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基于xCell算法研究痛风的免疫生物标志物及相关靶向中药的筛选

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中国药师 2024年第6期27卷 1007-1018页

作者：李玲琴周睿姣张燕妮袁心柱川北医学院附属医院风湿免疫科四川南充637000 川北医学院附属医院神经内科四川南充637000 川北医学院附属医院肾内科四川南充637000 川北医学院附属南充市中心医院肾内科四川南充637003

目的研究痛风致病的关键基因以及免疫生物标志物,挖掘潜在的靶向中药,为痛风的临床治疗提供新方向。方法从GEO数据库下载痛风芯片数据集,使用R软件进行差异基因的筛选,并对这些差异基因进行GO及基因通路KEGG富集分析。应用STRING数据库... 详细信息

目的研究痛风致病的关键基因以及免疫生物标志物,挖掘潜在的靶向中药,为痛风的临床治疗提供新方向。方法从GEO数据库下载痛风芯片数据集,使用R软件进行差异基因的筛选,并对这些差异基因进行GO及基因通路KEGG富集分析。应用STRING数据库对差异基因进行蛋白质互作网络分析,利用Cytoscape筛选关键基因。使用ELISA方法对关键基因的蛋白表达水平进行实验验证。进一步使用xCell估计免疫细胞在痛风中的相对表达情况及相关性,最后通过Coremine Medical数据库对显著富集的免疫相关生物学过程及关键基因中药进行预测。结果筛选出痛风差异基因共计852个。在GO富集分析中,与免疫反应密切相关的主要生物学过程包括白细胞的趋化性、IL(白细胞介素)-2的产生以及血管生成的调控;KEGG通路主要富集于IL-17信号通路、趋化因子信号通路和肿瘤坏死因子(TNF)信号通路等。筛选出TNF、IL-6、IL-1β、趋化因子配体8(CXCL8)、FOS原癌基因(FOS)和血管内皮生长因子A(VEGFA)等10个关键蛋白,实验验证关键基因蛋白表达水平与芯片数据的表达趋势一致。免疫分析显示,单核细胞、记忆B细胞、初始CD8+T细胞和树突状细胞与痛风关系密切。中药预测发现,人参、三七、黄芩、三白草和丹参等为治疗痛风的潜在药物。结论本研究揭示了痛风致病的可能关键基因以及免疫机制,挖掘出潜在的靶向中药。这些关键基因和中药有望为痛风的治疗提供新的思路和方法。

关键词：痛风中药生物信息学免疫标志物关节炎代谢综合征单钠尿酸盐基因芯片

维奈克拉联合阿扎胞苷在初治成人急性髓系白血病中的临床研究

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中国实验血液学杂志 2024年第4期32卷 1046-1050页

作者：郑永亮丁婷肖晓芳董思曾俊权陈懿建井冈山大学附属医院血液内科江西吉安343000 吉安市中心人民医院血液内科江西吉安343000 赣南医科大学第一附属医院血液内科江西赣州341000

目的:评价维奈克拉联合阿扎胞苷化疗方案治疗初治成人急性髓系白血病患者的疗效及不良反应。方法:回顾性分析井冈山大学附属医院血液内科2020年1月至2022年12月收治的48例初治成人急性髓系白血病患者,其中26例接受维奈克拉联合阿扎胞苷... 详细信息

目的:评价维奈克拉联合阿扎胞苷化疗方案治疗初治成人急性髓系白血病患者的疗效及不良反应。方法:回顾性分析井冈山大学附属医院血液内科2020年1月至2022年12月收治的48例初治成人急性髓系白血病患者,其中26例接受维奈克拉联合阿扎胞苷化疗(观察组),22例接受柔红霉素+阿糖胞苷化疗(对照组),对比两组之间完全缓解率、客观缓解率、无进展生存期、总生存期及不良反应的差异。结果:两组患者在治疗前的年龄、性别比、三系血细胞绝对值及骨髓原始细胞比例均无明显统计学差异(P>0.05)。观察组的完全缓解率及客观缓解率均明显高于对照组(P0.05)。观察组的中位PFS及中位OS均显著优于对照组(P<0.05)。结论:维奈克拉联合阿扎胞苷在初治成人急性髓系白血病中的缓解率高于常规化疗,维奈克拉联合阿扎胞苷化疗能够减少血液系统及非血液系统相关副反应的基础上延长患者缓解期及生存期。

关键词：维奈克拉阿扎胞苷急性髓系白血病

石蒜碱调控线粒体氧化损伤介导人乳腺癌细胞自噬及凋亡作用机制

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中草药 2024年第12期55卷 4056-4064页

作者：辛国松侯妍秀王毛毛于淼季宇彬李文兰李海茹哈尔滨商业大学药物工程技术研究中心黑龙江哈尔滨150076 国家教育部抗肿瘤天然药物工程研究中心黑龙江哈尔滨150076 哈尔滨医科大学附属第二医院黑龙江哈尔滨150086

目的研究石蒜碱介导人乳腺癌MDA-MB-231细胞自噬及凋亡的作用机制。方法采用CCK-8法检测石蒜碱对MDA-MB-231细胞增殖的影响;倒置显微镜、荧光显微镜和激光共聚焦扫描显微镜(laser scanning confocal microscopy,LSCM)观察细胞形态;细胞... 详细信息

目的研究石蒜碱介导人乳腺癌MDA-MB-231细胞自噬及凋亡的作用机制。方法采用CCK-8法检测石蒜碱对MDA-MB-231细胞增殖的影响;倒置显微镜、荧光显微镜和激光共聚焦扫描显微镜(laser scanning confocal microscopy,LSCM)观察细胞形态;细胞集落实验检测细胞克隆形成能力;划痕实验检测细胞迁移能力;流式细胞仪检测细胞凋亡率、细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平、线粒体膜电位;LSCM检测线粒体膜通透性转换孔(mitochondrial permeability transition pore,MPTP)开放情况;Western blotting检测线粒体自噬相关蛋白[线粒体内膜转位酶(translocase of inner membrane,TIM)、线粒体外膜转位酶(translocase of outer membrane,TOM)、E3泛素连接酶(E3 ubiquitin protein ligase,PARKIN)、PTEN诱导的激酶1(PTEN induced putative kinase 1,PINK1)、微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein light chain 3,LC3-B)、p62]和凋亡相关蛋白[半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cystein-asparate protease-3,Caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、细胞色素C(cytochrome-C,Cyt-C)]的表达。结果石蒜碱对MDA-MB-231细胞具有生长抑制作用,其半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC50)值为6.21μmol/L;石蒜碱能够改变细胞形态,部分细胞出现凋亡迹象;石蒜碱能够显著抑制细胞的增殖和迁移能力(P<0.01);与对照组比较,随着石蒜碱给药浓度的增加,细胞凋亡率随之升高(P<0.01),ROS水平升高(P<0.01),线粒体膜电位下降(P<0.01),MPTP开放(P<0.01);石蒜碱给药48 h后,细胞内TIM、TOM、p62和Bcl-2蛋白表达量下调(P<0.01),PARKIN、PINK1、LC3-B、Caspase-3、Bax和Cyt-C蛋白表达量上调(P<0.01),且呈浓度相关性。结论石蒜碱对MDA-MB-231细胞具有生长抑制作用,并可通过调控线粒体氧化损伤介导MDA-MB-231细胞的自噬及凋亡。

关键词：石蒜碱乳腺癌线粒体氧化损伤细胞自噬细胞凋亡

血清HIF-1α、HSP27、HSP70、HSP90α与肝细胞癌患者经肝动脉化疗栓塞术治疗疗效的关系研究

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现代生物医学进展 2024年第4期24卷 695-700页

作者：张子涵黄金刚邱世香陈超钟立明川北医学院医学影像学院四川南充637000 南充市中心医院/川北医学院第二临床医学院介入医学科四川南充637000

目的:探讨血清缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、热休克蛋白(HSP)27、HSP70、HSP90α与肝细胞癌(HCC)患者经肝动脉化疗栓塞术(TACE)治疗疗效的关系。方法:选取2021年6月~2023年6月在南充市中心医院接受TACE治疗的HCC患者125例,根据TACE治疗... 详细信息

目的:探讨血清缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、热休克蛋白(HSP)27、HSP70、HSP90α与肝细胞癌(HCC)患者经肝动脉化疗栓塞术(TACE)治疗疗效的关系。方法:选取2021年6月~2023年6月在南充市中心医院接受TACE治疗的HCC患者125例,根据TACE治疗疗效分为无效组(47例)和有效组(78例)。采用酶联免疫吸附法检测血清HIF-1α、HSP27、HSP70、HSP90α。多因素Logistic回归分析影响HCC患者TACE治疗疗效的因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析血清HIF-1α、HSP27、HSP70、HSP90α对HCC患者TACE治疗无效的预测价值。结果:与有效组比较,无效组血清HIF-1α、HSP27、HSP70、HSP90α水平升高(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,低分化、血管侵犯和HIF-1α、HSP27、HSP70、HSP90α升高为HCC患者TACE治疗无效的独立危险因素(P<0.05)。血清HIF-1α、HSP27、HSP70、HSP90α联合预测HCC患者TACE治疗无效的曲线下面积为0.958,大于血清HIF-1α、HSP27、HSP70、HSP90α单独预测的0.750、0.739、0.742、0.749。结论:血清HIF-1α、HSP27、HSP70、HSP90α升高是HCC患者TACE治疗无效的独立危险因素,血清HIF-1α、HSP27、HSP70、HSP90α联合预测HCC患者TACE治疗无效的价值较高。

关键词：肝细胞癌肝动脉化疗栓塞术 HIF-1α HSP27 HSP70 HSP90α 疗效

异鼠李素通过抑制LncRNA-gm33782减轻AKI肾小管炎性细胞凋亡

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中国实验动物学报 2024年第6期32卷 762-771页

作者：贾建谭睿陟钟霞粟宏伟王丽西南医科大学附属中医医院中西医结合研究中心四川泸州646000 西南医科大学附属中医医院泌尿外科四川泸州646000

目的探讨长链非编码RNA-gm33782(LncRNA-gm33782)在急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)肾小管损伤中的功能以及异鼠李素改善肾小管炎性细胞凋亡的作用机制。方法将48只雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、模型组、治疗组(AKI模型构建后... 详细信息

目的探讨长链非编码RNA-gm33782(LncRNA-gm33782)在急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)肾小管损伤中的功能以及异鼠李素改善肾小管炎性细胞凋亡的作用机制。方法将48只雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、模型组、治疗组(AKI模型构建后灌胃给予30 mg/kg异鼠李素)、空载质粒电转染组、LncRNA-gm33782敲低组、LncRNA-gm33782过表达组、LncRNA-gm33782敲低组+模型组、LncRNA-gm33782过表达+治疗组8组,通过腹腔一次性注射20 mg/kg顺铂诱导小鼠AKI,原位电转染技术用于介导肾LncRNA-gm33782的敲低和过表达。采用Chirp实验捕获AKI肾LncRNA-gm33782结合蛋白进行质谱分析,挖掘LncRNA-gm33782直接作用靶蛋白;通过观察电转染敲低LncRNA-gm33782和异鼠李素(isorhamnetin,ISO)治疗干预后小鼠肾功能、病理结构改变、肾炎性因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)表达,评价LncRNA-gm33782在AKI中的作用;NF-κB被作为介导炎症的关键信号通路,Bax、Bcl-2蛋白表达量以及流式凋亡检测结果被用于评价异鼠李素对AKI肾小管炎性细胞凋亡的治疗作用。结果AKI小鼠肾表现出严重的肾小管损伤以及巨噬细胞浸润和炎症,异鼠李素的治疗干预和LncRNA-gm33782电转染敲低均能够减轻AKI肾损伤。LncRNA-gm33782主要表达于AKI损伤的肾小管细胞,质谱检测发现补体因子-H(complement factor-H,CFH)与其有直接结合关系。体外过表达LncRNA-gm33782后,CFH表达量随即升高,而异鼠李素对AKI细胞炎性凋亡的治疗作用受到抑制。结论异鼠李素是通过抑制LncRNA-gm33782对CFH的调控作用减轻AKI肾小管细胞炎性凋亡。

关键词：急性肾损伤 LncRNA-gm33782 肾原位电转染异鼠李素炎性凋亡

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代谢综合征痰瘀互结证量化诊断标准的研究

世界科学技术-中医药现代化 2024年第1期26卷 242-251页

作者：刘亚丹王斌燕树勋段飞河南中医药大学第一附属医院郑州450000 天津中医药大学第一附属医院天津300381 国家中医针灸临床医学研究中心天津300381

目的确定代谢综合征痰瘀互结证量化诊断标准。方法基于文献研究制定《基于层次分析法的MS痰瘀互结证专家咨询问卷》,邀请专家填写问卷,采用专家群决策算法构建《MS痰瘀互结证诊断标准(草案)》。前瞻性收集MS患者,采用条件概率换算法、... 详细信息

目的确定代谢综合征痰瘀互结证量化诊断标准。方法基于文献研究制定《基于层次分析法的MS痰瘀互结证专家咨询问卷》,邀请专家填写问卷,采用专家群决策算法构建《MS痰瘀互结证诊断标准(草案)》。前瞻性收集MS患者,采用条件概率换算法、最大似然判别法对MS痰瘀互结证诊断标准进行临床验证并修订,制定MS痰瘀互结证量化诊断标准。结果建立的MS痰瘀互结证量化诊断标准诊断效能灵敏度95.7%,特异度84.0%,准确度91.6%,阳性似然比5.98,阴性似然比19.46。结论基于文献研究、专家咨询法及诊断性试验建立的MS痰瘀互结证量化诊断标准具有较好的诊断效能。

关键词：代谢综合征痰瘀互结证量化诊断标准层次分析法

肿瘤坏死因子α介导的骨细胞程序性死亡在骨质疏松症发病机制中的作用

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中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志 2024年第3期17卷 272-279页

作者：赵建栋刘贝郭成龙张晓刚毕煦昆魏玉娇李纪书刘凯雯刘志寰甘肃中医药大学兰州730000 甘肃中医药大学附属医院嘉峪关路社区卫生服务中心兰州730000 甘肃中医药大学附属医院脊柱外科兰州730000 甘肃中医药大学附属医院北院内科兰州730000

骨质疏松症(osteoporosis,OP)是中老年人群最常见的骨骼疾病,随着我国老龄化社会的到来,OP已严重影响国人生活质量,现阶段对OP的治疗已经有了相对系统的方案,但抗骨质疏松是一个长期的过程,药物使用周期长、费用高、不良反应较多等一系... 详细信息

骨质疏松症(osteoporosis,OP)是中老年人群最常见的骨骼疾病,随着我国老龄化社会的到来,OP已严重影响国人生活质量,现阶段对OP的治疗已经有了相对系统的方案,但抗骨质疏松是一个长期的过程,药物使用周期长、费用高、不良反应较多等一系列问题都为我国的医疗带来了巨大的压力,所以继续研究OP发病机理,寻求更有优势的抗骨质疏松药物显得尤为重要。现研究发现肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)在OP进程中起关键作用,TNF-α介导的骨组织细胞直接或间接发生坏死是导致骨量减少的一个关键因素,TNF家族作为免疫因子对抵抗致病因素对机体的损害起了巨大作用,但是机体内过多的TNF-α则会诱导某些疾病的发生,如OP,它参与多种骨组织细胞死亡方式。本文综述了TNF-α通过程序性坏死、铁死亡、细胞凋亡、自噬等程序性死亡方式导致OP的相关通路,为OP的治疗提供理论依据。

关键词：骨质疏松症程序性细胞死亡肿瘤坏死因子α

健脾化瘀解毒方调控PKA/NLRP3通路治疗胃癌前病变的机制

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中华中医药杂志 2024年第9期39卷 4605-4611页

作者：张丹倪家慧张喜沈阳刘伟方坚松潘华峰广州中医药大学广州510006 广州中医药大学第一附属医院岭南医学研究中心广州510006 南京中医药大学江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心南京210023

目的:探讨健脾化瘀解毒方(JPHYJD)调控蛋白激酶A(PKA)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)通路治疗胃癌前病变(GPL)的作用机制。方法:动物实验一:将60只小鼠随机分为空白组,模型组,JPHYJD高、低剂量组,维酶素组,分别进行处理后,H... 详细信息

目的:探讨健脾化瘀解毒方(JPHYJD)调控蛋白激酶A(PKA)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)通路治疗胃癌前病变(GPL)的作用机制。方法:动物实验一:将60只小鼠随机分为空白组,模型组,JPHYJD高、低剂量组,维酶素组,分别进行处理后,HE染色观察胃黏膜病理改变,免疫荧光染色观察NLRP3、GSDMD表达。动物实验二:将60只小鼠随机分为空白组、模型组、H89组、模型+H89组、JPHYJD组、模型+H89+JPHYJD组,Western Blot检测GSDMD-N、Caspase-1、IL-1β表达。细胞实验一:THP-1细胞分为空白组、模型组和JPHYJD组,使用LPS+ATP造模后,JPHYJD组予含药血清处理。细胞实验二:分组同动物实验二,分别予以H89及JPHYJD含药血清处理。检测焦亡相关分子表达和PI染色。结果:动物实验中,与空白组比较,模型组出现GPL病变,NLRP3、GSDMD表达显著升高(P<0.01),JPHYJD可改善胃黏膜病变,显著抑制NLRP3、GSDMD表达(P<0.01,P<0.05);与空白组比较,模型组GSDMD-N、Caspase-1、IL-1β表达显著升高(P<0.01),JPHYJD可抑制其表达(P<0.01),模型+H89+JPHYJD组表达水平显著高于JPHYJD组(P<0.05)。细胞实验中,与空白组比较,模型组NLRP3、GSDMD-N、Caspase-1、IL-1β蛋白和mRNA表达显著升高,焦亡水平显著升高(P<0.01,P<0.05),JPHYJD可显著抑制上述分子表达,减少细胞焦亡(P<0.01);与空白组比较,模型组PKA降低,NLRP3、GSDMD-N、IL-1β升高,焦亡水平升高(P<0.01),JPHYJD可上调PKA,抑制NLRP3、GSDMD-N、IL-1β,减少细胞焦亡(P<0.01,P<0.05);与JPHYJD组比较,模型+H89+JPHYJD组PKA降低,NLRP3、GSDMD-N、IL-1β表达升高,焦亡水平升高(P<0.01)。结论:JPHYJD可通过调控PKA/NLRP3通路抑制细胞焦亡从而治疗GPL。

关键词：胃癌前病变健脾化瘀解毒方细胞焦亡核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3 蛋白激酶A

炆何首乌通过激活Wnt/β-catenin信号通路治疗小鼠雄激素性脱发

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中国实验方剂学杂志 2024年第23期 246-253页

作者：潘福竺陈明霞易斌薛艳华玉秋萍伍发云冀恩惠吴宏伟许静中国中医科学院中药研究所遵义医科大学药学院建昌帮药业有限公司北京斯利安药业有限公司江西省中药炮制(炆法)重点研究室中国民用航空局民用航空医学中心民航总医院

目的：对炆何首乌治疗雄激素性脱发（AGA）的作用效果进行评价，并对其作用机制进行研究。方法：99只SPF级雄性C57BL/6J小鼠按照随机数字表法分为空白组、模型组、阳性药非那雄胺组（0.65 mg·kg-1）、炆/制何首乌低、中、高剂量组（0.7... 详细信息

目的：对炆何首乌治疗雄激素性脱发（AGA）的作用效果进行评价，并对其作用机制进行研究。方法：99只SPF级雄性C57BL/6J小鼠按照随机数字表法分为空白组、模型组、阳性药非那雄胺组（0.65 mg·kg-1）、炆/制何首乌低、中、高剂量组（0.78、1.56、3.12 g·kg-1）。利用丙酸睾酮稀释液皮下多点注射60 d构建小鼠AGA模型，并于第11天开始灌胃给药。通过脱毛区域的新生毛发面积、毛发长度、毛发质量、苏木素-伊红（HE）染色评价炆/制何首乌对AGA的治疗作用；进一步利用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测小鼠皮肤组织中睾酮（T）、双氢睾酮（DHT）和5α-还原酶（5-AR）的含量，利用蛋白免疫印迹法（Western blot）对Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路中的关键蛋白进行验证。结果：造模60 d后，与空白组比较，模型组小鼠背部脱发区域的新生毛发面积、毛发长度及质量、含黑色素毛囊数量/总毛囊数量比值明显降低（P<0.05,P<0.01），皮肤组织中T、DHT、5-AR含量及糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)表达水平明显升高（P<0.05,P<0.01）,β-catenin、磷酸化糖原合酶激酶-3β(p-GSK-3β)与p-GSK-3β/GSK-3β表达水平明显降低（P<0.05,P<0.01）；与模型组比较，非那雄胺、炆/制何首乌低、中、高剂量能够显著增加小鼠新生毛发面积及长度（P<0.01），炆何首乌低、中剂量明显升高新生毛发质量（P<0.05,P<0.01），非那雄胺、炆何首乌低、中、高剂量及制何首乌低、高剂量明显升高小鼠皮肤组织中含黑色素毛囊数量/总毛囊数量比值（P<0.05,P<0.01）；与相同生药量的制何首乌比较，炆何首乌中、高剂量明显升高含黑色素毛囊数量/总毛囊数量比值（P<0.05）。与模型组比较，炆何首乌能显著降低小鼠皮肤组织中T、DHT含量和GSK-3β表达水平（P<0.01），显著升高β-catenin、p-GSK-3β及p-GSK-3β/GSK-3β表达水平（P<0.05,P<0.01）。结论：炆何首乌能够改善小鼠雄激素性脱发，其作用机制与降低雄性激素水平、促进Wnt/β-catenin信号传导有关。

关键词：炆何首乌制何首乌雄激素性脱发毛发再生 Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路