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基于网络药理学的灯盏花乙素抗乳腺癌机制研究及实验验证

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天然产物研究与开发 2024年

作者：田冲冲张琦刘开娜方晨曦包小波江苏医药职业学院药学院

采用网络药理学和分子对接技术预测灯盏花乙素（scutellarin，SCU）抗乳腺癌的潜在靶点和作用机制，并结合临床数据以及体外细胞实验进行验证。分别通过SwissTargetPrediction数据库、TargetNet数据库以及GeneCards、OMIM、TTD数据库筛... 详细信息

采用网络药理学和分子对接技术预测灯盏花乙素（scutellarin，SCU）抗乳腺癌的潜在靶点和作用机制，并结合临床数据以及体外细胞实验进行验证。分别通过SwissTargetPrediction数据库、TargetNet数据库以及GeneCards、OMIM、TTD数据库筛选SCU的潜在作用靶点和乳腺癌相关疾病靶点，然后利用Venny2.1.0平台获得药物和疾病的交集靶标，作为SCU干预乳腺癌的潜在治疗靶点；通过STRING数据库和Cytoscape 3.7.2软件构建蛋白质-蛋白质互作网络并筛选关键靶点；利用DAVID数据库对交集靶标进行基因本体（GO）功能富集与京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析；利用Autodock Vina软件对排名前两位的核心靶点与SCU进行分子对接验证；通过癌症基因组图谱（TCGA）数据库分析核心靶基因在临床样本中的表达情况；最后在细胞水平验证SCU对乳腺癌的抗增殖作用以及对前面获取的关键靶点和通路蛋白表达的影响。经数据库筛选得到90个SCU抗乳腺癌潜在靶点，后续拓扑分析得到度值排名前5的关键靶点，分别为EGFR、TN、FCASP3、PTGS2以及MAPK14；KEGG通路分析提示SCU抗乳腺癌主要涉及C-型凝集素受体信号通路、凋亡信号通路、人巨细胞病毒感染、HIF-1信号通路、IL-17等多条信号通路；分子对接结果显示SCU与关键靶点具有较强的结合能力；临床样本分析显示与健康人群相比，关键靶基因的表达均在乳腺癌患者中发生显著变化（P < 0.01）。体外细胞实验表明，SCU在40～160 μmol/L浓度范围内以剂量依赖性的方式抑制人乳腺癌细胞MCF-7细胞的增殖（P < 0.01或P < 0.05），Western blot结果显示SCU上调了MCF-7细胞中EGFR的蛋白表达，下调了TNF-α与HIF-1α的蛋白表达。综上，SCU干预乳腺癌具有多靶点、多通路的特点，其作用机制可能与下调TNF-α/HIF-1α、上调EGFR通路，继而抑制细胞增殖有关，从而为SCU临床研究和产品开发提供了理论依据和参考。

关键词：灯盏花乙素乳腺癌网络药理学分子对接体外细胞实验信号通路

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巴戟天与伪品羊角藤叶绿体基因组的比较分析

分子植物育种 2024年

作者：陈荣珠王小平何丽珊漳州卫生职业学院药学院

本研究旨在通过叶绿体基因组的比较分析，探讨三种不同品系的巴戟天与其常见伪品羊角藤之间的遗传差异。通过对采集的三种不同品系巴戟天和羊角藤样本进行叶绿体DNA的提取、测序及后续的生物信息学分析，描绘了其叶绿体基因组的结构特... 详细信息

本研究旨在通过叶绿体基因组的比较分析，探讨三种不同品系的巴戟天与其常见伪品羊角藤之间的遗传差异。通过对采集的三种不同品系巴戟天和羊角藤样本进行叶绿体DNA的提取、测序及后续的生物信息学分析，描绘了其叶绿体基因组的结构特征，并鉴定出区分巴戟天与羊角藤的分子标记区域。研究发现，巴戟天和羊角藤在叶绿体基因组水平上存在明显差异，同时，不同品系巴戟天在叶绿体基因组水平上也存在一定的差异，差异性较小。这些差异为巴戟天的种质资源保护、品种鉴定及质量控制提供了新的分子工具。本研究结果丰富了巴戟天的遗传学研究，为巴戟天及其伪品的鉴别提供了科学依据，有助于提升药材市场的品质安全，也为药用植物的分子鉴定技术的发展和应用提供了重要的参考资料。

关键词：巴戟天(Morinda Officinalis) 羊角藤(Morinda Umbellata) 叶绿体基因组分子标记品种鉴定

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不同采收期枇杷叶中氨基酸的组成与分析

医药导报 2024年第9期43卷 1461-1469页

作者：高伟城王小平陈荣珠丁其春李雪煌漳州卫生职业学院药学院漳州363000

目的对12个月份采收期枇杷叶的氨基酸成分组成及含量变化进行分析,为确定枇杷叶采收期及资源利用提供理论依据。方法采用异硫氰酸苯酯柱前衍生化高效液相色谱法测定不同月份枇杷叶氨基酸组成及含量;采用SPSS22.0版软件进行数据统计学... 详细信息

目的对12个月份采收期枇杷叶的氨基酸成分组成及含量变化进行分析,为确定枇杷叶采收期及资源利用提供理论依据。方法采用异硫氰酸苯酯柱前衍生化高效液相色谱法测定不同月份枇杷叶氨基酸组成及含量;采用SPSS22.0版软件进行数据统计学差异及相关性分析;根据世界卫生组织(WHO)和联合国粮农组织(FAO)提出的理想模式及朱圣陶提出的氨基酸比值系数法,对不同采收期的枇杷叶氨基酸进行评分。结果不同采收期枇杷叶中均含有17种氨基酸,7种人体必需氨基酸(EAA)、9种儿童必需氨基酸(CEAA)及9种药用氨基酸。17种氨基酸分别是天门冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、甘氨酸、组氨酸、精氨酸、苏氨酸、丙氨酸、脯氨酸、酪氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、胱氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸,它们的平均含量分别为3.41~7.23、4.64~9.66、2.05~3.75、2.99~4.95、0.01~1.56、2.33~4.85、2.10~4.03、2.67~5.48、5.37~7.64、1.45~3.49、2.70~5.53、0.01~0.48、3.64~4.78、1.91~4.15、3.96~7.83、2.39~4.60、1.85~3.65 mg·g^(-1)。不同采收期枇杷叶中17种氨基酸、总氨基酸(TFAA)、EAA总量、CEAA总量、药用氨基酸、苦味氨基酸的含量间差异有统计学意义(P<0.05);苦味氨基酸在总氨基酸中的百分含量较稳定。不同采收期枇杷叶的EAA含量为44.26%~50.33%,明显高于WHO/FAO模式值(35.00%);EAA/非必需氨基酸(NEAA)均值(55.67%)和EAA/TFAA均值(35.74%)分别接近WHO/FAO模式值的60%、40%;不同采收期枇杷叶的17种氨基酸含量峰值前2位是7月和11月;氨基酸比值系数分(SRC)值为62.53~76.17,前3位为11月、8月及7月。赖氨酸为枇杷叶的第一限制氨基酸。苦味氨基酸与药用氨基酸、TFAA呈正相关(P<0.01)。结论枇杷叶中氨基酸种类齐全,组成合理,具有较佳开发利用价值;不同月份氨基酸的含量差异大,7月和11月是枇杷叶氨基酸合理开发利用的较佳时期。

关键词：枇杷叶氨基酸柱前衍生采收期氨基酸评分

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白凤菜转录组学分析及类黄酮基因的剖析

分子植物育种 2024年第16期22卷 5252-5260页

作者：黄建军谢伟容郑晓艳漳州卫生职业学院药学院漳州363000

白凤菜,是一味闽南地区及中国台湾著名的中草药,其作用多样,但近年来研究较少,特别是分子研究匮乏。本研究选择Illumina HiSeq~(TM)平台对白凤菜的叶和茎进行了高通量测序,研究结果表明:一共拼接成93 975个高质量的unigene,其N50为1 146... 详细信息

白凤菜,是一味闽南地区及中国台湾著名的中草药,其作用多样,但近年来研究较少,特别是分子研究匮乏。本研究选择Illumina HiSeq~(TM)平台对白凤菜的叶和茎进行了高通量测序,研究结果表明:一共拼接成93 975个高质量的unigene,其N50为1 146 bp,平均长度为624.78 bp;与基因本体数据库等七大数据库进行实验结果对比辨析,共有56 455个unigene至少顺利注释一个数据库,全部注释的有2 005个unigene。在白凤菜叶对根差异表达中共获得3 286个unigene,其中上升趋势表达1 852个,下降趋势表达1 434个。利用KEGG数据库,找到参与类黄酮生物合成的有39个unigene,具有显著差异的有11个,分布在12个合成酶中。此结果为进一步研究白凤菜黄酮类化合物生物合成和调控的分子机制提供理论基础。

关键词：白凤菜高通量测序类黄酮生物合成

高通量测序白茅转录组分析及黄酮合成相关基因挖掘

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分子植物育种 2024年第14期22卷 4574-4582页

作者：李秋玲郑晓艳谢伟容黄建军漳州卫生职业学院药学院漳州363000

利用Illumina Hiseq对白茅的地上部分(叶和茎)和地下部分(根茎和根)进行转录组测序及生物信息学分析,挖掘黄酮合成相关基因。结果表明:共获得161775条高质量unigene,N50长度为969 bp,平均长度为145.86 bp,Q20碱基百分比分布在98.19%~98.... 详细信息

利用Illumina Hiseq对白茅的地上部分(叶和茎)和地下部分(根茎和根)进行转录组测序及生物信息学分析,挖掘黄酮合成相关基因。结果表明:共获得161775条高质量unigene,N50长度为969 bp,平均长度为145.86 bp,Q20碱基百分比分布在98.19%~98.62%,Q30的碱基百分比分布在94.05%~95.28%。将转录本与GO、KEGG等七大数据库比对,得到其功能注释信息。结果表明,有97922条unigene至少注释到1个数据库,占60.53%;白茅的地上部分对地下部分差异表达unigene有3296个,其中上调表达2574个,下调表达722个。通过对KEGG数据库的代谢通路进行分析,参与白茅黄酮类合成途径相关的有12个酶。白茅参与黄酮类化合物合成的关键基因TMP值,对比关键基因在白茅地上部分及地下部分的表达,发现8个基因在地下部分有较高表达,4个基因在地上部分有较高表达(TMP>15)。本次转录组测序,获得了大量的白茅基因序列,为今后进一步挖掘白茅多种药用活性成分的功能基因、生物合成调控、种质改良等研究提供理论基础。

关键词：白茅转录组分析差异表达黄酮生物信息学

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中药综合实训教学改革研究

产业与科技论坛 2024年第15期23卷 104-106页

作者：高玲武威职业学院药学院

实践是教育创新的基础动力和源泉,中药综合实训是培养中药专业创新型人才的关键环节。但是在中药综合实训教学过程中依旧存在一定的缺陷和不足,因此开展中药综合实训教学改革势在必行。在此基础上,本文对中药综合实训的教学现状进行简... 详细信息

实践是教育创新的基础动力和源泉,中药综合实训是培养中药专业创新型人才的关键环节。但是在中药综合实训教学过程中依旧存在一定的缺陷和不足,因此开展中药综合实训教学改革势在必行。在此基础上,本文对中药综合实训的教学现状进行简要分析,并探讨了中药综合实训教学改革的必要性,最后针对当前的教学不足,分析了中药综合实训教学改革的具体工作方案。

关键词：综合实训中药专业教学改革

柱前衍生-高效液相色谱法测定巴戟天中氨基酸含量及营养价值评价

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食品与发酵工业 2024年第12期50卷 308-318页

作者：史娟兰奉容高伟城何丽珊王小平漳州卫生职业学院教务处福建漳州363000 漳州卫生职业学院药学院福建漳州363000 厦门医学院药学系福建厦门361023

建立柱前衍生-高效液相色谱法测定巴戟天中氨基酸含量,采用氨基酸比值系数法评价其营养价值。采用盐酸水解法制得巴戟天氨基酸供试品溶液,以异硫氰酸苯酯和三乙胺为柱前衍生化试剂,采用高效液相色谱法,使用Ultimate Amino Acid色谱柱(4.... 详细信息

建立柱前衍生-高效液相色谱法测定巴戟天中氨基酸含量,采用氨基酸比值系数法评价其营养价值。采用盐酸水解法制得巴戟天氨基酸供试品溶液,以异硫氰酸苯酯和三乙胺为柱前衍生化试剂,采用高效液相色谱法,使用Ultimate Amino Acid色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)以0.1 mol/L无水乙酸钠-乙腈为流动相,梯度洗脱,柱温40℃,检测波长为254 nm,测定氨基酸含量;通过氨基酸比值、氨基酸比值系数、氨基酸比值系数分等评价其营养价值,并采用系统聚类和主成分分析对其进行分类分析。结果表明,15种氨基酸线性关系良好,相关系数r≥0.9996。16份巴戟天氨基酸总含量为17.87~102.15 mg/g,均检测到15种氨基酸,其中包含6种必需氨基酸,占总氨基酸含量的14.15%~32.06%;8种药用氨基酸,占总氨基酸含量的45.20%~56.31%。限制氨基酸为苏氨酸和亮氨酸,氨基酸比值系数分为33.87~61.31。不同巴戟天样品氨基酸组成相关性显著;主成分分析提取2个主成分,累计方差贡献率为97.085%,可将16批巴戟天分为三类。该实验测定方法简单有效,可同时分离测定15种氨基酸,精密度与重复性良好,有较高的药用价值,可为巴戟天的品质分析和资源开发利用提供参考。

关键词：巴戟天柱前衍生-高效液相色谱法氨基酸营养价值评价系统聚类分析主成分分析

可见光催化合成C-3位芳酰基取代的2-芳基-2H-吲唑衍生物

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化学研究与应用 2024年第2期36卷 277-284页

作者：张杰朱磊孙茹萍王静江苏农牧科技职业学院动物药学院江苏泰州225300

基于C-H键官能团化反应策略,在无过渡金属条件下,以2-芳基-2H-吲唑为底物,芳基酮酸为芳酰基自由基源,利用2,4,5,6-四(9-咔唑基)-间苯二腈(4CzIPN)作为光催化剂,通过可见光催化脱羧偶联反应,合成了一系列C-3位芳酰基取代的2-芳基-2H-吲... 详细信息

基于C-H键官能团化反应策略,在无过渡金属条件下,以2-芳基-2H-吲唑为底物,芳基酮酸为芳酰基自由基源,利用2,4,5,6-四(9-咔唑基)-间苯二腈(4CzIPN)作为光催化剂,通过可见光催化脱羧偶联反应,合成了一系列C-3位芳酰基取代的2-芳基-2H-吲唑衍生物,产率59%-81%。所得产物结构经过氢谱、碳谱和高分辨质谱表征确证。该方法反应条件温和,具有良好的底物适用性和官能团耐受性,为2H-吲唑的C-3位C-H键芳酰基化反应提供了新途径。

关键词：可见光催化芳酰基化 2-芳基-2H-吲唑脱羧无过渡金属

灯盏花乙素通过PPARγ-PGC1α-UCP1通路改善小鼠肥胖作用及机制

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药物评价研究 2024年第8期47卷 1787-1796页

作者：张琦田冲冲张洋方晨曦卜薇李凤江苏医药职业学院药学院江苏盐城224005

目的探究灯盏花乙素对肥胖小鼠的干预作用及可能的分子机制,为肥胖的治疗提供借鉴。方法采用高脂膳食构建小鼠肥胖模型,并采用灯盏花乙素(400 mg·kg^(-1))干预8周,测定各组小鼠肥胖相关指标,包括体质量变化、脂肪组织质量、血脂指标[... 详细信息

目的探究灯盏花乙素对肥胖小鼠的干预作用及可能的分子机制,为肥胖的治疗提供借鉴。方法采用高脂膳食构建小鼠肥胖模型,并采用灯盏花乙素(400 mg·kg^(-1))干预8周,测定各组小鼠肥胖相关指标,包括体质量变化、脂肪组织质量、血脂指标[总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)]等;采用苏木精-伊红(HE)染色法分析脂肪组织形态的改变;分别采用免疫荧光方法、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及Westernblotting法检测脂肪组织中脂质代谢相关基因[过氧化酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、PPARγ共激活因子1α(PGC1α)与解偶联蛋白1(UCP1)]、蛋白(PPARγ、PGC1α及UCP-1)表达水平的变化。结果结果显示,灯盏花乙素干预可显著降低高脂喂养小鼠的体质量及脂肪组织质量(P<0.05、0.01);另外,灯盏花乙素可改善血脂指标——TC、TG、LDL-C及HDL-C;组织病理学结果显示,灯盏花乙素可以减轻脂肪组织中的脂质沉积。进一步qRT-PCR结果显示,灯盏花乙素极显著提高肥胖小鼠脂肪组织中PPARγ的mRNA表达水平(P<0.05),同时还能升高PGC1α与UCP1的mRNA表达水平,差异具有极显著性(P<0.01)。Western blotting结果则进一步验证了灯盏花乙素能显著提高高脂喂养小鼠脂肪组织PPARγ、PGC1α以及UCP1的蛋白表达水平(P<0.05)。结论灯盏花乙素可以改善高脂喂养小鼠肥胖,该作用可能与激活PPARγ-PGC1α-UCP1信号通路,调节脂肪组织的能量代谢有关。

关键词：灯盏花乙素肥胖 PPARγ-PGC1α-UCP1信号通路血脂脂质代谢