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神经营养因子3经受体切换促进大鼠脊髓损伤后神经功能的恢复

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中国组织工程研究 2025年第11期29卷 2268-2276页

作者：丛岩于健孙志德康大伟承德医学院附属医院急诊科河北省承德市067000

背景:神经营养因子是治疗脊髓损伤的新方法,调控自噬是其发挥作用的机制之一,但具体的信号通路尚不明确。目的:探讨神经营养因子3如何通过P75NTR/Trk C受体切换来调节少突胶质细胞的自噬以及促进脊髓损伤后神经功能恢复的作用,进一步明... 详细信息

背景:神经营养因子是治疗脊髓损伤的新方法,调控自噬是其发挥作用的机制之一,但具体的信号通路尚不明确。目的:探讨神经营养因子3如何通过P75NTR/Trk C受体切换来调节少突胶质细胞的自噬以及促进脊髓损伤后神经功能恢复的作用,进一步明确具体的分子机制。方法:将24只SD大鼠随机分为3组:假手术组、脊髓损伤组和神经营养因子3组,通过大鼠后肢神经功能评分来评估神经营养因子3对脊髓损伤大鼠的治疗效果,采用Western blot检测各组大鼠脊髓组织中神经营养因子3、Olig1、MBP蛋白以及自噬标记蛋白LC3B的表达水平。在细胞实验中,将少突胶质细胞接种在培养皿中,分为糖氧剥夺组、糖氧剥夺+神经营养因子3组、糖氧剥夺+神经营养因子3+P75NTR质粒组、糖氧剥夺+神经营养因子3+Trk C质粒组、糖氧剥夺+3-甲基腺嘌呤(自噬抑制剂)组及糖氧剥夺+雷帕霉素(自噬激活剂)组。光学显微镜观察少突胶质细胞形态变化,TUNEL染色观察细胞凋亡现象,Western blot检测Trk C受体、P75NTR、LC3B表达及PI3K/AKT/m TOR和AMPK/m TOR信号途径的磷酸化状态。结果与结论:(1)动物实验显示,与假手术组相比,脊髓损伤后神经营养因子3的表达显著增加(P<0.05);与脊髓损伤组相比,外源性神经营养因子3治疗能够加快大鼠神经功能的恢复(P<0.05),并增加Olig1和MBP蛋白的表达(P<0.05);(2)细胞实验发现,3 h是损伤早期与中后期的分界点,与糖氧剥夺组相比,糖氧剥夺+神经营养因子3组少突胶质细胞能够更长时间地维持其形态,Trk C受体在早期表达水平较低而中后期显著上调(P<0.05),P75NTR则在早期上调而中后期下调(P<0.05),自噬水平呈现出先升高后降低的趋势(P<0.05);(3)通过对比糖氧剥夺+神经营养因子3组、糖氧剥夺+雷帕霉素组和糖氧剥夺+3-甲基腺嘌呤组的细胞形态和TUNEL染色结果,发现单独促进或抑制自噬对少突胶质细胞的存活均有不利影响,而类似神经营养因子3这样调节自噬的方法则能最大限度地维持细胞存活;(4)神经营养因子3在早期通过P75NTR/AMPK/m TOR信号通路促进自噬,而在后期通过Trk C/PI3K/AKT/m TOR信号通路抑制自噬。根据上述结果,得到如下结论,即神经营养因子3可以通过P75NTR/Trk C受体的切换能够双向调控少突胶质细胞的自噬,从而维持细胞存活,有助于脊髓损伤后大鼠的神经功能恢复。

关键词：神经营养因子3 自噬少突胶质细胞受体切换凋亡脊髓损伤

人脐带间充质干细胞来源外泌体治疗SD大鼠骨质疏松性股骨骨折

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中国组织工程研究 2025年第31期29卷 6634-6641页

作者：卜宪敏梁迪张斌徐英杰丁豪吴彬田荣华济宁市第一人民医院病理科山东省济宁市272067 济宁医学院临床医学院山东省济宁市272067 济宁医学院附属医院检验科山东省济宁市272067 济宁医学院附属医院创伤骨科山东省济宁市272067

背景:人脐带间充质干细胞来源外泌体已广泛用于骨修复和重建研究,能显著促进成骨和血管生成。目的:探究人脐带间充质干细胞来源外泌体治疗骨质疏松性骨折的机制。方法:采用组织块培养法提取人脐带间充质干细胞及超速离心法提取人脐带间... 详细信息

背景:人脐带间充质干细胞来源外泌体已广泛用于骨修复和重建研究,能显著促进成骨和血管生成。目的:探究人脐带间充质干细胞来源外泌体治疗骨质疏松性骨折的机制。方法:采用组织块培养法提取人脐带间充质干细胞及超速离心法提取人脐带间充质干细胞来源外泌体并进行鉴定。30只12周龄雌性SD大鼠随机分为假手术组(6只)和去势组(24只)。去势组采用经典的去势法构建骨质疏松模型,术后12周随机选取去势组6只大鼠与假手术组6只大鼠行Micro-CT及苏木精-伊红染色进行模型验证。验证骨质疏松模型构建成功后,将去势组剩余18只大鼠随机分为3组,均构建骨质疏松性股骨骨折模型,骨折端分别注射PBS(PBS组)、1.5×10^(11)particles/mL(低浓度外泌体组)、3×10^(11)particles/mL(高浓度外泌体组)外泌体。骨折术后4周行影像学及组织学观察评估骨折愈合和骨组织血管生成情况。结果与结论:①大体标本观察:与PBS组相比,外泌体组骨折愈合速度明显增快,骨折端骨痂生成量显著增加;②X射线片评分:外泌体组显著高于PBS组,差异有显著性意义(P<0.05);③Micro-CT三维成像:与PBS组相比,外泌体组骨折愈合加快,骨痂生成量显著增加;外泌体组骨体积分数显著高于PBS组,差异有显著性意义(P<0.01);④苏木精-伊红染色和Masson染色:与PBS组相比,外泌体组有更多的骨小梁生成,有更多的新生骨组织生长;⑤免疫组织化学染色:与PBS组相比,外泌体组骨钙素与CD31的表达更加显著;高浓度外泌体组较低浓度外泌体组新生血管密度更大,骨痂生成量更多,骨折愈合增快,呈现浓度依赖性。结果表明,人脐带间充质干细胞来源外泌体可通过促进血管生成和成骨,最终促进骨质疏松性骨折修复,其机制可能与CD31和骨钙素表达增加有关。

关键词：骨质疏松性骨折人脐带间充质干细胞外泌体骨折愈合骨钙素 CD31

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脱细胞皮肤基质/聚氨酯混纺纤维支架促进大鼠皮肤缺损的修复

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中国组织工程研究 2025年第4期29卷 745-751页

作者：吴辰江佳慧苏豆刘晨慈超皖南医学院第一附属医院皮肤性病科安徽省芜湖市241001 皖南医学院第一附属医院脊柱外科安徽省芜湖市241001

背景:研究证实,将脱细胞基质与聚合物进行混合纺丝不仅可改善纤维的结构性质,还可保存脱细胞基质的生物学活性,但是目前将聚氨酯与脱细胞皮肤基质进行静电纺丝制备皮肤组织工程支架还没有相关报道。目的:观察脱细胞皮肤基质/聚氨酯混纺... 详细信息

背景:研究证实,将脱细胞基质与聚合物进行混合纺丝不仅可改善纤维的结构性质,还可保存脱细胞基质的生物学活性,但是目前将聚氨酯与脱细胞皮肤基质进行静电纺丝制备皮肤组织工程支架还没有相关报道。目的:观察脱细胞皮肤基质/聚氨酯混纺纤维支架对大鼠皮肤缺损的修复作用。方法:利用静电纺丝技术分别制备聚氨酯静电纺丝纤维支架和脱细胞皮肤基质/聚氨酯混纺纤维支架。扫描电镜下观察纤维结构;将大鼠脂肪间充质干细胞分别接种于两组支架上,扫描电镜下观察支架上的细胞形态。取10只SD大鼠,在每只大鼠背部制作3个1 cm×1 cm的全层皮肤缺损,其中2处缺损分别植入聚氨酯静电纺丝纤维支架(对照组)、脱细胞皮肤基质/聚氨酯混纺纤维支架(实验组),剩余缺损处不植入任何材料(空白对照组)。术后第1,2,3周,观察皮肤创面愈合情况;植入后第3周,进行创面苏木精-伊红染色,计算创面瘢痕面积。结果与结论:①扫描电镜下可见两种静电纺丝纤维均为网状结构,并且大鼠脂肪间充质干细胞在两种支架上沿纤维附着,黏附良好。②随着术后时间的延长,各组皮肤创面逐渐愈合,至术后第3周,实验组、对照组皮肤创面基本愈合,空白对照组创面可见小溃疡形成。皮肤创面苏木精-伊红染色显示,对照组、实验组创面表皮覆盖基本完整,真皮层内可见成纤维细胞长入和炎症细胞浸润,并且实验组创面胶原纤维较为丰富、排列规则有序,与表皮面基本平行;空白对照组创面表皮仍有缺损。实验组创面瘢痕面积小于其他两组(P<0.05,P<0.01)。③结果表明,脱细胞皮肤基质/聚氨酯混纺纤维支架可以有效修复大鼠全层皮肤缺损、改善创面瘢痕形成。

关键词：脱细胞皮肤基质聚氨酯静电纺丝皮肤缺损瘢痕

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核因子I-C调控人根尖牙乳头干细胞的分化

中国组织工程研究 2025年第31期29卷 6667-6673页

作者：吴越朱永娜葛翔刘樊何泽禹刘茜蚌埠医科大学口腔医学院蚌埠医科大学第二附属医院口腔科安徽省蚌埠市233000

背景:体外过表达核因子I-C基因可促进人根尖牙乳头干细胞的分化,Wnt/β-catenin信号通路的激活也可促进人根尖牙乳头干细胞的分化,而且核因子I-C对间充质干细胞中Wnt/β-catenin通路具有调节作用。然而,核因子I-C能否通过激活人根尖牙... 详细信息

背景:体外过表达核因子I-C基因可促进人根尖牙乳头干细胞的分化,Wnt/β-catenin信号通路的激活也可促进人根尖牙乳头干细胞的分化,而且核因子I-C对间充质干细胞中Wnt/β-catenin通路具有调节作用。然而,核因子I-C能否通过激活人根尖牙乳头干细胞中Wnt/β-catenin通路进而影响细胞分化,目前尚未见报道。目的:探讨核因子I-C通过Wnt/β-Catenin信号通路调控人根尖牙乳头干细胞分化的作用。方法:玻片覆盖组织块法培养人根尖牙乳头干细胞,慢病毒转染过表达核因子I-C基因。①设置对照组、空载体组和过表达核因子I-C组,Western blot检测β-Catenin、LRP5和TCF7L2的表达。②设置对照组、空载体组、过表达核因子I-C组和过表达核因子I-C+DKK-1(Wnt通路抑制剂)组,细胞成骨诱导7 d后进行碱性磷酸酶染色及活性定量,细胞成骨诱导14 d后qPCR和Western blot检测Runt相关转录因子2、牙本质涎磷蛋白、骨钙素mRNA及蛋白的表达,茜素红染色观察矿化结节形成情况。结果与结论:①与对照组、空载体组相比,过表达核因子I-C组人根尖牙乳头干细胞中Wnt/β-Catenin通路相关蛋白β-Catenin、LRP5、TCF7L2表达显著升高(P<0.01);②与对照组、空载体组相比,过表达核因子I-C组人根尖牙乳头干细胞中碱性磷酸酶活性显著升高(P<0.01),Runt相关转录因子2、牙本质涎磷蛋白、骨钙素mRNA及蛋白表达均显著升高(P<0.01),矿化结节数量显著增加(P<0.01);③与过表达核因子I-C组相比,过表达核因子I-C+DKK-1组人根尖牙乳头干细胞中碱性磷酸酶活性、Runt相关转录因子2、牙本质涎磷蛋白、骨钙素mRNA及蛋白表达显著下降(P<0.05),矿化结节数量显著减少(P<0.05)。结果表明:核因子I-C能够激活人根尖牙乳头干细胞中Wnt/β-catenin信号通路,介导人根尖牙乳头干细胞的成骨/成牙分化。

关键词：人根尖牙乳头干细胞核因子I-C Wnt 信号通路分化成骨 DKK-1 工程化干细胞

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实施容量反应性评估对重症肺炎患者预后的影响

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临床肺科杂志 2025年第1期 41-45+51页

作者：李济尾刘奎邵钫蕾丁雪峰李济江陈丽川北医学院川北医学院附属医院重症医学科

目的探讨补液前实施容量反应性评估对重症肺炎患者预后的影响。方法回顾性分析2023年1月至2023年12月某三甲医院重症医学科及急诊重症监护室410例诊断为重症肺炎的病例资料。根据补液前是否实施容量反应性评估，将病例分为评估组和对... 详细信息

目的探讨补液前实施容量反应性评估对重症肺炎患者预后的影响。方法回顾性分析2023年1月至2023年12月某三甲医院重症医学科及急诊重症监护室410例诊断为重症肺炎的病例资料。根据补液前是否实施容量反应性评估，将病例分为评估组和对照组，其中实施容量反应性评估的病例纳入评估组，未行容量反应性评估的病例纳入对照组。收集患者性别、年龄、既往史、BMI、急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(Acute physiology and chronic health evaluation, APACHEⅡ)评分等一般资料以及机械通气时间、住院时间、氧合指数、血乳酸、预后等临床资料。通过SPSS 22.0统计学软件对收集的数据进行统计学分析。结果共纳入410例患者，评估组202例，对照组208例；30天内死亡病例139例；评估组APACHⅡ评分(31.13±5.81)与对照组APACHⅡ评分(32.03±6.69)相比，差异无统计学意义(P>0.05);评估组30天住院死亡率(58/202,28.71%)明显低于对照组的死亡率(81/208,38.94%),差异具有统计学意义(P<0.05);评估组机械通气时间(9.04±7.97)天短于对照组机械通气时间(10.97±9.07)天(P<0.05)。结论补液前实施容量反应性评估可降低重症肺炎患者30天住院死亡率；补液前实施容量反应性评估可缩短患者机械通气时长，降低肺水肿的发生率。

关键词：重症肺炎容量反应性评估机械通气时间 30天死亡率

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非结核分枝杆菌肺病并发肺曲霉菌病一例

中国防痨杂志 2025年第1期47卷 116-120页

作者：柳晓蕾王海慧张汝姣崔蓉王凯田高清清华大学第一附属医院呼吸与危重症医学科北京100016 潍坊市第二人民医院呼吸与危重症医学科潍坊261000 潍坊市第二人民医院药剂科潍坊261000

非结核分枝杆菌(non-tuberculous mycobacterial,NTM)肺病易出现曲霉菌定植,在机体免疫状态下降及长期服用抗NTM药物后会导致定植曲霉菌致病,且不同的宿主免疫状态及对肺曲霉菌感染治疗的时机均会导致出现不同的肺曲霉菌病临床表型。本... 详细信息

非结核分枝杆菌(non-tuberculous mycobacterial,NTM)肺病易出现曲霉菌定植,在机体免疫状态下降及长期服用抗NTM药物后会导致定植曲霉菌致病,且不同的宿主免疫状态及对肺曲霉菌感染治疗的时机均会导致出现不同的肺曲霉菌病临床表型。本文报道1例持续管理的中年男性患者,因咳嗽、咳痰、发热反复住院,于2017—2019年相继诊断为“肺结核、NTM肺病、肺曲菌球、亚急性侵袭性肺曲霉菌病”,病程曲折,经积极诊治后预后良好,为临床了解NTM肺病、曲霉菌、肺曲霉菌病之间的相互关系,以及亚急性肺曲霉菌病的不同分型及病程演变特点提供了完整详尽的参考。

关键词：非典型性细菌分枝杆菌属肺疾病曲霉菌病共病现象

合成MRI定量直方图特征对预测乳腺癌腋窝淋巴结转移状态的价值

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现代肿瘤医学 2025年第1期 96-101页

作者：王玲廷周智鹏余雪燕刘蒋静桂林医学院附属医院放射科

目的:探讨合成MRI基于ALN本身定量直方图特征在预测乳腺癌腋窝淋巴结转移(axillary lymph node metastasis, ALNM)中的潜在价值，并将其预测效能与常规影像征象以及ADC值定量直方图特征进行比较。方法:共纳入104枚乳腺癌腋窝淋巴结(ALNM... 详细信息

目的:探讨合成MRI基于ALN本身定量直方图特征在预测乳腺癌腋窝淋巴结转移(axillary lymph node metastasis, ALNM)中的潜在价值，并将其预测效能与常规影像征象以及ADC值定量直方图特征进行比较。方法:共纳入104枚乳腺癌腋窝淋巴结(ALNM组45枚，非ALNM组59枚),所有患者接受完整乳腺MR检查，包括合成MRI、DWI和DCE MRI。采用PyRadiomics软件提取合成MRI、ADC的定量直方图特征。采用卡方检验、独立样本t检验及Mann-Whitney U检验比较ALNM组与非ALNM组的合成MRI[T1、T2和质子密度(PD)]、ADC值的直方图特征及其DCE-MRI上的影像征象差异。将差异有统计学意义的参数纳入多因素logistic回归分析，采用ROC的曲线下面积(AUC)评估上述变量预测乳腺癌腋窝淋巴结转移状态的诊断性能。结果:合成MRI中T2-最小值、ADC-10th及淋巴结DCE-MRI影像征象(短径)为鉴别乳腺癌腋窝淋巴结转移状态的独立预测因素(P值分别为0.041、0.022、0.023),而T2-最小值所建立的预测模型具有较好的诊断效能[0.765(95%CI:0.673～0.858)]并优于单独ADC(ADC-10th)、影像征象(短径)预测模型，此外，合成MRI(T2-最小值)+ADC(ADC-10th)+影像征象(短径)所建立的多参数模型可显著提高对乳腺癌腋窝淋巴结转移状态的整体诊断效能。结论:合成MRI基于ALN本身定量参数直方图特征在预测乳腺癌腋窝淋巴结转移状态中具有一定价值，合成MRI+ADC定量参数直方图特征+淋巴结影像征象多参数模型预测效能最优，这种多参数联合模型可能是一种预测ALNM有前景的替代方法。

关键词：乳腺癌合成MRI 淋巴结 ADC 直方图特征

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负载骨形态发生蛋白2水凝胶诱导牙髓干细胞的成骨分化

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中国组织工程研究 2025年第16期29卷 3301-3310页

作者：伊斯拉尔古丽·麦麦提贾森刘佳新疆医科大学第一附属医院(附属口腔医院)儿童口腔科-口腔预防科新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市830054 西安医学院口腔医学院陕西省西安市710021 新疆维吾尔自治区口腔医学研究所新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市830054

背景:前期研究证明,甲基丙烯酸酐改性明胶/经处理牙本质基质复合水凝胶支架可促进人牙髓干细胞的增殖及分化。水凝胶负载骨形态发生蛋白2被认为是骨修复中有前景的材料。目的:观察负载不同质量浓度骨形态发生蛋白2的甲基丙烯酸酐改性明... 详细信息

背景:前期研究证明,甲基丙烯酸酐改性明胶/经处理牙本质基质复合水凝胶支架可促进人牙髓干细胞的增殖及分化。水凝胶负载骨形态发生蛋白2被认为是骨修复中有前景的材料。目的:观察负载不同质量浓度骨形态发生蛋白2的甲基丙烯酸酐改性明胶/经处理牙本质基质复合水凝胶对人牙髓干细胞成骨向分化的诱导作用。方法:制备含0,50,100,200μg/mL骨形态发生蛋白2的甲基丙烯酸酐改性明胶/经处理牙本质基质复合水凝胶,分别记为GelMA/TDM、BMP-2(50 ng/mL)GelMA/TDM、BMP-2(100 ng/mL)GelMA/TDM、BMP-2(200 ng/mL)GelMA/TDM,检测复合水凝胶对骨形态发生蛋白2的体外缓释性能。采用改良组织块酶消化法提取人牙髓干细胞,分别接种于4种水凝胶表面,采用CCK-8法检测细胞增殖,DAPI染色检测细胞黏附;对各组水凝胶表面的人牙髓干细胞进行成骨诱导,进行碱性磷酸酶染色、碱性磷酸酶活性检测与茜素红染色,采用RT-PCR法检测相关成骨基因(Runx2、骨形态发生蛋白2、骨桥蛋白、骨钙素、Ⅰ型胶原)表达。结果与结论:①甲基丙烯酸酐改性明胶/经处理牙本质基质复合水凝胶可持续释放骨形态发生蛋白2长达21 d,在第3-6天释放较快,第6天之后释放趋于平稳;②4种水凝胶均可促进人牙髓干细胞的增殖,其中以BMP-2(100 ng/mL)-GelMA/TDM复合水凝胶的作用最明显;相较于GelMA/TDM复合水凝胶,BMP-2-GelMA/TDM复合水凝胶可促进人牙髓干细胞的黏附,其中以BMP-2(200 ng/mL)-GelMA/TDM复合水凝胶的作用最明显;③相较于GelMA/TDM复合水凝胶,BMP-2-GelMA/TDM复合水凝胶可提升碱性磷酸酶活性、钙结节含量与相关成骨基因表达,综合分析显示BMP-2(100 ng/mL)-GelMA/TDM复合水凝胶的作用更明显;④结果表明,BMP-2(100 ng/mL)-GelMA/TDM复合水凝胶促进牙髓干细胞成骨向分化的能力更明显。

关键词：人牙髓干细胞骨形态形成蛋白2 细胞增殖细胞分化组织工程牙髓-牙本质再生

红景天苷促进MC3T3-E1细胞成骨分化能力的体外实验

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中国组织工程研究 2025年第2期29卷 231-237页

作者：刘朝辉韩晓谦段昕郭鹏达张云涛滨州医学院附属医院口腔科山东省滨州市256600 山东省临沭县妇幼保健院山东省临沂市276700

背景:骨缺损可直接影响牙齿种植的成功率及种植体的长期稳定性。研究显示红景天苷可促进成骨细胞增殖、分化,但对于其成骨分化相关通路具体研究不多。目的:体外细胞实验研究红景天苷对MC3T3-E1细胞增殖和分化的影响,并探究其对相关基因... 详细信息

背景:骨缺损可直接影响牙齿种植的成功率及种植体的长期稳定性。研究显示红景天苷可促进成骨细胞增殖、分化,但对于其成骨分化相关通路具体研究不多。目的:体外细胞实验研究红景天苷对MC3T3-E1细胞增殖和分化的影响,并探究其对相关基因和蛋白表达的影响。方法:采用CCK-8实验和碱性磷酸酶实验筛选红景天苷(0.5,1,5,10,50μmol/L)促进MC3T3-E1细胞增殖和分化的最佳浓度。实验分为4组:对照组、红景天苷组、红景天苷+LY294002组、LY294002组,分别用成骨诱导液、含10μmol/L红景天苷、10μmol/L红景天苷+10μmol/L LY294002、10μmol/L LY294002的成骨诱导液进行培养,观察红景天苷及PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002对成骨相关基因和蛋白表达的影响。结果与结论:①CCK-8实验和碱性磷酸酶实验显示:红景天苷促进MC3T3-E1细胞增殖的作用在10μmol/L时最显著;②与对照组相比,红景天苷可以促进矿化、促进细胞黏附、减少细胞死亡,提高Runx-2、骨钙素、骨桥蛋白的mRNA表达(P<0.01),提高Runx-2和p-Akt蛋白表达(P<0.01);而添加PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002则可逆转以上结果;③结果表明,红景天苷能促进MC3T3-E1细胞矿化,并能促进成骨相关基因、蛋白的表达,这可能与PI3K/Akt信号通路的激活有关。

关键词：红景天苷 MC3T3-E1细胞细胞分化成骨矿化 LY294002 PI3K/Akt信号通路