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rDNA测序在酵母菌和丝状真菌鉴定中的临床应用评价

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中国抗生素杂志 2021年第5期46卷 432-436页

作者：卢玲玲单洪波许育绚钟钰芳丁进龙王慧兰杭州艾迪康医学检验中心有限公司杭州310000

目的评价核糖体RNA(rDNA)测序,在临床酵母菌和丝状真菌鉴定中的应用价值。方法收集61株真菌(包括5株标准菌株,9株室间质评酵母菌,24株临床酵母菌,23株临床丝状真菌),通过设计通用引物ITS和26S D1/D2,对61株真菌进行PCR扩增并对扩增产物... 详细信息

目的评价核糖体RNA(rDNA)测序,在临床酵母菌和丝状真菌鉴定中的应用价值。方法收集61株真菌(包括5株标准菌株,9株室间质评酵母菌,24株临床酵母菌,23株临床丝状真菌),通过设计通用引物ITS和26S D1/D2,对61株真菌进行PCR扩增并对扩增产物进行双向测序,将获得的所有序列在Seqman中打开,选取ITS和26S D1/D2正反向序列无重叠峰片段,进行BLAST核酸序列比对。结合Mycobank真菌分类信息以获得菌株鉴定结果。结果61株真菌全部扩增成功,剔除杂峰后,所有菌株联合ITS和26S D1/D2测序鉴定,100%菌种能鉴定到属或群,97.0%(32/33)的酵母菌与73.9%(17/23)的丝状真菌准确鉴定到种。结论经优化后的核糖体RNA(rDNA)测序,能准确快速的鉴定临床常见真菌与疑难菌。

关键词：核糖体真菌基因测序

亚砷酸钠对人正常肝细胞脂质代谢及因子调控的作用

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中国组织工程研究 2025年第23期29卷 4956-4964页

作者：田侦丽张小旭方兴艳谢婷婷贵州医科大学附属医院临床检验中心贵州医科大学医学检验学院贵州省贵阳市550004 贵州茅台医院贵州省仁怀市564501

背景:肝脏作为砷毒作用的主要靶器官,成为砷毒性作用机制相关研究的焦点。目的:探讨亚砷酸钠对人正常肝细胞脂质代谢、细胞增殖、细胞凋亡及相关调控因子表达的影响。方法:MIHA正常人肝细胞株暴露于0,10,20,30μmol/L亚砷酸钠48 h,光学... 详细信息

背景:肝脏作为砷毒作用的主要靶器官,成为砷毒性作用机制相关研究的焦点。目的:探讨亚砷酸钠对人正常肝细胞脂质代谢、细胞增殖、细胞凋亡及相关调控因子表达的影响。方法:MIHA正常人肝细胞株暴露于0,10,20,30μmol/L亚砷酸钠48 h,光学显微镜观察细胞形态变化,CCK-8法检测细胞活性,单试剂COD-PAP法、单试剂GPO-PAP法及酶微板法检测细胞上清总胆固醇、三酰甘油及总胆汁酸水平,油红O染色法检测细胞内脂质含量,Edu-488渗入法检测细胞增殖,PI染色法及Annexin V-FITC/PI双标记法结合流式细胞术分别检测细胞周期和细胞凋亡,实时荧光定量PCR和Western blot检测肝细胞核因子4α、胆固醇7α-羟化酶及法尼醇X受体的m RNA及蛋白表达水平。结果与结论:(1)与对照组(0μmol/L亚砷酸钠)相比,随着亚砷酸钠浓度的增加:MIHA细胞活性逐渐降低;细胞上清中总胆固醇、三酰甘油水平逐渐增高,总胆汁酸水平逐渐降低;细胞内脂质含量逐渐增多;细胞停滞于S期及G_2/M期细胞比例逐渐增多;细胞凋亡率逐渐升高;肝细胞核因子4α mRNA表达水平未见明显变化,胆固醇7α-羟化酶与法尼醇X受体mRNA表达水平下降;肝细胞核因子4α、胆固醇7α-羟化酶、法尼醇X受体蛋白表达水平逐渐下降;(2)亚砷酸钠具有细胞毒性,显著降低MIHA细胞活性,诱导细胞脂肪变性,阻滞细胞增殖,诱发细胞凋亡等损伤;亚砷酸钠可下调肝细胞核因子4α蛋白表达以及胆固醇7α-羟化酶、法尼醇X受体的转录和蛋白表达,进一步引起肝细胞的脂质代谢紊乱。

关键词：亚砷酸钠 MIHA细胞胆固醇7α-羟化酶法尼醇X受体细胞周期细胞凋亡油红O染色脂质代谢

一步酸稀释-电感耦合等离子体质谱法测定全血中17种元素的含量

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理化检验（化学分册） 2023年第8期59卷 923-929页

作者：霍玉美许育绚单洪波蔡鑫杭州艾迪康医学检验中心有限公司杭州310023

鉴于经典方法(原子吸收光谱法)存在过程繁琐、引入污染风险高、样品量大、耗时较长等缺点,进行了题示研究。采用含0.1%(体积分数)硝酸、0.1%(体积分数)曲拉通、1%(体积分数)异丙醇的稀释液一步稀释全血样品(样品量最低为50μL),所得溶... 详细信息

鉴于经典方法(原子吸收光谱法)存在过程繁琐、引入污染风险高、样品量大、耗时较长等缺点,进行了题示研究。采用含0.1%(体积分数)硝酸、0.1%(体积分数)曲拉通、1%(体积分数)异丙醇的稀释液一步稀释全血样品(样品量最低为50μL),所得溶液直接进电感耦合等离子体质谱仪分析。以Sc、Rh、In、Tb、Bi作为内标元素,碰撞模式选择氦(He)模式。结果显示:一步酸稀释法过程简单,引入污染风险小,且低、高浓度水平样品不会相互干扰,样品中17种元素可在45s内完成同时检测;各目标元素的质量浓度分别在0.05~30mg·L^(-1)(Ca、Mg、Fe)和0.5~300μg·L^(-1)(Cr、Co、Cd、Cu、Mn、Mo、Ni、Pb、Se、V、Zn、Rb、Sr、Cs)内与对应的质谱响应值比值呈线性关系,检出限(3s)为0.3ng·L^(-1)~0.22μg·L^(-1);对全血痕量元素标准物质L-1、L-2进行准确度试验,测定值均在认定值的95%置信区间内;对质控样品进行日内(n=10)、日间(n=15)精密度试验和方法比对试验,测定值的相对标准偏差均小于15%,且上述方法和经典方法测定值的相对误差的绝对值均不大于11%。

关键词：一步酸稀释法电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS) 元素全血

MFC监测MRD在AML中的应用和研究进展

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中国卫生检验杂志 2012年第3期22卷 671-674页

作者：孙晓柏夏成青济南市艾迪康医学检验中心济南250031 杭州市艾迪康医学检验中心杭州310023

急性白血病患者在诊断初期体内有大约1012个白血病细胞。为了使病人迅速获得完全缓解[1,2],在抗白血病治疗的第一阶段需要尽快对病人进行诱导缓解治疗。AML在诱导缓解治疗后有60%～80%的病人可以达到完全缓解（Complete remission,CR）... 详细信息

急性白血病患者在诊断初期体内有大约1012个白血病细胞。为了使病人迅速获得完全缓解[1,2],在抗白血病治疗的第一阶段需要尽快对病人进行诱导缓解治疗。AML在诱导缓解治疗后有60%～80%的病人可以达到完全缓解（Complete remission,CR）,但尽管如此,却有大约30%的病人在初步诱导治疗后仍会经历复发。

关键词：微小残留病变急性髓系白血病多参数流式细胞术

浙江地区妇女生殖道人乳头瘤病毒感染亚型的检测及流行病学分析

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中华流行病学杂志 2010年第3期31卷 353-354页

作者：邹媛郭兴中陈婕朱凡董正伟方国伟杭州艾迪康医学检验中心研发部 310023

人乳头瘤病毒（HPV）感染是导致宫颈鳞癌和上皮内瘤病变等发生的必要因素。通常在性活跃期的最初几年，有75％以上的女性会在不同阶段感染HPV。而持续性的高危型HPV感染将会增加宫颈细胞癌变的危险性。因此，HPV基因分型检测成为筛查及... 详细信息

人乳头瘤病毒（HPV）感染是导致宫颈鳞癌和上皮内瘤病变等发生的必要因素。通常在性活跃期的最初几年，有75％以上的女性会在不同阶段感染HPV。而持续性的高危型HPV感染将会增加宫颈细胞癌变的危险性。因此，HPV基因分型检测成为筛查及预防宫颈癌的有效手段之一。本研究分析浙江地区生殖道标本的HPV基因分型检测结果，以了解HPV各亚型的感染及分布情况。

关键词：人乳头瘤病毒基因分型基因芯片

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多学科交叉的检验医学的现状与进展

中国科学基金 2025年 1018-1032页

作者：方冬杜林勇梁国新王晨辉何彦方合志吕建新杨正林尚红窦豆闫章才国家自然科学基金委员会医学科学部温州医科大学检验医学院(生命科学学院) 中国医科大学附属第一医院国家医学检验临床医学研究中心电子科技大学附属医院/四川省人民医院南方医科大学珠江医院广东省医学检验临床研究中心温州医科大学浙江省医学遗传学重点实验室浙江省人民医院/杭州医学院附属人民医院

近年来,检验医学已经成为当前生命科学、医学、工学以及各类技术学科交叉的前沿阵地,也是基础研究向临床转化的重要出口。国家自然科学基金委员会从标志物发现、检验新技术与新方法建立等多个角度开展资助,积极推动了我国检验医学的发... 详细信息

近年来,检验医学已经成为当前生命科学、医学、工学以及各类技术学科交叉的前沿阵地,也是基础研究向临床转化的重要出口。国家自然科学基金委员会从标志物发现、检验新技术与新方法建立等多个角度开展资助,积极推动了我国检验医学的发展。其他学科的蓬勃发展,也为检验医学的进一步发展与面临的挑战带来了更多的思考。围绕国家自然科学基金委员会召开的第356期“双清论坛”的研讨成果,本文从“检验医学研究的范式——现状与发展趋势”“新技术与新方法促进检验医学发展”“多学科交叉推动检验医学创新”“新时代检验医学临床转化面临的挑战”四个方面对检验医学的学科交叉现状、进展以及所面临的挑战展开深入讨论,旨在推动我国检验医学学科的高质量发展。

关键词：检验医学研究范式新技术与新方法多学科交叉生物标志物临床转化研究

焦磷酸测序法检测结直肠癌患者k-ras基因突变

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同方期刊数据库

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中华检验医学杂志 2010年第6期33卷 538-540页

作者：陈婕郭兴中朱凡邹媛白法安方国伟杭州艾迪康医学检验中心 310023

研究证明,k-ras癌基因的激活在CRC发生发展过程中起重要作用[1].k-ras基因最常见的激活方式为点突变,其中90%以上的突变发生在1号外显子第12位密码子（野生型：GGT）和第13位密码子（野生型：GGC）[2],突变率约30%～49%[3].近年来,k-ra... 详细信息

研究证明,k-ras癌基因的激活在CRC发生发展过程中起重要作用[1].k-ras基因最常见的激活方式为点突变,其中90%以上的突变发生在1号外显子第12位密码子（野生型：GGT）和第13位密码子（野生型：GGC）[2],突变率约30%～49%[3].近年来,k-ras基因是否突变已成为西妥昔单抗能否用于CRC分子靶向治疗的用药评判标准[4].因此,如何快速准确检出k-ras 基因突变对这类药物的应用及疗效预测显得尤为重要.焦磷酸测序法是一种酶促级联测序技术,特别适用于SNP常规检测[5].

关键词： k-ras基因突变常规检测测序法焦磷酸直肠癌患者 k-ras癌基因分子靶向治疗激活方式

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血清葡萄糖测定的测量不确定度评定

临床检验杂志 2006年第6期24卷 466-467页

作者：潘超王文龙陈洁郭尧杭州艾迪康医学检验中心杭州310023

目的通过对血清葡萄糖浓度的测量不确定度评定,探讨实验室对测量不确定度的评定方法和程序。方法用Olym-pus生化检测系统己糖激酶法检测血清葡萄糖浓度,建立反映整个过程测量不确定度分量来源的数学模型。根据数学模型,分析各不确定度... 详细信息

目的通过对血清葡萄糖浓度的测量不确定度评定,探讨实验室对测量不确定度的评定方法和程序。方法用Olym-pus生化检测系统己糖激酶法检测血清葡萄糖浓度,建立反映整个过程测量不确定度分量来源的数学模型。根据数学模型,分析各不确定度的来源,按A、B两类不确定度的计算方式对各分量分别进行评定,计算合成标准不确定度,最后,取95%置信区间,计算出扩展不确定度。结果血清葡萄糖浓度为4.61mmol/L,合成标准不确定度uc=0.1667,取95%置信区间,包含因子k=2,则扩展不确定度U=0.1667×2=0.33mmol/L。结论医学实验室的测量不确定度与传统用准确度表示的误差相比,更能反映测量的水平,且对检测结果的临床应用有实际指导意义。

关键词：实验室葡萄糖测量不确定度

大麻二酚对转化生长因子β1诱导肝星状细胞活化和肝纤维化的作用

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中国组织工程研究 2025年第23期29卷 4965-4974页

作者：王联谢娜赵珮伶陈浩李芏酉王豫萍贵州医科大学附属医院临床检验中心贵州省贵阳市550003 贵州医科大学医学检验学院临床微生物学及免疫学教研室贵州省贵阳市550004

背景:大麻二酚具有抗炎、抗氧化等药理学作用,并且不具有精神活性,在肝脏疾病中的研究日渐增加,但其对肝星状细胞转化生长因子β1/Smad信号转导通路的作用尚未明确。目的:探讨大麻二酚对肝星状细胞中转化生长因子β1/Smad信号转导通路... 详细信息

背景:大麻二酚具有抗炎、抗氧化等药理学作用,并且不具有精神活性,在肝脏疾病中的研究日渐增加,但其对肝星状细胞转化生长因子β1/Smad信号转导通路的作用尚未明确。目的:探讨大麻二酚对肝星状细胞中转化生长因子β1/Smad信号转导通路的影响,研究其抗肝纤维化的可能机制。方法:(1)体外实验:选取大鼠肝星状细胞株(HSC-T6),分6组培养:对照组常规培养24 h,单纯药物组加入大麻二酚培养24 h,造模组加入转化生长因子β1培养24 h,造模+低剂量药物组、造模+高剂量药物组、造模+阳性对照组均加入转化生长因子β1培养24 h后分别加入1,5μmol/L大麻二酚或水飞蓟素培养24 h。培养结束后,检测各组细胞α-平滑肌肌动蛋白与Ⅰ型胶原mRNA表达、白细胞介素1β与肿瘤坏死因子α水平及Ⅰ型胶原、转化生长因子β1/Smad信号转导通路蛋白表达。(2)动物体内实验:将C57BL/6J小鼠随机分为5组,每组8只:假手术组不造模,造模组、造模+低剂量药物组、造模+高剂量药物组、造模+阳性对照组通过胆管结扎法建立肝纤维化模型,造模3周后分别腹腔注射4,8 mg/kg大麻二酚或水飞蓟素,1次/d,连续给药7 d。给药结束后,检测各组小鼠肝功能、肝脏病理形态及α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原、转化生长因子β1/Smad信号转导通路相关蛋白表达。结果与结论:(1)体外实验:与对照组比较,造模组HSC-T6细胞α-平滑肌肌动蛋白与Ⅰ型胶原mRNA表达、白细胞介素1β与肿瘤坏死因子α水平以及Ⅰ型胶原、转化生长因子β1、p-Smad2/3蛋白表达均升高(P<0.05),Smad7蛋白表达降低(P<0.05);两种剂量大麻二酚处理可改善转化生长因子β1诱导的HSC-T6细胞上述指标的变化,并且以造模+高剂量药物组改善作用更明显;(2)体内实验:与假手术组比较,模型组小鼠血清丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶活性升高(P<0.05),肝组织中炎性细胞浸润及胶原含量增加(P<0.05),转化生长因子β1/Smad信号转导通路被激活,α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原蛋白表达升高(P<0.05);两种剂量大麻二酚干预可减轻造模小鼠上述指标的变化,并且以造模+高剂量药物组效果更明显;(3)结果表明,大麻二酚通过抑制肝星状细胞转化生长因子β1/Smad信号传导通路的激活抑制肝纤维化。

关键词：大麻二酚肝星状细胞肝纤维化信号转导通路转化生长因子β1/Smad HSC-T6细胞