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基于微流控芯片式数字PCR乙型肝炎病毒RNA检测方法的构建与评价

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中华检验医学杂志 2025年第1期48卷 103-109页

作者：黄群芳谢如冰兰艳平荀振刘灿欧启水福建医科大学附属第一医院检验科、福建省检验医学重点实验室、福建医科大学基因诊断研究中心、福建省临床免疫学检验临床医学研究中心福州350005 福建医科大学第一临床医学院福州350005 福建医科大学附属第一医院滨海院区国家区域医疗中心检验科福州350212

目的建立基于微流控芯片式数字PCR(cdPCR)的乙型肝炎病毒(HBV)RNA检测方法,并评估其在慢性HBV感染者中的应用。方法选取福建医科大学附属第一医院的135例慢性HBV感染者,根据HBV DNA含量分为HBV DNA>100 IU/ml组(85例)和HBV DNA≤100 IU... 详细信息

目的建立基于微流控芯片式数字PCR(cdPCR)的乙型肝炎病毒(HBV)RNA检测方法,并评估其在慢性HBV感染者中的应用。方法选取福建医科大学附属第一医院的135例慢性HBV感染者,根据HBV DNA含量分为HBV DNA>100 IU/ml组(85例)和HBV DNA≤100 IU/ml组(50例),同时选取健康体检者及其他病毒感染者作为对照组(15例)。设计HBV前C/C区特异性引物和探针,优化微流控cdPCR检测方法,并评估其线性范围、检出限、特异性及精密度。使用自建方法和2种市售试剂盒分别检测患者血清HBV RNA含量。采用Pearson相关性分析对HBV RNA与其他HBV标志物的关系进行评估。结果优化后自建微流控cdPCR方法的变性时间为10 s,退火/延伸温度为62℃,引物和探针浓度分别为0.3和0.2μmol/L。其线性范围为10^(3)~10^(7)拷贝/ml,检出限为10^(2)拷贝/ml,10^(4)和10^(7)拷贝/ml质粒标准品的批内变异系数(CV)分别为1.06%和0.82%,批间CV分别为0.75%和0.44%。特异性实验显示,其他病原体感染者和健康体检者的血清中均未检出阳性信号。自建微流控cdPCR方法在HBV DNA>100 IU/ml组的检出率为81.18%(69/85),高于市售试剂盒B的64.71%(55/85)(P0.05)。HBV RNA与HBV DNA、乙型肝炎表面抗原及乙型肝炎e抗原均呈正相关(r=0.67、0.53、0.44,P均<0.001)。结论成功建立了微流控cdPCR定量检测HBV RNA的方法,该方法灵敏、特异,且在低浓度病毒载量样本中也具有良好的检测能力。

关键词：聚合酶链反应微流控芯片式数字PCR 乙型肝炎病毒 RNA

基于检验数据和机器学习构建并验证术前肝细胞癌微血管浸润的预测模型

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中华检验医学杂志 2025年第1期48卷 65-75页

作者：于洲林丽金陈雅芝林天生欧启水黄金兰福建医科大学附属第一医院检验科、福建省检验医学重点实验室、福建医科大学基因诊断研究中心、福建省临床免疫学检验临床医学研究中心福州350005 福建医科大学第一临床医学院福州350005 福建医科大学附属第一医院滨海院区国家区域医疗中心检验科福州350212 福建医科大学省立临床医学院、福建省立医院、福州大学附属省立医院肝胆外科福州350001

目的利用机器学习方法,基于检验指标建立并验证术前肝细胞癌(HCC)微血管浸润(MVI)的预测模型。方法纳入2019年1月至2023年12月在福建医科大学附属第一医院经术后病理确诊为HCC的患者629例,将2019年1月至2022年12月患者纳入至训练集(n=46... 详细信息

目的利用机器学习方法,基于检验指标建立并验证术前肝细胞癌(HCC)微血管浸润(MVI)的预测模型。方法纳入2019年1月至2023年12月在福建医科大学附属第一医院经术后病理确诊为HCC的患者629例,将2019年1月至2022年12月患者纳入至训练集(n=464),将2023年1—12月患者纳入内部验证集(n=165)。2023年1—12月在福建省立医院经术后病理确诊为HCC的患者190例作为外部验证集。收集所有患者年龄、性别、肿瘤大小及术前检验指标,根据术后病理是否存在MVI分为MVI阳性组和MVI阴性组。在训练集中利用Boruta算法和LASSO回归筛选出2组间与结局变量相关的指标,随后应用多因素逻辑回归、决策树(DT)、随机森林(RF)、极度梯度提升(XGboost)、K近邻(KNN)、支持向量机(SVM)、轻量梯度提升(LGBM)和朴素贝叶斯(Naive Bayes)等8种机器学习算法构建模型,在训练集和内部验证集中通过绘制受试者工作特征(ROC)曲线,筛选出曲线下面积(AUC)最佳的模型,并在外部验证集中进一步验证预测效能。通过校准曲线和临床决策曲线分别评估模型预测值与真实值的符合程度及模型的临床受益程度。结果经过筛选最终纳入肿瘤大小、甲胎蛋白、异常凝血酶原、嗜酸性粒细胞数、中性粒细胞数、肌酐、载脂蛋白A1、总胆红素共8个指标用于构建HCC术前MVI预测模型。在应用8种机器学习方法在训练集中构建模型时,XGboost算法构建的模型预测MVI的AUC为0.820,内部验证集中AUC为0.803,外部验证集中为0.758。此外,XGboost模型预测乙型肝炎表面抗原阳性HCC患者术前MVI的AUC为0.817,预测男性、高龄患者术前MVI的AUC分别为0.779和0.790。校准曲线可见预概率值曲线与实际发生概率曲线较为接近,临床决策曲线说明其在0.3~0.8的阈值概率范围内应用,可获得净收益。结论基于XGboost方法联合8个检验指标构建了HCC患者术前MVI预测模型,具有较好的预测效能。

关键词：肝肿瘤肝细胞癌微血管浸润预测模型极度梯度提升机器学习

神经质人格与功能性胃肠道疾病的因果关系:一项孟德尔随机化研究

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中国循证医学杂志 2025年第2期25卷 155-161页

作者：惠馨郑亚王玉平周永宁郭庆红兰州大学第一临床医学院兰州730000 兰州大学第一医院消化科兰州730000 兰州大学第一医院甘肃省消化系疾病临床医学研究中心兰州730000

目的采用孟德尔随机化方法(MR)探讨神经质人格与功能性胃肠病之间的关系。方法基于神经质人格和2种功能性胃肠病,即功能性消化不良(FD)、肠易激综合征(IBS)的全基因组关联研究数据,提取适当的单核苷酸多态性(SNP)作为工具变量,采用逆方... 详细信息

目的采用孟德尔随机化方法(MR)探讨神经质人格与功能性胃肠病之间的关系。方法基于神经质人格和2种功能性胃肠病,即功能性消化不良(FD)、肠易激综合征(IBS)的全基因组关联研究数据,提取适当的单核苷酸多态性(SNP)作为工具变量,采用逆方差加权法(IVW)作为主要的分析方法,并通过Cochran’s Q检验、MR-PRESSO检验、MR-Egger截距、留一法进行敏感性分析。进一步进行两步法MR分析,以检查咖啡摄入、饮酒、吸烟、抑郁的中介效应。结果单因素MR分析显示,遗传决定的神经质人格会增加FD和IBS的发病风险[FD:OR=1.448,95%CI(1.057,1.983),P=0.021;IBS:OR=1.705,95%CI(1.210,2.403),P=0.002]。Cochran’s Q检验、MR-Egger截距、MR-PRESSO未观察到显著的异质性或水平多效性。留一法分析也未发现单个SNP对整体结果有较大的影响。多因素MR分析表明,即使在调整其他混杂因素后,神经质人格与FD及IBS患病风险升高之间的关联仍然存在。两步法MR中介分析揭示,抑郁在这一效应中起到部分中介作用,中介比例分别为59.41%[95%CI(5.69%,113.12%)]和67.53%[95%CI(31.55%,103.51%)]。结论神经质人格与FD及IBS之间存在一定程度的因果关联,而抑郁可能在这种关联中扮演着重要的中介角色。

关键词：神经质人格功能性胃肠病孟德尔随机化分析因果关系中介分析

应用多重实时荧光定量PCR技术联合筛查新生儿两种原发性免疫缺陷病及脊髓性肌萎缩症的研究

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中华检验医学杂志 2025年第02期48卷 249-257页

作者：张超杨建滨尚世强陈迟毛华庆黄晓磊洪芳缪海霞赵涵怡杨茹莱浙江大学医学院附属儿童医院遗传与代谢科国家儿童健康与疾病临床医学研究中心杭州浙江大学医学院附属儿童医院实验检验中心国家儿童健康与疾病临床医学研究中心杭州

目的探讨应用多重实时荧光定量PCR技术联合筛查新生儿重症联合免疫缺陷病(SCID)、X连锁无丙种球蛋白血症(XLA)及脊髓性肌萎缩症(SMA)的可行性, 为患儿的早期筛查和诊治提供依据。方法横断面研究。收集2021年7月至2023年1月经冷链递送至... 详细信息

目的探讨应用多重实时荧光定量PCR技术联合筛查新生儿重症联合免疫缺陷病(SCID)、X连锁无丙种球蛋白血症(XLA)及脊髓性肌萎缩症(SMA)的可行性, 为患儿的早期筛查和诊治提供依据。方法横断面研究。收集2021年7月至2023年1月经冷链递送至浙江省新生儿疾病筛查中心的滤纸干血片103 240份, 采用多重实时荧光定量PCR方法联合检测干血片中T细胞受体切除环(TREC)、Kappa缺失重组切除环(KREC)浓度及运动神经元存活基因1(SMN1)外显子7缺失, 以核糖核酸酶P/MRP 30 000亚基(RPP30)作为内参基因。筛查阳性的新生儿进一步经实验室其他相关项目检测以辅助诊断, 基因测序结果作为确诊金标准。同时收集本院已确诊1例SCID、3例XLA及2例SMA患儿样本用于阳性验证。分析新生儿基本信息与TREC/KREC检测浓度的相关性, 并进行各因素组间差异性分析。结果应用多重实时荧光定量PCR技术筛查并确诊新生儿1例SCID、2例XLA、9例SMA以及7例其他遗传性疾病(4例DiGeorge综合征、1例21-三体综合征、1例努南综合征和1例超雄综合征);筛查新生儿SCID、XLA及SMA的阳性预测值分别为2.44%(1/41)、2.78%(2/72)和9/9。已临床确诊的1例SCID、3例XLA和2例SMA样本作为阳性验证样本, 经该方法全部检出。TREC/KREC检测结果与新生儿采血时间、性别、体重、胎龄、分娩方式的r值分别为0.162/0.187、0.066/0.032、0.045/0.042、?0.015/?0.088、0.014/0.068(P均<0.05), 有相关关系。结论浙江省依托现行的新生儿疾病筛查平台, 应用多重实时荧光定量PCR技术开展新生儿2种原发性免疫缺陷病及脊髓性肌萎缩症的联合筛查具有可行性。

关键词：新生儿筛查多重荧光定量PCR 重症联合免疫缺陷 X连锁无丙种球蛋白血症脊髓性肌萎缩, 儿童

伴与不伴强迫症状双相抑郁患者的脑灰质结构和功能网络拓扑属性比较分析

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中华精神科杂志 2025年第2期58卷 113-124页

作者：唐鑫悦杨梓彬陈观茂陈盼郭子玄孙仕林贾艳滨钟舒明黄力王颖暨南大学附属第一医院医学影像中心广州510630 暨南大学附属第一医院精神心理科广州510630

目的基于图论分析探究伴与不伴强迫症状双相抑郁患者的脑灰质结构网络和功能网络拓扑属性差异。方法收集2018年3月至2022年12月暨南大学附属第一医院精神科门诊和住院部90例双相抑郁患者,男27例,女63例,年龄[M(Q 1,Q 3)]19.0(22.0,25.0... 详细信息

目的基于图论分析探究伴与不伴强迫症状双相抑郁患者的脑灰质结构网络和功能网络拓扑属性差异。方法收集2018年3月至2022年12月暨南大学附属第一医院精神科门诊和住院部90例双相抑郁患者,男27例,女63例,年龄[M(Q 1,Q 3)]19.0(22.0,25.0)岁。同期招募健康对照者50名(对照组),其中男19名,女31名,年龄23.0(20.0,27.0)岁。根据患者是否伴强迫症状分为伴强迫症状双相抑郁组53例和不伴强迫症状双相抑郁组37例。采集受试者的静息态磁共振成像结构和功能数据,分别构建脑灰质结构网络和功能网络,应用图论分析方法分别计算小世界属性等网络拓扑属性指标。比较伴强迫症状双相抑郁组、不伴强迫症状双相抑郁组、对照组3组间的脑灰质结构网络拓扑属性和功能网络拓扑属性。将组间差异有统计学意义的网络拓扑属性指标与耶鲁-布朗强迫症状(Yale-Brown Obsessive-Compulsive Scale,Y-BOCS)量表进行偏相关分析。进一步用组间差异有统计学意义的网络拓扑属性指标作为分类特征值,利用支持向量机(support vector machines,SVM)进行3组间的两两分类以提高鉴别诊断正确率。结果脑灰质结构网络分析显示,与对照组比,伴强迫症状双相抑郁组和不伴强迫症状双相抑郁组均存在最短路径长度和标准化特征路径长度增加(最短路径长度:0.78和0.80比0.69,标准化特征路径长度:0.48和0.49比0.43)、全局效率降低(0.21和0.21比0.24)(置换检验,均P中心度及介数中心度增高(置换检验,均P中心度减低(t=2.15、-3.04,均P中心度减低、右侧颞横回节点中心度和节点效率增高(t=-2.99、-3.61、3.06、3.10,均P中心度与强迫思维因子得分呈正相关(r=0.303,P=0.034),右侧颞横回节点中心度、节点效率与Y-BOCS总分(r=-0.301、-0.311)和强迫思维因子得分(r=-0.385、-0.380)均呈负相关(均P一致的异常改变,且伴强迫症状双相抑郁患者较不伴强迫症状双相抑郁患者表现出更多节点拓扑属性异常。多网络特征融合具备一定的诊断性能。

关键词：双相情感障碍双相抑郁强迫症状结构协共变网络静息态功能网络支持向量机

全球子宫颈癌疾病负担及子宫颈癌筛查与管理质量分析

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浙江大学学报(医学版) 2025年

作者：孙畅 MUSTAFE Abdalle Abdi 刘冰青马袁英吕卫国浙江大学医学院附属妇产科医院浙江省妇科疾病临床医学研究中心

目的:基于最新全球数据描述全球和中国子宫颈癌流行病学负担，探究子宫颈癌筛查覆盖水平与疾病管理质量间的关系。方法:采用2021年全球疾病负担（GBD）数据和2019年世界卫生组织的全球子宫颈癌筛查研究数据，计算疾病负担年龄标化指标... 详细信息

目的:基于最新全球数据描述全球和中国子宫颈癌流行病学负担，探究子宫颈癌筛查覆盖水平与疾病管理质量间的关系。方法:采用2021年全球疾病负担（GBD）数据和2019年世界卫生组织的全球子宫颈癌筛查研究数据，计算疾病负担年龄标化指标，采用主成分分析获取疾病管理质量指数（QCI），使用线性回归分析检验QCI与子宫颈癌筛查覆盖率的相关性，并探索关联性在不同社会发展水平国家和不同年龄段女性中的分布特征。结果:不同社会发展水平国家的子宫颈癌疾病负担和管理质量水平不均衡，我国各项子宫颈癌疾病负担指标与中高社会人口指数国家的平均水平相近；全球子宫颈癌QCI为22.22(10.50,35.43)，我国子宫颈癌QCI为26.30；全球子宫颈癌筛查覆盖率为42%(12%,86%)，我国筛查覆盖率为31%。调整各国家的社会发展水平后，子宫颈癌筛查覆盖水平与QCI呈正相关关系（β=0.27,P0.05）；关联效应在所有年龄段女性中均存在，且在年轻女性中更强（β=1.48,P<0.05）。结论:子宫颈癌疾病负担及疾病管理质量在不同社会发展水平国家间均存在不均衡现象，我国在子宫颈癌疾病负担管理质量和子宫颈癌筛查率方面仍均有较大提升空间。扩大子宫颈癌筛查覆盖率可能是提高子宫颈癌疾病负担管理质量的有效策略，尤其是在年轻女性中实施筛查可能带来更大益处。

关键词：子宫颈癌疾病负担管理质量指数子宫颈癌筛查社会人口指数

课程思政融入《实验诊断学》教学的实践与探索

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中国继续医学教育 2025年第1期17卷 119-124页

作者：孙虹佳姚立琼李苗苗兰州大学第一医院/兰州大学第一临床医学院医学检验中心甘肃兰州730000

目的将思政教育融入《实验诊断学》的教学,把专业知识与思政教学相结合,达到知识传授、能力培养及价值引领的目标,分析融入后的满意度。方法选取2021年9月―2022年12月在兰州大学第一临床医学院参加《实验诊断学》课程学习的临床医学专... 详细信息

目的将思政教育融入《实验诊断学》的教学,把专业知识与思政教学相结合,达到知识传授、能力培养及价值引领的目标,分析融入后的满意度。方法选取2021年9月―2022年12月在兰州大学第一临床医学院参加《实验诊断学》课程学习的临床医学专业的380名学生作为研究对象,按照是否系统地进行《实验诊断学》课程思政建设及实施进行分组,将2021年9―12月参加课程学习的190名学生作为对照组,将2022年9―12月参加课程学习的190名学生作为研究组。对照组未系统地进行《实验诊断学》课程思政建设及实施,研究组系统地进行《实验诊断学》课程思政学习。课程结束后分别对2组学生进行满意度调查,评估课程中融入思政教学的实施效果。结果研究组的学习灵活性满意度和学习主动性满意度均高于对照组(97.37%vs.38.42%,97.89%vs.55.26%),差异有统计学意义(P一定成效,且学生满意度较高,未来需要不断持续改进,真正达到全方位育人的“立德树人”目标。

关键词：课程思政实验诊断学教学设计教学模式满意度立德树人

法布雷病患儿酶替代治疗临床观察及抗药抗体监测

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中华儿科杂志 2025年第1期63卷 75-79页

作者：路智红寿心怡林倩章玲霞傅海东毛建华浙江大学医学院附属儿童医院肾脏内科国家儿童健康与疾病临床医学研究中心杭州310052

目的分析法布雷病患儿酶替代治疗及抗药抗体生成情况。方法回顾性病例总结。收集2021年7月至2024年6月在浙江大学医学院附属儿童医院酶替代治疗1年以上的7例法布雷病患儿的基本信息,治疗前后相关化验、检查等临床资料。采用配对样本t检... 详细信息

目的分析法布雷病患儿酶替代治疗及抗药抗体生成情况。方法回顾性病例总结。收集2021年7月至2024年6月在浙江大学医学院附属儿童医院酶替代治疗1年以上的7例法布雷病患儿的基本信息,治疗前后相关化验、检查等临床资料。采用配对样本t检验比较治疗前后肾小球滤过率、左心质量指数、疼痛强度评分等相关指标的差异。通过酶联免疫吸附法检测抗药抗体。结果7例患儿中男6例、女1例,确诊年龄(12.2±1.8)岁。在酶替代治疗1年时,7例患儿的异常底物脱乙酰基三己糖酰基鞘酯醇和疼痛强度评分均较治疗前有明显降低[(16±11)比(63±42)μg/L,(22±19)比(45±29)分,t=3.88、3.43,均P0.05]。例4、5、6分别在用药后1、4、1个月时出现抗药抗体。例4患儿抗药抗体滴度持续高值(吸光度3.65~3.73)且伴随荨麻疹、脱乙酰基三己糖酰基鞘酯醇水平上升和手足疼痛症状加重。结论酶替代治疗可有效改善法布雷病患儿临床症状并显著降低脱乙酰基三己糖酰基鞘酯醇水平。抗药抗体的出现在长期酶替代治疗中较常见并可能影响疗效,需要临床关注和动态监测。

关键词：儿童抗体法布雷病酶治疗

极早产儿或极低出生体重儿获得性巨细胞病毒感染临床特征分析

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中华儿科杂志 2025年第03期63卷 259-265页

作者：蒋梦婷刘太祥徐珊珊梅红芳谢添马晓路陈正许燕萍浙江大学医学院附属儿童医院呼吸科国家儿童健康与疾病临床医学研究中心杭州浙江大学医学院附属儿童医院新生儿重症监护病房国家儿童健康与疾病临床医学研究中心杭州浙江大学医学院附属儿童医院新生儿科国家儿童健康与疾病临床医学研究中心杭州

目的分析极早产儿或极低出生体重儿获得性巨细胞病毒(pCMV)感染的临床特征。方法病例-对照研究, 纳入2019年1月至2024年6月收住浙江大学医学院附属儿童医院新生儿重症监护病房并诊断pCMV感染的极早产儿或极低出生体重儿共50例作为pCMV... 详细信息

目的分析极早产儿或极低出生体重儿获得性巨细胞病毒(pCMV)感染的临床特征。方法病例-对照研究, 纳入2019年1月至2024年6月收住浙江大学医学院附属儿童医院新生儿重症监护病房并诊断pCMV感染的极早产儿或极低出生体重儿共50例作为pCMV组, 采用倾向性评分1∶1匹配同时期非巨细胞病毒感染的50例极早产儿或极低出生体重儿作为对照组。pCMV组根据抗病毒治疗情况分为治疗组和未治疗组。收集各组患儿的临床特征、实验室检查结果、临床结局等资料, 组间比较采用χ2检验或连续校正χ2检验或Fisher确切概率法、独立样本t检验及Mann-WhitneyU检验, 采用二元Logistic回归分析危险因素, 相关性采用Spearman相关性分析。结果 pCMV组与对照组出生胎龄、出生体重、男性比例、第1及5分钟Apgar评分、生后前3周母乳喂养天数等差异均无统计学意义(均P>0.05)。与对照组相比, pCMV组住院时间及接受有创机械通气时间均更长, 发生支气管肺发育不良、早产儿视网膜病、听力损伤的比例均更高(均P<0.05)。pCMV组校正胎龄36周龄时的体重、身长均低于对照组(均P<0.05)。pCMV感染与早产儿坏死性小肠结肠炎及严重脑室内出血的发生率增加均相关[OR=11.50(95%CI 1.94～68.30)、6.82(95%CI 1.19～38.97), 均P<0.05]。治疗组经抗病毒治疗6～8周后血小板计数较未治疗前明显升高[(245±19)×109比(119±14)×109/L, t=5.37, P<0.001]。结论 pCMV感染的极早产儿或极低出生体重儿住院时间和接受有创机械通气时间明显更长, 更容易发生支气管肺发育不良、早产儿视网膜病、听力损伤及生长受限。抗病毒治疗可改善血小板减少。

关键词：婴儿, 早产巨细胞病毒感染支气管肺发育不良早产儿视网膜病听力障碍