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中国红豆杉内生真菌次生代谢产物及其生物活性研究

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中成药 2024年第10期 3324-3329页

作者：陈蕾蕾杨中铎魏汉楠马科贞郭文林张甜兰州理工大学生命科学与工程学院

目的研究中国红豆杉内生真菌次生代谢产物及其生物活性。方法利用组织块法、划线法分离纯化内生菌，所得菌株采用分子鉴定法进行鉴定。采用大孔树脂柱、硅胶柱进行分离纯化，根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。采用化学发... 详细信息

目的研究中国红豆杉内生真菌次生代谢产物及其生物活性。方法利用组织块法、划线法分离纯化内生菌，所得菌株采用分子鉴定法进行鉴定。采用大孔树脂柱、硅胶柱进行分离纯化，根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。采用化学发光激酶检测试剂盒法、刃天青细胞活力测定法、酶标法测定磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、磷酸二酯酶（PDE）、尖孢镰刀菌抑制活性。结果从中分离得到8种内生真菌，分别鉴定为木霉属、曲霉属、孢球托霉属、茎点霉属和青霉菌属真菌。菌株ZGG-5具有较强的PI3K抑制活性，IC50值为（0.17±0.05）μg/mL,被鉴定为卵形孢球托霉。从ZGG-5中分离得到13个化合物，化合物13在1 mg/mL质量浓度下具有较强的PI3K抑制活性，抑制率为（97.8±0.51）%。结论中国红豆杉中存在具有PI3K有抑制活性的内生真菌。化合物1～12为首次从卵形孢球托霉中分离得到。

关键词：中国红豆杉内生真菌卵形孢球托霉次生代谢产物分离鉴定 PI3K

5′UTR在植物基因表达调控中的功能研究进展

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植物生理学报 2024年第1期60卷 9-19页

作者：徐志民鄢梦雨兰海燕新疆大学生命科学与技术学院新疆生物资源基因工程重点实验室乌鲁木齐830017

植物5′非翻译区(untranslated region,UTR)存在众多的调控元件,如内部核糖体进入位点、上游开放阅读框、内含子及各种二级结构,在基因表达调控中发挥重要作用。5′UTR还能够通过保留、删除或突变调控元件产生多个mRNA变体,从而影响翻... 详细信息

植物5′非翻译区(untranslated region,UTR)存在众多的调控元件,如内部核糖体进入位点、上游开放阅读框、内含子及各种二级结构,在基因表达调控中发挥重要作用。5′UTR还能够通过保留、删除或突变调控元件产生多个mRNA变体,从而影响翻译效率。本文对植物5′UTR中涉及的各种调控元件及二级结构的作用机制进行了总结归纳,期望较为全面展示植物5′UTR的结构和功能,并为研究植物5′UTR的调控机制提供参考。

关键词： 5′UTR 上游开放阅读框内含子二级结构基因表达调控

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干酪乳杆菌对鸡肉干微生物区系和肉品质的影响

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食品科技 2024年第09期 107-115页

作者：郭红伟廖佳肴陈杭炜欧阳鑫胡鑫钰刘军和河南大学生命科学学院黄淮学院生物与食品工程学院

文章旨在评估干酪乳杆菌作为发酵菌剂对鸡肉干微生物区系和肉品质的影响。新鲜鸡胸肉切成条状（4 cm×2 cm×1 cm），腌制后分别接种不同剂量的干酪乳杆菌，33℃发酵40 h后，65℃干燥2 h,95℃干燥2 h，制成发酵鸡肉干；对照组为接种等... 详细信息

文章旨在评估干酪乳杆菌作为发酵菌剂对鸡肉干微生物区系和肉品质的影响。新鲜鸡胸肉切成条状（4 cm×2 cm×1 cm），腌制后分别接种不同剂量的干酪乳杆菌，33℃发酵40 h后，65℃干燥2 h,95℃干燥2 h，制成发酵鸡肉干；对照组为接种等量蒸馏水后直接烘干后样品。结果表明，鸡肉条接种量为1.0×10～7 CFU/g时，与未发酵的鸡肉干相比，发酵鸡肉干的剪切力和p H值分别下降了28.64%和26.61%,L*值增加了27.70%（P<0.05）。进一步的16S rRNA测序、蛋白组学和代谢组学联合分析表明：干酪乳杆菌显著降低了鸡肉干中金黄色葡萄球菌的丰度；干酪乳杆菌通过半胱氨酸和蛋氨酸代谢途径（KEGG ID:map00270）抑制蛋氨酸代谢，增加乳酸和丙氨酸积累，以维持低p H值并改善发酵鸡肉干的风味和安全性。研究结果提供了一种提高传统鸡肉干接受度的有效途径。

关键词：干酪乳杆菌鸡肉干微生物区系肉品质

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对黄瓜专化型枯萎病拮抗菌株的筛选与鉴定

山西农业大学学报(自然科学版) 2024年

作者：管利苏洁文彭晨孙星方泽民安徽大学生命科学学院滁州学院生物与食品工程学院

[目的]筛选出对黄瓜枯萎病具有拮抗作用的细菌。[方法]从黄海海域的海泥中筛选出一株能抑制尖孢镰孢黄瓜专化型枯萎病菌（Fusarium oxysporum f. sp. cucumerinum）的拮抗菌株，经形态学观察和分子生物鉴定菌株H5-9Z为短小芽孢杆菌（Bac... 详细信息

[目的]筛选出对黄瓜枯萎病具有拮抗作用的细菌。[方法]从黄海海域的海泥中筛选出一株能抑制尖孢镰孢黄瓜专化型枯萎病菌（Fusarium oxysporum f. sp. cucumerinum）的拮抗菌株，经形态学观察和分子生物鉴定菌株H5-9Z为短小芽孢杆菌（Bacillus pumilus），并对其作为黄瓜枯萎病生防菌的潜力进行了研究。[结果]拮抗菌株H5-9Z抑菌效果最好，其发酵菌液抑菌率为82.67%，无菌滤液抑菌率为77.87%，抑菌效果明显。胞外活性物质在紫外线和金属离子的条件下抑菌直径均无明显改变；pH在5.0、7.0、9.0、11.0都有较好的抑菌活性，当pH越靠近中性条件下抑菌效果越好；当温度高于70℃时失去抑菌活性，表明该菌株不耐高温。盆栽试验结果表明，菌株H5-9Z的发酵液对黄瓜枯萎病有一定的拮抗作用（57.65%）。探究发现菌株H5-9Z的主要抑菌化合物分子质量范围在33～95 kDa之间。[结论]分离得到的短小芽孢杆菌H5-9Z具有作为生物防治剂的潜力，可以用于黄瓜枯萎病生物防治方面的研究。

关键词：拮抗菌黄瓜枯萎病菌分离鉴定生物活性生物防治

海洋细菌假交替单胞菌DL-6来源β-N-乙酰己糖胺酶异源表达及酶学表征

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食品科学 2024年第16期45卷 68-76页

作者：刘向歌赵子琪吴家葳于爽迟乃玉王晓辉大连大学生命健康学院辽宁大连116622 辽宁省海洋微生物工程技术研究中心辽宁大连116622 大连大学医学院辽宁大连116000 北京百奥赛图基因生物技术有限公司北京102206

从海洋细菌假交替单胞菌(Pseudoalteromonas sp.)DL-6中克隆β-N-乙酰己糖胺酶基因(PsHex),扩增至pET-28a(+),并成功在大肠杆菌BL21(DE3)中异源表达,经镍-次氮基三乙酸亲和层析纯化得到纯蛋白。结果表明:PsHex编码876个氨基酸,分子质量... 详细信息

从海洋细菌假交替单胞菌(Pseudoalteromonas sp.)DL-6中克隆β-N-乙酰己糖胺酶基因(PsHex),扩增至pET-28a(+),并成功在大肠杆菌BL21(DE3)中异源表达,经镍-次氮基三乙酸亲和层析纯化得到纯蛋白。结果表明:PsHex编码876个氨基酸,分子质量约99.46 kDa,理论等电点5.65,序列对比分析表明,Ps Hex属于糖苷水解酶GH20家族;Ps Hex蛋白最适温度30℃,最适pH 8.5,比活力11.30 U/mg,且在20℃、pH 7.5时稳定性最高;重组蛋白可降解琼脂、葡聚糖、可溶性淀粉、卡拉胶等多种底物;Na^(+)、Mg^(2+)、Fe^(3+)、K^(+)、Ca^(2+)、二硫苏糖醇、吐温-80、乙二胺四乙酸、β-巯基乙醇对酶有激活作用;Ps Hex以对硝基苯基-β-D-乙酰氨基葡萄糖苷为底物的米氏常数(K_(m))为2.523 mol/L、转化效率(K_(cat))为79.035 min^(-1)、最大反应速率(v_(max))为2.081 U/mg、K_(cat)/K_(m)=31.326。该研究为酶法降解几丁质产生N-乙酰葡萄糖胺的生产应用提供了理论参考。

关键词： β-N-乙酰己糖胺酶假交替单胞菌表达与纯化酶学性质

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内含肽介导的Split-Cre系统的构建

生物工程学报 2024年

作者：敖艺菲张琪陈昱僖黄军就文锦坤广东药科大学生命科学与生物制药学院广东药科大学基础医学院中山大学生命科学学院

Split-Cre系统是指被拆分为无活性的N端和C端两个片段的Cre酶在一定条件下重组为有酶活性的全长Cre的基因工程工具。该系统常结合LoxP元件使用，近年来在多基因操纵、多基因活性标记以及神经环路示踪等方面有着重要的应用。为了开发更... 详细信息

Split-Cre系统是指被拆分为无活性的N端和C端两个片段的Cre酶在一定条件下重组为有酶活性的全长Cre的基因工程工具。该系统常结合LoxP元件使用，近年来在多基因操纵、多基因活性标记以及神经环路示踪等方面有着重要的应用。为了开发更高效的Split-Cre系统，本研究利用海洋红嗜热盐菌(Rhodothermus marinus， Rma)内含肽对Cre进行拆分，在“红绿灯”报告细胞系中筛选出了能够高效介导Cre酶重组的S102拆分位点，并且通过双腺相关病毒(adeno-associated virus， AAV)将S102 Split-Cre系统递送至小鼠体内，证明了Rma内含肽介导的S102 Split-Cre系统在小鼠体内同样具有高效的活性。该系统为Split-Cre的基础研究和应用研究提供了可靠的参考。

关键词： Cre酶 Split-Cre系统 Rma内含肽断裂内含肽

GreA蛋白对肠炎沙门菌生物学特性及致病力影响

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畜牧兽医学报 2024年

作者：蔡梦雷赵东旭张政钢刘东海姜婷婷苏士炫闫雪敏薛晓阳崔国林河北工程大学生命科学与食品工程学院华裕农业科技有限公司

旨在研究转录延长因子GreA蛋白对肠炎沙门菌生物学特性和致病力的影响。以ATCC13076为亲本株，通过λ-Red重组系统构建ΔgreA和ΔgreB单基因缺失株、ΔgreAΔgreB双基因缺失株，检测亲本株及缺失株的体外生长和运动力，对压力环境抵抗... 详细信息

旨在研究转录延长因子GreA蛋白对肠炎沙门菌生物学特性和致病力的影响。以ATCC13076为亲本株，通过λ-Red重组系统构建ΔgreA和ΔgreB单基因缺失株、ΔgreAΔgreB双基因缺失株，检测亲本株及缺失株的体外生长和运动力，对压力环境抵抗力，生物被膜形成能力，以及对细胞和小鼠的致病力，并利用RNA-seq检测差异表达基因。结果显示：GreA蛋白负调控肠炎沙门菌H2O2抵抗力、生长速度以及生物被膜形成能力，正调控肠炎沙门菌运动能力、细胞入侵和胞内增殖能力及其在小鼠脏器的定殖能力，但对高温和酸性环境抵抗力无显著影响。GreA蛋白影响107个基因表达，其中正向调控fim操纵子、flg操纵子、inv操纵子等，主要与细菌运动及入侵细胞相关；负向调控于cps操纵子、cys操纵子、leu操纵子等，主要与氨基酸合成及代谢相关。GreA蛋白通过调控鞭毛合成和细胞入侵相关代谢通路的表达，影响肠炎沙门菌环境适应性生存及致病力。

关键词：肠炎沙门菌 GreA 生物学特性 RNA-seq

沙棘LBD基因家族鉴定及其在花芽发育过程中的表达分析

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生物工程学报 2024年

作者：李昕娟杨盼盼张恬任乾丹周武新疆大学生命科学与技术学院新疆生物资源与基因工程重点实验室青海大学生态环境工程学院

外侧器官边界域(lateral organ boundaries domain， LBD)转录因子广泛存在于高等植物中，并在植物生长发育和逆境胁迫等过程中发挥了非常重要的作用。沙棘(Hippophae rhamnoides L.)作为一种抗旱、耐寒、耐盐碱的灌木，具有一定的生态... 详细信息

外侧器官边界域(lateral organ boundaries domain， LBD)转录因子广泛存在于高等植物中，并在植物生长发育和逆境胁迫等过程中发挥了非常重要的作用。沙棘(Hippophae rhamnoides L.)作为一种抗旱、耐寒、耐盐碱的灌木，具有一定的生态价值和经济价值。为了分析LBD基因家族在中国沙棘雌雄花芽发育过程中的作用，本研究利用生物信息学方法从沙棘全基因组数据中鉴定出了11个LBD基因。LBD基因家族不均匀分散在5条染色体上，编码159-302个氨基酸，分子质量18 249.91-33 202.01 Da。亚细胞定位预测表明蛋白质分布于细胞核或叶绿体中；LBD序列较为保守，具有高度相似的基序、基因结构和蛋白质三维结构；将沙棘与拟南芥(Arabidopsis thaliana)、大麦(Hordeum vulgare)的LBD基因进行系统发育分析发现，HrLBD基因家族均可细分为Class Ⅰ和Class Ⅱ两大亚家族；转录组及RT-qPCR结果显示，HrLBD基因在沙棘雄性花芽发育过程中表达量更高，并随着花芽发育过程表达量逐渐升高，推测HrLBD基因在特定时期影响沙棘雄性花芽发育。本研究为初步阐明HrLBD基因在沙棘雌雄花芽生长发育中的作用和性别分化机制奠定了理论基础。

关键词：沙棘外侧器官边界域基因家族花芽发育基因表达实时荧光定量PCR

小窝/小窝蛋白在病毒入侵宿主细胞中的作用研究进展

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生命科学 2024年第7期36卷 867-876页

作者：连瑞雅窦雪儿李莎莎李慧霞冯若飞西北民族大学生物医学研究中心生物工程与技术国家民委重点实验室兰州730030 西北民族大学生命科学与工程学院兰州730030

小窝(caveolae)是质膜上的一种多形态膜内陷结构,在哺乳动物细胞中广泛分布。小窝中承担主要功能的是小窝蛋白-1(caveolin-1,Cav-1)。除了发挥机械保护、脂质稳态和运输调节、囊泡转运以及信号转导等生物学功能以外,小窝和小窝蛋白还涉... 详细信息

小窝(caveolae)是质膜上的一种多形态膜内陷结构,在哺乳动物细胞中广泛分布。小窝中承担主要功能的是小窝蛋白-1(caveolin-1,Cav-1)。除了发挥机械保护、脂质稳态和运输调节、囊泡转运以及信号转导等生物学功能以外,小窝和小窝蛋白还涉及肿瘤、心血管疾病和糖尿病等多种疾病的发生。值得注意的是,越来越多的证据表明小窝/小窝蛋白参与病毒感染,尤其是介导病毒侵入宿主细胞的过程,但其作用机制尚不明确,仍是该领域内研究的热点。基于此,本文对小窝/小窝蛋白结构、功能及其在病毒入侵宿主细胞中作用机制的研究现状展开综述,为进一步揭示小窝介导病毒入侵的机制和研发感染早期抗病毒药物提供理论依据。

关键词：小窝小窝蛋白病毒入侵内吞作用

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