方法选取2021年7月27日于武汉大学中南医院就诊的1例患儿为研究对象。采集患儿及其父母的外周血样,提取基因组DNA,进行全外显子组测序,对疑似的剪接变异进行Sanger测序家系验证,并通过minigene实验进行体外功能验证;采用长片段PCR对疑似的外显子缺失变异进行验证。本研究通过武汉大学中南医院医学伦理委员会的审查(伦理号:[2021]伦审字62号)。结果WES结果显示患儿携带HPGD基因复合杂合变异,包括父源性杂合缺失变异(Exon 3 del)和母源性杂合剪接变异(c.421+1G>T)。长片段PCR验证了患儿及其父亲存在包含第3外显子在内的7565 bp片段的杂合缺失(c.218-1304_324+6156del),minigene实验结果显示母源性的剪接变异导致了第4外显子的跳跃剪接。结论HPGD基因c.218-1304_324+6156del杂合缺失变异和c.421+1G>T杂合剪接变异可能是该患儿的致病原因,上述结果丰富了HPGD基因的变异谱,为受累家庭的遗传咨询和产前诊断提供了依据。

关键词：原发性肥大性骨关节病全外显子组测序 HPGD基因 Minigene实验

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国外捐献器官获取质量管理与控制进展

器官移植 2024年第2期15卷 191-199页

作者：金律范晓礼叶啟发武汉大学中南医院、武汉大学肝胆疾病研究院、武汉大学移植医学中心、国家人体捐献器官获取质量控制中心、移植医学技术湖北省重点实验室、湖北省天然高分子生物肝临床医学研究中心、湖北省天然高分子基医用材料构建工程技术研究中心武汉430071 中南大学湘雅三医院卫生部移植医学工程技术研究中心

器官移植是二十世纪以来有效挽救终末期器官衰竭患者生命的一项突破性技术,显著改善了患者生存质量。器官捐献作为器官移植的重要来源,提升捐献器官获取质量是促进捐献器官转化、改善器官移植预后的关键。美国、西班牙等国家在捐献器官... 详细信息

器官移植是二十世纪以来有效挽救终末期器官衰竭患者生命的一项突破性技术,显著改善了患者生存质量。器官捐献作为器官移植的重要来源,提升捐献器官获取质量是促进捐献器官转化、改善器官移植预后的关键。美国、西班牙等国家在捐献器官获取质量管理与控制方面提出了系列政策和标准,并取得了积极成果。本文通过探讨医疗质量管理与控制有关概念、国际捐献器官获取质量管理先进策略及模式,研究器官获取组织、捐献者、捐献器官质控举措,以期为形成具有“中国特色”的捐献器官获取质量管理与控制体系、推进捐献器官获取高速度高质量发展提供参考。

关键词：器官捐献器官获取器官获取组织(OPO) 质量管理管理模式质量控制器官移植

UbcH5a调控DNA损伤修复蛋白表达对食管癌细胞放射敏感性的影响

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广西医科大学学报 2024年第1期41卷 11-16页

作者：黄丹黄国栋周云峰高孝家中国人民解放军中部战区总医院全科医学科武汉430000 华中科技大学同济医学院附属武汉市中心医院肿瘤科武汉430014 华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院分子诊断湖北省重点实验室武汉430014 武汉大学中南医院放化疗科武汉430000

目的:构建过表达人泛素交联酶UbcH5a基因的稳定转染食管鳞癌EC109细胞株,研究UbcH5a影响食管癌放射敏感性的机制。方法:将EC109细胞分为空白对照组(不处理)、阴性对照组(转染pEGFP-C1质粒)和过表达组(转染pEGFP-UbcH5a质粒)。分别采用... 详细信息

目的:构建过表达人泛素交联酶UbcH5a基因的稳定转染食管鳞癌EC109细胞株,研究UbcH5a影响食管癌放射敏感性的机制。方法:将EC109细胞分为空白对照组(不处理)、阴性对照组(转染pEGFP-C1质粒)和过表达组(转染pEGFP-UbcH5a质粒)。分别采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和western blotting法检测UbcH5a mRNA及蛋白表达以验证转染效率,克隆形成实验检测2 Gy X线照射后的细胞存活分数(SF2),免疫荧光检测DNA损伤灶点,western blotting法检测DNA损伤修复相关蛋白(ATM、ATR、p-ATM、p-ATR、Chk1、Chk2和BRCA1)表达。结果:与空白对照组相比,过表达组UbcH5a mRNA及蛋白表达水平升高,SF2降低,DNA损伤灶点增多(均P0.05)。与阴性对照组相比,过表达组经X线照射前、后ATM、ATR、p-ATM、p-ATR、Chk1、Chk2和BRCA1表达均显著下调(均P<0.05)。结论:UbcH5a通过抑制DNA损伤修复相关蛋白表达来增强食管癌细胞的放射敏感性。

关键词：食管癌泛素 UbcH5a 放射敏感性 DNA损伤修复

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干扰Wrap53基因调控人骨肉瘤U2OS细胞放射敏感性实验研究

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中华肿瘤防治杂志 2013年第21期20卷 1657-1660页

作者：竺炎吴传高刘少平邱惠谢丛华周福祥武汉大学中南医院放化疗科.肿瘤生物学行为湖北省重点实验室.湖北省肿瘤医学临床研究中心湖北武汉430071

目的:探讨干扰Wrap53基因表达对肿瘤细胞放射敏感性的作用及其分子机制。方法:构建针对Wrap53的干扰质粒;脂质体转染法转染至p53野生型(wtp53)的人骨肉瘤U2OS细胞;RT-PCR和蛋白质印迹法检测Wrap53和wtp53基因的mRNA和蛋白表达;克隆形成... 详细信息

目的:探讨干扰Wrap53基因表达对肿瘤细胞放射敏感性的作用及其分子机制。方法:构建针对Wrap53的干扰质粒;脂质体转染法转染至p53野生型(wtp53)的人骨肉瘤U2OS细胞;RT-PCR和蛋白质印迹法检测Wrap53和wtp53基因的mRNA和蛋白表达;克隆形成实验测定放射敏感性参数;流式细胞术(flow cytometry,FCM)分析细胞周期变化。结果:Wrap53的特异性shRNA质粒转染U2OS细胞后,细胞内Wrap53和wtp53的mRNA和蛋白表达水平均受到明显抑制;Wrap53基因干扰组U2OS细胞的D0值为0.44±0.01,明显高于阴性对照组0.37±0.01,P=0.001,Wrap53基因干扰组SF2值为0.72±0.10,高于阴性对照组0.44±0.02,P=0.047;Wrap53干扰细胞在放射后16h(P=0.014)和24h(P=0.011)的G2/M期阻滞更加明显,显著高于对照组;但Wrap53干扰细胞在放射后出现G1期阻滞减少,以放射后24h最为显著,P=0.001。结论:干扰Wrap53基因表达降低了U2OS细胞的放射线敏感性,该作用可能与下调wtp53表达和诱导细胞放射后G2/M期阻滞有关。

关键词： Wrap53 RNAi wtp53 放射敏感性细胞周期

177例Ⅱ期乳腺癌患者的规范性辅助治疗及影响预后的因素

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武汉大学学报（医学版） 2013年第3期34卷 377-380,384页

作者：杨笑曦杜丽蓓周福祥梁辰谢丛华张弓钟亚华邓涤周云峰武汉大学中南医院肿瘤放化疗科/湖北省肿瘤生物学行为重点实验室/湖北省肿瘤医学临床研究中心湖北武汉430071

目的:回顾性研究177例Ⅱ期乳腺癌患者术后辅助治疗是否规范对预后的影响。方法:纳入2000年1月至2005年12月在我院行术后辅助治疗且符合条件的177例乳腺癌患者的临床以及病理资料,探讨患者术后辅助治疗、年龄、绝经状况、淋巴结清扫、TN... 详细信息

目的:回顾性研究177例Ⅱ期乳腺癌患者术后辅助治疗是否规范对预后的影响。方法:纳入2000年1月至2005年12月在我院行术后辅助治疗且符合条件的177例乳腺癌患者的临床以及病理资料,探讨患者术后辅助治疗、年龄、绝经状况、淋巴结清扫、TNM分期、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、人表皮生长因子受体2(HER-2)、初发到治疗的时间、术式、病理类型、手术地点等与预后的相关性。结果:本组病例中位随访时间为62个月,随访率为82.49%,其中仅53例患者(29.94%)接受了规范辅助治疗。术后辅助治疗规范组与非规范组的5年总生存率分别为98.11%和93.58%,10年总生存率分别为80.66%和61.57%,两组之间存在统计学差异(P0.05)。结论:术后规范辅助治疗、绝经状况及HER-2与Ⅱ期乳腺癌患者的预后密切相关。

关键词：乳腺癌术后辅助治疗预后

中性粒细胞/淋巴细胞比值在乳腺癌预后评估中的应用

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武汉大学学报（医学版） 2013年第3期34卷 391-394页

作者：詹妍王文博周福祥周云峰武汉大学中南医院肿瘤放化疗科/湖北省肿瘤生物学行为重点实验室/湖北省肿瘤医学临床研究中心湖北武汉430071

目的:初步探讨术前中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)在乳腺癌患者中对预后的影响及预后评估的应用。方法:回顾性分析1997-2007年间武汉大学中南医院甲乳肿瘤科及放化疗科收治的经手术治疗的388例乳腺癌患者的临床资料,根据患者术前外周静脉... 详细信息

目的:初步探讨术前中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)在乳腺癌患者中对预后的影响及预后评估的应用。方法:回顾性分析1997-2007年间武汉大学中南医院甲乳肿瘤科及放化疗科收治的经手术治疗的388例乳腺癌患者的临床资料,根据患者术前外周静脉血NLR分为低NLR组(NLR临床病理因素与总生存时间之间的关系。结果:低NLR组和高NLR组乳腺癌患者5年生存率分别为74.4%和20.9%(P3及雌激素受体(ER),孕激素受体(PR)与人表皮生长因子受体2(HER2)三阴是影响乳腺癌总生存时间的危险因素。结论:术前高NLR是影响乳腺癌患者术后复发的单独危险因素,术前NLR大于4.39提示乳腺癌患者预后不良。

关键词：乳腺癌中性粒细胞淋巴细胞比值预后

联合MORC2-IDH1检测对胶质母细胞瘤放化疗患者分子分型价值

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中华放射肿瘤学杂志 2019年第6期28卷 401-404页

作者：唐蒙徐会王尤丁千山周福祥武汉大学中南医院肿瘤放化疗科/湖北省肿瘤医学临床研究中心/肿瘤生物学行为湖北省重点实验室 430071

目的研究MORC2在胶质母细胞瘤组织中的表达及其联合IDH1突变状态对放化疗疗效的预测作用及分子分型价值。方法应用免疫组化检测45例胶质母细胞瘤组织中MORC2表达水平,分析其与患者临床特征及放化疗预后间关系。通过胶质瘤转录组数据库... 详细信息

目的研究MORC2在胶质母细胞瘤组织中的表达及其联合IDH1突变状态对放化疗疗效的预测作用及分子分型价值。方法应用免疫组化检测45例胶质母细胞瘤组织中MORC2表达水平,分析其与患者临床特征及放化疗预后间关系。通过胶质瘤转录组数据库进一步联合分析MORC2转录水平及IDH1突变状态对胶质母细胞瘤患者放化疗预后意义。结果胶质母细胞瘤患者中MORC2蛋白高表达率为76%,且与放化疗预后总生存及无复发生存呈负相关(HR=2.928,95%CI为1.582~5.418,P=0.002;HR=2.204,95%CI为1.186~4.095,P=0.022)。联合IDH1突变状态、MORC2转录水平可将胶质母细胞瘤术后接受放化疗患者分为3个亚型,其中IDH1突变型(IDH1^mt)伴MORC2低表达(MORC2^low)者预后最好,中位生存期为22个月(95%CI为13.98~30.02),而IDH1野生型(IDH1a^wt)伴MORC2高表达(MORC2^high)者预后最差,中位生存期为5.63个月(95%CI为3.92~7.34)(HR=4.15,95%CI为1.606~10.720,P=0.002)。在IDH1^wt中MORC2^high比MORC2low预后更差,提示IDH1^wt/MORC2^high胶质母细胞瘤组织具有更强的DNA损伤修复能力,对放化疗治疗更抗拒。结论MORC2^high可作为胶质母细胞瘤患者潜在的放化疗预后不良的指标,联合IDH1突变状态及MORC2表达水平可建立一种新的分子分型,为分层治疗提供依据。

关键词： MORC2基因胶质母细胞瘤/放化疗预后分子分型

150例老年非小细胞肺癌临床特点与预后因素分析

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武汉大学学报（医学版） 2013年第3期34卷 372-376页

作者：韦静妮程雄飞周福祥梁辰张俊红钟亚华张弓邓涤谢丛华周云峰武汉大学中南医院放化疗科/湖北省肿瘤生物学行为重点实验室/湖北省肿瘤医学临床研究中心湖北武汉430071

目的:分析老年非小细胞肺癌患者的临床特点和预后因素。方法:回顾性分析150例老年(年龄≥70岁)非小细胞肺癌患者临床资料。采用单、多因素分析评估患者临床病理特征和预后因素。结果:150名患者中,临床分期为Ⅲ-Ⅳ的晚期肺癌的患者例数为... 详细信息

目的:分析老年非小细胞肺癌患者的临床特点和预后因素。方法:回顾性分析150例老年(年龄≥70岁)非小细胞肺癌患者临床资料。采用单、多因素分析评估患者临床病理特征和预后因素。结果:150名患者中,临床分期为Ⅲ-Ⅳ的晚期肺癌的患者例数为135例。约4/5患者是男性并且超过70%男性患者有吸烟史。首发症状主要表现为咳嗽、咳痰,其中20%患者伴发慢性肺部疾病。单因素分析,经过综合治疗或者单纯手术治疗患者中位生存时间(22月,29月)均高于仅接受最佳支持治疗的患者(10月,P5%)2年生存率明显低于于体重未减轻者,分别为12.07%,48.91%(P2分,分别为41.18%,20.83%(P<0.05)。多因素分析显示,体重减轻超过5%(HR=34.907,P<0.01)、年龄大于80岁(HR=10.91,P<0.01)和仅接受最佳支持治疗(HR=6.074,P<0.05)都是影响预后的独立因素。结论:老年非小细胞肺癌接受治疗可获益,女性,年龄相对较小,ECOG评分≤2分,接受手术治疗以及综合治疗者生存期较长,预后较好,体重减轻和仅接受最佳支持治疗患者预后差。

关键词：肺肿瘤老年医学生存预后