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球形棕囊藻对Pb^(2+)的吸附动力学

环境科学学报 2009年第5期29卷 930-933页

作者：黄月华尹平河赵玲黄凤暨南大学生命科学技术学院广州510632

研究了球形棕囊藻对金属离子Pb2+在球形棕囊藻上的生物吸附特性.结果显示,Pb2+在球形棕囊藻上的生物吸附可以分为2个阶段,第1阶段为物理吸附,在10min内快速达到平衡;第2阶段为金属离子向藻内部的迁移,过程缓慢.通过拟合得到了吸附过程... 详细信息

研究了球形棕囊藻对金属离子Pb2+在球形棕囊藻上的生物吸附特性.结果显示,Pb2+在球形棕囊藻上的生物吸附可以分为2个阶段,第1阶段为物理吸附,在10min内快速达到平衡;第2阶段为金属离子向藻内部的迁移,过程缓慢.通过拟合得到了吸附过程的准二级动力学方程,参数k为***-.1min-1,qe为19.8mg·g-1.吸附等温线结果表明,Pb2+在球形棕囊藻上的生物吸附可以用Langmuir来描述,最大吸附量qmax为20.2mg·g-1.

关键词：球形棕囊藻重金属生物吸附动力学 Pb2+

基因重组胰高血糖素样肽-1衍生多肽的表达和产物纯化与鉴定

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中国生物工程杂志 2009年第6期29卷 1-6页

作者：马义李弘剑周天鸿暨南大学生物工程研究所广州510632 暨南大学生命科学技术学院广州510632

为研究利用基因重组方法生产人胰高血糖素样肽-1(GLP-1)衍生多肽的最佳表达及纯化条件,选用大肠杆菌偏爱密码子,以含人GLP-1的质粒为模板,用PCR方法合成全长人GLP-1衍生多肽基因,并定向插入到高效表达载体pMFH中,用大肠杆菌BL21进行表达... 详细信息

为研究利用基因重组方法生产人胰高血糖素样肽-1(GLP-1)衍生多肽的最佳表达及纯化条件,选用大肠杆菌偏爱密码子,以含人GLP-1的质粒为模板,用PCR方法合成全长人GLP-1衍生多肽基因,并定向插入到高效表达载体pMFH中,用大肠杆菌BL21进行表达,融合蛋白经Ni-NTA柱纯化后,用C18Sep-Pak反相柱脱盐,然后融合蛋白经甲酸水解,水解产物经Ni-NTA柱和高效液相色谱(HPLC)纯化制备后,目的肽由质谱鉴定。实验结果表明:利用载体pMFH在BL21中,GLP-1衍生物的最佳诱导表达温度为37℃、诱导剂异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)的最佳浓度为0.6mmol/L,最佳诱导表达时间为6h;HPLC分析和制备GLP-1衍生物最佳条件为:流动相A(10%CNCH3∶90%H2O,0.1%TFA),流动相B(100%CNCH3,0.1%TFA),流速1ml/min,30min线性梯度洗脱,B相至70%,检测波长280nm;质谱鉴定GLP-1衍生物的分子量为5.492kDa,与理论值相符合。在最佳表达及纯化条件下可得GLP-1衍生多肽的产量可达到11.6mg/L发酵产物,纯度≥98%。

关键词：基因重组胰高血糖素样肽-1衍生多肽高效液相色谱质谱

响应面分析法优化豆粕固态发酵工艺生产大豆抗氧化肽的研究

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中国生物工程杂志 2012年第12期32卷 59-65页

作者：陈洁梅徐聪聪常磊刘永萍缪冰旋暨南大学生命科学技术学院生物工程学系广州510632

分别以总抗氧化活性(T-AOC)和多肽含量为评价指标,通过单因素实验分析和Box-Behnken响应面分析法对豆粕固态发酵工艺条件进行优化,得到最佳发酵工艺条件为:接种量9.6%,料水比1∶0.9,发酵温度35℃。豆粕在此条件下发酵48h,其总抗氧化活... 详细信息

分别以总抗氧化活性(T-AOC)和多肽含量为评价指标,通过单因素实验分析和Box-Behnken响应面分析法对豆粕固态发酵工艺条件进行优化,得到最佳发酵工艺条件为:接种量9.6%,料水比1∶0.9,发酵温度35℃。豆粕在此条件下发酵48h,其总抗氧化活性与多肽含量分别由发酵前的207.2U/g和21.0mg/g提高到1091.1U/g和347.7mg/g,分别提高了4.3倍和15.6倍,与预测值相比,结果吻合性良好。总抗氧化活性与多肽含量的相关性良好(R2=0.8604),表明得到的多肽为抗氧化肽。

关键词：抗氧化肽响应面分析法总抗氧化活性固态发酵

人心肌肌钙蛋白Ⅰ鲁米诺化学发光酶免疫分析法的建立

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中国免疫学杂志 2018年第5期34卷 712-717页

作者：李文丽余鹃向军俭王宏暨南大学生命科学技术学院生物工程学系广州510632

目的:制备两株抗人心肌肌钙蛋白Ⅰ(human cardiac troponinⅠ,cTnⅠ)单克隆抗体,建立鲁米诺化学发光酶免疫分析法。方法:制备腹水型单抗、饱和硫酸铵沉淀法和亲和层析柱Protein G纯化抗体,并通过SDS-PAGE和ELISA对抗体特异性进行鉴定,... 详细信息

目的:制备两株抗人心肌肌钙蛋白Ⅰ(human cardiac troponinⅠ,cTnⅠ)单克隆抗体,建立鲁米诺化学发光酶免疫分析法。方法:制备腹水型单抗、饱和硫酸铵沉淀法和亲和层析柱Protein G纯化抗体,并通过SDS-PAGE和ELISA对抗体特异性进行鉴定,建立鲁米诺化学发光酶免疫分析法,并对30份临床血清样本进行检测。结果:本实验制备的两株单抗(分别命名为Ab1、Ab3;亚型都是Ig G1)能够识别以cTnⅠ单体、cTnⅠ-C复合物和cTnⅠ-T-C复合物不同形式存在的cTnⅠ。Ab1、Ab3的效价分别为1∶80万和1∶40万,亲和力常数分别为1.62×109L/mol、2.60×108L/mol。利用2株单抗建立的鲁米诺化学发光酶免疫分析法检测范围为:6.25~400 ng/ml。对30份临床样本进行检测,阳性检出率为77.3%,阴性检出率为100%。结论:建立了可以检测以cTnⅠ单体、cTnⅠ-C和cTnⅠ-T-C复合物形式存在的cTnⅠ的鲁米诺化学发光酶免疫分析法,具有更高的实用性。

关键词：人心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ) 单克隆抗体化学发光

利用酵母双杂交系统筛选与人巨细胞病毒皮层蛋白pUL23相互作用的病毒编码蛋白

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中国生物化学与分子生物学报 2011年第4期27卷 377-383页

作者：肖静胡嘉淼肖小平员月明刘明亮曾宝娟李婧惠周天鸿冉艳红李弘剑暨南大学生命科学技术学院生物工程学系广州510632

人巨细胞病毒(HCMV)UL23基因编码病毒皮层蛋白,该基因缺失时,病毒在人包皮成纤维细胞(HFF)中的繁殖速度加快.为进一步阐述HCMV UL23基因编码产物pUL23的功能及调控机制,采用鸟枪法构建了融合于GAL4活性区域的HCMV Towne株基因组随机表... 详细信息

人巨细胞病毒(HCMV)UL23基因编码病毒皮层蛋白,该基因缺失时,病毒在人包皮成纤维细胞(HFF)中的繁殖速度加快.为进一步阐述HCMV UL23基因编码产物pUL23的功能及调控机制,采用鸟枪法构建了融合于GAL4活性区域的HCMV Towne株基因组随机表达文库.利用酵母双杂交技术,以pGBKT7-UL23为诱饵质粒,从构建的HCMV基因组表达文库中筛选到与pUL23相互作用的病毒编码蛋白***-pull down实验和免疫共沉淀实验进一步确认两种病毒蛋白之间的相互作用.结果表明,构建的HCMV基因组表达文库能够用于GAL4酵母双杂交系统筛选与诱饵蛋白相互作用的病毒自身编码蛋白.病毒蛋白pUL23和pUL24之间具有相互作用,这为进一步阐述pUL23在HCMV感染过程中的功能提供依据.该研究为揭示HCMV病毒感染机制奠定了基础.

关键词：人巨细胞病毒 UL23基因 BAC 基因组文库蛋白质相互作用

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溶血性评价体系中分光光度法检测波长的选择

生物医学工程学杂志 2016年第2期33卷 368-372页

作者：张红苏宝倡叶迅达罗曼暨南大学生命科学技术学院广州510632 暨南大学附属第一医院输血科广州510630

分光光度法是对新药、植入性生物医用材料及血液制品进行溶血性评价的常用简便方法,是针对血红蛋白特征吸收峰进行的定量分析,因此,当评价体系对血红蛋白构象产生影响时,检测波长的正确选择就显得至关重要。本文通过对在细胞培养液、磷... 详细信息

分光光度法是对新药、植入性生物医用材料及血液制品进行溶血性评价的常用简便方法,是针对血红蛋白特征吸收峰进行的定量分析,因此,当评价体系对血红蛋白构象产生影响时,检测波长的正确选择就显得至关重要。本文通过对在细胞培养液、磷酸盐缓冲液（PBS）、生理盐水和库血保存液四种体系中红细胞溶血的上清进行连续波长扫描及其特征峰随时间变化的研究,提出如下检测波长的选择方案：细胞培养液中,4h内检测选415nm,4-72h选408nm附近;PBS中,4h内选541、577或415nm,4-72h选541、577或406nm附近;生理盐水中,4h内选414nm,4-72h选405nm附近,12h内还可选541或577nm;库血保存液中,72h内选415、540或576nm。

关键词：溶血性评价分光光度法红细胞血红蛋白库血

多壁碳纳米管固定化生物酶修饰电极检测杂色曲霉素的初步研究

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生物工程学报 2004年第4期20卷 601-606页

作者：姚冬生文圣梅刘大岭谢春芳白燕冉艳红暨南大学生命科学技术学院生物技术室暨南大学生命科学技术学院化学系分析化学教研室广州510632

杂色曲霉素 (ST)是一种致癌致畸的真菌毒素 ,已报道的检测ST的技术有TLC、HPLC、ELISA以及毒素基因的PCR检测技术。初步探索了酶生物传感器三电极系统对ST的电化学分析。在实验中 ,应用多壁碳纳米管作为分子识别元件ADTZ的固定化基质和... 详细信息

杂色曲霉素 (ST)是一种致癌致畸的真菌毒素 ,已报道的检测ST的技术有TLC、HPLC、ELISA以及毒素基因的PCR检测技术。初步探索了酶生物传感器三电极系统对ST的电化学分析。在实验中 ,应用多壁碳纳米管作为分子识别元件ADTZ的固定化基质和传感器的电子传递体构建了Au工作电极 ,对ST进行CV和DPV分析 ,结果表明 :ST在 - 6 0 0mV位置有一明显的特征还原峰电位 ,线性检测范围是 8 32× 1 0 - 5～ 6 6 5 6× 1 0 - 5mg mL ,检测下限为8 32× 1 0 - 5mg mL ,响应时间 1 0s。

关键词：杂色曲霉素多壁碳纳米管酶传感器

人DNAJB6蛋白与人巨细胞病毒皮层蛋白pUL23相互作用的鉴定

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中国生物化学与分子生物学报 2009年第12期25卷 1143-1148页

作者：姚伙旺李实骞胡嘉淼陈业志邹奕张欣李月琴周天鸿李弘剑暨南大学生命科学技术学院生物工程学系广州510632

pUL23是人巨细胞病毒(HCMV)UL23基因编码的皮层蛋白.HCMV皮层蛋白与病毒颗粒的形成、病毒转移、免疫调控等病毒生活过程相关.利用GAL4酵母双杂交系统筛选人胚肾cDNA文库,获得与人巨细胞病毒皮层蛋白pUL23相互作用的宿主蛋白分子DNAJB6[D... 详细信息

pUL23是人巨细胞病毒(HCMV)UL23基因编码的皮层蛋白.HCMV皮层蛋白与病毒颗粒的形成、病毒转移、免疫调控等病毒生活过程相关.利用GAL4酵母双杂交系统筛选人胚肾cDNA文库,获得与人巨细胞病毒皮层蛋白pUL23相互作用的宿主蛋白分子DNAJB6[DnaJ(Hsp40)homolog,subfamily B,member 6].回复酵母双杂交、体外GST-Pull down和免疫共沉淀试验再次确认两者之间的相互作用.该结果为进一步研究pUL23蛋白在HCMV生活周期中的作用机制提供依据.

关键词：皮层蛋白pUL23 人巨细胞病毒酵母双杂交蛋白质相互作用 DNAJB6

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核酶对人巨细胞病毒mRNA片段的体外切割

中国生物工程杂志 2003年第5期23卷 82-85页

作者：陈浩军李弘剑周天鸿周乐平何华坤魏威程华胜暨南大学生命科学技术学院生物工程系广州510632

引导序列GSs(GuideSequences)是能与mRNA互补 ,引导核酶RNaseP催化核心M1RNA对互补区域特异切割的小片段游离RNA。针对人巨细胞病毒HCMV(humancytomegalovirus)DNA聚合酶mRNA序列设计GS ,共价结合到大肠杆菌来源M1RNA中 ,构建成M1GS T7... 详细信息

引导序列GSs(GuideSequences)是能与mRNA互补 ,引导核酶RNaseP催化核心M1RNA对互补区域特异切割的小片段游离RNA。针对人巨细胞病毒HCMV(humancytomegalovirus)DNA聚合酶mRNA序列设计GS ,共价结合到大肠杆菌来源M1RNA中 ,构建成M1GS T7核酶。通过对巨细胞病毒DNA聚合酶亚克隆片段转录产物体外切割实验。

关键词：核酶人巨细胞病毒 mRNA片段体外切割 DNA聚合酶