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豌豆蛋白酶解-美拉德反应产物的制备及其提升低钠植物肉风味及储藏稳定性的研究

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现代食品科技 2024年第1期40卷 183-193页

作者：谢宇希宋雪盈赵谋明吴军罗东辉罗燕华梁春虹张佳男苏国万华南理工大学食品科学与工程学院广东广州510640 广东天企生物科技有限公司广东佛山528000 广州市肽汇生物科技有限公司广东广州511458

该文探究了豌豆蛋白酶解-美拉德反应产物(Maillard Reaction Products Derived From Pea Protein Enzymatic Hydrolysate,PPIHM)对低钠植物肉品质的影响。以豌豆蛋白为原料,通过蛋白酶水解结合谷氨酰胺转氨酶(Glutamine Transaminase,TG酶)交联,添加质量分数为3.0%谷胱甘肽和1.0%还原糖(木糖:核糖=1:3)进行美拉德反应制备PPIHM,并证明PPIHM的良好烤肉香气,鲜味及抗氧化能力。进一步添加不同质量分数(1%,3%,5%)的PPIHM于低钠植物肉中,系统研究发现添加PPIHM在保持植物肉自身刚性和稳定性的前提下,能显著提升植物肉的肉香感知强度,延缓植物肉中油脂和蛋白的氧化。其中,感官品评人员对3%PPIHM植物肉组的喜好度和接受度最高,5%PPIHM植物肉组抗氧化和贮藏稳定性效果最好,在第12天时,POV值仅为0.0097 g/100 g。研究结果表明添加PPIHM是改善低钠植物肉风味,提高其储藏性能的一种有效途径。该研究为深入探究PPIHM作为天然反应型风味补偿剂在低钠植物肉中的应用提供了理论基础和方法指导。

关键词：豌豆蛋白美拉德反应植物肉风味特性储藏稳定性

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乳清蛋白源抗真菌多肽的制备工艺优化

中国乳品工业 2024年第6期52卷 59-64页

作者：谢雨佳彭小杰李明逸李政王娟肖珊珊张少辉上海交通大学农业与生物学院上海200240 浙江辉肽生命健康科技有限公司浙江温州325800

文章研究利用副干酪乳杆菌与费氏丙酸杆菌协同发酵乳清蛋白,进行正交实验设计,以酸度、多肽含量和抑菌率为指标,进一步优化乳清蛋白源抗真菌多肽的工艺条件。结果表明,乳清蛋白源抗真菌多肽的最佳生产条件为,菌株接种量为0.052 g/L,发... 详细信息

文章研究利用副干酪乳杆菌与费氏丙酸杆菌协同发酵乳清蛋白,进行正交实验设计,以酸度、多肽含量和抑菌率为指标,进一步优化乳清蛋白源抗真菌多肽的工艺条件。结果表明,乳清蛋白源抗真菌多肽的最佳生产条件为,菌株接种量为0.052 g/L,发酵温度为37℃,培养基中乳糖取代量为40%(m/m)。在此条件下进行协同发酵,获得的多肽对黑曲霉生长的72 h抑菌率达到80.37%±6.75%。

关键词：乳清蛋白抗真菌生物活性肽协同发酵

抗CD33单克隆抗体肽图分析方法的建立与验证

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中国药学杂志 2024年第16期59卷 1495-1503页

作者：白露叶日平刘蒙蒙李雪琪张秀真赵永新杭州多禧生物科技有限公司杭州310018

目的建立抗CD33单克隆抗体肽图分析方法并对方法进行验证。方法分别使用不同类型设备和不同流动相体系进行抗CD33抗体肽图检测。通过合成抗体CDR区域肽段进行特征肽段定位,并用质谱法对定位结果进行确认。以相对保留时间作为判断依据... 详细信息

目的建立抗CD33单克隆抗体肽图分析方法并对方法进行验证。方法分别使用不同类型设备和不同流动相体系进行抗CD33抗体肽图检测。通过合成抗体CDR区域肽段进行特征肽段定位,并用质谱法对定位结果进行确认。以相对保留时间作为判断依据,根据《中国药典》2020年版完成方法验证。结果超高效液相色谱法(ultraperformance liquid chromotograph,UPLC)进行肽图检测比高效液相色谱法(high performance liquid chromotograph,HPLC)时间更短,三氟乙酸流动相体系相比甲酸流动相体系分离度更高。使用合成肽段的定位结果与质谱鉴定结果一致。方法专属性验证结果显示制剂空白、样品溶液空白对肽图特征峰检测无干扰,不同抗体肽图谱之间存在明显差异;重复性验证结果显示6份平行样品间特征肽段相对保留时间相对标准偏差(RSD)为0.01%~0.05%;中间精密度验证结果显示不同分析人员特征肽段相对保留时间RSD为0.04%~0.32%;耐用性验证结果显示不同酶处理条件[胰蛋白酶量为(1±0.2)μg、酶解温度为(37±1)℃、酶解时间为(4±1)h]特征肽段相对保留时间RSD为0.02%~0.09%,不同色谱条件[三氟乙酸占比(0.08±0.02)%、流速(0.3±0.05)mL·min^(-1)、柱温(40±2)℃]、不同批次色谱柱特征肽段相对保留时间RSD为0.36%~1.43%。样品溶液在25 h内检测,特征肽段相对保留时间RSD为0.01%~0.04%。结论本研究采用合成肽段对液相肽图检测中的肽段进行定位,同时采用相对保留时间进行检测结果的判定,为生物药肽图检测提供了新的思路。

关键词：肽图分析超高效液相色谱法三氟乙酸质谱

酶解联合微生物发酵对弹性蛋白肽理化性质与功能特性的影响

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食品与发酵工业 2024年

作者：鲁杏茹智文博吕静曾贝贝李带根厦门元之道生物科技有限公司

为提高弹性蛋白肽（elastin peptide， EP）的理化性质与功能特性，该研究通过酶解联合微生物（副干酪乳杆菌YYS-K1）发酵制备弹性蛋白肽（EMEP），以单一蛋白酶解制备EP为对照，比较EMEP和EP的理化性质和功能特性的差异。结果表明：EME... 详细信息

为提高弹性蛋白肽（elastin peptide， EP）的理化性质与功能特性，该研究通过酶解联合微生物（副干酪乳杆菌YYS-K1）发酵制备弹性蛋白肽（EMEP），以单一蛋白酶解制备EP为对照，比较EMEP和EP的理化性质和功能特性的差异。结果表明：EMEP的糖胺聚糖的含量较EP提高了约1.73倍；2种EP中氨基酸组成和必需氨基酸占比无明显差异，而EMEP中的Gly和Leu含量占比明显高于EP；分子质量分布结果表明，EMEP中＜1 000 Da肽段占比为89.37%，单一酶解制备的EP占比为89.19%。抗氧化结果表明，2种EP均具有一定的抗氧化能力，在质量浓度为40 mg/mL时，EMEP的DPPH自由基、ABTS阳离子自由基和超氧阴离子自由基清除率较EP分别提高29.59%、2.74%和8.45%；EP与EMEP均表现出良好的功能特性，其中质量浓度为40 mg/mL的EMEP可有效抑制白蛋白变性、AGEs生成以及胰脂肪酶和弹性蛋白酶的活性，抑制率分别达到了92.11%，70.14%，81.14%和83.33%，与单一蛋白酶解EP相比分别提高20.25%、12.66%、81.14%和20.85%。总之，酶解联合微生物发酵制备法有利于进一步提高EP的理化性质和功能特性，为开发高质量的弹性蛋白肽产品提供理论依据。

关键词：弹性蛋白肽酶解联合微生物发酵蛋白酶解抗氧化活性生物活性

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不同杂粮粉对红薯粉条品质特性的影响

食品科技 2024年第1期49卷 169-176页

作者：冯亚运朱怡霖高彩彩刘志军安阳工学院生物与食品工程学院河南安阳455000 林州绿健农业发展有限公司河南林州456500

为探究添加杂粮粉对红薯粉条品质的影响,对添加不同质量分数(5%、10%和15%)板栗粉、葛根粉、山药粉和紫薯粉的红薯粉条断条率、蒸煮特性、质构特性、色泽、体外淀粉消化特性和挥发性成分进行分析。结果表明:不同杂粮粉对红薯粉条的品质... 详细信息

为探究添加杂粮粉对红薯粉条品质的影响,对添加不同质量分数(5%、10%和15%)板栗粉、葛根粉、山药粉和紫薯粉的红薯粉条断条率、蒸煮特性、质构特性、色泽、体外淀粉消化特性和挥发性成分进行分析。结果表明:不同杂粮粉对红薯粉条的品质影响存在显著差异,板栗粉使红薯粉条断条率从8.33%上升至18.33%,而添加其余杂粮粉的红薯粉条断条率均为3.33%。葛根粉和紫薯粉可显著降低红薯粉条的吸水率和蒸煮损失率。添加5%板栗粉、5%山药粉和5%~15%葛根粉降低了红薯粉条的硬度、胶黏性和咀嚼性,添加葛根粉使红薯粉条的L^(*)值增大。添加杂粮粉后红薯粉条的快速消化淀粉含量下降,慢速消化淀粉含量增加,板栗粉降低了红薯粉条的抗性淀粉含量,葛根粉、山药粉和紫薯粉则均使红薯粉条的抗性淀粉含量增加。添加板栗粉的红薯粉条挥发性气味成分与其他样品有明显差异,使红薯粉条在W5S(氮氧化合物)、W1S(甲基类)、W1W(硫化物、萜烯类)、W2S(醇类、醛酮类)和W2W(有机硫化物芳香成分)等5类气味成分信号值增强。

关键词：红薯粉条杂粮粉蒸煮特性质构特性挥发性成分

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牡丹花酶解肽的理化性质及促进皮肤健康功效

食品工业科技 2024年

作者：曾贝贝吕静鲁杏茹智文博李带根厦门元之道生物科技有限公司

为进一步促进牡丹花的开发利用，本研究以酶解的牡丹花酶解肽为研究对象，分析了其分子量分布与氨基酸组成，通过测定体外酪氨酸酶抑制率、抗糖化活性、透明质酸酶抑制率以及抗氧化活性研究其促进皮肤健康的功效，并进一步利用斑马鱼黑... 详细信息

为进一步促进牡丹花的开发利用，本研究以酶解的牡丹花酶解肽为研究对象，分析了其分子量分布与氨基酸组成，通过测定体外酪氨酸酶抑制率、抗糖化活性、透明质酸酶抑制率以及抗氧化活性研究其促进皮肤健康的功效，并进一步利用斑马鱼黑色素沉积模型进行验证。结果表明，牡丹花酶解肽是由15种氨基酸组成的平均分子量为644 Da的小分子肽，当浓度为10 mg/mL时，体外酪氨酸酶抑制率为88.96%，晚期糖基化终末产物（AGEs）抑制率为90.50%，透明质酸酶抑制率为60.43%，DPPH自由基清除率和羟自由基清除率分别为74.77%和94.74%。同时，斑马鱼模型的结果表明牡丹花酶解肽可有效抑制斑马鱼头部黑色素沉积，当样品浓度为1000 μg/mL时，黑色素抑制率达到40.59%。总之，体内外研究结果初步证明牡丹花酶解肽具有良好的促进皮肤健康的潜力。

关键词：牡丹花酶解肽美白皮肤健康抗氧化斑马鱼

东方黏虫溶菌酶基因MseLYS的克隆与表达分析

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华北农学报 2024年第4期39卷 206-214页

作者：张元臣苏圣盈张家祺薛爽王景顺安阳工学院生物与食品工程学院河南安阳455000 河南省太行山林业有害生物野外科学观测研究站河南林州456550 林州市科技创新服务中心河南林州456550

克隆东方黏虫C型溶菌酶基因MseLYS,构建MseLYS基因的原核表达载体,检测该基因在东方黏虫不同龄期和组织的表达情况,旨在为探究MseLYS基因的功能和结构提供理论参考,也为进一步研究该基因的抗菌功能和生理机制奠定基础。以东方黏虫为研... 详细信息

克隆东方黏虫C型溶菌酶基因MseLYS,构建MseLYS基因的原核表达载体,检测该基因在东方黏虫不同龄期和组织的表达情况,旨在为探究MseLYS基因的功能和结构提供理论参考,也为进一步研究该基因的抗菌功能和生理机制奠定基础。以东方黏虫为研究对象,通过反转录PCR(RT-PCR)和末端快速扩增技术(RACE),获得了溶菌酶基因MseLYS的全长核苷酸序列,之后将去掉信号肽的开放阅读框架(ORF)序列连接到表达载体pET-30a(+)上,并用IPTG进行了诱导表达,最后用荧光定量PCR明确了该基因的时空表达模式。序列分析表明,此基因全长729 bp,ORF全长426 bp,5′和3′非编码区分别为75,228 bp,共编码141个氨基酸残基,其蛋白质的等电点和分子质量分别为7.72,16.13 ku。系统进化树分析结果表明,MseLYS与其他物种的C型溶菌酶聚集在一起,且与其他昆虫的氨基酸序列具有高度一致性,表明MseLYS为C型溶菌酶。SDS-PAGE电泳结果表明,MseLYS在表达菌BL21(DE3)内表达的蛋白质分子质量与预期大小一致,约20 ku,说明MseLYS在大肠杆菌中能够高效表达。龄期表达谱分析表明,MseLYS基因在东方黏虫幼虫、雄虫和雌虫不同发育阶段表达量显著不同,在末龄幼虫、蛹中表达量较高,其他发育时期表达水平较低。组织表达分析结果表明,MseLYS基因在雄虫不同组织表达量存在着显著差异,其中脂肪体和胸内表达量较高;在雌虫不同组织表达量也存在显著差异,其中触角、翅和体壁中表达量较高。综上,成功克隆了东方黏虫C型溶菌酶MseLYS基因的全长序列,构建了该基因的原核表达载体并能够高效表达蛋白质,明确了该基因在不同组织和不同龄期的表达模式。

关键词：东方黏虫溶菌酶基因克隆原核表达定量PCR

超高效液相色谱-串联质谱法测定人血清中结核病生物标志物CFP-10

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分析试验室 2024年

作者：方媚许文芳王娇娇吴筱丹金法祥李士敏浙江大学农生环测试中心绍兴文理学院附属医院检验科泽达精准(杭州)生物科技有限公司

建立了超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）测定人血清中结核病生物标志物培养滤液蛋白10（CFP-10）的方法。血清样品经蛋白沉淀、胰蛋白酶消化后，采用固相萃取（SPE）富集纯化CFP-10酶解产生的特异性肽段，经Luna Omega PS-C18色... 详细信息

建立了超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）测定人血清中结核病生物标志物培养滤液蛋白10（CFP-10）的方法。血清样品经蛋白沉淀、胰蛋白酶消化后，采用固相萃取（SPE）富集纯化CFP-10酶解产生的特异性肽段，经Luna Omega PS-C18色谱柱分离后，采用电喷雾电离源（ESI+），多反应监测（MRM）扫描模式检测。结果表明：方法在3～100 ng/mL范围内线性良好，线性相关系数r2=0.9906，方法检出限和定量限分别为1.0和3.0 ng/mL，加标回收率为89.8% ～ 108.1%，日内和日间相对标准偏差均低于10%。采用该方法对61个实际血清样品进行测定，结果显示结核病例组的血清CFP-10水平较非结核病对照组显著降低。该方法可实现高通量处理，适用于临床血清样本中CFP-10的检测。

关键词：培养滤液蛋白10 超高效液相色谱-串联质谱法结核病血清

负压引流联合重组人碱性成纤维细胞生长因子治疗难愈性创面的临床效果分析

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中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 2024年第10期 0032-0035页

作者：滕凌朗肽生物制药股份有限公司广东佛山528000

探讨负压引流联合重组人碱性成纤维细胞生长因子治疗难愈性创面的临床效果。方法在2023年第三及第四季度期间,在本院的难愈性创面患者中选择了96例患者,按照数量对等原则将这些患者分为研究组及参照组两种,对参照组采用常规的手术清创... 详细信息

探讨负压引流联合重组人碱性成纤维细胞生长因子治疗难愈性创面的临床效果。方法在2023年第三及第四季度期间,在本院的难愈性创面患者中选择了96例患者,按照数量对等原则将这些患者分为研究组及参照组两种,对参照组采用常规的手术清创、机械清创及酶学法清创等治疗方法,对研究组患者则采用负压引流联合重组人碱性成纤维细胞生长因子治疗,每个患者均治疗、观察半个月以上,跟踪并记录这些患者的肉芽生长情况、创面愈合情况,对他们进行诊疗护理满意度调查。结果研究组患者肉芽生长情况的良好率、较好率、一般率、较差率分别为56.25%、39.58%、4.17%、00.00%。参照组患者肉芽生长情况的良好率、较好率、一般率、较差率分别为27.08%、22.92%、31.25%、18.78%。研究组患者24h后的残创面积、平均愈合时间、平均住院时间、半年后的瘢痕面积均值、半年内不良事件发生率分别是12.45±2.94cm、15.76±1.29天、12.45±2.94天、5.64±1.21cm、27.08%;参照患者24h后的残创面积、平均愈合时间、平均住院时间、半年后的瘢痕面积均值、半年内不良事件发生率分别是19.33±3.14cm、23.47±2.81天、15(31.25)天、13.47±2.15cm、85.42%。P<0.05。结论对于难愈性创面患者的治疗而言,应用负压引流联合重组人碱性成纤维细胞生长因子治疗方法可催动肉芽组织实现更为快速的生长,并且能确保较好的治愈率,有着比较不错的临床效果。

关键词：压引流联合重组人碱性成纤维细胞生长因子难愈性创面临床效果愈合