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RAD54L在口腔鳞状细胞癌中的表达及功能研究

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口腔疾病防治 2024年

作者：曹显陈佳琳张锐过新民暨南大学附属广州红十字会医院口腔科暨南大学附属广州红十字会医院超声医学科暨南大学附属广州红十字会医院急诊医学科

目的探讨DNA修复重组蛋白RAD54-like（DNArepairandrecombinationproteinRAD54-like，RAD54L）在口腔鳞状细胞癌（oralsquamouscellcarcinoma，OSCC）中的表达及功能作用。方法利用癌症基因组图谱（TheCancerGenomeAtlas，TCGA）数据库中OSCC相关数据，通过Mann-WhitneyU检验分析RAD54L在OSCC与对照样本中的表达差异，并采用受试者工作特征曲线评估RAD54L在OSCC诊断中的潜在价值。通过卡方检验分析RAD54LmRNA表达水平与OSCC患者临床病理数据之间的关系。将OSCC样本根据RAD54L表达中位值分为高低表达两组后，采用Cox回归分析比较两组的预后差异；采用DESeq2软件包筛选组间的差异表达基因，并利用clusterProfiler包进行KEGG通路富集分析。采用Spearman相关性分析展示RAD54L与同源重组修复途径中基因表达的相关性。在明确RAD54L的生物信息学意义后，在人OSCC细胞株HSC-3中进行RAD54L基因敲低实验，并通过qRT-PCR验证敲低效率。转染后，通过CCK-8、5-乙炔基-2'-脱氧尿苷（5-ethynyl-2'-deoxyuridine，EdU）染色、细胞划痕、细胞凋亡及细胞周期实验，评估HSC-3细胞增殖、迁移、凋亡及周期的变化。结果生物信息学分析结果显示，RAD54L在OSCC中的表达高于正常对照组（P临床分期（P=0.027）及病理学分级（P=0.013）。以RAD54L表达中位值将OSCC样本分为高低表达两组后，RAD54L高表达组的预后较低表达组差（P=0.049）；RAD54L高低表达两组间的差异表达基因主要富集于神经活性配体与受体的相互作用、细胞因子-细胞因子受体相互作用、钙信号通路、细胞周期、胃癌、细胞外基质受体相互作用、化学致癌-DNA加合物、DNA复制、同源重组和错配修复途径（P0.8，P<0.05）。体外实验结果表明，RAD54L在HSC-3细胞中的表达被敲低至约25%（P<0.001），与对照组相比，RAD54L敲低组的增殖率降低（P<0.05），EdU阳性细胞比例下降（P<0.001），划痕闭合比例降低（P<0.001），G1期细胞比例增加（P<0.001），S期细胞比例降低（P<0.001），细胞凋亡比例增加（P<0.001）。结论 RAD54L在OSCC中高表达且与不良预后相关。下调RAD54L表达可抑制HSC-3细胞的增殖和迁移，促进细胞凋亡，并阻碍细胞周期进程。

关键词：同源重组修复基因 RAD54L 口腔鳞状细胞癌预后临床价值通路调节细胞功能

不同硫酸化程度的糖胺聚糖成软骨作用的体外研究

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同方期刊数据库

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华西口腔医学杂志 2023年第4期41卷 395-404页

作者：郑雯蔡明详彭荟桢刘敏义刘湘宁暨南大学口腔医学院广州510632 暨南大学附属第一医院口腔医疗中心广州510630 暨南大学口腔交叉学科临床研究平台广州510630

目的本研究旨在探讨硫酸软骨素(CS)、硫酸皮肤素(DS)与肝素(HEP)对软骨形成细胞成软骨分化和小鼠关节软骨状态维持的作用及其机制。方法小鼠软骨发生细胞系(ATDC5)和小鼠关节软骨组织块在含不同硫酸化程度糖胺聚糖的培养基中培养后,使... 详细信息

目的本研究旨在探讨硫酸软骨素(CS)、硫酸皮肤素(DS)与肝素(HEP)对软骨形成细胞成软骨分化和小鼠关节软骨状态维持的作用及其机制。方法小鼠软骨发生细胞系(ATDC5)和小鼠关节软骨组织块在含不同硫酸化程度糖胺聚糖的培养基中培养后,使用细胞增殖试验、阿利新蓝染色、实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹(Western blot)分析来观察细胞增殖、成软骨分化、软骨形成、软骨组织维持的作用,并进一步探讨其潜在机制。结果HEP和DS主要通过激活骨形态发生蛋白(BMP)信号通路,CS主要通过激活蛋白激酶B(AKT)信号通路促进软骨形成细胞的增殖能力、提高基质蛋白多糖的生成、增加Sox9、Ⅱ型胶原蛋白(Col2a1)和聚集蛋白聚糖(Aggrecan)的表达水平。结论本研究探讨了不同硫酸化程度的糖胺聚糖对细胞成软骨与软骨稳态的维持作用差异及其机制,HEP有助于促进软骨形成和维持软骨组织正常状态,CS在损伤软骨组织再生方面效果更好。

关键词：软骨形成软骨损伤修复硫酸化糖胺聚糖硫酸化程度

3D打印导板在上颌骨前段牵引成骨中的应用及精度测量

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上海交通大学学报（医学版） 2024年第1期44卷 43-49页

作者：万腾姜腾飞朱敏王旭东上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔颅颌面科上海交通大学口腔医学院国家口腔医学中心国家口腔疾病临床医学研究中心上海市口腔医学重点实验室上海市口腔医学研究所中国医学科学院口腔颌面再生医学创新单元上海200011

目的·评估上颌骨前段牵引成骨(anterior maxillary segmental distraction osteogenesis,AMSDO)在治疗唇腭裂继发上颌骨发育不足中的作用以及3D打印导板在截骨中的精度。方法·收集12例接受了AMSDO治疗的唇腭裂患者的病例资料。手术前... 详细信息

目的·评估上颌骨前段牵引成骨(anterior maxillary segmental distraction osteogenesis,AMSDO)在治疗唇腭裂继发上颌骨发育不足中的作用以及3D打印导板在截骨中的精度。方法·收集12例接受了AMSDO治疗的唇腭裂患者的病例资料。手术前在患者的三维模型上进行虚拟手术,并通过3D打印将患者的截骨线制成牙支持式导板。术前(T0)、巩固期结束(T1)以及巩固期后6个月(T2)进行头影测量以评估AMSDO的效果及稳定性。导板的精度通过术后即刻CT与术前设计CT进行叠加,并通过计算位置和角度误差进行评估。结果·所有患者都顺利完成了牵引治疗,没有发生严重的并发症。SNA(S-N-A角)和覆盖从T0到T1以及T0到T2都发生了显著的改变。ANB(A-N-B角)、面部突度、硬腭长度都发生了变化,但是差异没有统计学意义。SNB(S-N-B角)基本没有发生变化。从T1到T2,所有的参数都没有发生明显变化。导板截骨精度在矢状向的线性均方根误差为0.90 mm,角度均方根误差为5.07°。结论·AMSDO是治疗唇腭裂继发上颌骨发育不足的一种有效方法。3D打印的截骨导板具有良好的精度,在减少手术并发症的同时降低了手术的难度。

关键词：上颌骨前段牵引成骨唇腭裂 3D打印截骨导板上颌骨发育不良

人与恒河猴下颌骨骨膜干细胞的分离、鉴定和跨物种单细胞分析

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中华口腔医学杂志 2024年第7期59卷 696-705页

作者：王子硕李阳阳王海涛邹多宏张志愿上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔外科、上海交通大学口腔医学院、国家口腔医学中心、国家口腔疾病临床医学研究中心、上海市口腔医学重点实验室、上海市口腔医学研究所、中国医学科学院口腔颌面再生医学创新单元上海200011

目的探究人与非人灵长类动物(恒河猴)的下颌骨骨膜中是否存在有别于传统间充质干细胞的干细胞群体及其在膜内成骨过程中的特性,并提供区别于其他解剖区域骨膜干细胞(PSCs)的下颌骨PSCs的稳定分离、培养、扩增的标准化流程。方法分别从... 详细信息

目的探究人与非人灵长类动物(恒河猴)的下颌骨骨膜中是否存在有别于传统间充质干细胞的干细胞群体及其在膜内成骨过程中的特性,并提供区别于其他解剖区域骨膜干细胞(PSCs)的下颌骨PSCs的稳定分离、培养、扩增的标准化流程。方法分别从上海交通大学医学院附属第九人民医院的18~24岁行第三磨牙拔除术3例患者翻瓣去骨过程中的骨块表面和3只6岁龄恒河猴下颌骨的前磨牙区颊侧获取骨膜,使用Illumina平台Novaseq 6000测序仪进行单细胞测序,并通过同源基因匹配进行跨物种单细胞转录组测序的结果比较。使用37℃和低温两种消化方式从原代组织中分离PSCs,经流式细胞术分析鉴定其表面标志物(CD200、CD31、CD45和CD90)并通过免疫荧光鉴定组织蛋白酶K(CTSK)与CD200的共定位情况。接着评估了体外扩增至第三代的不同物种PSCs的细胞增殖能力和三系分化能力。最后比较了PSCs和骨髓间充质干细胞(BMSCs)在成骨方面的特性异同。结果单细胞测序结果提示直系同源基因匹配降维后获得了18个聚类的细胞群,基于各细胞标志物数据库对各聚类进行细胞注释。低温消化方案可以稳定地从人、恒河猴下颌骨骨膜中分离出PSCs,细胞呈成纤维细胞状。细胞计数法结果显示人与恒河猴的PSCs增殖能力差异无统计学意义,流式细胞术分析鉴定结果显示,从骨膜分离的细胞表面抗原表达CD200^(+)、CD31^(-)、CD45^(-)和CD90^(-),免疫荧光提示CTSK与CD200共定位于此细胞中。茜素红染色、油红O染色和阿尔率蓝染色结果显示,人和恒河猴的PSCs均具备成骨、成脂、成软骨的三系分化能力。与BMSCs的成骨能力相比,PSCs增殖能力略优,分化过程中,PSCs在早期有良好的成骨表现。结论本研究成功稳定分离并鉴定出人和非人灵长类动物(恒河猴)的正常下颌骨PSCs,为探索下颌骨膜内成骨的机制、建立理想的非人灵长类动物模型以及下颌骨缺损修复新型策略提供了细胞学基础。

关键词：灵长目下颌骨骨膜干细胞成骨分化膜内成骨单细胞测序跨物种分析

miR-146a的功能及其靶基因的研究进展

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生命科学 2020年第4期32卷 387-395页

作者：谭俊龙郑明霞刘湘宁王晓刚暨南大学附属第一医院广州510632 暨南大学口腔医学院广州510632 暨南大学口腔交叉学科临床研究平台广州510632

微小RNA (micro RNA, mi RNA)是小分子非编码RNA中的一类,可与靶m RNA结合,降解或抑制该m RNA进行翻译,进而对细胞的生长、增殖、衰老等过程进行调控。mi RNA-146a(mi R-146a)与炎性因子所致的自身免疫性疾病以及肿瘤的侵袭和转移相关,... 详细信息

微小RNA (micro RNA, mi RNA)是小分子非编码RNA中的一类,可与靶m RNA结合,降解或抑制该m RNA进行翻译,进而对细胞的生长、增殖、衰老等过程进行调控。mi RNA-146a(mi R-146a)与炎性因子所致的自身免疫性疾病以及肿瘤的侵袭和转移相关,其失调往往导致病情的加重。然而,目前相关疾病常用的临床诊断指标和治疗药物缺乏特异性。现以mi R-146a为切入点,为寻找相关的自身免疫性疾病以及肿瘤更加精准的早期诊断指标和治疗靶点提供线索。

关键词： miR-146a 自身免疫性疾病肿瘤靶基因

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FinnGen数据库介绍与数据提取方法

中国循证心血管医学杂志 2024年第5期16卷 529-532页

作者：许奕娴田国祥郑炘凯沈思叶新苗卢浩李媛洁吕军王昊暨南大学附属第一医院麻醉科广州510630 解放军总医院第七医学中心老年医学科北京100700 暨南大学附属第一医院皮肤科广州510630 暨南大学附属第一医院放射科广州510630 暨南大学附属第一医院规划与学科建设办公室广州510630 广东省中医药信息化重点实验室广州510632 暨南大学附属第一医院临床研究部广州510630

FinnGen研究项目是一个规模庞大的遗传学研究计划,自2017年起,致力于通过分析芬兰人群的遗传数据及其与国家级电子医疗记录之间的关联,以深化对人类健康的理解。该项目计划收集约500,000个样本,占据芬兰总人口的10%。FinnGen利用国家级... 详细信息

FinnGen研究项目是一个规模庞大的遗传学研究计划,自2017年起,致力于通过分析芬兰人群的遗传数据及其与国家级电子医疗记录之间的关联,以深化对人类健康的理解。该项目计划收集约500,000个样本,占据芬兰总人口的10%。FinnGen利用国家级生物银行收集样本,并与众多健康机构、大学、医疗机构、生物银行及国际制药公司展开合作。本研究详细介绍了用户如何在FinnGen平台上下载和利用数据,目的在于促进学术交流和沟通,为科研工作者提供更高质量的科研数据来源。

关键词： FinnGen数据库全基因组关联研究纵向研究下载数据

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淫羊藿苷对骨骼系统药理作用机制的研究进展

中药新药与临床药理 2020年第12期31卷 1516-1520页

作者：刘摇摇刘湘宁田银平刘敏义钟佩桦暨南大学口腔医学院广东广州510630 暨南大学附属第一医院口腔医疗中心广东广州510630 暨南大学口腔交叉学科临床研究平台广东广州510630

淫羊藿苷是淫羊藿的主要药效成分,其药理研究颇为广泛,近年在骨骼系统研究中已经取得了丰硕的成果。淫羊藿苷在抗骨质疏松、修复骨缺损、提高骨结合及治疗骨关节炎等多方面均具有显著的药理活性。该文全面综述淫羊藿苷对骨骼系统的药效... 详细信息

淫羊藿苷是淫羊藿的主要药效成分,其药理研究颇为广泛,近年在骨骼系统研究中已经取得了丰硕的成果。淫羊藿苷在抗骨质疏松、修复骨缺损、提高骨结合及治疗骨关节炎等多方面均具有显著的药理活性。该文全面综述淫羊藿苷对骨骼系统的药效作用及其机制,并探讨了淫羊藿苷与有生命的3D打印生物支架结合,以促进骨缺损修复的研究思路,为淫羊藿苷在骨骼系统药理研究和应用提供参考。

关键词：淫羊藿苷骨质疏松骨缺损骨关节炎药理作用

微创修复用于短冠磨牙的三维有限元非线性应力分析

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口腔医学研究 2023年第11期39卷 988-994页

作者：廖莹黄怡暨南大学附属第一医院口腔科广东广州510630 暨南大学口腔医学院广东广州510632 暨南大学口腔交叉学科临床研究平台广东广州510632

目的:利用三维模型重建及有限元应力分析方法,着重对短冠磨牙牙体缺损中适用的微创修复方式——髓腔固位冠与牙合贴面的von Mises应力分布进行分析研究。方法:选择一健康、完整的右侧下颌第一磨牙作为实验样本并建立其三维有限元模型,... 详细信息

目的:利用三维模型重建及有限元应力分析方法,着重对短冠磨牙牙体缺损中适用的微创修复方式——髓腔固位冠与牙合贴面的von Mises应力分布进行分析研究。方法:选择一健康、完整的右侧下颌第一磨牙作为实验样本并建立其三维有限元模型,将冠部压缩至4 mm模拟短冠磨牙,再模拟行根管治疗(根管形成锉为25/06)后行髓腔固位冠与牙合贴面修复,生成空白对照组、髓腔固位冠组与牙合贴面组,在设定的力学参数下使其模拟咀嚼运动,记录3组模型的整体及各部分等效应力的大小及分布情况。结果:剩余牙本质近中根等效应力最大值:空白对照组(105.30 MPa)>髓腔固位冠组(88.95 MPa)>牙合贴面组(75.47 MPa)。结论:从对剩余牙体组织保护的角度来看,牙合贴面组能将应力更均匀的分布在牙根部,且其剩余牙体组织的应力峰值较髓腔固位冠组更低。

关键词：三维有限元非线性分析髓腔固位冠牙合贴面短冠磨牙

基于GEO数据挖掘与网络药理学探讨活血化瘀方治疗口腔扁平苔藓的机制研究

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口腔医学研究 2022年第5期38卷 465-470页

作者：杨倩赖仁发刘湘宁暨南大学附属第一医院口腔医疗中心广东广州510630 暨南大学口腔交叉学科临床研究平台广东广州510630 暨南大学口腔医学院广东广州510632

基于GEO数据库挖掘OLP的潜在治疗靶点,基于网络药理学分析活血化瘀方治疗OLP的主要化学成分、潜在作用靶点与治疗机制。采用R语言爬取GEO数据库中GSE52130数据集,通过差异分析得出OLP的异常表达基因;基于TCMSP数据库获取活血化瘀方中相... 详细信息

基于GEO数据库挖掘OLP的潜在治疗靶点,基于网络药理学分析活血化瘀方治疗OLP的主要化学成分、潜在作用靶点与治疗机制。采用R语言爬取GEO数据库中GSE52130数据集,通过差异分析得出OLP的异常表达基因;基于TCMSP数据库获取活血化瘀方中相关化学成分与靶点,利用Perl、Cytoscape软件和String绘制该药方成分-靶点网络与蛋白-蛋白互作网络;通过R语言完成关键靶基因的基因本体论(GO)分析与基因组百科全书(KEGG)分析。结果表明:活血化瘀方治疗OLP的关键化学成分共28个,包括槲皮素、山奈酚、豆甾醇等;核心作用靶点共13个,包括IL-1β、PTGS2(COX-2)、MAO等。KEGG分析发现活血化瘀方可影响神经递质代谢、巨细胞病毒感染、AGE-RAGE等通路,为后续中医药治疗口腔扁平苔藓的深入研究提供理论参考。

关键词：活血化瘀方口腔扁平苔藓网络药理学作用靶点治疗机制